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旋毛虫ES抗原结构基因TSPG Ⅱ 重组表达质粒构建 被引量:1
1
作者 袁慧君 阎玉河 +1 位作者 张改平 李健强 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第4期67-70,共4页
用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ,从克隆载体pUTSⅡ中切出一个0.988kbTSPGⅡ基因,经EcoRI和BstXI酶切鉴定,同时表达载体也用相同的酶进行酶切,经琼脂糖凝胶电泳,分别回收TSPGⅡ基因和pSV... 用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ,从克隆载体pUTSⅡ中切出一个0.988kbTSPGⅡ基因,经EcoRI和BstXI酶切鉴定,同时表达载体也用相同的酶进行酶切,经琼脂糖凝胶电泳,分别回收TSPGⅡ基因和pSV·SPORTⅠ表达载体,用T4DNA连接酶定向连接,转化大肠杆菌感受态细胞,挑取重组子,经EcoRⅠ,BstXⅠ和HindⅢ酶切鉴定,构建了重组表达质粒pSV·TSⅡ. 展开更多
关键词 旋毛虫 es抗原 结构基因 重组表达质粒
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旋毛虫53kDa ES抗原蛋白二级结构及B细胞表位预测 被引量:6
2
作者 卫海燕 崔晶 王中全 《河南预防医学杂志》 2004年第2期65-67,72,共4页
目的 分析旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白二级结构及B细胞表位。方法 应用生物信息分析软件DNASTAR和Anthep ro5 .0 ,按照Kyte -Doolittle氨基酸亲水性标准对旋毛虫 5 3kDaES抗原的亲水性基序、二级结构及B细胞表位进行分析预测。结果 在... 目的 分析旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白二级结构及B细胞表位。方法 应用生物信息分析软件DNASTAR和Anthep ro5 .0 ,按照Kyte -Doolittle氨基酸亲水性标准对旋毛虫 5 3kDaES抗原的亲水性基序、二级结构及B细胞表位进行分析预测。结果 在旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白中 ,第 1 9- 2 5、4 0 - 5 1、6 1 - 6 7、99- 1 0 5、1 1 1 - 1 1 9、1 2 6 - 1 34、1 37- 1 5 2、1 79- 1 85、1 91 - 2 0 0、2 1 9- 2 38、2 6 1 - 2 6 7、2 81 - 2 95、31 2 - 32 3、331 - 343、36 7- 372、2 90 - 393位氨基酸残基具有较强的抗原性 ,第 1 9- 2 5、4 0 - 5 1、6 1 -6 7、99- 1 0 5、1 1 1 - 1 1 9、1 2 6 - 1 34、1 37- 1 5 2、1 79- 1 85、1 91 - 2 0 0、2 1 9- 2 38、2 6 1 - 2 6 7、2 81 - 2 95、31 2 - 32 3、331 - 343、36 7- 372、390- 393位氨基酸残基可能是B细胞的表位。结论 对旋毛虫 5 展开更多
关键词 旋毛虫 es抗原 二级结构 B细胞表位
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肿瘤抗原MAGE-12的表位及二级结构预测 被引量:11
3
作者 李艳秋 吴玉章 +3 位作者 贾正才 耿淼 万瑛 管孝鞠 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期268-270,共3页
