肠道病毒EV71 IgM抗体参考品的建立

目的建立肠道病毒EV71 IgM抗体检测用血清国家盘。 方法 通过收集手足口病感染早期患者的咽拭子和血清,对咽拭子病毒进行分离、鉴定、基因分型,通过血清中和试验及酶联免疫吸附试验（捕获法）的验证,确定EV71 IgM抗体阳性样品,组建EV71 IgM抗体国家参考品盘,并经3家实验室对国家参考品进行协同标定和确认。结果 12名患儿的咽拭子中均分离到EV71病毒,在RD细胞上引起细胞病变。 通过套式PCR扩增、序列测定后进化树分析确认均为流行的C4基因亚型 。每名患儿的双份血清均可中和EV71病毒,抗体效价为1∶512 － 1∶2048。 通过捕获法进行EV71 IgM抗体检测结果均为阳性 。 以此12份样品为原料制备EV71 IgM抗体阳性参考品,同时以12份EV71 IgM抗体阴性血清制备阴性参考品,建立了由12份阳性参考品、12 份阴性参考品、1 份最低检出限参考品和1份精密性参考品组成的肠道病毒EV71 IgM抗体参考血清盘。 通过3家实验室协同标定,各实验室间差异均无统计学意义。 结论 建立了EV71 IgM抗体检测参考血清盘,为相关检测试剂的质量控制和评价提供了标准。

EV71 IgM抗体均相酶联免疫检测方法的初步建立

目的 建立一种快速检测肠道病毒71型（EV71） IgM抗体的均相ELISA新技术.方法 首先克隆表达纯化EV71 VP1蛋白,使用生物素标记该蛋白.通过ELISA法摸索出Bio-EV71 VP1的最适抗原量为0.0375 μg.优化供体微球、受体微球、血清等实验反应体系,建立EV71 VP1的均相酶联免疫检测方法的IgM检测技术.使用EV71感染的手足口病（HFMD）患者和健康人血清进行均相酶联免疫检测方法检测评价,并与ELISA检测结果相比较.结果 获得EV71 VP1纯化蛋白并生物素化.摸索出均相酶联免疫检测方法的体系：5 μg/ml受体微球、0.037 5μg生物素化的VP1、20μg/ml供体微球、血清2μl,总体系为20μl.采用ELISA和均相酶联免疫检测方法检测方法对样本血清进行IgM检测.两种方法同时检出手足口病患者lgM阳性16份;14份ELISA法检出阴性样本中,均相酶联免疫检测方法法检出阳性6份.20份健康人血清,2种方法检测结果均为阴性.结论 本研究初步建立了EV71 VP1 IgM的均相酶联免疫检测方法.

肠道病毒EV71型和CA16型IgM抗体检测试剂盒的分析性能

目的 评价基于磁微粒化学发光法的肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)IgM抗体检测试剂盒的精密度、稳定性及方法学比对,并初步评价其临床应用价值。方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件和标准,对柯萨奇病毒A16型IgM抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)(CA16 IgM CMIA)和肠道病毒71型IgM抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)(EV71 IgM CMIA)进行分析性能评价。采用受试者工作特征曲线评估CA16 IgM CMIA及EV71 IgM CMIA与已上市酶联免疫法检测试剂的符合率。结果 CA16 IgM CMIA批内精密度CV为1.10%和1.63%,中间精密度CV为5.70%~7.20%,EV71 IgM CMIA批内精密度CV为2.80%和1.59%,中间精密度CV为2.91%~4.49%,试剂机载稳定性良好。临床病症与手足口病相似或病原结构与肠道病毒相近的其他病原体的高浓度抗体特异性血清对CA16 IgM CMIA和EV71 IgM CMIA的检测结果无影响,不存在交叉反应。CA16 IgM CMIA和EV71 IgM CMIA与已上市酶联免疫法检测试剂的总符合率分别为96.4%和98.9%。结论 基于磁微粒化学发光法的肠道病毒71型IgM抗体检测试剂盒和柯萨奇病毒A16型IgM抗体检测试剂盒具有良好的精密度和机载稳定性,与已上市酶免试剂对比性能良好,适用于临床大规模样本的检测。

