1例S100和CD34共表达伴EML4-ALK融合的特殊组织学形态软组织肉瘤

采用光镜、免疫组织化学染色(immunohistochemical stain,IHC)及二代测序(next-generation sequencing,NGS)对1例S100、CD34阳性、SOX10阴性,伴EML4-ALK融合的特殊组织学形态软组织肉瘤进行临床、病理及分子特征分析。患者为68岁男性,右大腿皮下脂肪组织内肿物,包膜完整,组织学为短梭形、卵圆形肿瘤细胞,呈旋涡状、小巢状或散在分布,黏液样、梭形纤维性间质或均质透明变性间质。核分裂活跃,可见病理性核分裂。IHC结果显示:CD34、ALK、CD99、H3K27me3弥漫阳性,S100局灶阳性,SOX10、STAT6、CD31、SMA、Desmin等阴性,Ki-67增殖指数约30%。NGS检测出EML4-ALK和EIF4E3-FOXP1 2个基因融合。结合文献复习,可排除恶性外周神经鞘瘤、隆突性皮肤纤维肉瘤、孤立性纤维性肿瘤等,并诊断为S100、CD34阳性伴EML4-ALK融合的软组织肉瘤。以S100、CD34阳性、SOX10阴性为特征的梭形细胞肿瘤是一组包含有不同基因融合、不同组织学形态以及不同增殖状态的肿瘤,其生物学行为多样,分子检测对其诊断和鉴别诊断必不可少,同时可为其提供靶向治疗依据。

EGFR突变的非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的检测及其临床特征分析

目的:检测EML4-ALK融合基因在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变的非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)人群中的突变率,并分析其与临床特征的关系。方法:入选的102例NSCLC患者均为中国人,且至少满足以下1个入选条件:女性、不吸烟/少吸烟和肺腺癌。将102例患者的组织标本采用多重逆转录聚合酶链反应(multiplex RT-PCR)的方法检测其EML4-ALK融合基因的突变率;对EML4-ALK阳性患者的组织标本采用DNA扩增后直接测序的方法来检测其EGFR(18～21号外显子)及Kirsten鼠肉瘤基因(Kirsten rat sarcoma,KRAS)(1、2号外显子)的突变情况。结果:102例非小细胞肺癌患者的组织标本,有8例(7.8%)存在EML4-ALK融合基因突变,其中7例为突变体1(variant 1,V1),1例为突变体2(vari-ant 2,V2);这8例EML4-ALK阳性患者组织标本的EGFR(18～21号外显子)及KRAS(1、2号外显子)均为野生型。8例阳性患者中,5例患者的年龄小于总体患者的平均年龄(59±10)岁,占62.5%(5/8);女性患者6例,占75%(6/8);不吸烟患者7例,占87.5%(7/8);腺癌患者5例,占62.5%(5/8)。结论:EML4-ALK融合基因突变代表了NSCLC的一个新的分子亚型,EML4-ALK突变与EGFR及KRAS突变是不共存的。

非小细胞肺癌中c-Met、EGFR、K-Ras和EML4-ALK基因的检测分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肝细胞生长因子受体(c-Met)基因扩增与临床病理特征的关系以及分析c-Met与EGFR、K-Ras和EML4-ALK驱动基因的相关性。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)检测108例NSCLC患者的c-Met基因扩增情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测EML4-ALK融合基因及c-Met基因表达量,聚合酶链扩增反应(PCR)及直接测序法检测EGFR和K-Ras基因突变情况,并分析c-Met基因与临床病理特征的关系及其与EGFR、K-Ras和EML4-ALK驱动基因的关系。结果 NSCLC中c-Met基因扩增率为1.85%,其在吸烟和非吸烟患者中扩增率分别为2.94%和1.35%;腺癌c-Met基因扩增率为1.23%,鳞癌未发现c-Met基因扩增;仅Ⅰ期和Ⅲ期中分别有1例c-Met基因扩增。NSCLC中EGFR、K-Ras基因突变及EML4-ALK融合基因的阳性率分别为42.59%、5.56%和12.04%。结论 FISH法对c-Met基因扩增检出率与qRT-PCR检测的c-Met基因表达水平基本一致;c-Met基因扩增与EGFR、K-Ras突变及EML4-ALK融合基因之间几乎是不共存的,c-Met扩增与NSCLC患者年龄、性别、吸烟状态、肿瘤组织类型及临床分期无关。

