EUSA提交Erwinase的BLA

EUSAPharma公司宣布其已经向美国食品和药品监督管理局（FDA）提交了一份生物制品许可申请（BLA），以使Erwinase（来自菊欧文菌的L-天冬酰胺酶）（Ⅰ）能够用于治疗对大肠杆菌衍生的天冬酰胺酶过敏的急性成淋巴细胞性白血病患者。（Ⅰ）已经在很多国家通过了审批，

ELISA法检测牛奶中链霉素残留量

从抗原的制备、抗体的获得、酶结合物的合成等基础入手,建立了牛奶中链霉素残留量快速筛选检测方法,检测历时60min,方法的临界值为110μg/L。经试验证明该方法检测限可达20μg/L或以下,奶样用水稀释后可直接测定,批内变异系数小于20%,板间变异系数小于30%,200μg/L质量浓度处空白奶样添加回收率在60%-110%,符合快速筛选方法的要求。

宫颈癌SCCAg检测及其临床意义

目的:探论鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)对宫颈癌的诊断,治疗前后的动态变化规律及与临床病理生理特征的关系。方法:用ELISA法检测145例治疗前后的宫颈癌患者和300例复查的宫颈癌患者。结果:1)SCCAg对于宫颈癌的诊断灵敏度为77.24%,特异度为98%。SCCAg对于Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌阳性诊断率为66.67%,对Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌诊断率87.71%。两者有显著差异(P<0.005)。2)治疗后宫颈癌患者SCCAg水平(0.235±0.178ng/ml)较治疗前(5.048±6.234ng/ml)显著下降(P<0.001)。3)治疗后复发转移的宫颈癌患者SCCAg水平(9.372±10.252ng/ml)与治疗前患者(5.048±6.234ng/ml)比较,SCCAg水平明显升高(P<0.001)。4)SCCAg在宫颈癌的表达与临床分期,脉管浸润,盆腔淋巴结转移有关(P<0.01～0.001),而与患者年龄,细胞类型及肿瘤生长方式无关。结论:SCCAg不仅可以作为宫颈鳞癌的特异性诊断指标,同时用于了解治疗前患者病灶扩散情况,治疗中及治疗后判定疗效及预后的监测。

应用生物素-链霉亲和素的酶联免疫吸附法检测谷物中的玉米赤霉烯酮

基于生物素-链霉亲和素的酶联免疫吸附法(ELISA),建立了玉米赤霉烯酮(ZEN)的ZEN-ELISA检测方法。该方法的检测灵敏度为0.8 ng/ml,批内、批间变异系数分别为5.1%和8.6%,平均加样回收率为91.2%;抗ZEN单克隆抗体与玉米赤霉醇的交叉反应度为12.3%,而其与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应;相关试剂在4℃存180 d后各检测参数基本无变化;该方法与商品ELISA试剂盒对同一样品ZEN测定结果的相关系数为0.943 2。说明该方法的特异性和稳定性较好,测定结果准确,可用于ZEN的大量筛查。

抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用

目的:制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法,对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究。方法:将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株。常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定。通过对不同抗体组合的分析和条件的优化,建立检测过敏原的双抗体夹心ELISA方法。结果:经细胞融合、筛选及克隆化,共获得9株稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株,其中5株亲和力较高。建立了双抗体夹心ELISA相对定量检测方法,该方法灵敏度达到870 U/L,平均回收率为107.81%,批内变异系数平均为6.7%,批间变异系数平均为9.3%,可用于A群链球菌制剂中青霉噻唑蛋白的检测。结论:成功地制备了抗青霉素的mAb,并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法。

溶组织内阿米巴ELISA试剂盒在阿米巴病调查的应用

目的了解景洪市爱尼族人群阿米巴病流行情况,为阿米巴病监测和防治提供依据,并评价ELISA试剂盒在阿米巴病调查应用的效果。方法以整群随机抽样爱尼族村寨,逐户收集新鲜粪便标本,用观察法、碘液涂片镜检法和TECHLAB第二代溶组织内阿米巴ELISA试剂盒对照检测粪便标本溶内阿米巴。结果镜检278例,E·h/E·d感染为9·71%;ELISA检测366例,E·h感染率为9·29%;镜检和ELISA共同阳性15例,占镜检阳性的55·56%;粪便观察和ELISA检测结果诊断5例为肠阿米巴病,发病率为1·37%,E·h致病率为14·71%。结论景洪爱尼族阿米巴病流行严重,应加强阿米巴病的监测和防治工作,同时积极推广新技术。

