运脾消食颗粒对厌食模型幼龄大鼠下丘脑、胃窦及十二指肠β-EP、nesfatin-1影响研究

目的研究厌食模型幼龄大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠中β-内啡肽(β-EP)、新型神经肽-1(nesfatin-1)的含量及蛋白表达情况,以及中药复方运脾消食颗粒对两者的干预作用。方法选取SPF级72只Wistar幼龄大鼠,雌雄各半,日龄30 d,体质量(60±10)g,随机分为空白组(12只)和造模组(60只),造模组以病因和症状模型法建立幼龄大鼠厌食症模型。造模成功后的动物随机分为模型组、阳性组(儿宝颗粒组)、运脾消食颗粒高剂量组、运脾消食颗粒中剂量组、运脾消食颗粒低剂量组,每组12只,空白组和模型组灌胃等量0.9%氯化钠溶液,其余4组分别给予等体积的儿宝颗粒混悬液(1.75 g/kg)、运脾消食颗粒高剂量混悬液(4.20 g/kg)、运脾消食颗粒中剂量混悬液(2.10 g/kg)、运脾消食颗粒低剂量混悬液(1.05 g/kg),连续给药14 d,最后一次给药结束禁食禁水24 h后,采集标本,用ELISA法和Western Blot法分别检测大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠中β-EP、nesfatin-1的含量和蛋白表达。结果①模型组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠β-EP含量及蛋白表达降低,治疗后儿宝颗粒组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠β-EP含量及蛋白表达增加,运脾消食颗粒高、中剂量组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠β-EP含量及蛋白表达增加;②模型组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠nesfatin-1含量及蛋白表达增加,治疗后儿宝颗粒组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠nesfatin-1含量及蛋白表达降低,运脾消食颗粒高、中剂量组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠nesfatin-1含量及蛋白表达降低。结论运脾消食颗粒可显著降低下丘脑、胃窦、十二指肠中nesfatin-1含量及蛋白表达水平,而增加下丘脑、胃窦、十二指肠中β-EP含量及蛋白水平;可改善模型大鼠的胃肠功能,调节脑肠肽水平,增加食欲,这可能是运脾消食颗粒治疗小儿厌食症的重要机制之一。

不育剂EP-1对荒漠啮齿动物优势种群数量的影响

2011—2012年在内蒙古阿拉善荒漠区，利用复合不育剂EP-1（左炔诺孕酮-炔雌醚），设试验区和对照区，采用春季试验区一次性投饵的方法，对子午沙鼠、小毛足鼠和三趾跳鼠3种荒漠啮齿动物优势种群的不育控制进行研究。结果表明，不育剂EP-1显著降低了优势种群当年的幼体出生率，试验区5，6月小毛足鼠幼体比例较对照区显著降低（P〈0．05），5—8月子午沙鼠和6—8月三趾跳鼠成体比例分别较对照区显著增加（P〈0．05），同时显著降低了优势鼠种当年的种群数量，试验区子午沙鼠和小毛足鼠种群在繁殖高峰期的数量均显著低于对照区（P〈0．05），4—5月三趾跳鼠种群数量显著低于对照区（P〈0．05）。次年，试验区5—7月子午沙鼠种群成体比例显著高于对照区（P〈0．05），全年种群数量显著低于对照区（P〈0．05），而三趾跳鼠种群数量与对照区差异并不显著。因此，不育剂EP-1对3种荒漠啮齿动物优势种群数量增长均具有控制作用，尤其对子午沙鼠种群的持续控制效果更加明显。可见，种群在繁殖期年龄结构的变化是影响其种群数量动态的重要因素。

EP-1对雄性中华姬鼠和黑线姬鼠繁殖力的影响

为了检测左炔诺孕酮-炔雌醚(EP-1)对雄性中华姬鼠和黑线姬鼠的不育效果,将32只雄性中华姬鼠和30只雄性黑线姬鼠分为30 mg/kg单剂量组、30 mg/kg多剂量组和对照组,15 d和45 d后剖检,比较睾丸、附睾、储精囊、精子密度、睾酮含量及睾丸组织形态的变化。结果发现:给药后第15 d,两种试鼠的睾丸、附睾、储精囊的重量较对照组明显降低;精子密度、睾酮含量显著下降;曲细精管结构破坏明显。给药后第45 d,处理组各生理指标继续下降,但与第15 d相比差别不显著;单剂量组和多剂量组在两个时间点的差别并不显著。结果表明,EP-1对雄性中华姬鼠和黑线姬鼠的繁殖器官有显著抑制效果,单次给药与多次给药的不育效果差别不大。

