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Phosphatase and tensin homology deleted in chromosome 10,hypoxia-inducible factor-1 alpha gene expression in colorectal adenoma and adenocarcinoma and their relation to vascular endothelial growth factor protein expression
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作者 钱群 《外科研究与新技术》 2005年第3期165-166,共2页
To examine phosphatase and tensin homology deleted in chromosome 10 (PTEN),hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-1 alpha) gene expressions and their relation to vascular endothelial growth factor(VEGF) protein express... To examine phosphatase and tensin homology deleted in chromosome 10 (PTEN),hypoxia-inducible factor-1 alpha (HIF-1 alpha) gene expressions and their relation to vascular endothelial growth factor(VEGF) protein expression in the patients with human colorectal adenomas and adenocarcinomas.Methods The expression of PTEN,HIF-1 alpha gene was detected by using in situ hybridization,and the VEGF expression levels by immunohistochemistry in colorectal adenomas and primary colorectal adenocarcinoma.Results Strong expression of HIF-1 alpha was detectable in the majority of colorectal dadenocarcinoma,particularly surrounding areas of necrosis in adenocarcinoma.PTEN,HIF-1 alpha mRNA and VEGF protein were positive in 51.6%,67.7% and 59.7% respectively in 62 cases of adenocarcinomas,and 77.8%,44.4% and 33.3% respectively in 18 cases of adenomas.The positive rate of VEGF was higher in the patients with colorectal adenocarcinomas than that in those with adenomas,whereas that of PTEN mRNA was contrary.HIF-1 mRNA expression was correlated significantly with lymph node metastasis,liver metastasis,Duke’s stage and recurrence.During colorectal tumor progression,the expression of HIF-1 alpha mRNA was positively correlated with the VEGF protein expression (χ2= 4.751 ,P<0.05),but negatively with the PTEN mRNA expression(χ2=21.84,P<0.01).Conclusion The absence or low expression of PTEN and the increased levels of HIF-1α and VEGF may paly an important role in carcinogenesis and progression of colorectal carcinoma.These results suggest that VEGF upregulated by HIF-1 alpha gene may be involved in angiogenesis of colorectal adenocarcinoma.4 refs,1 tab. 展开更多
关键词 Phosphatase and tensin homology deleted in chromosome 10 hypoxia-inducible factor-1 alpha gene expression in colorectal adenoma and adenocarcinoma and their relation to vascular endothelial growth factor protein expression
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泛癌分析揭示SREK1在低级别胶质瘤中促进CD274表达
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作者 刘东 刘媛 +1 位作者 张淑灵 王玉祥 《宁夏医科大学学报》 2024年第9期893-902,910,共11页
目的剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1(SREK1)在多种肿瘤中的泛癌分析,揭示SREK1在泛癌中的作用。方法利用在线数据库GEPIA 2、TIMER 2.0、TISIDB和cBioPortal分析SREK1表达对肿瘤患者预后的影响、在低级别胶质瘤(LGG)肿瘤组织中的表... 目的剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1(SREK1)在多种肿瘤中的泛癌分析,揭示SREK1在泛癌中的作用。方法利用在线数据库GEPIA 2、TIMER 2.0、TISIDB和cBioPortal分析SREK1表达对肿瘤患者预后的影响、在低级别胶质瘤(LGG)肿瘤组织中的表达、遗传变异的特征及其表达对肿瘤组织中免疫细胞的浸润和免疫—肿瘤靶基因的相关性分析。结果LGG肿瘤组织中,SREK1表达与记忆B细胞、活化的CD4+T细胞、Th2细胞、中性粒细胞、NKT细胞以及单核细胞和CD56dimNK细胞的浸润存在相关性(P均<0.05)。SREK1与免疫—肿瘤靶基因如信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、Ⅰ型干扰素受体1(IFNAR1)、核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)和表皮生长因子受体(EGFR)、表面抗原分化簇274(CD274)等表达在LGG中均呈正相关(P均<0.05)。结论SREK1是LGG患者的危险因子之一,可能通过促进CD274的表达来加剧LGG的进展。 展开更多
关键词 剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1 低级别胶质瘤 细胞程序性死亡-配体1 Ⅰ型干扰素受体1 信号转导和转录激活因子3 免疫—肿瘤靶基因
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Claudin 1 mediates tumor necrosis factor alpha-induced cell migration in human gastric cancer cells 被引量:7
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作者 Atsushi Shiozaki Hiroki Shimizu +10 位作者 Daisuke Ichikawa Hirotaka Konishi Shuhei Komatsu Takeshi Kubota Hitoshi Fujiwara Kazuma Okamoto Daisuke Iitaka Shingo Nakashima Yoshito Nako Mingyao Liu Eigo Otsuji 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第47期17863-17876,共14页
AIM: To investigate the role of claudin 1 in the regulation of genes involved in cell migration and tumor necrosis factor alpha (TNF-&#x003b1;)-induced gene expression in human gastric adenocarcinoma cells.