免疫组化法检测EML4-ALK融合突变价值的meta分析

背景与目的棘皮动物微管相关蛋白4(echinoderm microtubule-associated protein 4,EML4)与间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphatic tumor kinase,ALK)重排形成的融合基因存在于大约5%的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中,是继表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、K-ras之后又一新型靶点基因。有数据显示携带EML4-ALK融合基因的NSCLC患者接受ALK抑制剂治疗后,其疾病控制的有效率可达80%,探索和建立能够准确快速检测出NSCLC患者EML4-ALK融合突变的方法,是筛选出适合治疗的优势人群的关键。本研究分析免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测EML4-ALK融合基因突变的敏感度与特异度,评价该方法准确性及临床应用价值,从而为肺癌患者"个体化分子治疗"提供依据。方法通过Pubmed数据库检索所有符合检索条件的文献,末次检索日期为2015年2月25日,根据纳入和排除标准进行进一步筛选,采用诊断试验meta分析方法,比较特异性抗体免疫组化法与"金标准"荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)法的敏感度、特异度,以明确特异性抗体IHC作为筛查方法的可行性。结果本文11篇文献纳入meta分析,EML4-ALK融合基因免疫组化累计病例3,234例,诊断比值比(diagnositic odds ratio,DOR)为1,135.00(95%CI:337.10-3,821.46);综合受试者工作特征曲线(summary receiver operating characteristic curve,SROC)下面积为0.992,3(SEAUC=0.003,2),Q*统计量为0.964,4(SEQ*=0.008,7)。结论特异性抗体IHC法检测EML4-ALK融合基因的方法可行,具有高特异度和敏感度,可作为一种简单快速的筛查方法,具有临床应用价值。

克唑替尼靶向治疗非小细胞肺癌疗效及EML4-ALK的表达情况分析

目的探讨克唑替尼靶向治疗非小细胞肺癌患者对EML4-ALK的表达的影响。方法选取2010年2月-2016年3月在我院接受治疗的EML4-ALK阳性非小细胞肺癌患者的临床资料。根据其治疗方式分为传统化疗组和克唑替尼靶向治疗组,克唑替尼靶向治疗组在传统化疗的基础上给予克唑替尼靶向治疗。观察治疗6个月后两组患者EML4-ALK阳性表达率和肿瘤标志物水平的变化,比较两组患者1年生存率的差异,分析EML4-ALK阳性表达率与肿瘤标志物水平和生存率的相关性。结果两组患者治疗前EML4-ALK阳性表达率均为100%,治疗后,靶向治疗组EML4-ALK阳性表达率低于传统化疗组(P<0.05);两组患者治疗前的CEA、NSE和CYFRA21-1等肿瘤标志物水平无明显差别,治疗后,靶向治疗组低于传统治疗组(P<0.05);靶向治疗组1年生存率明显高于传统化疗组;患者的EML4-ALK阳性表达率与CEA、NSE、CYFRA21-1明显正相关,与生存率明显负相关。结论克唑替尼靶向治疗可明显降低非小细胞肺癌患者的EML4-ALK阳性表达率,提高其生存率。

浙江省非小细胞肺癌患者EGFR基因与EML4-ALK融合基因突变的检测及其临床特征

目的 :检测中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因和棘皮动物微管相关蛋白样-4与渐变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因的突变情况,同时分析这两种基因与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床病理特征的关系。方法 :采用PCR扩增和基因测序法检测252例NSCLCs EGFR基因外显子19和21的突变情况,real-time PCR法检测EML4-ALK融合基因的突变情况,分析突变与临床特征的关系。结果:252例非小细胞肺癌组织标本EGFR的突变率为38.8%(98例),其中19外显子突变率为15.8%(40例),21外显子突变率为23.0%(58例)。EGFR突变的患者多为女性、无吸烟史和腺癌(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。252例非小细胞肺癌组织标本中,EML4-ALK融合基因突变率4.7%(12例)。EML4-ALK基因突变患者多为女性和年龄较小者(P<0.05),与患者吸烟史和病理类型无关(P>0.05)。没有检测到EGFR和EML4-ALK的突变共存情况。结论:中国人中NSCLCs的EGFR突变率较高,在使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗前进行EGFR基因突变检测很有必要。EML4-ALK基因突变代表了NSCLC另一种分子亚型,这为临床NSCLC患者的治疗提供了一种新的选择方案。EML4-ALK融合基因突变与EGFR突变共存是罕见的现象。

