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ES细胞(MESPU13)嵌合体小鼠的GPI分析 被引量:9
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作者 吴白燕 冼美薇 +1 位作者 尚克刚 吴鹤龄 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1995年第5期336-342,共7页
为了评判小鼠ES细胞系MESPU13的分化潜能,我们对19只嵌合小鼠的心、肝、脾、肺、肾、胰腺、生殖腺、肌肉和血液的GPI(磷酸葡萄糖异构酶)进行了分析。在这些样品中,来源于ES细胞的A型条带的检出情况和小鼠的毛色嵌... 为了评判小鼠ES细胞系MESPU13的分化潜能,我们对19只嵌合小鼠的心、肝、脾、肺、肾、胰腺、生殖腺、肌肉和血液的GPI(磷酸葡萄糖异构酶)进行了分析。在这些样品中,来源于ES细胞的A型条带的检出情况和小鼠的毛色嵌合率成正比关系。当毛色嵌合率低于40%时,除了少数小鼠的肾脏外,没有看到A型的条带。当毛色嵌合率大于85%时,几乎所有的器官组织都检测到A型条带,显示了ES细胞在发育形成内、中、外胚层的细胞方面具有很高的分化潜能。另外,在毛色嵌合率大于85%的其中的6只嵌合鼠的肌肉中,只观察到A型的条带,表明这些肌肉只单独来源于ES细胞。 展开更多
关键词 es细胞 嵌合小鼠 磷酸葡萄糖 异构酶
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具高效种系嵌合能力的C57BL/6J小鼠ES细胞系的建立 被引量:8
2
作者 童英 韩嵘 +2 位作者 郑玉兰 苏平 尚克刚 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期468-473,共6页
采用小鼠原代成纤维细胞作为饲养层,在含1×103单位白血病抑制因子(LIF)的DMEM高糖培养基中,建成了11个C57BL/6J小鼠的ES细胞系,成系率为9.6%。所建的11个ES细胞系中有5个核型正常率大于70%。这些细胞具早期胚胎细胞的特... 采用小鼠原代成纤维细胞作为饲养层,在含1×103单位白血病抑制因子(LIF)的DMEM高糖培养基中,建成了11个C57BL/6J小鼠的ES细胞系,成系率为9.6%。所建的11个ES细胞系中有5个核型正常率大于70%。这些细胞具早期胚胎细胞的特征,呈碱性磷酸酶阳性,具表达0014基因的特性5进行体内分化实验时能发生广泛的分化。通过嵌合体制作实验证明其中3个系具嵌合能力,并从中筛选出具高效种系嵌合能力的MESPU35细胞系,MESPU35细胞的克隆能达到种系传递,经过基因操作的细胞克隆,也保留了高效的嵌合能力。因此,MESPU35细胞可作为制作突变小鼠的有效载体。 展开更多
关键词 es细胞系 C57BL/6J品系 种系嵌合
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中药有效部位新药TCM-ES的祛邪作用研究 被引量:1
3
作者 黄升海 吴成义 +2 位作者 张玲玲 许淑萍 魏伟 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期115-119,共5页
目的观察中药有效部位新药TCM-ES体内抗流感病毒的作用,以及体外抗菌效果,探讨其祛邪作用。方法采用鸡胚培养法,从TCM-ES的鸡胚最大无毒剂量(TC0)开始,预先注射不同剂量药物,再以100EID50(50%鸡胚感染量)流感病毒FM1株感染,收集尿囊液,... 目的观察中药有效部位新药TCM-ES体内抗流感病毒的作用,以及体外抗菌效果,探讨其祛邪作用。方法采用鸡胚培养法,从TCM-ES的鸡胚最大无毒剂量(TC0)开始,预先注射不同剂量药物,再以100EID50(50%鸡胚感染量)流感病毒FM1株感染,收集尿囊液,测定血凝效价,能抑制32倍以上所注射的最小药量,即为最小抑制剂量(MIC)。以不同剂量的TCM-ES灌胃给药,以15LD50FM1株病毒滴鼻感染小鼠,测定小鼠肺指数和肺指数抑制率,死亡保护率,延长生命率等,观察TCM-ES的体内抗病毒作用。采用试管稀释法,测定TCM-ES的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果TCM-ES对鸡胚的TC0=2.5mg/胚,MIC=10mg/mL,对IFV的抑制作用比利巴韦林稍弱。动物实验显示,病毒对照组的肺指数和体重下降值明显升高,与正常对照组相比,具有非常显著性差异。TCM-ES在750mg/kg(中剂量)和1500mg/kg(大剂量)组可逆转小鼠体重的下降,肺指数显著高于感染对照组,与正常对照组比较,无显著性差异。TCM-ES中剂量组和大剂量组对流感病毒FM1株感染动物的平均存活日、死亡保护率、延长生命率与病毒对照组相比具有显著性差异。TCM-ES对金黄色葡萄球菌(G+)的MIC和MBC均为10mg/mL,而对革兰阴性杆菌无作用。结论TCM-ES体内具有抗流感病毒作用,对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,具有进一步开发研究的价值。 展开更多
关键词 中药有效部位 TCM—es 流感病毒FM1 细菌 祛邪 小鼠