关键词 Tumor necrosis factor alpha Claudin 1 Cell migration MICROARRAY gene expression change
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急性缺血性脑卒中患者血清TSG-6、ABCA1预测溶栓后出血转化的价值及与短期预后的关系 被引量:1
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作者 陈慧昱 鄂盈 +2 位作者 任鲜卉 卫婧雅 虢瑾 《疑难病杂志》 CAS 2024年第9期1037-1042,共6页
目的急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)、ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)预测溶栓后出血转化(HT)的价值及与短期预后的关系。方法选取2021年1月—2023年10月空军军医大学第一附属医院神经内科接受静脉溶栓的... 目的急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)、ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)预测溶栓后出血转化(HT)的价值及与短期预后的关系。方法选取2021年1月—2023年10月空军军医大学第一附属医院神经内科接受静脉溶栓的AIS患者185例(AIS组)和同期健康体检者100例(健康对照组),AIS患者根据溶栓后是否发生HT分为HT亚组56例和非HT亚组129例,根据溶栓后3个月改良Rankin量表(mRS)评分分为不良预后亚组47例和良好预后亚组138例。采用酶联免疫吸附法检测血清TSG-6、ABCA1水平;多因素Logistic回归分析AIS患者溶栓后HT的影响因素,Pearson法分析血清TSG-6、ABCA1水平与AIS患者mRS评分的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析二者对AIS患者溶栓后HT的预测价值。结果与健康对照组比较,AIS组血清TSG-6水平升高,ABCA1水平降低(t/P=12.178/<0.001、25.944/<0.001)。185例AIS患者溶栓后HT发生率为30.27%(56/185)。与非HT亚组比较,HT亚组血清TSG-6水平升高,ABCA1水平降低(t/P=7.607/<0.001、6.784/<0.001)。随访3个月,185例AIS患者溶栓后预后不良发生率为25.41%(47/185)。与良好预后亚组比较,不良预后亚组血清TSG-6水平升高,ABCA1水平降低(t/P=6.876/<0.001、6.470/<0.001)。AIS患者mRS评分与血清TSG-6水平呈正相关(r/P=0.693/<0.001),与ABCA1水平呈负相关(r/P=-0.671/<0.001)。美国国立卫生研究院卒中量表评分(NIHSS)增加、心源性栓塞、TSG6升高为AIS患者溶栓后HT的独立危险因素[OR(95%CI)=1.071(1.023~1.121)、2.907(1.077~7.845)、2.075(1.466~2.938)],ABCA1升高为保护因素[OR(95%CI)=0.900(0.858~0.945)]。血清TSG-6、ABCA1水平及二者联合预测AIS患者溶栓后HT的AUC分别为0.802、0.786、0.880,二者联合的AUC大于血清TSG-6、ABCA1水平单独预测(Z/P=3.161/0.002、3.298/0.001)。结论AIS患者血清TSG-6水平升高和ABCA1水平降低,与溶栓后HT发生和短期预后不良相关,血清TSG-6、ABCA1水平联合对AIS患者溶栓后HT的预测价值较高。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 肿瘤坏死因子α刺激基因6 ATP结合盒亚家族A成员1 出血转化 短期预后
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猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达 被引量:27
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作者 曹瑞兵 徐学清 +2 位作者 周斌 陈德胜 陈溥言 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期291-294,共4页