左炔诺孕酮和炔雌醚复合不育剂(EP-1)对雌性东方田鼠生殖的影响

本文在实验室条件下通过一次性灌胃的方式研究了左炔诺孕酮-炔雌醚复合不育剂(EP-1)对雌性东方田鼠激素、生殖系统、胎仔数、受孕率的影响及药效持续时间,旨在检验其应用于野外东方田鼠不育控制的价值。结果表明,各浓度EP-1灌胃均能显著提高雌性东方田鼠的子宫系数,使子宫形态发生变化,对卵巢组织造成损伤,影响卵泡和黄体的发育,但是对雌二醇含量和子宫长度没有明显影响;60 mg/kg EP-1灌胃能显著提高促卵泡刺激素含量和卵巢系数,而10 mg/kg、30 mg/kg EP-1灌胃对二者没有明显影响。室内繁殖实验表明,各浓度EP-1灌胃均能不同程度延迟初次怀孕时间,并降低试鼠的怀孕率和胎仔数,但抗生育作用具有可逆性且与药物浓度相关,10 mg/kg、30 mg/kg和60 mg/kg剂量组生殖系统恢复时间分别为16 d、38 d和52 d。

菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒EP-1-like基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备方法

本实验提取被菜蛾盘绒茧蜂寄生后24h的小菜蛾幼虫体内总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒(Cotesia vestalis polydnavirus,CvBV)EP-1-like基因,将其分别克隆到表达载体pET30a、pET28a中,转化宿主菌BL21(DE3),获得单克隆重组质粒pET-30a-EP1L和pET-28a-EP1L。经IPTG诱导,pET-28a-EP1L成功表达了约34.8kDa的包涵体蛋白。将诱导条件优化以后,采用割胶回收的方法纯化包涵体,将纯化后的表达蛋白免疫新西兰大耳兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1:128000,Western blot检测证明抗体具有良好的免疫反应特异性。

左炔诺孕酮和炔雌醚复合物(EP-1)及组分对鼠类不育效果的研究进展

由于当前传统灭杀带来的一系列问题,鼠害不育控制逐渐受到重视。自张知彬等2004年率先报道左炔诺孕酮和炔雌醚复合物(EP-1)对野生鼠类不育效果的研究以来,国内多个研究团队对EP-1及其组分的不育效果、剂量、饵料制作、环境安全性、行为与分子机理等方面开展了大量的验证和完善研究,取得了许多重要的进展。这些结果进一步说明EP-1及组分对鼠类具有很好的不育效果,并具有两性不育、高效低量、可持续、相对环保与安全、野外投放方便、经济可行等特点。EP-1或炔雌醚毒饵的不育剂量约为10-50μg/m L(0.001%-0.005%),甚至更低;其组分在土壤和水体的半衰期约为5-16 d和小于3 d。在鼠类繁殖的早期,采取野外一次饱和投放即可有效降低全年鼠类的繁殖,效果可延续至第二年。可见,EP-1及其组分有望成为鼠害控制的一个新手段。建议今后进一步加强野外不育与跨年持续效应的验证、环境安全性评价和行为生态学机制等研究工作。

复合不育剂EP-1对雄性棕色田鼠的抗生育作用

为探讨复合不育剂EP-1对雄性棕色田鼠繁殖器官的药效,选取健康的发情期成年雄性棕色田鼠22只,随机分成2组,记录2组用药前及用药后睾丸、附睾、储精囊、精子密度、睾酮含量和睾丸组织形态的变化。结果显示EP-1对雄性黑线姬鼠具有明显的不育效果,实验组试鼠睾丸组织破坏严重,精子密度及睾酮含量较对照组降低。说明复合不育剂(EP-1)能对雄性中华姬鼠的生殖系统造成一定的影响。