目的预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构、B细胞表位和 MAGE- 12的 HL A- A2限制性 CTL表位。方法用 Garnier- Robson和 Chou- Fasman方案预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构 ;用 Kyte- Doolittle亲水方案预测肿瘤抗原 MAGE-... 目的预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构、B细胞表位和 MAGE- 12的 HL A- A2限制性 CTL表位。方法用 Garnier- Robson和 Chou- Fasman方案预测肿瘤抗原 MAGE- 12的α-螺旋二级结构 ;用 Kyte- Doolittle亲水方案预测肿瘤抗原 MAGE- 12的 B细胞表位 ;用简单基序 ( simple motifs)和延展基序 ( extended m otifs)对肿瘤抗原 MAGE- 12的 HL A-A2限制性 CTL 表位进行预测。结果 MAGE- 12可能含有较多的 α-螺旋 ;B细胞识别的表位可能在 82~ 93残基 ( QSDEGSS-NEEQE)或附近和 3~ 14残基 ( L EQRSQHCKPEE)或附近 ;发现 1个 HL A- A2限制性 CTL 表位为 FL WGPRAL V( 2 71~2 79)。结论用亲水性方案和基序法预测肿瘤抗原 MAGE- 12的 B细胞表位和 MAGE- 12的 HL A- A2限制性 CTL 表位 ,为实验方法探索 MAGE- 12的表位提供有用线索。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 表位 二级结构 预测 MAGE-12
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鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测 被引量:11
4
作者 于天飞 马波 +4 位作者 邢明伟 靳淼 刘海暇 李俚 王君伟 《中国家禽》 北大核心 2007年第7期7-10,共4页
利用DNAStar软件包中的Editseq将GPV H1株非结构蛋白和结构蛋白核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,分别预测结构蛋白和非结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。结果表明,GPVH1株非结构蛋白和结构蛋白具... 利用DNAStar软件包中的Editseq将GPV H1株非结构蛋白和结构蛋白核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,分别预测结构蛋白和非结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。结果表明,GPVH1株非结构蛋白和结构蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其中非结构蛋白的NS2和结构蛋白的VP3含有较多的潜在的B细胞优势抗原表位。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 非结构蛋白 结构蛋白 二级结构 抗原表位
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新型氨基甲酸乙酯人工抗原的分析表征方法研究 被引量:7
5
作者 郭明 周伟 +2 位作者 周珊 敬娇 杨萍 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期193-198,共6页
采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺方法合成氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)新型人工抗原。将衰减全反射红外光谱法(ATR-FTIR)应用于人工合成抗原的表征分析,并结合荧光光谱分析EC人工抗原的偶联效果以及载体蛋白质分子的二级结... 采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺方法合成氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)新型人工抗原。将衰减全反射红外光谱法(ATR-FTIR)应用于人工合成抗原的表征分析,并结合荧光光谱分析EC人工抗原的偶联效果以及载体蛋白质分子的二级结构变化;通过质谱结合紫外光谱、电泳方法进行人工抗原的系统表征,计算新型人工抗原中半抗原分子与载体蛋白质分子的偶联比。结果表明:合成路线合理,成功获得了氨基甲酸乙酯新型人工抗原。人工抗原分子的α-螺旋、β-折叠和β-转角结构与载体蛋白质分子相比含量发生变化,人工抗原的荧光相图满足线性型态变迁关系,符合"二态模型"。氨基甲酸乙酯人工抗原分析表征的红外衰减全反射方法、基质辅助激光解析飞行时间质谱法获得的检测结果与其它光谱方法、电泳方法表征结果一致,获得人工抗原的偶联比为15∶1~19∶1,EC新型人工抗原免疫小鼠抗血清的效价为1∶25600。 展开更多