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雌酮硫酸钠的制备及其对小鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究
4
作者 阿迪拉·阿布都热西提 仲春红 +1 位作者 阿曼古丽·如则 高晓黎 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第5期734-739,共6页
目的研究雌酮硫酸钠(Estrone sulfate sodium,ES)的制备方法及其对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法(1)采用雌酮和氨基磺酸通过氨基磺酸化和离子置换法合成ES。采用核磁共振内标法计算ES的纯度,采用紫外光谱法、红外光谱法、高... 目的研究雌酮硫酸钠(Estrone sulfate sodium,ES)的制备方法及其对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法(1)采用雌酮和氨基磺酸通过氨基磺酸化和离子置换法合成ES。采用核磁共振内标法计算ES的纯度,采用紫外光谱法、红外光谱法、高分辨质谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱对ES进行结构分析。(2)建立雌鼠更年期模型,将小鼠随机分为溶媒组(蒸馏水0.094 mg/kg体重)、雌二醇组[(Estradiol,E2),给药剂量0.3 mg/kg体重]和ES组(给药剂量0.094 mg/kg体重)灌胃给药2周后建立小鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测量心梗面积,评估ES预处理对小鼠心肌损伤的影响。结果合成的ES纯度为66.6%,Tris含量30.8%,表征结果显示产物为雌酮硫酸钠。与溶媒组比较,E2降低小鼠心肌缺血/再灌注损伤面积,但是E2组差异不具有统计学差异,而ES组小鼠心肌缺血/再灌注损伤导致的心肌梗死面积减少,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本合成方法能够得到纯度较高且稳定的ES,动物试验结果证明ES能够减少小鼠心肌缺血再灌注损伤后的心肌梗死面积。 展开更多
关键词 雌酮硫酸钠 心肌缺血再灌注损伤 小鼠 心肌梗死 雌二醇
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ES小鼠和ES细胞中H19基因甲基化状态
5
作者 杨荣荣 周荣艳 +2 位作者 高淑敏 温晓辉 李相运 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期765-770,共6页
为探讨印迹基因H19的甲基化状态与ES小鼠胚胎发育之间的关系,以遗传背景相同的正常成年对照小鼠、22只成年ES小鼠和8只新生死亡的ES小鼠以及不同传代次数的ES细胞为实验材料,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术分别检测了其印迹基因... 为探讨印迹基因H19的甲基化状态与ES小鼠胚胎发育之间的关系,以遗传背景相同的正常成年对照小鼠、22只成年ES小鼠和8只新生死亡的ES小鼠以及不同传代次数的ES细胞为实验材料,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术分别检测了其印迹基因H19的5′非翻译区两个位点的甲基化状态。结果表明,发育至成年的ES小鼠印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与正常成年对照小鼠之间没有差异,而新生死亡的ES小鼠印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与成年ES小鼠以及正常成年对照小鼠相比则存在明显差异。推测ES细胞中印迹基因H19所检测位点的甲基化状态与成年ES小鼠以及正常成年对照小鼠之间可能存在差异。 展开更多
关键词 es细胞 es小鼠 DNA甲基化 印迹基因H19
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Differentiation of Embryonic Stem Cells into Neurons and Retina-like Structure in Nude Mice 被引量:7
6
作者 LiYP GeJ 《眼科学报》 1999年第3期131-136,共6页