Bim在克唑替尼诱导EML4-ALK融合基因阳性肺腺癌细胞株H2228凋亡中的作用机制

目的探讨Bim在克唑替尼诱导EML4-ALK融合基因阳性肺腺癌细胞株H2228凋亡过程中的作用机制。方法在不同时间点(24、48、72h)用不同浓度克唑替尼分别处理EML4-ALK阳性肺腺癌H2228细胞株和EML4-ALK阴性肺癌A549细胞株,采用MTT法检测克唑替尼作用72h的细胞增殖抑制情况;PI单染流式细胞仪检测经300nmol/L克唑替尼作用24、48和72h的细胞凋亡率;采用Western blotting法检测克唑替尼诱导前后Bim蛋白(Bim-EL、Bim-L和Bim-S)的表达水平,同时对促凋亡分子Bid和抗凋亡分子Bcl-2、Bcl-xL的蛋白水平进行联合检测;采用siRNA技术"沉默"Bim基因的表达,用流式细胞仪检测siRNA"沉默"Bim基因后克唑替尼诱导H2228细胞株的凋亡率。结果克唑替尼作用72h后,肺腺癌H2228细胞株和A549细胞株的细胞增殖抑制率均随着克唑替尼药物浓度的增加而逐渐升高,呈剂量依赖性。克唑替尼作用于H2228细胞72h的IC50值为335nmol/L。300nmol/L克唑替尼作用H2228细胞株24、48、72h后的凋亡率分别为(19.19±0.61)%、(35.47±1.17)%、(43.58±4.84)%,作用A549细胞株的凋亡率分别为(12.71±0.1)%、(18.22±0.13)%、(19.36±0.45)%。随着克唑替尼(300nmol/L)作用时间的延长,细胞凋亡率亦随之增加,并呈时间依赖性(P<0.05)。在凋亡细胞中发现Bim蛋白水平升高,以及抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL表达降低,但促凋亡蛋白Bid在不同药物浓度及时间点的表达水平无明显变化。此外,经siRNA技术"沉默"Bim基因后,克唑替尼诱导的H2228细胞株凋亡率明显降低。结论克唑替尼通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL及上调Bim的表达水平来发挥其诱导细胞凋亡作用,该过程可被Bim siRNA抑制。

非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因突变研究

背景与目的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌的主要类型,相关位点突变检测研究已经成为肺癌分子靶向治疗的热门方向,研究NSCLC肿瘤组织中动物微管相关蛋白4与间变性淋巴瘤激酶融合基因(echinodem microtubule associated protein like 4-Anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的基因突变状态,比较免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)与蝎形探针扩增阻滞突变系统(Scorpions amplification refractory mutation system,Scorpions ARMS)荧光定量PCR与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变的敏感性。方法应用IHC、ARMS荧光定量PCR及FISH技术检测85例NSCLC石蜡包埋肿瘤组织以及癌旁正常肺组织中EML4-ALK融合基因状态,并应用ARMS方法检测EGFR基因第18、19、20和21外显子突变状态。结果 115例NSCLC中IHC显示32例有ALK(D5F3)表达,表达率为27.8%;ARMS检测27例存在EML4-ALK融合基因突变,突变检出率为23.5%;53例检出EGFR突变,突变率为46%。而FISH检测23例存在EML4-ALK融合基因突变,检出率为20%,稍低于ARMS检测结果,提示ARMS的敏感度更高。结论联合运用IHC/ARMS荧光定量PCR/FISH技术能够对EML4-ALK融合基因状态做出快速、准确评价。

非小细胞肺癌治疗的新靶点:EML4-ALK融合基因

3年前棘皮动物微管相关类蛋白4(echinoderm microtubule-associated protein-like 4,EML4)与间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因被发现存在于部分非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中。该融合基因常见于不吸烟的肺腺癌患者,有其独特的病理学特征,可以诱导肿瘤生成。ALK抑制剂能够作用于该基因的下游信号传导通路并拮抗其促肿瘤生成活性。本文旨在介绍EML4-ALK基因的结构、功能、生物学特征、检测方法及其在肺癌诊断治疗中的意义。

