中华绒螯蟹卵巢EJO1基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达

扩增中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢EJO1基因(GenBank检索号:AY185917)的cDNA全序列得到编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28b中,构建成表达质粒pET28b-EJO1。该表达质粒在大肠杆菌(Esche-richia coli)BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到EJO1-H IS6融合蛋白。SDS-PAGE电泳分析表明,该融合蛋白的相对分子质量约为32 000。经镍离子柱亲和层析进一步纯化得到纯度较高的EJO1-H IS6融合蛋白。

转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦水稻表达蛋白的小鼠急性经口毒性研究

目的探讨转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦水稻表达蛋白的急性经口毒性。方法选择体重18～22 g、SPF级健康昆明种小鼠,禁食16 h后,G6蛋白以1693.3 mg/kg.BW剂量,HJC-1蛋白以751和1 502 mg/kg.BW2个剂量经口灌胃染毒,连续观察2周。结果 G6蛋白和751 mg/kg.BW剂量的HJC-1蛋白染毒后未见明显中毒症状,观察期内无死亡;1502 mg/kg.BW剂量的HJC-1蛋白雌雄各死亡1只。结论 G6表达蛋白对小鼠急性经口毒性LD50>1693.3 mg/kg.BW;HJC-1表达蛋白对小鼠急性经口毒性LD50>751 mg/kg.BW。