基于ERK5信号通路探讨薯蓣健脾益智合剂对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:探讨薯蓣健脾益智合剂对血管性痴呆(VaD)大鼠海马神经元凋亡的影响以及相关作用机制。方法:采用改良双侧颈总动脉结扎(2-VO)法建立VaD大鼠模型,将120只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和治疗组,每组30只。治疗组予以10 mL/(kg·d)薯蓣健脾益智合剂灌胃,正常组、假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃,持续8周。观察大鼠一般状态,并于造模后第7天及造模后治疗4、8周分别进行行为学检测,苏木精-伊红(HE)染色观察海马神经元组织学改变,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色观察海马神经元凋亡情况,免疫组织化学法检测丝分裂原活化蛋白激酶K2(MEKK2)、丝分裂原活化蛋白激酶K3(MEKK3)和丝裂原激活蛋白激酶5(MEK5)、细胞外信号调节激酶5(ERK5)表达的变化,蛋白免疫印迹法检测MEKK2、MEKK3和MEK5、ERK5的蛋白表达。结果:与正常组及假手术组比较,模型组行为学表现差异显著,变性神经元增加,神经元凋亡率增加(P<0.01),MEKK2、MEKK3和MEK5、ERK5的表达减少;与模型组比较,治疗组行为学表现改善,变性神经元减少,神经元凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),MEKK2、MEKK3和MEK5、ERK5表达增加。结论:薯蓣健脾益智合剂可能通过上调ERK5信号通路,抑制海马神经元凋亡,促进海马神经元的修复进而治疗VaD。

基于ERK5通路探讨蟾酥抑制人骨肉瘤MG-63细胞的作用机制

目的:研究蟾酥对人骨肉瘤细胞MG-63的作用效应及作用机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞MG-63,采用不同浓度的蟾酥含药血清(0%、2.5%、5%)进行干预,采用qPCR法检测各组c-myc、caspase-9的mRNA表达量,采用免疫荧光法检测各组整合素α4的含量并采用Western Blot法检测MEK5、Nur77的表达情况。分别采用ERK5抑制剂XMD8-92、XMD8-92联合5%蟾酥含药血清、MEK5过表达腺病毒干预人骨肉瘤细胞MG-63,采用Western Blot法检测c-myc、caspase-9及整合素α4的表达量。结果:相较于空白对照组(%),2.5%、5%蟾酥含药血清干预后的c-myc及整合素α4表达下降,caspase-9表达上升(P<0.05),且蟾酥含药血清干预后MEK5、Nur77表达下降(P<0.05),与干预浓度呈负相关;相较于5%蟾酥含药血清干预组,XMD8-92联合5%蟾酥含药血清组c-myc及整合素α4表达下降、caspase-9表达上升(P<0.05),而过表达MEK5联合5%蟾酥含药血清组的表达情况相反(P<0.05)。结论:蟾酥可以通过调控ERK5通路抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖、转移并促进细胞凋亡。

氟暴露下SH-SY5Y细胞ERK5信号转导通路的改变

目的检测ERK5信号通路中磷酸化的细胞外信号调节激酶5(P-ERK5)及P-ERK5在氟暴露下SH-SY5Y细胞中的表达,探讨ERK5信号通路与氟暴露下SH-SY5Y神经损伤机制的关系。方法用不同剂量氟化钠(NaF,0.000、0.100、0.200、0.300、0.400、0.500、1.000、2.000、3.000、4.000及5.000 mmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h及48 h,采用CCK8实验筛选出低和高剂量氟中毒浓度;再以正常组SH-SY5Y细胞为参照,用低、高剂量氟化钠剂量分别处理SH-SY5Y细胞24 h和48 h,采用实时荧光定量PCR检测处理48 h时各组细胞的ERK5 mRNA水平,用Western blot检测P-ERK5、ERK5蛋白表达水平。结果染氟处理后,0.500、1.000 mmol/L NaF处理SH-SY5Y细胞24 h及48 h细胞的存活率均低于正常对照组(P<0.05),可作为低剂量组和高剂量组的染氟剂量;染氟48 h时,对照组、低剂量组和高剂量组SH-SY5Y细胞中ERK5的mRNA表达水平分别为1.00±0.00、0.85±0.08、0.94±0.21,组间比较均无统计学意义。染氟24 h时,P-ERK5蛋白高氟组较低氟组和正常组表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),而染氟48 h时,染氟组P-ERK5蛋白表达升高,各组间比较均有统计学意义(P<0.05),染氟24 h和48 h正常组、低氟组、高氟组P-ERK5蛋白表达水平分别为(0.20±0.05、0.28±0.04、0.50±0.18)、(0.28±0.01、0.46±0.02、0.61±0.08);染氟24 h后,总ERK5蛋白升高,高氟组较低氟组、正常组有意义(F=14.731,P<0.05),而染氟48 h后,染氟组较正常组升高有统计学意义(F=17.877,P<0.05),染氟24 h和48 h总ERK蛋白表达水平分别为(0.34±0.04、0.36±0.05、0.67±0.12),(0.55±0.02、0.72±0.03、0.78±0.08)。结论ERK5信号通路中P-ERK5蛋白及ERK5蛋白在慢性氟中毒时被激活,随着染氟时间与染氟剂量增加其表达水平出现逐渐升高,其可能参与代偿性神经保护机制对抗氟的神经毒性作用。