关键词 氨基甲酸乙酯 人工抗原 红外光谱 二级结构
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鸡抗菌肽NK-lysin的生物信息学分析 被引量:9
6
作者 杭柏林 李杰 +3 位作者 张慧辉 徐彦召 徐军 胡建和 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期29-31,36,291,292,共6页
为了解鸡内源性抗菌肽NK-lysin的基本信息,试验选择鸡NK-lysin的氨基酸序列通过软件对NK-lysin的生物信息学进行了分析。结果表明:NK-lysin的等电点为5.87,分子质量为15 231.3 u,为稳定蛋白和亲水蛋白,定位于细胞质内,有1个跨膜区和1个... 为了解鸡内源性抗菌肽NK-lysin的基本信息,试验选择鸡NK-lysin的氨基酸序列通过软件对NK-lysin的生物信息学进行了分析。结果表明:NK-lysin的等电点为5.87,分子质量为15 231.3 u,为稳定蛋白和亲水蛋白,定位于细胞质内,有1个跨膜区和1个信号肽,没有糖基化位点,但有2个磷酸化位点,二级结构由α螺旋、延伸链、β折叠和无规则卷曲组成,存在多个抗原表位。说明鸡抗菌肽NK-lysin可作用于细胞膜或某些生物分子,使菌体死亡。 展开更多
关键词 抗菌肽 NK—lysin 生物信息学 二级结构 抗原表位
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猪重要感染病毒蛋白的二级结构、抗原表位分析及三联表位多肽疫苗的重组预测 被引量:4
7
作者 刘祥 陈琛 +1 位作者 陈春琳 吴三桥 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期18-23,共6页
为设计猪重要感染病毒的蛋白表位多肽疫苗,选取猪感染病毒的候选疫苗蛋白:猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5蛋白,猪圆环病毒2型的CAP蛋白,猪瘟病毒的E2蛋白。综合ABCpred和Bepi Pred方案,预测候选蛋白的B细胞表位;利用神经网络与量化矩阵法... 为设计猪重要感染病毒的蛋白表位多肽疫苗,选取猪感染病毒的候选疫苗蛋白:猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5蛋白,猪圆环病毒2型的CAP蛋白,猪瘟病毒的E2蛋白。综合ABCpred和Bepi Pred方案,预测候选蛋白的B细胞表位;利用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位;采用MHC-Ⅱ类分子结合肽在线程序预测蛋白的Th表位。使用SOPMA方法与DNASTAR软件分析候选蛋白的二级结构,进一步验证B/T细胞表位预测结果的准确性。然后,通过Protean程序重组拼接获得的B/T细胞抗原表位。结果显示GP5蛋白具有4个优势B细胞表位,CAP、E2蛋白分别具有5个B细胞表位;GP5、CAP与E2蛋白各具有1个CTL表位;GP5、E2蛋白分别具有2个Th表位,CAP蛋白存在1个Th表位。二级结构分析显示预测获得的B/T细胞表位均处于蛋白易于产生表位的暴露表面、无规则卷曲与转角等位置,验证了B/T细胞表位预测结果的准确性。Protean程序重组拼接获得优势的B/T细胞抗原表位。最终设计获得抗原性较好的猪病毒三联表位多肽,为猪易感病毒的多联疫苗开发奠定基础。 展开更多
关键词 猪病毒 表位疫苗 二级结构分析 抗原分析
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猪瘟流行野毒株E_2基因编码的gp55蛋白模拟分析 被引量:4
8
作者 张永国 张彦明 +4 位作者 邢福珊 许信刚 胡建和 刘湘涛 韩雪清 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第5期128-132,共5页
 利用RT-PCR和PCR技术扩增出近期猪瘟流行野毒株的E2基因,将其克隆到载体上测定核苷酸序列,根据Alfort株和Brescia株、C-株确定起始氨基酸三联体的正确位置后推导出其氨基酸序列,结果表明近期流行的猪瘟毒株与疫苗毒株和强毒株之间存...  利用RT-PCR和PCR技术扩增出近期猪瘟流行野毒株的E2基因,将其克隆到载体上测定核苷酸序列,根据Alfort株和Brescia株、C-株确定起始氨基酸三联体的正确位置后推导出其氨基酸序列,结果表明近期流行的猪瘟毒株与疫苗毒株和强毒株之间存在一定差异;利用DNAstar软件分析E2基因编码的gp55蛋白的疏水性、抗原性和二级结构,并与猪瘟疫苗毒株(C-株)进行比较,结果表明,目前流行的猪瘟病毒与疫苗毒的gp55蛋白在抗原性、二级结构上存在一定的差异,而C末端疏水性差异不大。 展开更多