Purpose:To investigate the intraocular growth and biological characteristics of mice embryonic stem cells in nude mice.Methods:Murine embryonic stem cells(D3 cell line)were cultured and maintained in an undifferentiat... Purpose:To investigate the intraocular growth and biological characteristics of mice embryonic stem cells in nude mice.Methods:Murine embryonic stem cells(D3 cell line)were cultured and maintained in an undifferentiated state in vitro,then transplanted into the anterior chamber of nude mice.Mophological and immunohistochemical examinations were implemented.Results:Two to three days after transplantation,yellow-white floating granules,sheets and masses were seen inside the anterior chamber and vitreous cavity,and enlarged gradually,14-20days later,the mice were executed.Morphological examination showed that there were undifferentiated cells and some round or polygonal differentiated cells in anterior chamber and vitreous cavity.The morphology of these differentiated cells were similar to that of the retina.The cells were highly positive in NSE staining.Conclusion:The tranplanted embryonic stem cells cold grow in the eyes of nude mice with tendency to differentiate into neurons and retina-like structure. 展开更多
关键词 胚胎干细胞 神经元 视网膜样结构 裸鼠
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Establishment of Germ-line Competent C57BL/6J Embryonic Stem Cell Lines
7
作者 Gui-jun YAN Zheng GU +1 位作者 Jian WANG Jia-ke TSO 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2004年第4期201-208,共8页
Objective To establish C57BL/6J embryonic stem (ES) cell lines with potential germ- line contribution Methods ES cells were isolated from blastocyst inner cell mass of C5 7BL/6J mice, and cultured for 15 passages, a... Objective To establish C57BL/6J embryonic stem (ES) cell lines with potential germ- line contribution Methods ES cells were isolated from blastocyst inner cell mass of C5 7BL/6J mice, and cultured for 15 passages, and then injected into blastococels of ICR mice blastocysts to establish chimeric mice. Results Three ES cell lines (mC57ES1,mC57ES3, mC57ES7) derived from the inner cell mass of C57BL/6J mice blastocysts were established. They were characteristic of undifferentiated state, including normal XY karyotype, expression of a specific cell surface marker “stage-specific embryonic antigen-I” and alkaline phosphatase in continuous passage. When injected into immunodeficient mice, mC57ES1 cells consistently differentiated into derivatives of all three embryonic germ layers. When mC57ES1 cells were transferred into ICR mice blastocysts, 4 chimeric mice have been obtained. One male of them revealed successful germ-line transmission. Conclussion We have obtained C57BL/6J ES cell lines with a potential germ-line contribution, which can be used to generate transgenic and gene knock-out mice. 展开更多
