EP4受体激动剂可通过激活Wnt/β-catenin信号途径促进人CD34^+细胞体外增殖

目的:探讨前列腺素E2特异性受体激动剂4(EP4A)促进人CD34^+细胞体外增殖的可能信号途径。方法:收集中山一院血液科20例健康供者经G-CSF动员后的外周血造血干细胞采集物。应用免疫磁珠法分选出人CD34^+细胞,应用CCK8法明确EP4A促进人CD34^+细胞体外增殖的最佳条件(最佳浓度和最佳作用时间);在此条件下EP4A作用于人CD34^+细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测β-catenin mRNA水平的变化、Western blot检测β-catenin和P-GSK-3β蛋白表达情况。结果:EP4A 10μmol/L、在培养72 h能明显促进人CD34^+细胞体外增殖,增殖率为对照组的1.36倍(P=0.002)。最佳条件EP4A作用于人CD34^+细胞后,β-catenin mRNA及其蛋白的表达增高,GSK-3β蛋白的磷酸化增加,而这些作用均可被相应的抑制剂(EP4AA)所拮抗。结论:EP4A可通过激活Wnt/β-catenin信号途径促进人CD34^+细胞体外增殖。

EP4A对人CD34^+细胞干性因子表达的影响

目的:探讨前列腺素E2特异性受体激动剂4(EP4A)增强人CD34^+细胞干性因子表达的机制。方法:收集中山大学附属第一医院血液科20例健康供者经G-CSF动员后的外周血造血干细胞采集物,采用免疫磁珠法分选出人CD34^+细胞。以DMSO作对照,分别用EP4A、EP4A+EP4A拮抗剂(EP4AA)作用人CD34^+细胞72 h后,应用热图和Pathway富集分析检测与CD34^+细胞干性相关的差异基因和通路;再用qRT-PCR和Western blot检测不同组别细胞中通路蛋白和差异基因的mRNA及蛋白(β-catenin、Nanog、Oct4、Sox2、Stat3、AKT、P38)表达水平。结果:与对照组相比,EP4A组人CD34^+细胞中β-catenin、Nanog、Oct4及Sox2 mRNA及其蛋白的表达均增高,而STAT3、AKT、P38 mRNA及其蛋白的表达无变化;EP4A与EP4AA(XAV939)共同作用人CD34^+细胞时,人CD34^+细胞β-catenin表达水平明显降低,并且Nanog、Oct4及Sox2基因及蛋白表达相应减少。结论:EP4A可增加人CD34^+细胞干性因子(β-catenin、Nanog、Oct4和Sox2)表达,而不能增加STAT3、AKT、P38表达。

前列腺素受体4与肾脏疾病相关性研究进展

前列腺素受体4(prostaglandin receptor 4,EP4)是内源性脂质介质前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的作用受体,属G-蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCR)的一种。EP4在体内分布广泛,几乎在所有组织、脏器表达。在肾脏,肾小球旁颗粒细胞、肾小球上皮细胞、远曲小管和皮质集合管上皮细胞均有EP4的高度表达。因EP4可同时与Gs、Gi蛋白途径偶联,与血管张力、氧化应激、炎症、细胞增殖等生理功能和病理生理过程密切相关。目前通过对全身性及肾组织特异性EP4敲除小鼠模型的研究和选择性EP4激动剂/拮抗剂的作用研究,证明EP4在肾脏发挥重要作用,其PGE2-EP4信号通路同时能产生保护和不良的影响。该文将EP4与肾脏疾病,包括肾性高血压、肾缺血/再灌注损伤、肾源性尿崩症、肾小球肾炎、肾小球硬化、慢性肾脏病及常染色体显性遗传性多囊肾病发生发展的相关性进行分析和总结。