关键词 猪瘟 流行野毒株 E2基因编码 gp55蛋白 模拟分析 疏水性 抗原性 二级结构
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应用DNAStar软件预测结核分枝杆菌Rv3812的抗原表位 被引量:4
9
作者 李江英 白雪娟 +4 位作者 梁艳 张俊仙 阳幼荣 赵卫国 吴雪琼 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期166-170,共5页
目的:预测结核分枝杆菌Rv3812蛋白的抗原表位。方法:利用DNAStar软件包中Editseq软件将结核分枝杆菌Rv3812氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv3812蛋白的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,... 目的:预测结核分枝杆菌Rv3812蛋白的抗原表位。方法:利用DNAStar软件包中Editseq软件将结核分枝杆菌Rv3812氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv3812蛋白的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果:Rv3812蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于55~68、77~99、116~120、265~280、283~294、303~326、330~337和425~435位氨基酸残基或其附近。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于6~30、55~85、97~140、159~191、202~204、208~231、251~264、270~281、287~299、311~334、337~343、349~356、368~385、394~413、428~433、437~441、470~476、479~481和488~493位氨基酸残基或其附近。结论:Rv3812是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少。 展开更多
关键词 抗原表位 结核分枝杆菌Rv3812 二级结构
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DEV核衣壳蛋白二级结构与B细胞表位预测 被引量:4
10
作者 代淑燕 程振涛 +2 位作者 汪德生 文明 周碧君 《山地农业生物学报》 2008年第4期335-339,共5页
为预测和分析鸭肠炎病毒NP蛋白的二级结构和B细胞表位,以DEV-NP基因推导的氨基酸序列为基础。采用Chou-Fasman法、Ganmier-Robson法和Karplus-Schulz法预测该蛋白二级结构;按Kyte—Doolittle方案、Emini方案和Jameson-Wolf方案预测其... 为预测和分析鸭肠炎病毒NP蛋白的二级结构和B细胞表位,以DEV-NP基因推导的氨基酸序列为基础。采用Chou-Fasman法、Ganmier-Robson法和Karplus-Schulz法预测该蛋白二级结构;按Kyte—Doolittle方案、Emini方案和Jameson-Wolf方案预测其B细胞抗原表位。结果表明,DEV-NP蛋白的二级结构较为复杂,含有较多的转角、无规则卷曲等柔性区域以及α-螺旋与β-折叠区段,且在蛋白肽链中有多个区段可形成B细胞抗原表位,其中第10—15和182—186区段及其附近可能是DEV-NP蛋白的B细胞表位优势区。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白 二级结构 B细胞抗原表位
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口蹄疫病毒Hankou/99株结构蛋白的二级结构及其B淋巴细胞表位的预测 被引量:4
11
作者 曾江勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期34-38,共5页