炎症微环境作用下BMP9通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞成骨分化

目的:探讨骨形态蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)在炎症环境中是否通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化。方法:利用重组腺病毒技术,在TNF-α刺激的PDLSCs中过表达BMP9,通过RT-PCR和Western印迹法检测成骨相关基因及蛋白的表达变化。随后,通过转染技术使KLF4在PDLSCs中过表达,在炎症条件下观察其对成骨分化及相关基因表达的效应。在KLF4敲低的背景下过表达BMP9,观察其对成骨分化的影响。添加ERK5抑制剂BIX02189,揭示ERK5在BMP9诱导的成骨分化中的关键作用。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:BMP9在炎症环境下显著促进PDLSCs成骨分化,并增强KLF4表达。KLF4过表达进一步加强了PDLSCs成骨分化。然而,当KLF4被敲低时,BMP9对PDLSCs成骨促进效应受到明显抑制。BMP9处理显著增加ERK5磷酸化水平,但在ERK5被抑制后,BMP9对成骨分化的促进效应大幅减弱。结论:BMP9可在炎症环境中通过ERK5/KLF4信号通路显著促进PDLSCs成骨分化。

The Antidepressant Mechanism of JiaWeiWenDan Decoction Regulating p38MAPK-ERK5 Signal Transduction Pathway

Objective: To investigate the anti-depression mechanism of JiaWeiWenDan Decoction in regulating p38MAPK-ERK5 signal transduction pathway. Methods: Depression model rats were randomly divided into Blank Control Group, Model Control Group, Chinese Medicine Treatment Group, and Western Medicine Treatment Group (hereinafter referred to as Blank Group, Model Group, Chinese Medicine Group, and Western Medicine Group), with 48 rats in each group. The mice were treated with p38MAPK-ERK5 on the 7th day, 14th day and 21st day, respectively, and the mice were treated for 28 days. The key targets and cytokines in p38MAPK-ERK5 signal transduction pathway were detected. Results: Compared with the Blank Group, the expression of p38MAPKmRNA in the hippocampus of the Model Group was increased. The Chinese Medicine Group and Western Medicine Group could reduce the expression of p38MAPK mRNA (P P P P Conclusion: The anti-inflammatory effect of JiaWeiWenDan Decoction may be related to the regulation of p38MAPK-ERK5 signaling pathway. With the advance of the treatment week, the best effect was obtained when the treatment was started on the 7th day of modeling.

ERK5调节成骨细胞功能的研究

目的研究ERK5在成骨细胞的表达及IL-6对其表达的调控,初步探讨ERK5在成骨细胞增殖分化中的作用。方法应用免疫印迹法检测人、大鼠、小鼠成骨细胞和MG-63细胞ERK5的表达;用IL-6作用于MG-63细胞,检测不同时间和剂量干预后ERK5和P-ERK5表达情况,构建ERK5 siRNA和空白对照质粒,转染MG-63细胞,IL-6干预细胞后检测各组细胞增殖率、碱性磷酸酶活性和骨钙素表达的差异。结果在人、大鼠、小鼠成骨细胞和MG-63细胞中均有ERK5的表达;IL-6可呈时间、剂量依赖性的提高ERK5的磷酸化;与对照组相比,ERK5 siRNA的成骨细胞IL-6刺激后增殖降低,骨钙素表达量下降且差异有统计学意义,而碱性磷酸酶活性的变化差异无显著性。结论成骨细胞ERK5信号通路的活性受IL-6调控,ERK5信号通路参与了成骨细胞的增殖分化。

miRNA-199a-5p通过SP1调节ERK5抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的机制

