舌癌细胞exosome中致癌因素的细胞间转移研究

目的观察人舌癌细胞Tca8113来源exosome与人正常口腔黏膜上皮细胞间进行致癌因素的细胞间转移，探索正常口腔黏膜上皮细胞是否是舌癌细胞exosome的靶细胞。方法构建含有EGFRvIII绿色荧光蛋白表达载体，用脂质体转染入舌癌细胞Tca8113，倒置荧光显微镜下观察转染情况；采用超滤离心结合蔗糖密度梯度超速离心的方法从已转染舌癌细胞的培养上清液中分离出exosome，在透射电子显微镜下观察确认；将ex-osome与人正常口腔黏膜上皮细胞共培养，倒置荧光显微镜下观察人正常口腔黏膜上皮细胞是否能摄取exo-some。结果重组质粒pEGFP-N1-EGFRvIU转染的舌癌细胞在倒置荧光显微镜下呈现绿色荧光；透射电子显微镜下观察exosome具有特征性的盘状结构，由双层膜构成，直径在30-100nm之间；exosome与口腔黏膜上皮细胞共培养2h后，黏膜上皮细胞荧光显微镜下观察到绿色荧光。结论成功分离人舌癌细胞exosome，人正常口腔黏膜上皮细胞是人舌癌细胞exosome的靶细胞，exosome能进行致癌因素的细胞间转移。