为了获得更多抗原信息,预测猪口蹄疫病毒Hankou/99株结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位,试验采用DNAStar生物学软件,以Hankou/99株的基因组序列为材料,推导出相应的氨基酸序列,采用Garnier-Robson、Chou-Fasman和Karplus-Schulz方法预... 为了获得更多抗原信息,预测猪口蹄疫病毒Hankou/99株结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位,试验采用DNAStar生物学软件,以Hankou/99株的基因组序列为材料,推导出相应的氨基酸序列,采用Garnier-Robson、Chou-Fasman和Karplus-Schulz方法预测蛋白质的二级结构;按KyteDoolittle、Emini及Jameson-Wolf方法分别预测蛋白质的亲水性、表面可能性以及抗原性指数,并综合分析预测此株结构蛋白的B细胞抗原表位。结果表明:此株VP1结构α-螺旋少,转角和无规卷曲多,柔性区域很丰富,VP2和VP4α-螺旋复杂,VP3含有较多的α-螺旋,但亲水性较差,出现在蛋白质表面的可能性不高。在VP1第144∽147位、177∽182位,VP2第132∽134位和VP3第117∽119位的氨基酸残基最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。说明此株抗原位点不仅局限在VP1区,VP2和VP3也存在抗原表位。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 结构蛋白 二级结构 抗原表位 疫苗
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猪型布鲁氏菌Omp31基因的抗原表位预测与分析
12
作者 杜志强 刘丽娜 王建英 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期693-696,共4页
布鲁氏菌的外膜蛋白在维持细胞结构方面发挥着重要作用,其中,有些外膜蛋白与细菌本身的毒性相关,成为了重要的抗原决定簇相关分子。Omp31分子就是猪型布鲁氏菌的一个重要的抗原表位分子,在研制亚单位疫苗方面有重要作用。本论文以猪型... 布鲁氏菌的外膜蛋白在维持细胞结构方面发挥着重要作用,其中,有些外膜蛋白与细菌本身的毒性相关,成为了重要的抗原决定簇相关分子。Omp31分子就是猪型布鲁氏菌的一个重要的抗原表位分子,在研制亚单位疫苗方面有重要作用。本论文以猪型布鲁氏菌Omp31基因作为研究对象,利用DNAStar生物学软件对Omp31分子的立体结构、分子的表面可能性、亲水性、蛋白骨架区的柔韧性、分子的抗原指数进行了详细分析。结果显示:猪型布鲁氏菌Omp31分子一级结构的氨基酸序列中存在4段可能的抗原表位区段,其中,51~80氨基酸残基组成的区段和193~228氨基酸残基组成的区段的抗原指数较高,成为抗原决定簇的可能性很大。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 Omp31基因 二级结构 抗原表位 预测
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旋毛虫21 KDa排泄分泌抗原二级结构及T细胞和B细胞表位预测
13
作者 王来 崔晶 +1 位作者 王强 王中全 《河南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第4期71-75,共5页
应用SYFPEITHI和Propred程序和多种预测方案对旋毛虫21 KDa排泄分泌抗原的T细胞表位、二级结构、疏水性、柔韧性、表面可能性、两性区以及B细胞表位进行预测.旋毛虫21KDa排泄分泌抗原存在2个较强的T细胞表位区,分别为第9~23位和第135... 应用SYFPEITHI和Propred程序和多种预测方案对旋毛虫21 KDa排泄分泌抗原的T细胞表位、二级结构、疏水性、柔韧性、表面可能性、两性区以及B细胞表位进行预测.旋毛虫21KDa排泄分泌抗原存在2个较强的T细胞表位区,分别为第9~23位和第135-150位氨基酸位点;潜在的B细胞表位存在于从第28个氨基酸残基开始的广大区域内.预测结果为旋毛虫病诊断和新型疫苗研制提供候选抗原. 展开更多
关键词 旋毛虫 抗原 二级结构 T细胞表位 B细胞表位
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Pla a 1的抗原表位分析
14