针刺疗法对子宫内膜异位症模型鼠β-EP与DynA_(1-13)的影响

目的 :探讨针刺疗法对子宫内膜异位症镇痛机制的影响。方法 :2 8只 SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、治疗组 ,分别监测各组大鼠垂体、下丘脑及异位内膜的β-内啡肽 (β- EP)和强啡肽 ( Dyn A1 - 1 3)的含量。结果 :模型组较空白对照组β-EP及 Dyn A1 - 1 3水平均明显降低 ( P<0 .0 5 ) ;针刺治疗组其β- EP及 Dyn A1 - 1 3含量较模型组显著升高 ( P<0 .0 5 )。结论 :针刺疗法可提高中枢及异位内膜组织中β- EP和 Dyn A1 - 1

β-Ep和IGF-1对急性肝片形吸虫感染水牛免疫机能的影响

１２ 头健康阉公水牛，９ 头经口１ 次性感染肝片吸虫囊蚴１ ６００ 个／头，３ 头对照。于感染前和感染后２２ 周，每周定时采颈静脉血样１ 次，分别测定血浆观察ＩＧＦ－１ 和β－ Ｅｐ 与机体免疫功能的关系。结果发现ＩＧＦ－ １ 浓度和淋巴细胞比例在感染后１ 周即明显高于对照组，ＩｇＧ水平则于感染后第２ 周开始明显升高，β－ Ｅｐ 水平在感染后第４ 周先显著降低，９ 周时明显升高。结果提示机体免疫功能可能与ＩＧＦ－１ 和β－ Ｅｐ 水平的变化有关。

复合不育剂EP-1对小鼠空间记忆与焦虑行为的影响

EP-1是由炔雌醚和左炔诺孕酮按照1∶2的比例配制而成的一种用于鼠类不育控制的激素类复合不育剂,对鼠类的繁殖及繁殖行为等有一定影响,但对鼠类空间学习与记忆、焦虑行为等非繁殖行为的影响还没有报道。为此,用0(对照)、1.0、2.0、3.0 mg/kg剂量的EP-1对昆明小鼠(Mus musculus)进行灌胃处理,然后用Morris水迷宫和高架十字迷宫分别测定其空间记忆、焦虑行为。结果发现灌胃后15 d,剂量为2.0 mg/kg的EP-1使小鼠空间记忆能力显著下降,但30 d后其空间记忆能力有所恢复,表明2.0 mg/kg剂量的EP-1可以在一定时间范围内降低小鼠的空间记忆能力。但不同剂量的EP-1对小鼠焦虑行为无显著影响。该结果可以为从对非繁殖行为的影响的角度研究EP-1对鼠类的作用提供一定启示。

腕踝针电刺激对慢性限制性损伤大鼠机械痛及脊髓背角β-EP、IL-10和Iba-1变化的影响

目的探讨腕踝针电刺激对慢性限制性损伤(CCI)大鼠机械痛以及脊髓背角IL-10、β-EP和Iba-1变化的影响。方法采用随机数字表法将24只SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、电针组和鞘内注射组,每组6只,模型组、电针组和鞘内注射组采用4-0可吸收外科缝线结扎右侧坐骨神经的方法制备CCI大鼠模型,假手术组只暴露右侧坐骨神经,但不结扎。电针组选取右侧踝部分区(“下1”“下3”“下4”“下6”)进行电刺激,每次干预30 min;鞘内注射组电针干预同电针组,干预第1、4、7天鞘内注射μ受体拮抗剂,每次注射20μL;模型组和假手术组只抓取、固定大鼠,不予电针及鞘内注射。造模后、干预后分别采用Von Frey测痛仪测定机械缩足反射阈值(MWT)以检测各组大鼠机械痛的变化;采用酶联吸附法检测各组大鼠脊髓背角β-EP、IL-10和Iba-1含量变化情况。结果造模后与假手术组比较,模型组、电针组、鞘内注射组MWT、β-EP和IL-10显著下降,Iba-1显著升高(P均<0.01);干预后与模型组比较,电针组MWT、β-EP和IL-10显著升高,Iba-1显著降低(P均<0.01);与电针组比较,鞘内注射组MWT显著降低,Iba-1显著升高(P均<0.01),IL-10变化不明显(P>0.05)。结论腕踝针电刺激治疗可升高CCI大鼠MWT,其机制可能与提高脊髓背角IL-10、β-EP的释放,抑制Iba-1有关。