关键词 C57BL/6J mice embryonic stem es cell ICR mice blastocysts germ-line competent
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BALB/c小鼠胚胎干细胞系的建立及其嵌合体小鼠的获得 被引量:28
8
作者 黄冰 陈系古 +4 位作者 邓新燕 林以理 陈颖青 黄春浓 梁英杰 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期28-32,共5页
目的:建立BALB/c小鼠胚胎干细胞系,并用于制作嵌合体小鼠。方法:从BALB/c小鼠囊胚内分离培养内细胞团块。建系后,进行C_(57)BL/6小鼠受体囊胚腔注射,制作嵌合体小鼠。结果:建立了我国第一株BALB/c小鼠胚胎干细胞系。该细胞系具有典型的E... 目的:建立BALB/c小鼠胚胎干细胞系,并用于制作嵌合体小鼠。方法:从BALB/c小鼠囊胚内分离培养内细胞团块。建系后,进行C_(57)BL/6小鼠受体囊胚腔注射,制作嵌合体小鼠。结果:建立了我国第一株BALB/c小鼠胚胎干细胞系。该细胞系具有典型的ES细胞形态,碱性磷酸酶强阳性,核型正常以及具有分化为三种胚层组织的能力,并已产生5只嵌合体小鼠。结论:建立的BALB/c小鼠胚胎干细胞系具有胚胎干细胞的各种特点,可用于体内外诱导分化研究。在进一步观察生殖系嵌合情况后,决定是否可应用于基因打靶等转基因动物的制作。 展开更多
关键词 BALB/C小鼠 胚胎干细胞系 嵌合体 建系
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曼氏裂头蚴感染小鼠血清IgG抗体动态变化 被引量:3
9
作者 李楠 崔晶 +5 位作者 王书伟 李旭旭 王莉 姜鹏 蔺西萌 王中全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期837-839,共3页
目的观察小鼠实验感染曼氏裂头蚴后不同时间血清IgG抗体水平的变化。方法 40只小鼠随机分为5组,每组8只,1-5组小鼠采集尾静脉血后分别经口感染裂头蚴1、2、4、6及8条。感染后1周开始每周尾静脉采血,分离血清,至感染后18周。应用裂头蚴... 目的观察小鼠实验感染曼氏裂头蚴后不同时间血清IgG抗体水平的变化。方法 40只小鼠随机分为5组,每组8只,1-5组小鼠采集尾静脉血后分别经口感染裂头蚴1、2、4、6及8条。感染后1周开始每周尾静脉采血,分离血清,至感染后18周。应用裂头蚴排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原ELISA检测血清中抗裂头蚴IgG抗体水平。结果 2条裂头蚴感染小鼠感染后2周的血清抗体阳性率为87.5%(7/8),感染后3周升至100%(8/8);1、4、6及8条裂头蚴感染小鼠感染后2周抗体阳性率即达100%(8/8)。5组小鼠均是在感染2~4周后血清抗体水平快速升高,感染后5~7周达峰值,之后抗体水平稍有下降,至感染后第18周抗体阳性率仍均为100%。5组小鼠感染裂头蚴后1~18周血清抗体水平间的差异有统计学意义(F=245.296,P〈0.05),且抗体水平随感染剂量的增加而升高。结论小鼠感染不同剂量裂头蚴后2周即可检出血清抗裂头蚴抗体,ES抗原ELISA对不同感染度小鼠均有早期诊断价值。 展开更多
关键词 裂头蚴 裂头蚴病 ELISA 排泄分泌抗原 小鼠
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小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化 被引量:7
10
作者 王洁 崔晶 王中全 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第4期266-268,共3页
目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组(每组10只),分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染300条幼虫,感染后1~6周每周尾部静脉采血,... 目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组(每组10只),分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染300条幼虫,感染后1~6周每周尾部静脉采血,6周后每2周尾部静脉采血,至感染后20周,用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清中抗旋毛虫IgG抗体水平。