作者 李冰峰 李鑫 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第8期3435-3436,3738,共3页
[目的]预测Pla a 1抗原的免疫原性及B细胞表位。[方法]联合运用多种方法预测Pla a 1的二级结构并预测其表面特性,如亲水性、可塑性及抗原表位。[结果]该蛋白是一个分子量约19 kDa,pI值约8.7,主要为α-螺旋的结构紧凑的球形蛋白。预测其... [目的]预测Pla a 1抗原的免疫原性及B细胞表位。[方法]联合运用多种方法预测Pla a 1的二级结构并预测其表面特性,如亲水性、可塑性及抗原表位。[结果]该蛋白是一个分子量约19 kDa,pI值约8.7,主要为α-螺旋的结构紧凑的球形蛋白。预测其亲水性区域:32-42,55-59,76-78,88-89,92-98,110-112,118-127,140-151,157-163;预测其可塑性区域:28-40,49-57,76-80,87-98,109-114,121-125,137-139,144-151,154-162;预测其蛋白质抗原表位区域:29-42,49-60,75-78,86-100,107-114,116-130,134-152,156-164;预测其转角结构区域:39-42,51,55,88-89。[结论]Pla a 1抗原蛋白具有较强的免疫原性;其主要的抗原表位集中于29-42,49-60,86-100,而这些预测结果为进一步寻求梧桐花粉变态反应的防治方法提供了依据。 展开更多
关键词 B细胞表位 PLA a 1抗原 法国梧桐花粉 二级结构 表面特性
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血清4型Ⅰ群禽腺病毒四个主要结构蛋白的生物信息学分析 被引量:3
15
作者 张丙燕 王君娜 +2 位作者 张宇名 冯培祥 徐守振 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第13期1-6,11,162,共8页
为了了解血清4型Ⅰ群禽腺病毒(serotype 4 of groupⅠFowl adenovirus)分离株RZ140718(RZ株)的hexon、penton、fiber-1和fiber-2四个主要结构蛋白的遗传进化、二级结构及抗原表位等生物学信息,试验在对四个蛋白基因扩增测序基础上,应用M... 为了了解血清4型Ⅰ群禽腺病毒(serotype 4 of groupⅠFowl adenovirus)分离株RZ140718(RZ株)的hexon、penton、fiber-1和fiber-2四个主要结构蛋白的遗传进化、二级结构及抗原表位等生物学信息,试验在对四个蛋白基因扩增测序基础上,应用Megalign、MEGA 5.1软件进行氨基酸序列分析并构建系统发育进化树,应用ProtParam、SignalP和SOPMA软件分析理化性质和二级结构,应用BepiPred、ABCpred、IEDB和DNAStar软件综合预测B细胞抗原表位,应用NetMHCpan4.0和NetMHCⅡpan3.2软件预测T细胞抗原表位。结果表明:从RZ株中PCR扩增出hexon、penton、fiber-1和fiber-2这四个蛋白的基因;RZ株的hexon和penton蛋白与GenBank中12个血清型参考株的同源性较高,fiber-1和fiber-2蛋白与4型和10型参考株的同源性较高;RZ株的四个蛋白与GenBank中其他4型中国分离株均位于同一分支上;四个蛋白均为酸性亲水蛋白,无信号肽,均以无规卷曲为主;从四个蛋白中分别得到22,11,11,10个潜在的线性B细胞抗原表位,4,2,4,2个潜在的CTL细胞抗原表位,2,1,1,0个潜在的Th细胞抗原表位。说明hexon蛋白具有较多的潜在优势抗原表位,可用于后续表位疫苗的开发研究。 展开更多
关键词 血清4型Ⅰ群禽腺病毒 遗传进化 生物信息学 二级结构 抗原表位
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1株九江分离的柯萨奇A6病毒VP1基因分析及B细胞表位预测 被引量:4
16
作者 徐焕新 柯秀梅 +4 位作者 蔡曼 王萌 杨生晟 陈春辉 余文敏 《江苏预防医学》 CAS 2017年第1期18-21,共4页
