前列腺素E2活化EP2受体促进肝癌细胞增殖

目的研究前列腺素E2（PGE2）对肝癌细胞增殖活性的影响,并探讨其作用主要通过何种前列腺素EP受体介导。方法采用RT-PCR检测肝细胞癌Hep3B细胞COX-2和EP1~EP4受体mRNA的表达水平,cell counting kit-8（CCK-8）细胞计数法检测PGE2和EP2受体激动药butaprost及EP3/EP4受体激动药PGE1 alcohol对细胞增殖的影响。结果人肝癌细胞Hep3B高表达COX-2 mRNA,正常肝细胞QSG7701 COX-2 mRNA表达水平远远弱于前者。四种亚型的PGE2受体EP1~EP4的mRNA在人肝细胞癌细胞株Hep3B均有表达,EP2和EP4受体表达水平明显高于EP1和EP3受体。PGE2呈时间和浓度依赖性地促进Hep3B细胞增殖。孵育细胞48h后,10μmol/L的PGE2表现出明显的促细胞增殖的作用,与未加PGE2的阴性对照组相比,细胞的增殖活性上升22.57%（P〈0.001）。0.1、1和10μmol/L的PGE2作用Hep3B细胞72 h后,细胞增殖活性分别较对照组上升12.13%（P〈0.01）、17.58%（P〈0.01）和33.07%（P〈0.001）。20μmol/L的butaprost孵育细胞72 h使细胞增殖活性提高了21.96%（P〈0.001）,而EP3/EP4受体激动剂PGE1alcohol在浓度为2~20μmol/L的范围内对Hep3B细胞增殖活性无显著影响,当浓度达到200μmol/L时则对细胞的增殖产生抑制作用。结论 Hep3B细胞上的EP2受体被选择性激动后可刺激细胞增殖,提示EP2受体介导了PGE2对Hep3B细胞的促增殖作用。

Toll样受体、前列腺素受体EP2在溃疡性结肠炎组织的表达与炎症细胞因子的关系

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)组织中Toll样受体、前列腺素受体EP2的表达变化及与组织中炎性细胞因子表达的关系。方法选取我院2016年1月至2017年1月收治的100例UC组织(UC组)、50例正常结肠黏膜组织(对照组),采用免疫组化染色检测两组标本中的Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、前列腺素受体EP2蛋白的表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组标本中的白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10),并分析TLR2、TLR4、前列腺素受体EP2与IL-17、IL-10的关系。结果 UC组中TLR2、TLR4、前列腺素受体EP2蛋白阳性表达率59. 00%、61. 00%、69. 00%均高于对照组的26. 00%、18. 00%、26. 00%,差异有统计学意义(P<0. 05);活动期、Ⅲ级UC组中TLR2、TLR4、前列腺素受体EP2蛋白阳性表达均显著的高于非活动期、Ⅰ级+Ⅱ级的UC患者,差异有统计学意义(P <0. 05); TLR2、TLR4、前列腺素受体EP2蛋白阳性的UC组织中的IL-17水平高于阴性表达的患者,IL-10表达水平则低于阴性表达的UC组织,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 Toll样受体、前列腺素受体EP2在UC组织表达上调,并且与UC病情进展及炎症反应程度加重有关。

EP2受体介导大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织损伤机制研究

为了探索EP2受体是否参与调节大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织损伤,试验以体外培养的奶牛子宫内膜组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR、免疫荧光和H.E.染色等方法对EP2受体激动剂处理的大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中损伤因子HMGB-1和HABP1的表达以及子宫内膜组织损伤情况进行了研究。结果表明:与空白对照组相比,用大肠杆菌处理后可极显著上调奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和HABP1 mRNA及蛋白的表达,而用大肠杆菌和EP2受体激动剂共同处理组织后HMGB-1和HABP1 mRNA及蛋白的表达进一步升高。用大肠杆菌处理的子宫内膜组织上皮细胞部分脱落,腺细胞崩解、坏死,腺体轮廓不清晰;而用大肠杆菌和EP2受体激动剂共同处理时,子宫内膜组织损伤情况进一步加强,上皮细胞完全脱落,腺体崩解融合更加严重。说明EP2受体能够介导大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织损伤。

一种轻型脑损伤后大鼠海马EP2的表达变化

目的研究单纯性脑震荡(pure cerebral concussion,PCC)大鼠脑内海马EP2受体的阳性表达及其变化,探讨EP2在脑损伤病理变化中的角色.方法应用金属单摆脑损伤打击装置制作大鼠PCC模型,多克隆EP2抗体(兔)进行免疫组织化学染色,观察正常对照组(n=5)及PCC后3 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d组(n=5)大鼠海马CA1~4区和上、下齿状回EP2阳性表达的平均光密度值及阳性细胞计数情况.结果正常生理状态下EP2表达较少,PCC后3 h免疫阳性开始增强,其表达小高峰出现在3 d组(P<0.05),随后7 d组下调.结论 PCC损伤早期EP2受体与PCC致伤后发生的病理变化有密切相关性.