旁路信号通路激活介导的EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib继发耐药的研究

目的:本研究旨在探讨肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)及转化生长因子α(TGF-α)是否以旁路激活的方式诱导EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib的耐药,并进一步探讨旁路信号激活在alectinib耐药中的作用。方法:用不同浓度的alectinib、克唑替尼(crizotinib)、17-DMAG或(和)HGF(50μg/L)、EGF(100μg/L)、TGF-α(100μg/L)处理EML4-ALK阳性肺癌细胞株H3122,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,应用Western blot技术检测细胞中ALK、c-Met、EGFR及相应磷酸化蛋白的表达,观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK水平。结果:Alectinib作用72 h后,H3122细胞株的活力随着alectinib药物浓度的增加而逐渐下降,呈剂量依赖性。HGF、EGF和TGF-α诱导后,alectinib抑制H3122细胞的生长曲线往右移,HGF、EGF和TGF-α处理能够降低alectinib对肺癌细胞活力的抑制作用。0.05μmol/L alectinib作用H3122细胞株48 h后的凋亡率为(20.12±1.36)%,而alectinib联合HGF、EGF和TGF-α后的凋亡率分别为(7.85±1.03)%、(5.60±0.79)%和(4.58±1.00)%,显著低于alectinib单药处理(P<0.05)。Alectinib单药成功抑制p-ALK及其下游信号通路,HGF明显增加细胞中p-Met及其下游p-AKT、p-ERK的蛋白水平,EGF和TGF-α明显增加细胞中p-EGFR及其下游p-AKT、p-ERK的表达,alectinib抑制p-ALK,但不能抑制HGF、EGF和TGF-α诱导的pAKT和p-ERK的蛋白表达。此外,联合应用crizotinib和17-DMAG可以抑制因HGF和EGFR配体而导致的H3122耐药细胞的活力。结论:HGF、EGF和TGF-α可通过旁路激活的方式诱导EML4-ALK阳性肺癌细胞H3122对alectinib耐药,其机制可能与HGF激活c-Met磷酸化、EGF和TGF-α激活EGFR磷酸化有关。

EML4-ALK融合基因阳性表达的人肺腺癌H2228细胞对克唑替尼耐药后BIM信号通路的影响

目的建立人肺腺癌H2228克唑替尼耐药细胞株,探讨克唑替尼(crizotinib)诱导EML4-ALK融合基因阳性表达的人肺腺癌细胞H2228在BIM信号通路中的作用。方法克唑替尼按50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、500 nmol/L、1 000 nmol/L的浓度逐步递增法诱导人肺腺癌H2228细胞株获得性耐药;分别采用MTT法和流式细胞术检测H2228和H2228/CR细胞在不同浓度克唑替尼作用后的IC50和细胞凋亡率;采用Western blot法检测H2228和H2228/CR细胞在BIM信号通路关键分子ALK、p-ALK、ERK、p-ERK及BIM蛋白表达的变化。结果成功诱导克唑替尼耐药细胞株H2228/CR;MTT法检测H2228/CR细胞和H2228细胞的IC50分别为3 418 nmol/L、335 nmol/L,H2228/CR细胞的耐药指数为10.20,H2228/CR细胞在不同浓度克唑替尼作用下的增殖抑制率低于H2228细胞(P<0.05);流式细胞术检测显示克唑替尼对H2228细胞有促凋亡作用,且呈时间依赖性(P<0.05),H2228/CR细胞的凋亡率明显低于H2228细胞的凋亡率(P<0.05);Western blot法检测显示H2228/CR细胞的p-ALK、p-ERK的表达不受抑制,BIM蛋白表达无上调趋势。结论实验表明H2228/CR耐药细胞中的BIM蛋白的表达与其耐药有关。初步阐明EML4-ALK阳性表达的非小细胞肺癌克唑替尼耐药产生的可能机制,BIM在诱导EML4-ALK阳性表达的人肺腺癌细胞株H2228对克唑替尼产生耐药发挥重要作用,提示BIM可作为克服克唑替尼耐药的一个靶点。