目的对1株在九江地区分离的柯萨奇A6病毒(CoxA6)VP1区域进行克隆,并对其编码蛋白的结构、功能及B细胞表位进行分析和预测,为CoxA6疫苗制备和诊断方法的研究提供理论基础。方法采用RT-PCR法对CoxA6分离株VP1区进行扩增和克隆、序列分析,... 目的对1株在九江地区分离的柯萨奇A6病毒(CoxA6)VP1区域进行克隆,并对其编码蛋白的结构、功能及B细胞表位进行分析和预测,为CoxA6疫苗制备和诊断方法的研究提供理论基础。方法采用RT-PCR法对CoxA6分离株VP1区进行扩增和克隆、序列分析,应用SigaIP、TMPRED、TMHMM、Big-PI Predictor、Cell-Ploc、PSORT、NetNES、Netphos、SOPMA、NetNGlyc、MotifScan、InterProscan、SMART、PROSITE、GOR4、Bepipred Linear Epitope Prediction等生物信息学方法预测其VP1基因编码蛋白特性和潜在的B细胞表位。结果该CoxA6分离株VP1基因编码305aa的多肽,分子量为33.5kDa。该蛋白无信号肽、跨膜区,是亲水性蛋白;二级结构主要以无规则卷曲为主,其次为α-螺旋及β-片层。该蛋白共有7个可能的B细胞抗原表位,位于151~173aa区域内的表位分值最高为2.774。结论成功克隆了1株CoxA6的VP1基因,并对其进行序列分析、蛋白质结构和B细胞表位预测,为制备CoxA6疫苗和开发诊断方法提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 柯萨奇A6病毒 VP1 B细胞抗原表位 功能区 二级结构 信号肽 跨膜区 无规则卷曲 α-螺旋 β-片层
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超声处理对牛乳酪蛋白结构及抗原性的影响 被引量:10
17
作者 薛海燕 操歌 +2 位作者 贺宝元 樊娇娇 薛丽欢 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第23期123-129,共7页
利用超声波处理牛乳致敏蛋白α-酪蛋白(casein,CN)和β-CN,结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、圆二色光谱、荧光光谱及酶联免疫吸附测定等方法分析α-CN和β-CN结构和抗原性的变化。结果表明:随着超声波功率的增大,α-CN的分子质... 利用超声波处理牛乳致敏蛋白α-酪蛋白(casein,CN)和β-CN,结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、圆二色光谱、荧光光谱及酶联免疫吸附测定等方法分析α-CN和β-CN结构和抗原性的变化。结果表明:随着超声波功率的增大,α-CN的分子质量无显著性变化,β-CN在600 W时发生聚集,两种酪蛋白羰基含量上升,自由巯基含量先下降后回升,在500 W时达到最低,疏水性则呈现与自由巯基含量相反的规律;二级结构中,α-螺旋结构经超声处理后其相对含量减少,无规卷曲相对含量随着超声功率先增加后降低,功率为500 W时相对含量最高,β-折叠的相对含量变化趋势则与无规卷曲相反,这表明超声波处理破坏了酪蛋白的高级结构;随着超声功率的增强,抗原性呈现先升高后降低的趋势,其中500 W时抗原性最高,与酪蛋白疏水性及无规卷曲结构相对含量呈正相关,与β-折叠结构的相对含量呈现负相关。超声处理酪蛋白在影响蛋白构象及结构的同时改变其抗原性,且抗原性与疏水性及无规卷曲相对含量相关。 展开更多
关键词 牛乳酪蛋白 超声波 抗原性 羰基 巯基 二级结构 疏水性
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抗华支睾吸虫循环抗原噬菌体抗体基因分析
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作者 俞慕华 黄文繁 +4 位作者 雷智刚 何蔼 孟锦绣 李卓雅 唐希美 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1418-1419,共2页
目的 对获得的抗华支睾吸虫循环抗原Fab抗体克隆进行基因分析。方法 将 2株阳性克隆抗体基因进行测序 ,并用NCBI和IgBlastAnalysisofImmunoglobulinsequences中的分析软件 ,对其推导的氨基酸序列进行分析 ,再进一步模拟它们的二级结... 目的 对获得的抗华支睾吸虫循环抗原Fab抗体克隆进行基因分析。方法 将 2株阳性克隆抗体基因进行测序 ,并用NCBI和IgBlastAnalysisofImmunoglobulinsequences中的分析软件 ,对其推导的氨基酸序列进行分析 ,再进一步模拟它们的二级结构。结果 E38、B0 5阳性克隆抗体基因与人免疫球蛋白κ轻链和γ重链可变区基因高度同源。推导的氨基酸序列均具有典型的抗体轻、重链可变区特征。用分析软件对推测的 2株克隆轻链和重链Fd氨基酸序列进行二级结构模拟 ,结果显示以β -折叠和转角为主的平行肽链形成片层样结构 ,均符合抗体二级结构构型。 结论 E38、B0 5阳性克隆外源基因均属于人免疫球蛋白κ轻链和γ重链可变区基因。 展开更多