poIFN α1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子 ,为了获得高表达 ,使用了大肠杆菌的偏爱密码子 ,人工合成了poIFN α1成熟蛋白编码基因。在保留编码蛋白序列的同时 ,使其 5′端A +T的含量增加到最大限度 ,并将其终止密码子改为TAA。将... poIFN α1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子 ,为了获得高表达 ,使用了大肠杆菌的偏爱密码子 ,人工合成了poIFN α1成熟蛋白编码基因。在保留编码蛋白序列的同时 ,使其 5′端A +T的含量增加到最大限度 ,并将其终止密码子改为TAA。将合成的poIFN α1成熟蛋白编码基因插入原核单纯表达载体pRLC中 ,转化大肠杆菌DH5α。实现了poIFN α1在大肠杆菌中的高效表达 ,表达产物以包涵体形式存在。纯化的包涵体经含DTT的 6mol L盐酸胍的变性液溶解及含GSH GSSG的复性液复性处理 ,复性后的表达产物浓缩后经凝胶层析纯化 ,细胞病变抑制法测定表明 ,重组poIFN α1具有较高的抗病毒活性 ,约为 6 4x10 6 u mg。 展开更多
关键词 α1-干扰素 基因 原核表达 poIFN-α1 大肠杆菌 包涵体 抗病毒活性
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胸腺素α_1 基因的克隆表达及其生物活性 被引量:16
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作者 石继红 张英起 +4 位作者 赵永同 赵宁 朱宝娥 颜真 韩苇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期344-349,共6页
胸腺素α1(thymosinalpha 1 ,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛 .为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因 ,克隆于质粒pUC1 9的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④ ) ,经再次测序确认后克... 胸腺素α1(thymosinalpha 1 ,Tα1)作为一种免疫增强剂 ,临床用途广泛 .为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因 ,克隆于质粒pUC1 9的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后 ,串联为 4串体 (Tα1④ ) ,经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .转化大肠杆菌T0P1 0 ,酶切鉴定正确后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达 ,用离子交换层析纯化融合蛋白 .溴化氰裂解融合蛋白 ,释放出Tα1单体 ,经离子交换色谱纯化出Tα1.采用3 H TdR参入法进行生物活性测定 ,证实融合蛋白和Tα1均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力 . 展开更多
关键词 胸腺素Α1 基因克隆 融合表达 蛋白质纯化 生物活性
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中药益髓生血颗粒对β地中海贫血患者骨髓α血红蛋白稳定蛋白及红系转录因子GATA-1基因表达的影响 被引量:25
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作者 刘咏梅 吴志奎 +1 位作者 柴立民 张新华 《中西医结合学报》 CAS 2006年第3期247-250,共4页
目的:研究中药益髓生血颗粒对β地中海贫血患者α血红蛋白稳定蛋白(alpha-hemoglobin stabilizing protein,AHSP)及红系转录因子GATA-1表达的影响,探讨中药治疗β地中海贫血的临床疗效及分子机制.方法:2004年9月~2005年2月收治中... 目的:研究中药益髓生血颗粒对β地中海贫血患者α血红蛋白稳定蛋白(alpha-hemoglobin stabilizing protein,AHSP)及红系转录因子GATA-1表达的影响,探讨中药治疗β地中海贫血的临床疗效及分子机制.方法:2004年9月~2005年2月收治中间型β地中海贫血患者12例,采用益髓生血颗粒治疗3个月.比较治疗前后患者血红蛋白、胎儿血红蛋白、红细胞、网织红细胞等血液学参数的变化;提取其中8例患者用药前后骨髓有核细胞总RNA,采用实时PCR技术检测AHSP mRNA和转录因子GATA-1 mRNA的表达.结果:治疗后患者临床症状明显改善,其血红蛋白、胎儿血红蛋白、红细胞和网织红细胞等血液学参数较治疗前明显升高,差异有统计学意义.其中8例患者骨髓有核细胞AHSP和GATA-1 mRNA的表达量与治疗前比较有明显升高,差异有统计学意义.结论:中药益髓生血颗粒治疗β地中海贫血的可能机制之一为通过调节β地中海贫血患者体内骨髓有核细胞转录因子GATA-1 mRNA的表达,使GATA-1与其他转录因子协同作用,上调AHSP mRNA的表达,使AHSP合成增加以结合地中海贫血患者体内游离的相对过剩的α珠蛋白,阻止其在活性细胞中的沉积,遏制其对红细胞的毒害作用,从而减少溶血的发生. 展开更多
关键词 益髓生血颗粒 Β地中海贫血 α血红蛋白稳定蛋白 GATA-1 基因