克唑替尼治疗EML4-ALK重排阳性患者的临床疗效

目的探讨EML4-ALK融合基因阳性与阴性非小细胞肺癌患者在应用不同治疗方案后的临床疗效。方法对有自主意愿进行EML4-ALK基因检测的21例ALK阳性、50例ALK阴性与75例未行ALK检测的非小细胞肺癌患者,对3组患者给予不同的治疗方法,并对疗效、无疾病生存期及不良反应做出统计学分析。结果对于EML4-ALK阳性患者,应用克唑替尼后的PFS明显延长,其客观缓解率为61.9%,明显高于应用化疗药物之后的客观缓解率。对比与EML4-ALK阴性及未测组的二线治疗方案,其客观缓解率及疾病控制率也有显著统计学差异。结论克唑替尼对EML4-ALK阳性患者具有更好的疗效,EML4-ALK基因重排与否对化疗药物并无影响。

EML4-ALK在非小细胞肺癌中的研究进展

EML4-ALK是肺癌诱发基因之一,属于融合基因,2007年由日本学者首次报道。在非小细胞肺癌(non-small-celllung carcinoma,NSCLC)患者中EML4-ALK表达阳性率约为3%～8%。EML4-ALK融合基因存在多种不同结构的变异体,其中3种变异体占大多数,其他变异体相对较少。目前尚无标准的、快速简便的检测EML4-ALK的方法,使其临床应用推广受到限制,有待进一步研究。新近的临床研究发现,EML4-ALK阳性率和患者是否吸烟高度相关,也与年龄、腺癌以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和KRAS基因是否突变等因素相关。其中不吸烟或轻度吸烟的NSCLC患者EML4-ALK阳性率高达9.4%,而在吸烟的患者中其阳性率只有2.9%,两者存在显著性差异。EML4-ALK表达阳性与EGFR、KRAS突变呈负相关。在NSCLC患者中EML4-ALK表达和EGFR、KRAS突变很少同时存在。EML4-ALK的抑制剂TAE684和PF02341066等目前已进入Ⅲ期临床试验,前期研究取得了较好的疗效。EML4-ALK现已成为NSCLC治疗的新靶点,EML4-ALK抑制剂为肺癌的个体化治疗提供了新的可选择方案,也可作为不能耐受化疗的患者的治疗药物。

EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达

目的探讨肺腺癌EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变的发生率及临床病理特征。方法采用FISH和ARMS方法对安徽省铜陵市人民医院2008～2011年手术切除和经皮肺穿刺活检病理确诊的肺腺癌60例石蜡包埋组织分别进行EML4-ALK融合基因和EGFR基因突变检测,并分析与临床病理特征的相关性。结果肺腺癌病理组织中EML4-ALK融合基因阳性表达率为8.33%,EGFR基因突变率61.67%,女性患者突变率76.92%(20/26)较男性患者突变率50.0%(17/34)高,P=0.034;吸烟<400年支突变率74.29%(26/35)较吸烟≥400支突变率44.0%(11/25)高,P=0.017;≥60岁患者突变率42.86%(12/28)较<60岁患者突变率78.13%(25/32)低,P=0.005,差异均有统计学意义。EML4-ALK和EGFR在肺腺癌患者中表达的相关性分析,显示二者之间呈负相关(R=-0.134,P=0.308),差异无统计学意义。结论 EML4-ALK在肺腺癌中低表达,EGFR基因突变高表达,两者呈负相关。

Ventana免疫组化检测非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因及其结果判读难点分析

目的分析Ventana免疫组织化学染色(IHC)检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EML4-ALK融合基因的突变情况。解析Ventana IHC结果判读的难点和陷阱,为此项检测的开展提供参考。方法回顾性分析695份Ventana IHC检测NSCLC标本,对部分标本进行了实时定量PCR(qRT-PCR)对照研究。结果 EML4-ALK在腺癌中的突变率为8.78%,鳞状细胞癌中的突变率为4.49%,总突变率为8.48%。10例Ventana IHC为(-)和(+)标本qRT-PCR检测为阴性;5例Ventana IHC染色(+++)标本qRT-PCR检测均为阳性;5例Ventana IHC(++)标本qRT-PCR检测1例阳性。结论 EML4-ALK融合基因主要发生在肺腺癌。Ventana IHC检测结果存在判读难点和陷阱,判读需要谨慎。EML4-ALK IHC检测阳性(++)的需要qRT-PCR或其它方法进一步证实。

