RNA聚合酶2延长因子相关因子2可通过调节胞外信号调控激酶的磷酸化抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移

目的 探讨RNA聚合酶2延长因子相关因子2（EAF2）对前列腺癌细胞增殖和迁移能力的抑制作用与细胞内细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化的关系。方法 采用RNA干扰（RNAi）方法干扰前列腺癌细胞C4-2和22Rv1中EAF2的表达，采用Western blot方法检测细胞内ERK磷酸化水平的变化；采用质粒转染的方法在293T细胞中过表达EAF2后检测ERK磷酸化水平的变化；分别采用溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记法和Transwell小室法检测干扰EAF2表达对前列腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，利用ERK抑制剂PD184352同时抑制ERK磷酸化后，进一步检测细胞增殖和迁移能力的变化。结果 干扰EAF2表达后ERK的磷酸化水平明显升高。过表达EAF2的表达后ERK的磷酸化水平进行性下降，在C4-2细胞中干扰EAF2的表达，检测到增殖细胞的百分比从（19.7±1.5）%升高至（30.8±0.8）%（P＝0.001）。但同时抑制细胞中ERK的磷酸化后，增殖细胞的百分比从（30.8±0.8）%降至（21.9±0.5）% （P＝0.013）。在C4-2细胞中干扰目标基因EAF2的表达后，检测到迁移细胞的数量从（104±12）个升高至（203±17）个（P＝0.002）。但同时抑制细胞中ERK的磷酸化后，迁移细胞的数量从（203±17）个降至（123±11）个（P＝0.011）。结论 EAF2的表达和ERK的磷酸化水平相关，EAF2可能通过调节ERK的磷酸化水平调控前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。

RNA聚合酶2延长因子相关因子2通过调节骨髓基质抗原2的表达调控前列腺癌细胞的增殖与迁移

目的 观察雄激素应答基因RNA聚合酶2延长因子相关因子2（EAF2）对骨髓基质抗原2（BST2）的调节能力，以及EAF2通过BST2调节前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。方法 以Lipofectamine 2000试剂转染针对EAF2和非特异性对照组的小干扰RNA（siRNA，分别为100 pmol），干扰前列腺癌细胞C4-2中EAF2的表达，采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测细胞内BST2的mRNA和蛋白水平表达变化；采用质粒转染的方法在293T细胞中过表达EAF2后检测BST2蛋白水平的变化，明确EAF2对BST2表达的影响；采用溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记法和Transwell小室法计算并检测干扰BST2表达后对前列腺癌细胞C4-2增殖能力和迁移能力的影响，明确BST2对前列腺癌细胞增殖和迁移的调节能力。结果 干扰EAF2表达后细胞内BST2 mRNA的表达明显升高，说明EAF2可以调节BST2的转录水平，进一步检测干扰EAF2表达后，BST2的蛋白水平表达明显升高，进一步干扰BST2表达后，检测到前列腺癌细胞的增殖比例由（22.09±1.08）%下降至（12.25±1.32）%（P＝0.001）。同时，迁移细胞的数量从（50.50±3.80）%下降至（24.25±1.42）%（P＝0.001）。结论 在前列腺癌细胞中，EAF2可以在转录和蛋白水平调节BST2的表达，BST2具有调节前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。