眼络通方对大鼠视网膜静脉阻塞模型ET-1/ETAR信号通路的影响

目的探讨眼络通对大鼠视网膜静脉阻塞(RVO)模型ET-1/ETAR信号通路的影响。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(Control),模型对照组(Model)、波生坦组(Bosentan)、眼络通组(Yanluotong),以光化学法建立RVO模型SD大鼠各12只,连续给药3周。在第3周时处死SD大鼠,取血清用于Elisa检测,取视网膜组织用于荧光定量PCR与免疫荧光检测,测定其中ET-1、ETAR、VEGF、TNF-α、IL-6蛋白与mRNA表达水平。结果Elisa检测发现模型对照组血清IL-6、TNF-α、VEGF较空白对照组升高(P<0.01),波生坦和眼络通方干预3周后比模型对照组均下降(P<0.01);免疫荧光显示相对于空白对照组,RVO模型对照组ET-1、IL-6、TNF-α、VEGF表达量均增多,波生坦和眼络通方治疗后表达量均呈下降趋势。对于ET-1、ETAR、VEGF mRNA表达量,模型对照组较空白对照组上调(P<0.01),波生坦和眼络通方均能下调上述基因mRNA的表达(P<0.01)。结论ET-1/ETAR信号通路在RVO发病过程中被异常激活,眼络通方可通过ET-1/ETAR信号通路发挥抑制视网膜血管收缩、减轻炎症反应、抑制VEGF作用,干预RVO病情进展。

CEC、ET、ETAR与脑外伤后脑水肿、缺血性脑损害关系的实验研究

目的研究脑外伤后脑水肿、缺血性脑损害的发生与循环内皮细胞（CEC）、内皮素（ET）及内皮素A受体（ETAR）变化的关系。方法建立颅脑撞击伤的动物模型，于伤后不同时相测定CEC、血、CSF、不同脑区ET含量，原位杂交检测ETARmRNA表达，测定脑血流量、脑含水量，光镜、电镜观察神经病理学改变。结果脑外伤后CEC、ET含量显著升高，ETARmRNA表达增强，并与伤情轻重呈正相关。结论脑外伤后脑血管内皮细胞脱落致血脑屏障（BBB）破坏，升高的ET与ETAR结合使血管通透性增高，脑血流减少，参与了脑水肿、缺血性脑损害的发生。

ETAR-C58多肽生物合成及其对黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭的影响

目的获得ETAR羧基末端58个氨基酸的多肽(ETAR-C58),探讨其对黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭的影响。方法通过PCR方法获得ETAR-C58碱基序列,将其克隆到原核表达载体pWaldoGFPe,转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达后,经镍柱亲和层析和分子筛层析,得到重组融合多肽,SDSPAGE分析多肽表达量和纯度,免疫印迹做进一步的鉴定。最后采用Transwell法测定A375细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建了重组表达载体pWaldo-ETAR-C58,优化表达条件获得了约90%的可溶性蛋白表达量,纯化获得纯度高达95%的融合多肽,免疫印迹的曝光条带和重组多肽的大小相一致,加入2μmol/L ETAR-C58后,A375细胞的迁移和侵袭能力显著下降(P <0.05)。结论 ETAR-C58多肽具有抗黑色素瘤的活性,为下一步的临床应用奠定了良好的基础。

中西医结合治疗消化性溃疡疗效观察

目的:探讨中西医结合治疗消化性溃疡(PU)的临床疗效及机制.方法:将PU患者120例随机分为6组,另选10个经内镜证实无PU,但有消化道症状者为对照组.在用药1个月后观察临床疗效.结果:健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗消化性溃疡在临床证候及症状改善方面优于雷尼替丁胶囊(P＜0.01～0.05);健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊、健胃愈疡颗粒、雷尼替丁胶囊在治疗溃疡愈合率、Hp清除率方面无显著差异(P＞0.05).健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗消化性溃疡可显著上调胃黏膜MUC5AC mRNA的表达(P＜0.01);下调ETAR(内皮素-1A受体) mRNA的表达(P＜0.01).结论:健胃愈疡颗粒+雷尼替丁胶囊治疗PU具有明显优势,其治疗机制可能是上调MUC5AC mRNA的表达改善胃黏膜黏蛋白屏障保护作用,下调ETAR mRNA的表达改善胃黏膜血流.