AKT信号通路在克唑替尼诱导的EML4-ALK阳性肺癌细胞凋亡迁移中的作用及机制研究

目的探讨AKT信号通路在克唑替尼诱导的EML4-ALK阳性肺癌细胞凋亡迁移中的作用及机制研究。方法培养人肺癌细胞株H2228,CCK8实验检测20、40、80、160、320、640 nmol/L的克唑替尼作用于细胞48 h后对细胞增殖的影响,计算半抑制浓度(IC50);300 nmol/L克唑替尼处理细胞24、48、72 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室检测细胞迁移数;Western Blot检测Bcl-x L、Bcl-2、Bim、AKT、p-AKT蛋白表达。结果克唑替尼能明显抑制人肺癌细胞株H2228增殖(P﹤0.01),根据IC50值选择300 nmol/L克唑替尼为研究对象;克唑替尼能明显促进细胞凋亡,抑制细胞迁移(P﹤0.01);克唑替尼能下调Bcl-x L、Bcl-2、p-AKT蛋白表达,上调Bim蛋白表达(P﹤0.01)。AKT蛋白表达水平在克唑替尼作用的各个时间点间比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论克唑替尼通过AKT信号通路抑制人肺癌细胞株H2228迁移,并通过调节Bcl-x L、Bcl-2、Bim蛋白表达促进细胞凋亡。

国人原发性肺印戒细胞癌伴EML4-ALK融合基因阳性1例

2007年,日本学者Soda等[1]首次报道1例有吸烟史的62岁男性肺腺癌患者具有一种致瘤的变异融合基因,即EML4-ALK。EML4-ALK是一种棘皮动物微管相关蛋白样-4（echinoderm microtubule-associated protein-like 4,EML4）/间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）融合基因。非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因阳性的发生率约为5%,是继EGFR后肺癌的又一分子标志物,目前针对ALK的靶向治疗药物Crizotinib已于2011年8月26日被美国食品和药物管理局（FDA）批准上市。

存在EML4-ALK融合基因非小细胞肺癌患者的临床和病理学特征

研究一：Takahashi T，Sonobe M，Kobayashi M，et al．Clinicopathologic features of non—small-cell lung cancer with EML4-ALK fusion gene[J]．Ann Surg Oncol，2010，17（3）：889—897．

非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的检测及其临床病理特征分析

目的：检测EML4-ALK融合基因在非小细胞肺癌（NSCLC）人群中的突变率,并分析其与临床病理特征的关系。方法：采用逆转录定量PCR检测66例NSCLC患者组织标本中EML4-ALK融合基因的突变率;采用DNA扩增后直接测序的方法检测EML4-ALK阳性患者的组织标本中EGFR基因（18~21号外显子）及K-Ras基因（2号外显子）的突变情况。结果：66例NSCLC患者的组织标本中,有5例（7.6%）存在EML4-ALK融合基因阳性,这5例组织标本的EGFR（18~21号外显子）及K-Ras（2号外显子）均为野生型。5例阳性患者中,4例年龄小于总体患者的平均年龄（59±11）岁,占80%（4/5）;女性患者4例,占80%（4/5）;不吸烟患者3例,占60%（3/5）。EML4-ALK融合基因阳性NSCLC患者均为腺癌,1例NSCLC组织为腺泡样结构,3例组织为印戒细胞样结构,4例伴有胞内或胞外黏液。结论：EML4-ALK融合基因阳性NSCLC多见于年轻女性腺癌患者,多为伴有黏液产生的印戒细胞样结构,不同时合并EGFR和KRas突变。

EML4-ALK融合基因与非小细胞肺癌

非小细胞肺癌是危害人类生命最常见的恶性肿瘤之一,分子靶向治疗是目前治疗非小细胞肺癌最具前景的研究领域,如何选择合适的患者一直是靶向治疗的关键。EML4-ALK融合基因是新近发现主要表达于非小细胞肺腺癌中,可能与非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药相关的新靶点,本文就其发现过程以及研究现状进行综述。