目的探讨miR-199a-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭影响及其作用机制。方法转染miR-199a-5p mimic至MDA-MB-231细胞,Transwell侵袭实验检测miR-199a-5p对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。采用细胞免疫荧光、Western blot法检测上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)分子标志物E-cadherin、vimentin的表达。应用Western blot法检测miR-199a-5p mimic及其LNA-siRNA对ERK5、p ERK5、EGF、SP1表达的影响。染色体免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,CHIP)技术检测SP1是否与ERK5启动子区结合。结果 miR-199a-5p能抑制MDA-MB-231细胞的侵袭,降低vimentin的表达,增强E-cadherin的表达。同时,miR-199a-5p降低ERK5表达并抑制其磷酸化;EGF、SP1的表达也相应减少。相反,应用LNA-siRNA抑制miR-199a-5p后,ERK5、p ERK5、EGF、SP1的表达上调。CHIP结果显示SP1能与ERK5启动子区结合。结论 miR-199a-5p通过调节EGF、SP1下调ERK5的表达并抑制其磷酸化,进而发挥对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的抑制作用。

ERK5在急性心肌梗死患者中的磷酸化水平及对体外血小板激活的影响

目的观察急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血小板中细胞外信号调节激酶5(extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5)的活化水平及其特异性抑制剂XMD8-92对血小板功能的影响,探索ERK5调节血小板活性的分子机制。方法运用Western bolt法检测AMI患者(n=34)和稳定性心绞痛患者(n=33)血小板ERK5、Akt473及Akt308的磷酸化水平;通过检测体外血小板的聚集,测定不同浓度XMD8-92对胶原(collagen)刺激引起的血小板聚集的影响;利用荧光素酶同期检测XMD8-92对血小板致密颗粒分泌的影响;通过检测血小板在纤维蛋白原上的铺展、在血浆中的收缩,评价血小板整合素ɑIIbβ3的活化水平;运用Western bolt法检测聚集反应中XMD8-92对Akt473、Akt308及PTEN370磷酸化的影响。结果 AMI患者组ERK5及Akt473、Akt308磷酸化水平显著升高(P<0.05);ERK5抑制剂XMD8-92可抑制胶原诱导的血小板聚集、分泌、栓块收缩及在纤维蛋白原上的铺展等活化指标;XMD8-92处理后血小板Akt473、Akt308及PTEN370磷酸化水平减低。结论 ERK5的激活参与了AMI过程中血小板的活化;ERK5可通过调节PTEN的活性,从而调节Akt的磷酸化水平,进而调控血小板的功能。其特异性抑制剂有望成为新的抗栓药物。

冠心康含药血清通过活化ERK5对ox-LDL负载的巨噬细胞胞葬作用的影响

目的:探讨冠心康通过活化ERK5抗动脉粥样硬化的潜在分子机制.方法:用ERK5抑制剂(ERK5-IN-1和XMD8-92)干预RAW264.7细胞,探讨ERK5失活对巨噬细胞胞葬作用的影响.用ox-LDL干预RAW264.7细胞建立巨噬细胞胞葬作用功能受损的细胞模型,然后在存在或不存在XMD8-92干预的情况下,用冠心康含药血清处理该细胞模型.流式细胞仪检测巨噬细胞的胞葬率,RT-qPCR和Western blot法检测巨噬细胞ERK5和C1qA的mRNA和蛋白的表达.结果:ERK5抑制剂XMD8-92和ERK5-IN-1均可抑制RAW264.7细胞的胞葬作用,抑制ERK5的活化和C1q A mRNA和蛋白的表达.冠心康含药血清可增强ox-LDL导致的受损的巨噬细胞胞葬作用,这一作用与冠心康活化ERK5和上调C1q A mRNA和蛋白的表达有关.结论:ERK5激酶的失活可通过下调C1qA的表达损伤巨噬细胞胞葬作用;冠心康可通过活化ERK5上调C1qA的表达,促进ox-LDL负载的巨噬细胞胞葬作用.