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串联的人胸腺素α1基因在番茄中的高效表达 被引量:11
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作者 曹慧颖 张锐 郭三堆 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期2291-2296,共6页
【目的】提高免疫活性多肽人胸腺素α1(Tα1)在番茄中的表达量。【方法】根据植物偏爱密码子对Tα1基因进行优化,并将其顺式串联成四联体,同时在单体基因间插入肠激酶剪切位点基因序列,以便表达的融合蛋白可以被肠激酶切割成单体。利用... 【目的】提高免疫活性多肽人胸腺素α1(Tα1)在番茄中的表达量。【方法】根据植物偏爱密码子对Tα1基因进行优化,并将其顺式串联成四联体,同时在单体基因间插入肠激酶剪切位点基因序列,以便表达的融合蛋白可以被肠激酶切割成单体。利用农杆菌介导法将单体Tα1基因和四联体Tα1基因分别转化进入番茄。【结果】两个基因转化番茄后分别得到卡那霉素抗性再生植株19株和10株,PCR和Southern杂交检测证明,部分番茄基因组中整合了外源基因。经过Western和ELISA分析,串联的Tα1基因已经在番茄果实中表达,表达量最高相当于20.2μg T α1·g-1果实鲜重,高于单体基因的表达量。【结论】基因串联的方式提高了Tα1基因在番茄中的表达量。 展开更多
关键词 胸腺素Α1 转基因番茄 生物反应器 串联基因 肠激酶
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泰国缺失型α地中海贫血1的基因诊断和临床血液学表型分析 被引量:21
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作者 林娜 黄海龙 +7 位作者 王燕 郑琳 范向群 蔡美英 王林铄 刘合焜 徐两蒲 林元 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1116-1120,共5页
目的:探讨少见的泰国缺失型α地中海贫血1(泰国缺失型,--^(THAI)/αα)的血液学特征及其基因诊断的方法。方法:对32例泰国缺失型地中海贫血患者进行了回顾性分析,采用常规血液学检查、常见地中海贫血基因检测和泰国缺失型地中海贫血检... 目的:探讨少见的泰国缺失型α地中海贫血1(泰国缺失型,--^(THAI)/αα)的血液学特征及其基因诊断的方法。方法:对32例泰国缺失型地中海贫血患者进行了回顾性分析,采用常规血液学检查、常见地中海贫血基因检测和泰国缺失型地中海贫血检测方法对泰国缺失型α地中海贫血1的血液学特征和基因诊断进行了分析,并与同期正常对照组、东南亚型缺失组(--^(SEΑ)/αα)进行了血液学特征比较。结果:在32例病例中,29例检出泰国缺失型α地中海贫血1杂合子,1例检出泰国缺失型α地中海贫血1和-α3.7缺失双重杂合子,2例检出泰国缺失型α地中海贫血1杂合子合并β地中海贫血突变(1例合并CD41-42突变杂合子,1例合并CD17(Α→T)突变杂合子)。泰国缺失型地中海贫血患者均有MCV、MCH水平降低;正常对照组、--^(SEΑ)/αα组间Hb、RBC、MCV、MCH比较差异有显著性,(P<0.05);正常对照组与--^(THAI)/αα组间RBC、MCV、MCH比较差异有显著性,(P<0.05);--^(SEΑ)/αα、--^(THAI)/αα组间MCHC比较差异有显著性,(P<0.05),其余各组指标差异无显著性。结论:泰国缺失型α地中海贫血1血液学除MCHC外类似于东南亚型地中海贫血,而在地中海贫血高发区存在一定比例的泰国缺失型α地中海贫血,因此在临床上对泰国缺失型α地中海贫血1应综合分析常规检测和泰国缺失型检测结果,以及患者的临床表现、血液学参数和超声结果后方可作出正确的诊断,避免由泰国缺失型引起α重型和中间型地中海贫血的婴儿出生。 展开更多
关键词 Α地中海贫血 泰国缺失型α地中海贫血1 基因诊断
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肝缺氧诱导因子-1α与肝癌发生、发展及治疗研究新进展 被引量:15
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作者 李姗姗 姚登福 董志珍 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期361-367,共7页
失控的增殖导致缺氧(hypoxia)是肝细胞癌(HCC)形成的特征性微环境.缺氧可促进癌细胞增殖、转移、血管新生、抑制癌细胞分化、凋亡以及对放化疗耐受.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导生理性和病理性低氧反应的关键转录因子,在转录水平上... 失控的增殖导致缺氧(hypoxia)是肝细胞癌(HCC)形成的特征性微环境.缺氧可促进癌细胞增殖、转移、血管新生、抑制癌细胞分化、凋亡以及对放化疗耐受.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导生理性和病理性低氧反应的关键转录因子,在转录水平上调控百余种靶基因,参与调节血管新生及糖代谢等过程,与HCC生长、浸润、转移和预后等密切相关.近年来以HIF-1α为靶点的基因疗法如RNA干扰、反义技术和自杀基因技术等,成为HCC辅助治疗的新策略.本文综述了HIF-1α转录水平异常与HCC发生、发展及靶向HIF-1α基因治疗HCC的新进展. 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α 肝细胞癌 基因治疗