三种乙型肝炎血清标志物检测方法的成本-效果分析

目的对三种乙型肝炎血清标志物(HBVMs)的测定方法进行成本-效果分析,找出低成本高效率的检测方法。方法分别用ELISA、胶体金免疫层析法(金标)、化学发光法检测血清HBVMs,同时按照各类成本的特征做实际测算。结果三法方法检测结果的符合性良好,其灵敏性依次为化学发光法,ELISA和金标法;单位成本以化学发光法最高,依次为ELISA、金标法,分别为744．17元、317．23和42．22元。批量成本则以 ELISA为最低。结论 ELISA灵敏性高,成本低,适用于普通病人筛查;金标法简便易行,可用于急诊病人快速检测;化学发光法因其价格昂贵,可用于HBVMs为临界值的病人的确证及某些特殊病人等。

规模化猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

此试验用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对规模化猪场的1498份猪血清进行了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪细小病毒病(PP)、猪日本乙型脑炎(JE)、猪瘟(HC)以及猪圆环病毒2型(PCV2)感染的抗体检测。检测结果表明,猪瘟免疫抗体的阳性率为69.0%(156/226);猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病免疫抗体的阳性率分别为79.9%(175/219)、87.2%(191/219)和74.8%(217/290);猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体的阳性率为58.8%(67/114),未免疫抗体的阳性率达61.5%(150/244);猪圆环病毒2型感染未免疫抗体的阳性率为66.7%(98/147)。结果表明,引起繁殖障碍的疾病中,猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病的免疫效果较好;而猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果较差,并与猪圆环病毒病困扰某些猪场。根据检测结果,提出了相应的防制措施。

间接ELISA快速检测猪PRV抗体方法的建立

用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化伪狂犬病病毒(PRV)作抗原,建立了检测PRV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为3.2 mg/L,血清最佳稀释度为1∶80。试验结果表明,间接ELISA检测PRV抗体具有快速、敏感、特异等特点,适合于大量样品的检测,对畜群免疫效果的检测和免疫程序的制定有重要意义。

IL-18抗体对急性免疫性肝坏死动物模型的影响

目的探讨白细胞介素(IL) 18 抗体干预,了解IL 18 抗体对急性免疫性肝坏死动物模型的影响。方法取BALB/c 小鼠18 只,随机平分为三组A组(正常对照组);采用结核菌苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导法建立急性免疫性肝损伤模型B组(单纯病理组);抗体治疗组(C组)在模型形成前用IL 18抗体干预。实验结束取所有BALB/c小鼠肝组织,行病理学肝组织炎症活动度计分(HAI),血清IL 18由ELISA法检测,肝组织IL 18、肿瘤坏死因子α(INF α)、干扰素γ(IFN γ)由RT PCR检测。结果C组HAI 3 333±1 633,明显低于B组19 000±0 548(P<0 05);B组血清IL 18明显较C组增高(P<0 05);B组肝组织IL 18、IFN γ、INF αmRNA表达水平明显较C组增高(P<0 05)。结论IL 18、IFN γ、TNF α在急性免疫性肝坏死动物模型的形成中发挥重要作用,IL 18抗体可干预其形成。

应用纯化抗原检测唾液 尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较

目的寻求敏感性高、特异性强的幽门螺杆菌(helicobacterpylori,H.pylori)抗原和简便、可靠的检测H.pylori抗体的方法,用于诊断H.pylori感染。方法以多株H.pylori超声上清、重组H.pylori热休克蛋白A亚单位(rHspA)纯品和重组H.pylori热休克蛋白尿素酶B亚单位(rUreB)纯品混合物为抗原,采用ELISA方法对96例患者的唾液、尿液和血清同时进行检测。结果使用rHspA和rUreB混合纯品进行检测,特异性和敏感性明显优于H.pylori超声上清。诊断H.pylori感染的优劣顺序为:血清IgG、尿液IgG、唾液IgG、血清IgA、唾液IgA。结论混合基因工程纯化抗原进行H.pylori感染的检测,具有良好的临床应用前景。