应激状态下大鼠胃黏膜组织中内皮素-1A受体mRNA的表达及其意义

应激性溃疡(SU)是危重疾病的常见严重并发症,其发生机制尚不清楚。研究表明内源性缩血管因子内皮素(ET)-1与SU密切相关,而关于其受体表达在SU发生中作用的研究尚少。目的:探讨ET-1A受体(ETAR)mRNA表达在SU发生中的作用和意义。方法:以冷束缚应激(CRS)制备大鼠胃溃疡模型,应激前和应激1 h、3 h、6 h、9 h、12 h后分别采用放射免疫测定、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和斑点杂交等方法,动态检测血浆和胃黏膜组织中的ET-1和胃黏膜组织中的ETAR mRNA水平,同时检测胃黏膜血流量(GMBF)和溃疡指数(UI)等指标的变化情况。结果:与正常对照组相比,各应激组大鼠血浆和胃黏膜组织中的ET-1水平均显著升高(P<0.05),GMBF显著下降(P<0.01),UI显著增加(P<0.01);胃黏膜组织中的ET-1水平与UI呈显著正相关(r=0.98,P<0.01),与GMBF呈显著负相关(r=-0.89,P<0.05),而血浆ET-1水平与GMBF、UI相关性不显著(r=-0.61,0.43,P>0.05)。GMBF与UI呈显著负相关(r=-0.98,P<0.01)。RT-PCR和斑点杂交显示各应激组大鼠胃黏膜组织中ETAR mRNA的表达水平较正常对照组显著升高(P<0.01),并与胃黏膜组织中的ET-1水平和UI呈显著正相关(r=0.93,0.95,P<0.01)。结论:在CRS诱发大鼠急性胃黏膜损伤的过程中,胃黏膜组织可显著增加ET-1的合成分泌和ETAR

心室成纤维细胞促进新生大鼠心肌细胞肥大的作用

【目的】研究新生大鼠心室成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大的作用。【方法】成纤维细胞和心肌细胞培养。【结果】成纤维细胞条件培养液能明显增大心肌细胞的表面积 ,增加心肌细胞的蛋白含量和 [3 H] 亮氨酸 ([3 H] Leu)的掺入 ,上述作用以第 3天的条件培养液作用最强 ,具有剂量依赖性。内皮素A受体 (ETAR)拮抗剂BQ12 3 能部分阻断成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大作用 ,而血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的Ⅰ型受体拮抗剂CV11974和α 肾上腺素受体拮抗剂酚胺唑啉(regitin)却无此效果。百日咳毒素 (PTX)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂staurosporine(ST)也能部分阻断成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大作用。【结论】成纤维细胞条件培养液 (FCGM)中含有促使心肌细胞肥大的物质 ,这些物质可能是内皮素 1(ET 1)等 ,培养液的促肥大作用可能与PTX敏感的G蛋白及PKC有关。

缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的检测

目的 采用夹闭双肾动脉方法建立缺血性肾损害动物模型 ,探讨缺血性肾损害时肾小球系膜细胞内皮素A受体mRNA表达的情况。方法 应用地高辛标记的ETARcDNA探针进行的原位杂交检测肾脏系膜细胞的内皮素A受体mRNA的表达 ,结果 显示缺血性肾损害组动物的肾脏系膜细胞内此素A受体mRNA表达明显高于假手术对照组 ,P <0 0 5。提示

内皮素A受体拮抗剂GF009防治肺动脉高压的研究

目的：评价我所自行合成的选择性ETAR拮抗剂GF009对缺氧性肺动脉高压的防治作用；方法：在整体动物模型上考察GF009（2mg／kg）静脉注射对ET-1（1．5nM／kg）升压效应的抑制作用；Wistar大鼠置于模拟海拔5000米高度的低压低氧舱内，连续缺氧2周，同时伴随皮下给予GF009和前期合成的ETP508或生理盐水，2周取出行右心导管术测定大鼠肺动脉压力，测压完毕后称取右心室和左心室及室间隔，计算右心肥厚指数，综合评价GF009对缺氧性肺动脉高压的预防作用。结果：ETAR拮抗剂GE009能够明显拮抗ET-1的升压作用，抑制百分率（1％）为36．85％；ETP50850mg／kg预防防给药能够预防缺氧诱发的肺动脉高压的发生，同时可使右心室肥厚得到改善，而GF00925、50、100mg／kg能够降低缺氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉压力，平均肺动脉压抑制百分率均超过30％，但是对缺氧大鼠的右心室肥厚没有改善作用。结论：选择性ETAR拮抗剂GF009能够降低缺氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉压力，但是对右心室肥厚没有影响。

泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A表达的影响

目的 :观察造影剂泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A (endothelinreceptorA ,ETAR)表达的影响。方法 :应用链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射建立SD大鼠糖尿病肾病模型。设对照组、模型组、泛影葡胺组 ,BQ1 2 3 +泛影葡胺组 ,利用RT PCR和westernblot方法检测心肌组织ETAR表达的变化。结果 :与对照组比较 ,各组糖尿病大鼠心肌ETAR表达上调 ,CM组上调尤为明显(P <0 .0 5) ,注射BQ1 2 3后 ,可见其表达下调。结论 :有糖尿病肾病基础病史时 ,泛影葡胺可引起心肌组织ETAR表达变化 ,从而影响心脏功能 ;预防性使用选择性ETAR拮抗剂BQ1 2 3 ,可下调ETAR蛋白表达 。