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人胸腺素α_1基因工程菌的构建与表达 被引量:5
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作者 林陈水 黎小军 +1 位作者 王平 梅建凤 《浙江工业大学学报》 CAS 2005年第3期306-309,共4页
胸腺素α1(Thymosinalpha1,Tα1)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂,临床用途广泛.为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成编码Tα1的基因,克隆于pUCmT,转化E.coliJF1125,经测序证明序列正确后,克隆入pET39(b)的BspT 和BamH 位点,成功... 胸腺素α1(Thymosinalpha1,Tα1)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂,临床用途广泛.为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成编码Tα1的基因,克隆于pUCmT,转化E.coliJF1125,经测序证明序列正确后,克隆入pET39(b)的BspT 和BamH 位点,成功地构建出包含信号肽,DsbA,连接肽,6个His,EKsite(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),胸腺素α1的表达载体,转化E.coliBL21(DE3),获得胸腺素α1基因工程菌.SDS-PAGE分析表明,经0.1mmol/LIPTG和30℃诱导8h,在大肠杆菌周质中大量表达表观分子量31kD左右的融合蛋白.为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组胸腺素α1创造条件. 展开更多
关键词 胸腺素α1(Tα1) 基因克隆 融合表达
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印度南瓜延伸因子基因CmEF1a的克隆与分析 被引量:5
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作者 朱海生 刘建汀 +4 位作者 温文旭 李永平 王彬 陈敏氡 温庆放 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1096-1104,共9页
真核生物延伸因子(EF1a)是一种重要的内参基因,广泛应用于RT-qPCR中。为获得印度南瓜EF1a基因,开发合适的荧光定量PCR引物,本研究通过转录组测序和RT-PCR方法获得了1条长度为1 701 bp的cDNA,命名为CmEF1a,GeneBank登录号:MH310443。结... 真核生物延伸因子(EF1a)是一种重要的内参基因,广泛应用于RT-qPCR中。为获得印度南瓜EF1a基因,开发合适的荧光定量PCR引物,本研究通过转录组测序和RT-PCR方法获得了1条长度为1 701 bp的cDNA,命名为CmEF1a,GeneBank登录号:MH310443。结果表明,CmEF1a包含1个ORF,大小为1 344 bp,编码447个氨基酸,理论分子大小约为49.30 kD,蛋白质等电点为9.14。Wolf Psort分析发现, CmEF1a蛋白亚细胞定位于细胞质基质中;Motif Scan分析显示, CmEF1a蛋白质的氨基酸序列2~432位和322~430位分别为EF1结构域和EF1的C端保守结构域。同源性分析表明,CmEF1a基因编码的蛋白质与同为葫芦科的中国南瓜、甜瓜和黄瓜同源蛋白的相似性达到99%,具有高度的保守性。在此基础上设计了1对RT-qPCR引物,该引物具有较高的特异性和扩增效率,在印度南瓜不同组织和不同胁迫处理下均能稳定表达,适合作为内参基因应用于印度南瓜基因表达研究。本研究结果为印度南瓜重要功能基因的表达分析及相关分子调控机制的研究奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 印度南瓜 延伸因子 内参基因 表达分析
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大肠癌中MTA1和HIF-1α的表达与淋巴管生成的关系 被引量:8
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作者 杨珍玉 周序珑 +3 位作者 夏明汗 蒋光喻 钟雪云 杜彬 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期350-353,396,共5页