结果小鼠感染旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫后3~5周,血清IgG抗体水平快速升高,至感染后第8周达高峰,此后旋毛虫和乡土旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平缓慢下降,布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平迅速下降;小鼠感染伪旋毛虫后3~5周血清IgG抗体水平快速升高,至第16周达高峰,之后缓慢下降。5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平差异具有显著性(P<0.05)。结论5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平和动态变化不同;旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染的血清学诊断及流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 乡土旋毛虫 布氏旋毛虫 伪旋毛虫 纳氏旋毛虫 ELISA 排泄分泌抗原 小鼠
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具生殖系嵌合能力的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系的建立 被引量:2
11
作者 颜桂军 顾正 +3 位作者 罗金平 于合国 王健 左嘉客 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期321-325,i001,共6页
目的:建立能实现种系传递的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系。方法:从C57BL/6J小鼠3.5d的囊胚中分离培养内细胞团。经体外适宜培养建系后,将C57BL/6J胚胎干细胞(ES)注入ICR小鼠受体囊胚腔,制备嵌合体小鼠。结果:成功地建立了3个C57BL/6J小鼠... 目的:建立能实现种系传递的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系。方法:从C57BL/6J小鼠3.5d的囊胚中分离培养内细胞团。经体外适宜培养建系后,将C57BL/6J胚胎干细胞(ES)注入ICR小鼠受体囊胚腔,制备嵌合体小鼠。结果:成功地建立了3个C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系,该C57BL/6JES细胞呈集落状生长,正常稳定的核型率>80%,具高水平的磷酸酶活性,并表达ES细胞特殊性细胞表面标记SSEA-1,不表达SSEA-3和SSEA-4;体内外的分化实验也证实mC57ES1具向三胚层组织分化的能力。经显微注入ICR小鼠囊胚腔中,产生4只嵌合体小鼠,经证实其中1只为种系嵌合小鼠。结论:建立了能实现种系传递的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系,该系的ES细胞可用于今后制备转基因动物和基因敲除动物。 展开更多
关键词 C57BL/6J小鼠 胚胎干细胞 ICR小鼠囊胚 种系嵌合体
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昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养 被引量:2
12
作者 杨恕玲 董雅娟 +4 位作者 柏学进 程明 李建栋 王雪红 董方圆 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期422-426,共5页
利用昆明小鼠13.5dpc的胚胎制备小鼠胚胎成纤维细胞,并以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层;收集3.5dICR小鼠的囊胚和桑椹胚进行体外培养,筛选纯化ES细胞集落,使其稳定传代后,对其形态学和生物学性状进行初步鉴定,获得阳性细胞集落。
关键词 昆明小鼠 胚胎干细胞 饲养层 分离培养
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通过胚胎干细胞途径获得的嵌合体小鼠中neo基因在各组织中的分布 被引量:2
13
作者 姚玉成 熊俊 +2 位作者 王新民 李建秀 胡以平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1116-1119,T001,共5页
为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回... 为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回输到 5只假孕小鼠 ,在子代中得到了携带有neo基因的嵌合体小鼠。通过对嵌合体小鼠各组织PCR分析发现 ,neo基因可以在皮肤、肝脏。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 neo基因 嵌合体小鼠 组织分布
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人类α-actin启动子真核表达载体的构建及应用 被引量:3
14