患者参与式饮食管理对胃癌术后患者营养状况的影响研究

Kim等[1]提出患者参与式饮食管理模式(patientparticipation-baseddietaryintervention,PPDI),并将该模式运用到肿瘤术后患者中取得很好效果。该模式是以患者为中心,医护人员与其建立合作关系,共同参与饮食决策。我国学者李先荣和黄远泉[2]将该模式引入到糖尿病患者中,效果可观。我科也将该模式运用到胃癌术后患者中,来评估患者营养状况,现报告如下。

新化合物Ⅲ21对大鼠心肌内皮素受体(ET_A R,ET_B R)亚型的亲和力和选择性

目的:研究新化合物Ⅲ21与大鼠心肌内皮素受体(Endothelin receptor,ETR)的亲和力及结合特点。方法:采用放射配体受体结合分析方法,通过^(125)Ⅰ-ET_1与大鼠左心室膜受体结合,观察新化合物Ⅲ21对ETR的亲和力及对ET_AR,ET_BR两种亚型的选择性,分别求IC_(50)值。结果:Ⅲ21对^(125)Ⅰ-ET_1与ETR的结合有较强的抑制作用,在10^(-7)mol·L^(-1)浓度时,使其结合率降为原来的(43．1±13．7)%。Ⅲ21抑制^(125)Ⅰ-ET_1与ET_AR和ET_BR结合的IC_(50)值分别为10．21nmol·L^(-1)和1．65μmol·L^(-1),两者比值(ET_AR的选择性)为161．76。结论:新化合物Ⅲ21与ETR有较强的亲和力,并且对ET_AR具有较高的选择性,可能是一种选择性ET_A受体拮抗剂。

肺动脉高压治疗新方法——内皮素受体A治疗性疫苗

肺动脉高压(PAH)是一种慢性致死性疾病,现有针对PAH的药物虽有一定的治疗效果,但其预后仍不尽人意,需要探索新的治疗方法。治疗性疫苗是治疗PAH的新方法。内皮素(ET)系统,尤其是ET-1和内皮素受体A(ETAR)的异常激活与PAH的发病机制密切相关,ETAR是PAH治疗性疫苗的理想靶点。我们最近成功研发出一种以ETAR为靶点的PAH治疗性疫苗ETRQβ-002。该疫苗能显著降低两种PAH动物模型的肺动脉压,改善甚至逆转肺小动脉重构和右心室肥厚,且没有发现明显的靶器官免疫损害和肝肾功能异常,说明ETRQβ-002是一种能有效并且安全地治疗PAH的治疗性疫苗。

山姜素对大鼠妊娠高血压的治疗作用及机制

目的 探究山姜素对大鼠妊娠高血压的作用及可能机制。方法 雌雄大鼠以2∶1合笼饲养,妊娠后采用随机数字表法将孕鼠分为对照组(Control组)、妊娠高血压组(PIH组)和山姜素组(Alpinetin组),每组10只。测量大鼠血压和24 h尿蛋白量;HE染色观察胎盘组织形态学变化;免疫荧光检测胎盘组织ET-1蛋白表达;qRT-PCR检测胎盘组织PPAR-γ和ETAR mRNA表达;Western blot检测胎盘组织PPAR-γ和ETAR蛋白表达。结果 山姜素降低妊娠高血压大鼠血压和24 h尿蛋白量,改善胎盘组织形态,降低胎盘组织ET-1和ETAR表达,增加胎盘组织PPAR-γ表达。结论 山姜素改善大鼠妊娠高血压,其作用机制可能与激活PPAR-γ,抑制ET-1/ETAR信号通路有关。

调和肝脾理气止痛方治疗消化性溃疡疗效观察

[目的]探讨调和肝脾理气止痛方治疗消化性溃疡(PU)的临床疗效及机制。[方法]将PU患者80例随机分为治疗组与对照组,每组40例。治疗组服用调和肝脾理气止痛方治疗,对照组服用奥美拉唑治疗;用药6周后观察并比较2组临床疗效。[结果]治疗组在临床疗效改善方面优于对照组(P<0.01),2组在溃疡愈合率、幽门螺杆菌清除率方面差异无统计学意义(P>0.05),在溃疡愈合患者1年复发率方面,治疗组明显低于对照组(P<0.01)。治疗组可显著上调胃黏膜MUC(黏蛋白)5AC蛋白的表达(P<0.01);下调内皮素-1A受体(ETA R)蛋白的表达(P<0.01)。[结论]调和肝脾理气止痛方治疗PU具有明显优势,其治疗机制可能是通过上调MUC5AC蛋白的表达改善胃黏膜黏蛋白屏障保护作用、下调ETA R蛋白的表达改善胃黏膜血流来实现的。