【目的】探讨大肠癌中转移相关基因1(MTA1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达及其与淋巴管生成的关系。【方法】用免疫组织化学SP法检测81例大肠癌中MTA1、HIF-1α蛋白的表达及D2-40标记的淋巴管密度。【结果】81例大肠癌中MTA1、H... 【目的】探讨大肠癌中转移相关基因1(MTA1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达及其与淋巴管生成的关系。【方法】用免疫组织化学SP法检测81例大肠癌中MTA1、HIF-1α蛋白的表达及D2-40标记的淋巴管密度。【结果】81例大肠癌中MTA1、HIF-1α阳性表达率分别为66.7%和63%,MTA1和HIF-1α的表达均与大肠癌Duke's分期和淋巴结转移相关(P<0.05)而与组织学分级和浸润深度无关(P>0.05),大肠癌中MTA1和HIF-1α蛋白表达呈正相关(P<0.05),MTA1和HIF-1α蛋白过表达病例肿瘤旁淋巴管密度分别为18.4±4.9、18.0±5.3,高于MTA1和HIF-1α不表达和弱表达病例(15.6±4.5、15.4±4.2),两者的差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】MTA1和HIF-1α蛋白的过表达可能促进了大肠癌旁淋巴管的生成,在肿瘤淋巴结的转移中起一定作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 MTA1 HIF-1Α 淋巴管密度
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中国福建地区类孟买血型个体Fut1基因突变研究 被引量:4
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作者 黄豪博 范丽萍 +3 位作者 魏世金 曾丰 林海艳 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1338-1340,共3页
本研究旨在探讨中国福建地区类孟买血型的分子机制。采用血清学方法鉴定研究对象为类孟买血型,采用PCR扩增研究对象的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列,并将PCR产物经TA后进行测序,分析fut1基因编码区序列,以证实类孟买血型的... 本研究旨在探讨中国福建地区类孟买血型的分子机制。采用血清学方法鉴定研究对象为类孟买血型,采用PCR扩增研究对象的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列,并将PCR产物经TA后进行测序,分析fut1基因编码区序列,以证实类孟买血型的发生机制。结果表明,PCR扩增产物电泳分析证实成功扩增fut1基因编码区序列;克隆后测序分析发现本例先证者2条染色体上fut1基因均为第547-552位AG两碱基缺失(CAGAGAG→CAGAG),导致阅读框架发生移码,提前形成终止密码。结论:本例类孟买血型个体fut1基因为h1h1型纯合突变。 展开更多
关键词 类孟买血型 α1 2岩藻糖基转移酶 FUT1基因
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天然胸腺素α_1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 石继红 韩苇 +1 位作者 颜真 张英起 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第2期55-57,75,共4页
目的为降低CNBr裂解融合蛋白的毒副作用 ,改进利用基因重组技术制备胸腺素α1 (Tα1 )的流程工艺。方法按大肠杆菌惯用密码合成Tα1 基因 ,克隆于质粒pGEM 3Zf的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,裂解位点为羟胺裂解位点Asn Gly对应的核苷酸序列 ,测... 目的为降低CNBr裂解融合蛋白的毒副作用 ,改进利用基因重组技术制备胸腺素α1 (Tα1 )的流程工艺。方法按大肠杆菌惯用密码合成Tα1 基因 ,克隆于质粒pGEM 3Zf的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,裂解位点为羟胺裂解位点Asn Gly对应的核苷酸序列 ,测序正确后用BamHⅠ和BglⅡ位点串联为Tα1 4串体 (Tα1 ④ )和Tα1 8串体 (Tα1 ⑧ ) ,经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,转化大肠杆菌TOP1 0。结果经 1mmol LIPTG诱导4h获得了硫氧还蛋白 (thioredoxin)与Tα1 ④和Tα1 ⑧的融合表达 ,用离子交换色谱可纯化出融合蛋白 ,羟胺裂解融合蛋白 ,能够释放出Tα1 单体。结论羟胺能够裂解融合蛋白释放出天然Tα1 。 展开更多