基于EP2C35F672C8的数控分频器设计

针对数字电路中最常用的数控分频器,提出了基于EP2C35F672C8的数控分频器设计。EP2C35F672C8是Altera公司生产的Cyclone II系列中的高性能FPGA芯片。利用EDA技术的仿真软件QuartusII 9.0的原理图和VHDL文件2种方法设计了数控分频器,最后通过EP2C35F672C8实现。实验结果表明,对时钟信号的分频操作简单、快捷,具有成本低、可编程、可移植等优点。广泛应用于各类便携式数字电子系统中。

基于EP2C8Q208C8型FPGA等精度频率测量仪设计

设计一种以Altera公司生产的CycloneII系列EP2C8Q208C8器件为核心实现高精度计数功能频率测量仪,本频率测量仪对传统的等精度测量方法进行改进,采用SOPC设计技术对NIOS II软核处理器进行浮点数据运算处理。整个电路采用模块化设计,系统测量精度高,频率测量范围为1Hz--10MHz,并利用液晶显示器对测量的频率进行实时显示,可读性好。

EP2在海马齿状回突触传递中的作用

目的探讨EP2在小鼠海马齿状回突触传递中的作用及其机制。方法细胞外记录技术记录海马脑片穿通纤维-齿状回颗粒细胞突触的场兴奋性突触后电位（fEPSP）。结果①EP2的激动剂Butaprost增强海马齿状回突触传递和降低双脉冲比（paired-pulse ratio,PPR）,此效应被EP2的拮抗剂AH6809所阻断。②Forskolin单独或Forskolin＋AH6809均可增强fEPSP的斜率。③EP2增强突触效能的效应由PKA,ERK和IP3途径介导。结论多信号转导途径可能参与EP2激活诱导的突触传递增强。

EP2受体介导的前列腺素E_2影响胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1表达和侵袭的研究

目的 :探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP2受体影响人胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达及癌细胞的侵袭能力。方法:用PGE2、EP1～4四种受体激动剂(17-phenyltrinorProstaglandin E2、Butaprost、Sulprostone和Prostaglandin E1 Alcohol)、EP2受体抑制剂AH6809、腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理HuCCT1细胞,通过Western blot、划痕试验等方法检测ICAM-1的蛋白表达水平以及HuCCT1细胞侵袭能力的变化。结果:PGE2明显提高HuCCT1细胞ICAM-1蛋白的表达水平,5μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白表达水平与对照组相比上升了66.17%(P<0.05),并呈浓度依赖性和时间依赖性;5μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了43.29%(P<0.01)。10μmol/L EP1～4受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂上升了257.88%(P<0.05),10μmol/L EP2受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了56.99%(P<0.01);10μmol/LEP2受体抑制剂AH6809处理后ICAM-1蛋白的表达水平与PGE2组相比下降了49.14%(P<0.05),细胞侵袭能力下降了52.06%(P<0.01)。25μmol/L AC抑制剂SQ22536、10μmol/L PKA抑制剂H89处理HuCCT1细胞后,ICAM-1蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了72.87%(P<0.05)和80.78%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调HuCCT1细胞ICAM-1的表达,从而促进HuCCT1细胞的侵袭转移。

基于CycloneⅡEP2C20的8051IP核的应用研究

以CycloneⅡ系列芯片EP2C20F484N7为平台,介绍了基于8051IP核的SOC小型系统的构建过程以及对IP核各模块的应用测试。通过应用测试,8051IP核能够方便的移植到其它系统模块中,可见IP核的复用技术在嵌入式系统以及SOC的设计中有着重要的作用。

PGE2通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号通路上调SnoN的表达而促进CCLP1细胞的增殖

目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对人胆管上皮癌细胞CCLP1增殖能力影响的作用机制。方法:用PGE2、EP1～4 4种受体激动剂、AC激动剂Forskolin、PKA抑制剂H89、cAMP拟似物db-cAMP处理CCLP1细胞,通过RT-PCR、Western blot、WST等实验检测SnoN mRNA、SnoN蛋白等表达水平、CREB蛋白磷酸化水平以及CCLP1细胞增殖能力的变化。结果:10μmol/L PGE2处理CCLP1细胞24 h后,SnoN mRNA的表达水平与对照组相比上升了22.5%(P<0.01),SnoN蛋白的表达水平上升了35.6%(P<0.05);10μmol/L EP受体激动剂处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中以EP2受体激动剂的作用最明显,上升了64.9%(P<0.05),细胞增殖能力上升了26.5%;10μmol/L AC激动剂Forskolin处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平及CREB蛋白的磷酸化水平较对照组分别上升了25.1%、71.3%(P<0.05),细胞增殖能力也上升了4.4%(P<0.05);用500μmol/L cAMP拟似物dbcAMP处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平较对照组上升了90.1%(P<0.05);而PKA抑制剂H89阻断Forskolin的作用后,SnoN蛋白的表达水平和CREB蛋白的磷酸化水平较Forskolin处理组分别下降了9.1%、14.1%,20μmol/L H89处理CCLP1细胞后,细胞增殖能力较对照组下降了45.7%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号转导通路上调CCLP1细胞SnoN的表达,从而促进CCLP1细胞的增殖。

