基于CHD基因和EE0.6基因遗传多态鉴定白枕鹤、丹顶鹤性别研究报告

白枕鹤(Grus vipio)和丹顶鹤(Grus japonensis)是中国重点保护动物,为单态性鸟,很难通过外观和形态来进行性别鉴定,给人工繁殖造成很大困难。研究已发现CHD基因和EE0.6序列片段大小在非平胸鸟类W、Z染色体上均存在差异。基于此,本研究以无锡市动物园饲养的白枕鹤和丹顶鹤为研究对象,经PCR实验,对白枕鹤和丹顶鹤CHD基因和EE0.6序列的相关片段进行了特异性扩增。结果显示,这2种方法 PCR扩增结果一致,并根据这一结果进行白枕鹤、丹顶鹤配对,均成功孵化出后代,表明该PCR鉴定结果可靠,研究结果为提高鹤类人为配对指数和繁殖率奠定了基础。

PCR技术在鸟类性别鉴定上的应用

根据鸟类性染色体连锁基因EE0．6在Z、W染色体上长度的不同,通过选择6对不同的引物,同时设置4种不同的反应条件,分别采用PCR技术对丹顶鹤、黑鹳、琉璃金刚鹦鹉、绯红金刚鹦鹉、鞭苔(?)鵼、戴冕鹤、火烈鸟的Z、W染色体上的EE0．6基因进行了特异性扩增。结果显示,某些引物组合能从雄鸟样品中扩增出1条片段(EE0．6Z,190 bp),而雌性鸟样品则能扩增出2务片段(EE0．6W和EE0．6Z,分别为250 bp和190 bp),但4组引物对6种鸟类EE0．6基N的扩增效果不同。证实,利用PCR技术能对鸟类进行性别鉴定。

合肥野生动物园东方白鹳的保护遗传学初步研究

研究选用EE0.6基因和线粒体DNA控制区(D-loop)作为分子标记,用于合肥野生笼养东方白鹳的性别鉴定和遗传多样性检测。研究中成功地鉴定了东方白鹳成体和幼体的性别,并且双引物的引入克服了性别鉴定中假阴性。在合肥野生动物园28个笼养个体中共检测出11种单倍型,其单倍型多样性(h)为0.8598±0.0419,核苷酸多样性(π)为0.01035±0.0058,但单倍型在繁殖个体间分布严重失衡,子一代个体的单倍型主要集中在H1,H2,H3。因此,建议在进行圈养东方白鹳的繁殖管理时,注重提升各单倍型的奠基者作用,以保护笼养群体的遗传多样性。

LAMP法鉴定家鸡性别的初步研究

为建立一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术高效快速鉴定家鸡及早期胚胎性别的反应体系,本研究以W染色体上假基因序列EE 0.6序列为模板,设计LAMP引物,对反应温度、反应时间、Mg2+浓度、d NTP浓度等条件进行优化.结果表明,在25μL反应体系中,Mg2+终浓度为6 mmol/L,d NTP终浓度为1.5 mmol/L,63℃反应60 min时为最佳反应体系.在该反应体系下,LAMP成功地鉴定出家鸡性别的雌雄,准确率达到100%.此方法将成为一种快速有效地鉴定家鸡早期胚胎性别的新方法,且可以在生产实践中广泛推广应用.

扩增性别基因片段的鹭类性别鉴定方法的研究

以鹳形目5种鹭科鸟类和1种鹮科鸟类的组织为实验材料,采用PCR方法扩增其性别基因相关片段,探讨鹭科鸟类性别的分子鉴定方法.通过测定3对已知性别的白鹭(Egretta garzetta)、岩鹭(Egretta sacra)和黄嘴白鹭(Egretta eulo-photes)以及12只未知性别的夜鹭(Nycticorax nycticorax)、池鹭(Ardeola bacchus)、白鹭、牛背鹭(Bubulcus ibis)黑脸琵鹭(Platalea m inor)的性别基因CHD或EE0.6上的基因相关片段并进行比较.结果表明,通过扩增EE0.6或CHD基因片段的性别鉴定分子方法都能够适用于鹭科鸟类的性别鉴定,由此能够解决鹭科鸟类雌雄外形同色而难以从外貌上区分其性别的问题.

黑冠鹤性别的分子鉴定方法

黑冠鹤,也称戴冕鹤,在我国数量较少,对其进行人工繁殖与人工育种意义很大。本研究采用非伤害性采样方法,利用黑冠鹤羽毛提取基因组DNA,之后利用2个引物组合对黑冠鹤EE0.6基因上的相关片段进行了特异性扩增。结果显示,这2个引物组合都能从雄鹤中扩增出1条片段,从雌鹤中扩增出2条片段,从而成功地对黑冠鹤的性别作出了准确判断,有利于黑冠鹤的成功配对和繁殖。

白枕鹤性别的分子鉴定方法

根据鸟类性染色体连锁基因EE0.6在Z、W染色体上PCR扩增产物长度的不同,利用4个引物组合对白枕鹤EE0.6基因上的相关片段进行特异性扩增。结果表明:这4个引物组合能从雄鹤中扩增出1条片段,从雌鹤中扩增出2条片段,从而成功地对白枕鹤的性别作出准确判断,有利于白枕鹤的成功配对和繁殖。

鸟类性别鉴定技术研究进展

鸟类性别鉴定曾经通过外科手术对生殖腺直接进行检测 ,此法不仅繁琐而且有时会导致鸟的不育 ;细胞学水平上鉴定性别是通过直接观察W、Z性染色体而进行 ,但由于染色体数目大、分散难度高 ,很容易引起人为的主观因素导致结果错误。近年来利用鸟类W染色体上的性连锁基因或DNA序列 ,通过PCR、原位杂交等技术建立起来的DNA分子水平性别鉴定方法 ,发展迅猛 ,准确度高 ,操作简便。此技术一旦形成体系 ,对鸟类研究、濒危物种保存等都将具有非常重要的意义。

火烈鸟性别鉴定的分子标记方法

由于火烈鸟在外观上雌雄极为相似,很难用常规方法对其性别进行鉴定。本试验首次确立了利用PCR技术对火烈鸟性别进行鉴定的分子标记方法。从火烈鸟血液中提取总基因组DNA,针对性染色体上的CHD基因和EE0.6序列,筛选了4对引物进行特异性扩增,其中3对引物组合成2个组(A/B和B/C)进行多重PCR。结果表明,3组引物都在雄性个体中扩增出1条片段,在雌性中扩增出2条片段;待测群体中雄性个体11只,雌性个体6只。经检验,利用3组引物都能准确鉴定火烈鸟性别,为该物种在分子水平上的性别鉴定奠定了基础。

鸵鸟性别鉴定的分子标记方法

鸵鸟(Struthiocamelus)属于平胸总目鸟类,雌雄鸵鸟在性成熟前外部形态相同,很难通过外观和形态来鉴定性别,给早期分群饲养造成了很大的困难。实验利用鸵鸟羽毛提取基因组DNA,之后利用EE0.6和CHD基因中2个引物组合对3对已知性别和9只未知性别鸵鸟的性别基因片段进行特异性扩增。结果显示,这对引物组合在雄性鸵鸟的DNA中未扩增出片段,在雌性鸵鸟DNA中扩增出1条片段,可以对鸵鸟的性别作出准确鉴定,从而解决幼雏期鸵鸟难以从外貌上区分其性别的问题。