作者 杨玉艾 孙永科 +1 位作者 华进联 窦忠英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1093-1098,共6页
利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较... 利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较,发现在本实验室条件下,质粒DNA浓度以3.0~5.0μg/mL,转染时间约在2~3h最佳。200μg/mL的G418较适宜于靶细胞的转染与筛选。得到表达心肌a—actin和GFP的小鼠ES细胞,基本维持小鼠ES细胞的形态。PCNA染色结果表明,转染后的小鼠ES细胞具有增殖能力。α—actin抗体免疫组化染色结果表明,转染后细胞表达α-actin和GFP,揭示构建的真核表达载体pEGFP-N1-α-actin-P转染小鼠ES细胞,可能促进其向心肌细胞分化并对其筛选。 展开更多
关键词 人类ractin启动子 真核表达载体 小鼠es细胞 心肌细胞
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同源重组技术研究进展 被引量:10
15
作者 马先勇 姚开泰 《生物工程进展》 CSCD 1996年第3期16-23,共8页
同源重组是近年来迅速发展起来的对细胞染色体基因组中某一特殊基因进行定向操作,以便借助转基因动物手段来精确研究基因结构与功能及表达调控的技术。本文对同源重组发生的分子机理、实验设计策略、打靶细胞的筛选和富集方法,近年来... 同源重组是近年来迅速发展起来的对细胞染色体基因组中某一特殊基因进行定向操作,以便借助转基因动物手段来精确研究基因结构与功能及表达调控的技术。本文对同源重组发生的分子机理、实验设计策略、打靶细胞的筛选和富集方法,近年来在这一领域中所取得的主要成就及应用前景进行了较全面的评述。 展开更多
关键词 同源重组 基因结构 分子模型
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内皮抑素治疗结肠癌小鼠模型的实验研究 被引量:1
16
作者 段全红 任斌 +2 位作者 徐万鹏 徐先琴 刘冲 《潍坊医学院学报》 2007年第6期529-531,I0001,共4页
目的观察内皮抑素(endostatin,ES)对小鼠结肠癌移植瘤的治疗作用,并探讨其对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达和微血管密度(MVD)的影响。方法随机将16只结肠癌荷瘤小鼠分为实验组(ES组)与对照组(NS组)。... 目的观察内皮抑素(endostatin,ES)对小鼠结肠癌移植瘤的治疗作用,并探讨其对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达和微血管密度(MVD)的影响。方法随机将16只结肠癌荷瘤小鼠分为实验组(ES组)与对照组(NS组)。实验组左侧腋部皮下注射ES 6mg/kg,对照组于左侧腋部皮下注射0.9%生理盐水0.2ml,1次/d,连用14d。用药结束后测量肿瘤体积并计算抑瘤率,检测VEGF,计数微血管密度,分析NS组与ES组肿瘤体积、VEGF及微血管密度差异的显著性。结果ES组肿瘤平均体积小于NS组,ES组平均体积为(3892.74±820.14)mm^3,NS组平均体积为(2686.84±1382.24)mm^3,差异有显著性(P<0.05);ES组VECF表达低于NS组(P<0.05);ES组MVD计数低于NS组(P<0.05)。结论内皮抑素能通过直接抑制肿瘤细胞分泌VEGF来减少肿瘤血管的形成达到抑制肿瘤生长的目的。 展开更多
关键词 内皮抑素 小鼠 结肠癌 血管内皮生长因子 微血管密度
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小鼠皮肤成纤维细胞的体细胞核移植 被引量:2
17
作者 曹鸿国 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期559-563,共5页
取成年小鼠唇部皮肤进行培养, 分离成纤维细胞并血清饥饿培养1 周, 用作核供体。对成年小鼠进行超排, 取卵母细胞用作核受体,核移植重构胚经SrCl2 激活处理6 h后, 同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养, 把发育到早期囊胚的重构胚转... 取成年小鼠唇部皮肤进行培养, 分离成纤维细胞并血清饥饿培养1 周, 用作核供体。对成年小鼠进行超排, 取卵母细胞用作核受体,核移植重构胚经SrCl2 激活处理6 h后, 同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养, 把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上, 添加ES细胞条件培养液,消化分离ICM,然后接种培养, 对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示, 小鼠唇部皮肤成纤维细胞为核供体, 核移植重构胚2 细胞率为54 05%, 桑椹胚率17 14%, 囊胚率6 90 %, 对照组卵丘细胞的核移植重构胚2 细胞率为60 00%, 桑椹胚率21 85%, 囊胚率11 69 %, 但2种供体细胞在支持核移植重构胚发育能力上差异不显著。