基于EP2/NLRP3信号通路探讨雀啄灸对原发性痛经大鼠的影响

目的探讨雀啄灸对原发性痛经大鼠前列腺素E受体2(EP2)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)的调控作用及相关抗炎机制。方法24只雌性SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、雀啄灸组、激动剂组,每组6只。除空白组外其余三组建立原发性痛经模型;空白组每日注射同等剂量生理盐水。空白组及模型组不予治疗;雀啄灸组每日造模后,选取三阴交和关元穴进行治疗;激动剂组每日造模后腹腔注射Treprostinil,之后进行雀啄灸治疗,治疗方法同雀啄灸组。观察各组扭体潜伏时间、扭体次数;HE染色观察子宫病理情况;免疫组织化学法检测EP2、NLRP3、caspase-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠潜伏时间缩短、扭体次数增多(P<0.01);与模型组比较,雀啄灸组潜伏时间延长、扭体次数减少(P<0.01);与雀啄灸组比较,激动剂组潜伏期缩短、扭体次数增多(P<0.01)。空白组子宫组织形态规则,肌细胞间质内少许淋巴细胞,无中性粒细胞浸润;模型组、激动剂组子宫小血管有扩张及充血表现,淋巴细胞与嗜酸性粒细胞等炎症细胞呈灶团样向外浸润明显;雀啄灸组间质内充血水肿及炎症细胞浸润程度较模型组减轻,肌壁间可见少许炎症细胞浸润,仅见少许小血管充血。与空白组比较,模型组EP2、NLRP3、caspase-1蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,雀啄灸组EP2、NLRP3、caspase-1蛋白表达降低(P<0.01);与雀啄灸组比较,激动剂组NLRP3、caspase-1蛋白表达升高(P<0.01),雀啄灸组与激动剂组EP2蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论雀啄灸可以改善子宫炎症细胞浸润的情况,通过调控EP2/NLRP3信号通路调节痛经大鼠炎症反应。

EP2受体在猕猴肾组织中的表达分布研究

目的研究前列腺素E2受体EP2在正常猕猴肾组织的表达和分布情况,讨论EP2的分布特点与肾功能之间的相关性。方法将制备好的猕猴肾脏石蜡切片进行HE染色,在光镜下进行肾脏组织结构的辨别。采用免疫组织化学SP法观察EP2在肾脏中的免疫阳性表达,用HP IAS1000高清图像分析系统对HE染色和免疫组化实验结果进行观察和图像采集。结果 EP2的免疫阳性表达产物为棕色,它在肾脏各个区域的表达分布情况不同。免疫组织化学结果表明,EP2在肾脏皮质迷路的远曲小管和皮、髓质交界处的弓形动脉壁平滑肌呈强阳性表达(+++),在髓质的远直小管呈弱阳性表达(+),此外,在肾脏组织其它区域中未见EP2阳性表达。结论 EP2在猕猴肾远曲小管、弓形动脉壁平滑肌和远直小管中有表达,提示EP2这种分布特征与肾功能相关。

基于AMESim的柱塞泵EP2D控制特性研究

该文简述了A11V变量泵带压力切断的电子控制(EP2D)的工作原理,通过对EP2D变量机构进行分析,建立了柱塞泵EP2D控制的数学模型,得出了调压弹簧刚度、大变量缸截面积、反馈弹簧刚度和流量系数是影响控制稳定性的主要因素,并通过AMESim软件建立了相应的仿真模型进行论证;最后,通过试验论证相关设计参数的正确性。

基于EP2C35的DSP阵列板通信接口设计与实现

基于EP2C35的FPGA能力,实现DSP的Cluster Bus和PCI9054本地端总线的接口转换,如地址映射、中断DSP阵列板,使DSP阵列板具备PCI总线通信能力,同时把DSP的Link口与100M网口之间的转换,如Link口接口模块、FIFO等,使DSP阵列板具备网络通信接口能力,提高DSP阵列板的通信扩展接口能力,增加其应用能力和范围。同时指出,基于FPGA,根据需要,可以进一步扩展更多和更高性能的接口。