关键词 胸腺素Α1 融合表达 化学裂解 羟胺 基因克隆
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基质金属蛋白酶-3和Ⅰ型胶原α1链基因多态性对原发性冻结肩易感性的影响 被引量:5
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作者 陈文祥 包倪荣 +7 位作者 王艺颖 方益春 邱阳 郭耀曼 韦昌辉 钱洪 谢发荣 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第3期289-293,共5页
目的目前原发性冻结肩的病因及发病机制在基因及分子生物学领域的研究报道较少。文中旨在探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和I型胶原α1链(COL1A1)基因多态性对原发性冻结肩的易感性的影响。方法选择2016年1月至6月来南京军区南京总医院骨... 目的目前原发性冻结肩的病因及发病机制在基因及分子生物学领域的研究报道较少。文中旨在探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和I型胶原α1链(COL1A1)基因多态性对原发性冻结肩的易感性的影响。方法选择2016年1月至6月来南京军区南京总医院骨科就诊的42名原发性冻结肩患者为病例组,50名健康受试者作为对照组。对所有研究对象的MMP-3基因多态性rs679620及rs522616与COL1A1基因多态性rs1107946,分别进行基因型测定。结果 MMP-3多态性位点rs679620基因型分布与原发性冻结肩易感性无明显相关性(P>0.05)。等位基因A与G比较,差异有统计学意义(OR=0.54,95%CI:0.30~0.99,P=0.044)。COL1A1多态性位点rs1107946基因型及等位基因频率与原发性冻结肩易感性无明显相关性(P=0.994、0.920)。与隐性遗传模型GG相比,GT、TT和GT+TT差异无统计学意义;等位基因T与G比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MMP-3基因多态性rs679620等位基因A是原发性冻结肩发病的保护性因素。MMP-3基因多态性rs522616和COL1A1基因多态性rs1107946与原发性冻结肩易感性无关。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-3 Ⅰ型胶原α1 基因多态性 原发性冻结肩
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肝癌组织中HIF-1α的表达与HIF-1α mRNA的扩增分析 被引量:6
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作者 李月明 姚登福 +4 位作者 姜华 邱历伟 李姗姗 钱静 卞银珠 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2009年第4期327-331,共5页
目的分析肝癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其基因的表达。方法以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及癌周组织各35份,以免疫组化法检测肝癌及癌周组织HIF-1α的表达,从癌组织中制备总RNA、逆转录合成cDNA,以巢式PCR扩增HIF-... 目的分析肝癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其基因的表达。方法以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及癌周组织各35份,以免疫组化法检测肝癌及癌周组织HIF-1α的表达,从癌组织中制备总RNA、逆转录合成cDNA,以巢式PCR扩增HIF-1α基因片段和DNA测序分析,以探讨HIF-1α及其基因表达的病理特征。结果肝癌及癌周组织中HIF-1α阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞浆中,部分位于胞核;癌周组织表达较强,中央静脉周围表达明显;癌周组织HIF-1α表达阳性率明显高于肝癌组织(P<0.01);癌周组织中总RNA浓度明显高于肝癌组织(P<0.01);肝癌和癌周组织HIF-1α基因阳性率分别为54.3%和74.3%(P>0.05);癌组织HIF-1α表达率与肿瘤大小相关,与肿瘤数目和HBsAg阳性间未见明显相关。结论肝癌的发生、发展与肝组织HIF-1α过表达密切相关。 展开更多
关键词 肝癌 缺氧诱导因子-1Α 免疫组织化学 基因扩增
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ATBF1异构体的选择性表达及其抑癌作用的分子机制 被引量:3
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作者 李孟森 刘新华 李刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-5,共5页