电针对吗啡戒断大鼠β-EP免疫调节作用的影响

本文观察电针“足三里”穴对吗啡戒断大鼠β EP免疫调节作用的影响 ,探讨针刺祛毒扶正的作用机理。结果表明 ,电针组血清和垂体内 β EP含量增加 ,IL 1、IL 2升高 ,免疫器官重量和体重比吗啡对照组明显增加 ,垂体β EP与IL 1之间呈正相关趋势。提示针刺脱毒扶正 ,改善戒断症状的作用可能与β

瑞士乳杆菌MB2-1胞外多糖发酵条件优化

对1株分离自新疆赛里木酸奶中的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus MB2-1)胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的发酵条件进行优化。利用单因素试验确定发酵温度、乳糖添加量、氮源种类及添加量、无机盐种类及添加量对其EPS产量的影响。采用Box-Behnken法对其中的三因素三水平进行响应面分析以确定其最优工艺条件。结果表明:L.helveticus MB2-1 EPS提取的最佳条件为发酵温度37℃、Mg2+添加量为质量浓度0.2 g/100 mL、大豆蛋白胨添加量为质量浓度2 g/100 mL,在此工艺条件下,L.helveticus MB2-1 EPS的产量达到801.2 mg/L。

电针对退变腰椎间盘兔模型M-ENK、β-内啡肽、Netrin-1表达的影响及相关性研究

目的:观察电针对退变腰椎间盘模型兔脊髓背角中甲硫脑啡肽(M-ENK)、β-内啡肽及背根神经节中Netrin-1含量及相关性的影响,探讨电针改善盘源性腰痛的可能作用机制。方法:随机选取4只新西兰大白兔作为正常组,并随机选取12只实验兔予以轴向椎体加压诱导退变腰椎间盘模型,造模成功后随机分为模型组、电针组和假电针组,每组各4只,另随机选取4只不予轴向椎体加压处理作为假模型组。电针组取L_(4)、L_(5)双侧夹脊穴,连接电针仪治疗,疏密波,频率2/15 Hz,强度1~2 mA,20 min/次,1次/d,一疗程6次,共治疗4个疗程;假电针组针刺L_(4)、L_(5)夹脊穴夹持电针但不通电,其余操作同电针组。治疗结束后,Western blot法检测各组实验兔L_(2)脊髓背角中M-ENK、β-内啡肽以及背根神经节中Netrin-1蛋白表达,直线相关分析法分析M-ENK、β-内啡肽的表达与Netrin-1之间的相关性。结果:与正常组比较,模型组退变腰椎间盘相应背根神经节中Netrin-1蛋白表达明显下降;脊髓背角中M-ENK、β-内啡肽蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,电针组Netrin-1、M-ENK及β-内啡肽蛋白表达明显增加(P<0.05);与电针组比较,假电针组Netrin-1、M-ENK及β-内啡肽蛋白明显减少(P<0.05)。直线相关分析法Netrin-1蛋白含量与M-ENK、β-内啡肽之间均存在正相关性(R^(2)=0.66、R^(2)=0.51)。结论:电针可上调背根神经节中Netrin-1的表达,改善盘源性疼痛,其作用可能与上调脊髓背角中M-ENK、β-内啡肽的表达有关。

新生儿窒息后血胰岛素样生长因子1、β-内啡呔变化与脑损伤的关系

目的探讨新生儿窒息后血胰岛素样生长因子1(IGF-1)、β-内啡呔(β-EP)水平变化与脑损伤的关系。方法用放射免疫法检测60例窒息新生儿生后第1、7天及30例正常新生儿生后第1天血清IGF-1、β-EP水平变化并分析其与脑损伤的关系。结果窒息新生儿生后第1天IGF-1显著降低,与对照组比较有统计学意义(P<0.001),β-EP水平明显增高,与对照组比较有统计学意义(P<0.001);HIE组IGF-1低于单纯窒息组,HIE组β-EP高于单纯窒息组,有统计学意义(P<0.001)。结论新生儿窒息可致IGF-1降低,β-EP升高,且与脑损伤相关,IGF-1与β-EP呈负相关。