成纤维细胞重构囊胚中6个囊胚分离出ES细胞样集落, 3个ES细胞样集落可稳定传代; 对照组卵丘细胞重构囊胚中9个囊胚中分离出ES细胞样集落, 5个ES细胞样集落可稳定传代。从核移植重构胚中分离出的ES细胞样集落具有岛状或巢状群体生长形态,生长旺盛的集落可自发分化成单个散在或片状存在的上皮样或梭形细胞, 碱性磷酸酶检测为阳性, 常规冻存复苏, 仍显示ES细胞特征。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 体细胞核移植 es细胞 输卵管上皮细胞 胎儿成纤维细胞 成年小鼠 2-细胞 卵丘细胞 重构胚 SrCl2 条件培养液 碱性磷酸酶 血清饥饿 卵母细胞 早期囊胚 接种培养 发育能力 供体细胞 生长形态 细胞特征 核供体
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小鼠胚胎干细胞成纤维细胞液养层的制备 被引量:1
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作者 刘发央 王志勇 《草原与草坪》 CAS 2005年第2期32-34,共3页
采用受孕12.5 d、13.5 d、14.5 d的ICR品系小鼠的胚胎制备原代成纤维细胞,在相同条件下观察不同胚龄胚胎成纤维细胞的增殖情况。结果表明受孕13.5 d胚胎为分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胚龄。分离出的原代成纤维细胞在37 ℃时,用0.... 采用受孕12.5 d、13.5 d、14.5 d的ICR品系小鼠的胚胎制备原代成纤维细胞,在相同条件下观察不同胚龄胚胎成纤维细胞的增殖情况。结果表明受孕13.5 d胚胎为分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胚龄。分离出的原代成纤维细胞在37 ℃时,用0.25%胰蛋白酶0.02%EDTA消化组织的时间为3 min,可在培养3 d后传代。F1代和F2代较F3代成纤维细胞分泌的抑制干细胞分化因子LIF的量要多。小鼠胚胎成纤维细胞冻存于-135 ℃^-150 ℃10 个月,复苏后能正常传代。丝裂霉素C抑制胚胎成纤维细胞增殖的最适浓度为10μg/105细胞,作用时间为2.5 h,丝裂霉素C处理过的胚胎成纤维细胞可以在12 d内即不增殖也不死亡,但在6 d内使用效果最佳。 展开更多
关键词 小鼠 胚胎 MEF 丝裂霉素-C 胚胎干细胞
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用高代数小鼠胚胎干细胞制作嵌合体小鼠
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作者 刘容珍 李万利 +2 位作者 施振旦 陈学进 田允波 《佛山科学技术学院学报(自然科学版)》 CAS 2008年第1期68-72,共5页
为了检验胚胎干的全能性,通过用1日龄卵巢移植后,经体外受精得到的囊胚的饲养建立了小鼠的ES系,并在较高的代数下(第41代)制出了5只毛色嵌合体小鼠,但是没有得到性腺嵌合的小鼠。研究结果证实,高代数的ES细胞仍然具有构建嵌合体的能力。
关键词 胚胎干细胞 嵌合体 显微注射 小鼠
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四倍体补偿技术的建立及其应用 被引量:2
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作者 匡颖 孙霞 +4 位作者 邓涛 卢希彬 孙瑞林 王铸钢 费俭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期304-311,共8页
常规基因剔除小鼠的获得主要是利用ES细胞的全能性先获得嵌合体小鼠,再利用ES细胞的生殖系传递能力,通过嵌合体与野生型小鼠的交配获得杂合子小鼠.而四倍体补偿技术则可绕过嵌合体小鼠阶段,直接获得基因修饰杂合子小鼠.利用电融合技术和... 常规基因剔除小鼠的获得主要是利用ES细胞的全能性先获得嵌合体小鼠,再利用ES细胞的生殖系传递能力,通过嵌合体与野生型小鼠的交配获得杂合子小鼠.而四倍体补偿技术则可绕过嵌合体小鼠阶段,直接获得基因修饰杂合子小鼠.利用电融合技术和Piezoelectric microinjection显微注射技术建立了四倍体补偿技术,小鼠四倍体胚胎的获得率(电融合率)为(93.01±1.37)%,经体外培养囊胚形成率为(82.49±2.08)%.通过显微注射方法将2种129品系小鼠来源的ES细胞(CJ7和SCR012)注射到四倍体囊胚腔中,获得了完全ES细胞来源的小鼠,ES鼠的获得率分别为2.7%和8.3%.经微卫星DNA检测,成体小鼠的10个被检测组织均为129小鼠来源的.同时,也利用基因修饰的ES细胞进行了研究,获得了2种基因修饰的完全ES细胞来源的杂合子小鼠,部分小鼠具有繁殖能力,经繁育已获得了纯合子,其中凝血因子Ⅷ基因敲除小鼠获得了预期的血友病小鼠表型.上述结果说明四倍体补偿技术可应用于基因修饰小鼠的制备. 展开更多
关键词 四倍体补偿技术 es 基因修饰 近交系es细胞
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