脑缺血及缺血再灌注诱导大鼠海马脑区ERK5的激活及其分子机制的研究

目的 研究脑缺血及缺血再灌注大鼠海马脑区细胞外信号调节激酶 5 (ERK5 )的磷酸化 (激活 )规律以及还原剂N -乙酰半胱氨酸 (NAC)对其激活的影响。方法 采用S -D大鼠四动脉结扎模型 ,用免疫印迹法分析不同条件ERK5的蛋白表达量和激活。给药组大鼠在缺血前 2 0min腹腔给药。结果 S -D大鼠缺血时 ,海马脑区ERK5被快速激活 ,3min达最高峰 ;缺血 15min后再灌注 10min至 2 4h ,ERK5被持续激活 ,30min时达到最高激活峰。ERK5的蛋白表达量在以上不同处理条件下没有明显变化。NAC显著抑制了缺血及缺血再灌注后ERK5的激活。结论 脑缺血及缺血再灌注诱导了ERK5的激活 ,这种激活与自由基的产生密切相关。

ERK5信号通路介导流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响

目的:观察流体剪切力对MC3T3-E1成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响,并探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法:应用不同浓度的ERK5特异性阻断剂BIX02188干预成骨细胞,MTT比色法检测酶标仪490 nm吸光度,观察成骨细胞增殖情况以及ERK5mRNA的表达。并采用生理强度为12dyne/cm2的流体剪切力干预成骨细胞,实时荧光定量PCR检测BMP2,BMP7mRNA的表达情况。结果:浓度为15μM的BIX02188干预成骨细胞后,成骨细胞的生长的抑制以及ERK5mRNA的降低呈浓度依赖性。流体剪切力能够明显增加BMP2和BMP7mRNA的表达(P<0.05),且该种反应能够被ERK5信号通路阻断(P<0.05)。结论:ERK5信号通路调控流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达。

MEK5/ERK5在大鼠脊髓损伤修复过程中表达水平动态变化及临床意义

目的以大鼠为模型观察脊髓损伤修复过程中MEK5/ERK5(mitogen extracellular signal-regulated kinase 5/extracellular signal kinase 5)表达水平变化及临床指导意义。方法将成年健康雄性大鼠随机分为实验组和假手术组,应用western-blotting蛋白质印迹技术和Real-Time PCR实时荧光定量检测技术分别检测脊髓损伤后1天,3天,7天,14天后MEK5、ERK5两种蛋白及其mRNA表达水平动态变化情况,通过考察P-ERK(phosphorylated extracellular signal kinase 5)表达水平考察ERK5激活情况。结果 RT-PCR显示实验组组MEK5 mRNA和ERK5 mRNA表达水平均随时间呈逐渐增加的动态变化规律,且与假手术组相比表达水平明显增加;Western blotting显示实验组MEK5表达水平随时间先增加后回落,ERK5表达水平随时间逐渐增加,P-ERK表达水平随时间增加。结论 ERK5表达水平与脊髓损伤修复过程呈正相关,ERK5的促组织细胞分裂增殖的功能可能有助于脊髓损伤加速修复。

ERK5MAPK在genistein对MDA-MB-231细胞增殖抑制中的作用

目的探讨ERK5(extracellular-regulated kinase5)MAPK(mitogen-activated protein kinase)信号转导通路与genistein对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖抑制作用的关系。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测genistein对MDA-MB-231增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;应用western blot分别检测ERK5总蛋白和凋亡相关蛋白Bax、Caspase3的表达。结果genistein对MDA-MB-231细胞增殖有明显的抑制作用;流式细胞仪检测到细胞产生凋亡;western blot分析提示genistein抑制ERK5总蛋白的表达,促进Bax和Caspase3蛋白表达。结论genistein可以影响ERK5MAPK信号转导通路,使凋亡相关蛋白表达增加,抑制MDA-MB-231细胞增殖。