乙型肝炎病毒前S1抗原阳性检验价值分析

目的分析乙型肝炎病毒前S1抗原阳性检验价值。方法便利选取2014年8月—2016年8月于济南市传染病医院诊治的108例乙型肝炎患者临床资料,均采集静脉血检验,观察不同HBV血清标志物检查结果。结果在不同HBV血清标志物中,HBeAg阳性血清的Pre S1-Ag阳性率77.08%、HBV-DNA阳性率89.58%,HBeAg阴性血清的Pre S1-Ag阳性率41.67%、HBV-DNA阳性率48.33%。不同HBV-DNA载量的Pre S1-Ag阳性率均比HBeAg的高(P<0.05)。结论在乙肝病毒复制标志物中,乙肝病毒前S1抗原的敏感性高,其阳性率随HBV-DNA载量增加,帮助HBV感染的诊治及病判断,值得推广应用。

肥大细胞及细胞表面分化抗原117在绝经后子宫内膜息肉中的作用

目的探讨肥大细胞(MCs)及细胞表面分化抗原117(CD117)在绝经后子宫内膜息肉(EP)发病中的作用。方法收集EP40例(观察组)和正常萎缩性子宫内膜40例(对照组)标本,用免疫组织化学染色法检测各组标本中肥大细胞类胰蛋白酶β2(TPSB2)、类糜蛋白酶-1(Chy-1)及CD117染色阳性的MCs数量并分析其临床意义。结果绝经后观察组TPSB2、Chy-1和CD117阳性的MCs数量明显高于对照组(P<0.05)。相关性分析显示,2组中CD117阳性的MCs数量分别与TPSB2和Chy-1阳性的MCs数量呈显著正相关(均P<0.05)。结论 MCs的过度活性及伴随的炎症性损害可能是绝经后EP形成及发展的原因,CD117及其配体干细胞因子促进了MCs的增殖与分化,具体机制需更进一步的探讨。

EP-1对雄性东方田鼠生殖的影响

为探索复方不育剂左炔诺孕酮-炔雌醚(EP-1)对雄性东方田鼠Microtus fortis的不育效果、适宜药剂浓度和生殖系统的恢复期等,采用一次性多个浓度组灌胃和多个时间段剖检的方法测定EP-1对雄性东方田鼠生殖的影响和药效持续时间。结果显示,不育剂EP-1对雄性东方田鼠具有明显的不育作用,但不育作用具有可逆性。试验组试鼠的睾丸系数、附睾系数降低,睾丸萎缩受损,精子密度与睾酮含量较对照组降低,且繁殖率下降。10、30、60 mg/kg处理组的雄性东方田鼠生殖系统恢复时间分别为40、55、60天左右,生殖恢复顺序为睾丸、附睾、精子密度。

复合不育剂EP-1对雄性长爪沙鼠的抗生育作用

在室内条件下采用食毒法研究了浓度为1/20 000的复合不育剂EP-1饵料对雄性长爪沙鼠性激素、生殖器官及繁殖行为的作用。结果显示:给药1周后,血清内促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和雌二醇(E2)水平与对照组相比差异不显著,但睾酮(T)浓度显著下降;试鼠精囊腺重量显著降低;睾丸和附睾重量虽略有降低,但差异均不显著;给药组精子平均畸形率为(55.00±2.79)%,显著高于对照组的(32.00±2.36)%;给药组睾丸曲精小管平均异常率为(22.99±5.00)%,显著高于对照组的(4.21±1.18)%;试鼠配对后主要表现为相互嗅闻,给药组雄鼠主动嗅闻雌鼠频次显著低于对照组,打斗和攻击频次也降低;实验室条件下,40天内对照组繁殖率为55.6%,而给药组均未繁殖。说明EP-1对雄性长爪沙鼠具有明显的抗生育作用。

高原鼠兔对炔雌醚、左炔诺孕酮和EP-1不育药饵适口性

采用单只饲养方法,选择燕麦(Arena nuda)、颗粒饲料和胡萝卜(Daucus carota)为基饵,分别测定了高原鼠兔(Ochotona curzoniae)对10mg/kg浓度的炔雌醚、左炔诺孕酮和EP-1药饵的适口性。结果表明,高原鼠兔对燕麦和颗粒基饵具有较高的取食偏好性;3种不育成分均未显著改变雄鼠对药饵的适口性;炔雌醚显著降低了雌性高原鼠兔对燕麦药饵的取食量(P=0.0128);但左炔诺孕酮和EP-1均未显著降低高原鼠兔对燕麦、颗粒饵料和胡萝卜药饵的取食量。总之,高原鼠兔对含有10mg/kg浓度3种不育成分的燕麦、颗粒饵料和胡萝卜药饵具有很好的适口性,具有潜在应用前景。