ATBF1(AT motif binding factor 1)基因是一个新发现的抑癌基因,其表达产物是目前发现的分子量最大的转录调节因子,它能和甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)基因增强子AT富聚区结合,调节AFP的转录.ATBF1基因表达过程中,由于转录本mRNA的... ATBF1(AT motif binding factor 1)基因是一个新发现的抑癌基因,其表达产物是目前发现的分子量最大的转录调节因子,它能和甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)基因增强子AT富聚区结合,调节AFP的转录.ATBF1基因表达过程中,由于转录本mRNA的选择性剪接,可产生ATBF1-A和ATBF1-B两种异构体,这两种异构体对AFP表达的调节具有相互对抗作用.ATBF1-A是ATBF1基因的主要表达形式,其能抑制癌细胞生长,而ATBF1-B则能促进癌细胞增殖.本文分析ATBF1异构体如何调控AFP表达及其作用的多样性,阐述ATBF1表达下调对肿瘤细胞生长和侵袭产生的影响;探讨ATBF1异构体抑癌作用的可能机制和选择性应用ATBF1异构体治疗肿瘤的科学意义. 展开更多
关键词 ATBF1(AT MOTIF BINDING FACTOR 1) 抑癌基因 甲胎蛋白
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α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:2
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作者 贾红红 李玉 +3 位作者 刘逸寒 王尧 梁晓梅 路福平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期185-190,共6页
利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuc... 利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuct。将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,25℃,0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达4 h,并用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,可表达出相对分子质量为33 kD的蛋白,与预期分子量一致,说明α1,2-岩藻糖基转移酶在大肠杆菌BL21中实现表达,应用HPLC法进行酶活检验,酶活达到了13.21 pmol/(mgPr.h)。 展开更多
关键词 α12-岩藻糖基转移酶 基因克隆 原核表达 大肠杆菌
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TNF-αR1 mRNA和Caspase-10 mRNA在增殖期增生性瘢痕组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 刘达恩 黎洪棉 +2 位作者 梁自乾 朱绍般 张奇 《广西医学》 CAS 2010年第1期4-7,共4页
目的从基因水平探讨肿瘤坏死因子(TNF-αR1)及半胱氨酸蛋白10(Caspase-10)在增生性瘢痕组织中的作用,为增生性瘢痕的基因治疗提供理论依据。方法利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCT)法分别检测12例增殖期增生性瘢痕组织、12例正常皮肤对照... 目的从基因水平探讨肿瘤坏死因子(TNF-αR1)及半胱氨酸蛋白10(Caspase-10)在增生性瘢痕组织中的作用,为增生性瘢痕的基因治疗提供理论依据。方法利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCT)法分别检测12例增殖期增生性瘢痕组织、12例正常皮肤对照组织中成纤维细胞TNF-αR1 mRNA及Caspase-10 mRNA的表达情况。结果在增生性瘢痕组织中,TNF-αR1 mRNA及Caspase-10 mRNA表达的相对值分别为(1.31±0.27)和(1.19±0.23),均明显低于正常皮肤组织(P<0.05)。结论TNF-αR1及Caspase-10在伤口愈合过程中起着重要的作用,增生性瘢痕的形成可能与组织中TNF-αR1 mRNA及Caspase-10 mRNA表达低下有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 增殖期 肿瘤坏死因子受体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 基因表达
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