ERK5在小鼠骨质疏松性骨折愈合过程中作用的实验研究

目的通过构建小鼠骨质疏松骨折模型,研究ERK5在骨质疏松性骨折愈合过程中的作用。方法将108只6周龄雌性昆明小鼠随机分成4组,通过手术切除小鼠双侧卵巢及小鼠股骨离断分别构建骨质疏松(OVX)和骨折模型(Fracture),然后给实验组小鼠每日腹腔注射ERK5特异性阻断剂XMD8-92,于1 w、2 w、4 w后分别处死一定数量的小鼠,取术侧股骨标本,行X线片检查、股骨骨痂Micro-CT、HE染色及免疫组织化学染色检查,观察骨折端骨小梁生长情况,骨痂内成骨相关蛋白及ERK5表达情况。结果给予实验小鼠注射XMD8-92后第2周及第4周,Fracture组小鼠骨痂生长较快,骨小梁数目较多,厚度较大,成骨相关蛋白ALP、Runx2的表达相对较多(P<0.05),而Fracture+XMD8-92组小鼠骨痂生长则相对缓慢,骨小梁稀少且绯薄,结构相对较乱,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runx2表达较少(P<0.05);且OVX+Fracture+XMD8-92组小鼠与OVX+Fracture组小鼠相比,骨小梁生成更少且紊乱,骨痂生长明显延迟,ALP、Runx2表达量显著减少(P<0.05)。结论 ERK5影响骨折端骨痂形成的速度和质量,在促进骨质疏松性骨折愈合过程中起着十分重要的生理作用。

预缺血再灌注通过NMDA受体介导海马CA1区ERK5激活的研究

目的 研究脑缺血及预缺血再灌注后大鼠海马脑区细胞外信号调节激酶5（ERK5）的磷酸化（激活）规律以及NMDA受体抑制剂盐酸氯胺酮（开他敏）对其激活的影响.方法 采用SD大鼠四动脉结扎缺血及预缺血模型,给药组大鼠在缺血前20 min腹腔给予盐酸氯胺酮30 mg/kg.用免疫印迹法分析不同条件下大鼠海马ERK5的蛋白表达量和激活情况;焦油紫染色观察缺血及预缺血对大鼠海马神经元的作用.结果 盐酸氯胺酮显著抑制了预缺血再灌注后ERK5的激活,而ERK5的蛋白表达量在以上相同处理条件下无明显变化;焦油紫染色观察示预缺血对大鼠海马神经元具有保护作用.结论 预缺血再灌注具有神经元保护作用,这种保护作用与NMDA受体有关,为临床治疗脑中风提供理论依据.

NFATc1-ERK5通路介导流体剪切力促进成骨细胞BMP7表达

目的:探讨成骨细胞中NFATc1与ERK5调控关系,并研究流体剪切力(FSS)调节BMP7表达的信号通路。方法:实验分为6组,即空白组、FSS组、Cs A(Cyclosporin,NFATc1抑制剂)组、XMD8-92(ERK5抑制剂)组、FSS+Cs A组、FSS+XMD8-92组。用Western Blot方法检测不同干预条件下NFATc1、ERK5、p-ERK5以及BMP7蛋白表达水平并进行比较。结果:12 dyn/cm^2FSS作用45 min能够显著提高NFATc1、p-ERK5在成骨细胞内水平,400 nmol/L Cs A干预30 min能够有效抑制NFATc1表达量升高以及ERK5磷酸化,但5μmol/L XMD8-92作用1 h仅能够抑制ERK5磷酸化,而对NFATc1没有作用。此外,FSS促进MC3T3-E1细胞中BMP7表达量升高,Cs A和XMD8-92任何一种抑制剂均能显著阻止BMP7表达。结论:FSS在成骨细胞中通过NFATc1来调控ERK5磷酸化,BMP7为ERK5下游靶点受NFATc1-ERK5通路调控。

食管鳞癌组织中ERK5的表达及临床意义

目的在人食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常黏膜组织中检测细胞外信号调节激酶5(ERK5)蛋白和mRNA表达情况,对照临床病理参数,探讨ERK5表达的临床意义。方法选取食管鳞癌组织(食管鳞癌组)和癌旁正常组织(正常组)各115例,采用免疫组化法检测两组ERK5蛋白表达,RT-PCR法检测ERK5 mRNA相对表达量,并分析ERK5蛋白、mRNA表达与食管鳞癌临床病理参数的关系。结果食管鳞癌组及正常组ERK5蛋白表达阳性率分别为90.4%和68.6%,两组ERK5蛋白表达有显著差异(P<0.05);食管鳞癌组及正常组ERK5 mRNA的相对表达量分别为0.82±0.07、0.61±0.02,两组ERK5 mRNA表达有显著差异(P<0.05)。不同的病理分级分期的食管鳞癌ERK5蛋白、mRNA表达有显著差异(P<0.05)。而不同的性别、年龄的食管鳞癌ERK5蛋白、mRNA表达无显著差异(P>0.05)。ERK5蛋白和mRNA表达呈正相关。结论 ERK5蛋白和mRNA表达在癌组织中较癌旁正常组织高;分期越高分化程度越低及发生淋巴结转移的食管鳞癌组织中ERK5蛋白和mRNA的表达水平越高。提示高表达的ERK5和食管癌的恶性程度和转移密切相关。