关键词 抗华支睾吸虫 循环抗原 噬菌体抗体 基因分析 二级结构 克隆
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热处理羊乳酪蛋白结构与抗原性的变化规律 被引量:5
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作者 薛海燕 樊娇娇 +3 位作者 贺宝元 操歌 李晶莹 宋宏新 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2021年第2期94-102,共9页
热加工处理羊乳α-酪蛋白(α-casein,α-CN)和β-酪蛋白(β-casein,β-CN),通过圆二色谱、荧光光谱等方法探索不同热加工条件下羊乳的蛋白结构变化与抗原性的关系。结果表明:随着对蛋白热处理温度的升高,会破坏羊α-CN和β-CN的天然结构... 热加工处理羊乳α-酪蛋白(α-casein,α-CN)和β-酪蛋白(β-casein,β-CN),通过圆二色谱、荧光光谱等方法探索不同热加工条件下羊乳的蛋白结构变化与抗原性的关系。结果表明:随着对蛋白热处理温度的升高,会破坏羊α-CN和β-CN的天然结构,使得分子内部发生交联或聚集,导致分子量发生改变,分子内游离羰基含量升高,在134℃时,羰基含量分别增长了134.72%、110.98%;自由巯基含量则不断下降;疏水性探针检测最大荧光吸收强度分别增加了50.38%和9.61%,升温引起疏水基团或二硫键等被暴露出来,导致蛋白疏水性随着温度的升高而增大。圆二色谱显示,二级结构中卷曲程度或弹性结构发生复杂的转化,使蛋白质空间结构发生改变,α-螺旋呈现增加趋势,β-转角和无规则卷曲则在减少。两种蛋白的抗原性随着温度的升高而降低,经模拟胃肠消化,134℃处理后抗原性分别减少了80.63%和84.12%。故热处理可降低羊乳酪蛋白的抗原性,且抗原性变化与蛋白的游离羰基含量变化呈反比,还与二级结构中的无规则卷曲及β-转角含量呈正相关关系。 展开更多
关键词 酪蛋白 热处理 二级结构 抗原性
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热加工方式对牛乳过敏原α_(s1)-酪蛋白二级结构和抗原性的影响
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作者 魏家祺 周胜云 +1 位作者 丛艳君 闫文杰 《乳业科学与技术》 2022年第4期29-35,共7页
为探究热加工方式对牛乳过敏原α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响,利用间接竞争酶联免疫吸附测定方法、免疫印迹方法分析不同加热条件下α_(s1)-酪蛋白免疫原性的变化,进而通过8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针和圆二色谱分析其二级结构变化,初... 为探究热加工方式对牛乳过敏原α_(s1)-酪蛋白构象和抗原性的影响,利用间接竞争酶联免疫吸附测定方法、免疫印迹方法分析不同加热条件下α_(s1)-酪蛋白免疫原性的变化,进而通过8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针和圆二色谱分析其二级结构变化,初步揭示热处理调控过敏原α_(s1)-酪蛋白抗原性的机制。结果表明:在80℃、60 min,90℃、10 min,90℃、60 min条件下热处理后,α_(s1)-酪蛋白中α-螺旋结构含量显著低于未加热α_(s1)-酪蛋白,在70℃、20 min,80℃、20 min,90℃、20 min条件下热处理后,α_(s1)-酪蛋白中无规卷曲含量显著增加,70~100℃加热20 min条件下表面荧光强度最强,其他温度-时间条件下二级结构含量变化不显著;α_(s1)-酪蛋白构象的变化导致α_(s1)-酪蛋白的抗原性显著降低,间接竞争酶联免疫吸附测定显示,在70~100℃加热20 min条件下,α_(s1)-酪蛋白的抗原残留量均较高,而免疫印迹方法显示不同温度-时间条件下α_(s1)-酪蛋白仍具有免疫反应特性,建议进一步通过动物实验揭示热处理调控α_(s1)-酪蛋白抗原性的机制。 展开更多
关键词 α_(s1)-酪蛋白 过敏原 热加工 抗原性 二级结构
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