市售猪肉及其组织中“瘦肉精”残留调查

采用德国r—Biopharm拜发公司试剂盒,用竞争性ELISA法对某市13个菜场共抽取40价瘦肉、30份猪肝、18份猪肾脏、30份猪肺、15价猪骨和30份猪血、30价猪毛,总计样品进行了瘦肉精残留检测。结果表明,在抽检的193份样品中共有38份瘦肉精含量大于1.0ng/g,占总数的19.7％,其中猪肝与猪毛的检出率最高。同时在瘦肉精含量大于1.0ng/g的样品中抽取9份,用GC/MS/MS法确证,结果与ELISA法相符。

6种抗-HCVELISA试剂应用评价

目的评价不同厂家抗-HCV ELISA试剂质量。方法使用2 NCU/ml质控血清和第5套抗HCV国家参考品对6种抗-HCV ELISA试剂作质量评价。结果6种厂家在灵敏度、重复性、阳性符合率存在一定差异。结论使用前对试剂进行质量评价,选用两种特异性、灵敏度、重复性较好的抗-HCV试剂,对筛选HCV非常重要。

MIF检测与胃癌临床病理特征之间的关系

目的探讨外周血中巨噬细胞移动抑制因子MIF浓度与胃癌病理特征之间的关系,同时验证外周血MIF浓度与胃癌组织MIF蛋白和mRNA之间的相关性。方法30例胃癌患者均为温州医学院附属第二医院手术并经病理活检证实,按照分化、分期、浸润深度、有无淋巴结转移分组,所有患者均在入院初检测外周血中MIF浓度,同时在手术后取胃癌标本检测MIFmR-NA和蛋白的变化,另取温州医学院附属第二医院经胃镜检查健康者10例。结果胃癌患者的MIFmRNA、MIF蛋白、MIF外周血中浓度较健康对照组明显增高(P<0.05),MIF浓度的高低与分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),MIF浓度≥8.96ng/ml患者生存率较MIF浓度<8.96ng/ml患者生存率明显下降(P<0.05),外周血MIF浓度与胃癌组织中MIFmR-NA、MIF蛋白具有明显相关性(P<0.05)。结论外周血MIF浓度与患者分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关,且可以很好预测胃癌组织中MIF基因和蛋白的变化情况。

4179例性病门诊患者沙眼衣原体ELISA法检测结果分析

目的 :了解ELISA方法在检测性病门诊患者标本沙眼衣原体的意义。方法 :收集本中心 1 999年～ 2 0 0 3年性病门诊患者共 41 79例尿道或宫颈拭子标本 ,进行衣原体抗原酶免疫 (ELISA)测定法检测。结果 :41 79例患者 ,沙眼衣原体检出率 1 1 0 % ,其中男性检出率 9 2 % ,女性检出率 1 4 1 %。高于快速胶体金法的 5 75 % ,高于细胞培养法的 6 3 3 % ,低于荧光PCR法 2 7 1 % ,结论 :ELISA法检测泌尿生殖道沙眼衣原体具有操作简便、敏感性和特异性较高 。

鼠青光眼模型中热休克蛋白27的表达及其作用(英文)

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)在鼠青光眼模型视网膜神经节细胞(RGCs)中的表达以及眼压对抗HSP27自身抗体的影响。方法:使用SPSS12.0软件将55只Wistar大鼠随机分为高眼压组(25只鼠)、sham对照(假手术)组(25只鼠)及正常对照组(5只鼠)。采用电凝鼠巩膜表面至少3组静脉及角膜缘周围血管,建立鼠青光眼模型。采用免疫组化和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法分别检测术后1,2,3,4及8wk视网膜中RGCs以及神经纤维层(RNFL)HSP27的表达、分布以及血清中抗HSP27抗体水平。结果:随着眼压升高及高眼压持续时间延长,高眼压组右眼RGCs中HSP27表达逐渐增强,与其左眼、sham对照组右、左眼和正常对照组右、左眼比较,差异均有统计学意义(P<0.001),且RNFL中也出现HSP27的表达。高眼压组血清中抗HSP27抗体水平在术后1wk轻度升高(P>0.05),随着眼压升高及高眼压持续至术后8wk,血清中HSP27抗体水平逐渐升高并稳定于较高水平,与sham对照组和正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:内源性HSP27表达增强可能在青光眼视神经病变中具有重要作用。