细胞外信号调节激酶5(ERK5)对体外血小板聚集和体内血栓形成的影响

目的探究细胞外信号调节激酶5(ERK5)对人体外血小板聚集的影响和体内血栓形成的影响。方法将本院获得的人血50份,制备血小板悬浮液,随机将血小板悬浮液分为两组,对照组和干预组,每组25份。干预组血小板悬浮液给予ERK5,对照组血小板悬浮液给予等量的生理盐水,然后采用血小板聚集仪检测体外血小板的凝集情况。购买SPF级雌性BALB/c型小鼠40只,建立FeCl3颈动脉血栓小鼠模型,将FeCl3颈动脉血栓小鼠模型随机分为两组,实验组和空白组,每组20只,实验组静脉给予ERK5,对照组静脉给予特异性抑制剂XMD8-92,观察小鼠颈动脉血栓形成时间,并比较两组是否有差异。结果 50份血小板悬浮液,对照组血小板凝集5份,干预组血小板凝集23分。两组差异有统计学意义(P<0.05)。40例FeCl3颈动脉血栓小鼠模型中给予ERK5特异性抑制剂XMD8-92的实验组小鼠第一次血栓形成平均时间为(12.56±0.47)min;给予DMSO溶液的空白组第一次血栓形成平均时间为(7.62±0.89)min,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERK5在体外和体内血小板的凝集过程中发挥重要作用。

ERK5信号通路与恶性肿瘤研究进展

丝裂原活化蛋白激酶家族是一类介导细胞反应的重要信号系统,是细胞外信号调节激酶5(ERk5)是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的重要组成部分,作为MAPK家族发现较晚的转导体,可以被许多胞外刺激因素激活,参与细胞的增殖、分化、凋亡等,诱导细胞发生相应生物学变化,参与机体多种生理病理过程。最近研究表明,ERK5可促进肿瘤血管的生成并对肿瘤细胞生长起重要作用。因此,本文通过总结ERK5信号通路的作用原理及相关研究,为恶性肿瘤的诊断与治疗提供一种新的方法。

回药失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠脑组织ERK5蛋白激酶表达的影响

目的:探讨失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠脑组织ERK5蛋白激酶表达的影响;方法:将238只SD大鼠随机分为17组,每组14只,分别为:空白组,假手术组,模型再灌注、尼莫地平再灌注1d、3d、7d组,失荅剌知丸再灌注高、中、低剂量1d、3d、7d组,以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。空白组、假手术组、模型组均用0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃剂量为1mL/100g;尼莫地平组予以浓度为1.08g/L、剂量1mL/100g的稀释液灌胃;失荅剌知丸高剂量组予以浓度为4.5g/mL、中剂量组予以浓度为3.0g/mL、低剂量组予以浓度为1.5g/mL,灌胃剂量按1mL/100g的原方浓缩剂灌胃;以上各组每天同一时间灌胃,1天2次。各组分别在缺血再灌注后1d、3d、7d各时间点取材后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中P-ERK5蛋白激酶的相对表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK5激酶的相对表达情况。结果:Western blot结果示:磷酸化活化后的P-ERK5蛋白激酶表达结果示:(1)各药物组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);(2)尼莫地平组与失荅剌知丸低剂量组比较有统计学意义(P<0.05),与失荅剌知丸中剂量组比较没有统计学意义(P>0.05),与失荅剌知丸高剂量组比较差异性显著(P<0.01);(3)失荅剌知丸各剂量组1d、3d、7d比较,P-ERK5蛋白激酶的表达随着治疗时间的延长依次增加,其中失荅剌知丸高剂量7d组表达量最高。RT-PCR结果同P-ERK5激酶Western blot结果。结论:失荅剌知丸对脑缺血有一定的治疗作用,且可上调蛋白激酶ERK5表达,这可能与治疗过程中激活MAPK/ERK5通路,促使ERK5蛋白激酶磷酸化活化为P-ERK5,从而发挥其神经保护的作用有关。