利用EP2C15AF256C6实现智能家居系统的设计

Cyclone Ⅱ系列的FPGA以高性能和低功耗在自动化、通信等方面得到了广泛的应用。本文以EP2C15AF256C6为核心处理器设计智能家居防盗报警系统,详细分析了处理器及外围硬件电路的设计原理,以实现家居全方位防盗报警系统的构建。该设计对于Cyclone Ⅱ系列的FPGA嵌入式处理器的开发与设计具有借鉴意义。

基于EP2C8的FPGA教学实验板设计与实现

该文研究的重点是设计一块以Altera公司cycloneⅡ系列芯片EP2C8Q208C8为核心的FPGA教学实验板。实验开发板采用模块化的设计思路,分为核心板和扩展板。该文在介绍了核心板设计的基础上,详细描述了扩展板的原理图及外围芯片的设计与实现,并对实验板进行功能测试与验证,验证结果表明此实验板稳定可靠,易于操作,能够满足高校教学和简单开发设计的需要。用户在此平台上可进行基础性、扩展性实验和简单工程实践,便于学习应用FPGA和SOPC技术。

Altera发售高密度FPGA成品Stratix Ⅱ EP2S90

Altera日前宣布开始发售器件密度极高、速度极快的FPGA成品Stratix Ⅱ EP2S90。

前列腺素受体EP2在溃疡性结肠炎黏膜中的表达及临床意义

目的通过检测溃疡性结肠炎(UC)结肠黏膜前列腺素EP2受体的表达,探讨EP2受体与UC黏膜炎症的关系。方法选取27例活动期UC、11例缓解期UC及23例正常对照者为研究对象。首先对UC患者按Souther-land疾病活动指数(UCAI)进行疾病分期及病理学分级,再进行免疫组化检测每例结肠上皮EP2的表达。结果免疫组化表明,活动期UC患者结肠上皮和炎症细胞中EP2的表达均高于UC缓解期及正常结肠黏膜(P<0.01),活动期UC患者EP2的表达与病理分级呈正相关。结论 EP2蛋白在活动期UC患者中的表达显著上调,且与炎症程度相关,EP2有可能作为UC治疗的新靶标。

浒苔多糖EP2对小鼠免疫功能的影响

目的研究浒苔多糖EP2对小鼠免疫功能的影响。方法将Babl/c小鼠随机分成6组,1~3组为正常小鼠,4~6组为CTX诱导的免疫抑制小鼠,各组每日分别以0、50、125、0、50、125mg/kg的剂量灌服EP2,持续14d。按常规方法测定小鼠血常规指标、器官指数和巨噬细胞吞噬功能,采用耳肿法测定迟发型变态反应(DTH),采用MTT法测定脾脏淋巴细胞增殖活性,采用流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,采用酶联免疫吸附试验检测细胞因子和BSA抗体。结果给予EP2的免疫抑制小鼠脾脏和胸腺指数、血液WBC、PMBC、LY、RC、CD8^+细胞含量、淋巴细胞增殖活性、血清IL-2、IL-4、IFN-γ和BSA抗体水平显著升高;巨噬细胞吞噬功能、DTH显著增强;CD4^+/CD8^+比例显著下降。给予高剂量EP2的正常小鼠脾脏和胸腺指数、WBC、PMBC、RC含量、淋巴细胞增殖活性、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+比例、血清IL-2及BSA抗体水平显著升高;巨噬细胞吞噬功能显著提高;DTH、血清IL-4和IFN-γ水平呈升高趋势。结论 EP2能显著增强正常小鼠和免疫抑制小鼠的免疫功能,且呈现明显量效关系。

EP2受体对大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中IL-1β和IL-6 mRNA表达的影响

为了研究前列腺素E2(PGE2)受体-EP2受体对大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中炎性因子的影响,本试验分别用1×10-8~1×10-5 mol/L的EP2受体激动剂(Butaprost)处理大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织,培养12 h,并选取Butaprost的有效作用浓度处理大肠杆菌感染的子宫内膜组织8,12和24 h,用RT-qPCR法检测IL-1β和IL-6 mRNA的表达,同时用HE染色技术观察组织形态结构。最后,在大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中加入1×10-5 mol/L的EP2受体阻断剂(AH6809),以验证EP2受体对IL-1β和IL-6 mRNA表达的特异性作用。结果显示:当10-7mol/L的Butaprost处理大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织12 h时,对IL-1β和IL-6基因表达的促进作用最为明显,并且能够加剧大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织的病理性损伤;AH6809能够有效阻断Butaprost对IL-1β和IL-6基因表达的促进作用。结果表明,EP2在调控大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织的炎性损伤中发挥重要的作用,为更加高效地治疗细菌性奶牛子宫内膜炎提供理论依据。