EV71-IgM检测在手足口病诊断中的价值

目的:回顾性分析评价应用胶体法检测EV71-Ig M抗体与RT-PCR法检测EV71病毒在手足口病重症病例早期识别中的作用。方法:收治手足口病疑似病例1 252例,分别采用血清胶体金法检测EV71肠道病毒Ig M抗体,RT-PCR法检测患者大便中肠道病毒及肠道病毒71-RNA。结果:胶体金法检测EV71阳性率28.67%;RT-PCR法检测肠道病毒阳性率81.15%,EV71阳性率44.89%。其中金标法检测阳性5例,RT-PCR法检测阴性。结论:EV71胶体金法可作为EV71感染的初筛早期快检,在临床手足口病重症病例早期识别及治疗中具有重要意义。

手足口病EV71 IgM快速诊断试剂盒应用的对比评价

目的评价快速诊断试剂盒在及时确诊手足口病EV71感染,降低由EV71病毒引起的手足口病患儿死亡率方面的作用。方法对门诊和住院临床诊断手足口病病例,由县医院实验室采集血清,使用中国疾病预防控制中心提供的IgM快速诊断试剂盒通过酶联免疫法进行EV71抗体定性筛查。结果 2010年我县473例临床诊断病例中,EV71阳性73例,阳性率为15.4%。由于EV71 IgM快速诊断试剂盒的应用,病例的实验室及时诊断和合理治疗,无重症和死亡病例发生;而2009年由于未使用快速诊断试剂盒,临床病例未能早期诊断而延误治疗,共发生3例重症,其中1例重症死亡。均为EV71病毒感染。结论 EV71 IgM快速诊断试剂盒可早期发现、诊断由EV71感染的手足口病例,为及时治疗提供帮助,能有效预防和控制手足口病重症和死亡病例的发生,大大降低患儿死亡率。

免疫层析法与酶联免疫法检测手足口病EV71-IgM抗体的阳性率比较

目的:分析免疫层析法(GICA)和酶联免疫法(ELISA)在检测手足口病发病中抗体EV71-IgM的阳性率效果。方法:收治手足口病患者86例,采用GICA和ELISA进行抗体EV71-IgM检测。结果:GICA检测阳性率明显高于ELISA检测(P<0.05)。结论:GISA的检测效果比ELISA效果要更精确,但两种方法都出现阴性标本,表明有遗漏,需要进行复查才能够完成检测。

溶血、脂血和黄疸对EV71-IgM胶体金法检测的影响

目的:探讨溶血、脂血和黄疸对EV71-IgM胶体金法检测的影响。方法:用EV71-IgM胶体金法检测不同程度溶血、脂血、黄疸EV71-IgM含量3.0ng/mL的标本。结果:不同浓度胆红素、不同浓度甘油三酯以及血红蛋白0.2g/L、EV71-IgM含量3ng/mL的标本对EV71-IgM胶体金法检测影响不明显(P>0.05)。血红蛋白0.6g/L和0.8g/L、EV71-IgM含量3ng/mL的标本对EV71-IgM胶体金法检测影响显著(P<0.01)。结论:重度溶血对EV71-IgM胶体金法检测的影响很大,轻度溶血、黄疸和脂血对EV71-IgM胶体金法检测的影响不明显。

重症手足口病患儿临床特征与血液脑脊液EV71-IgM结果的相关性分析

目的探讨重症手足口病患儿的临床特征与血、脑脊液EV71-IgMkL体的相关性，为早期识别危重型手足口病患儿提供更多依据。方法回顾性分析2014年3月1日至7B31目手足口病高发期间收治的317例重症手足口病患儿的一般临床资料和血、脑脊液EV71-tgM抗体及相关实验室检测结果，对两组结果进行分析比较。结果317例重症手足口病患儿中，重型264例（83．3％），危重型53例（16．7％）。危重型组与重型纽在年龄、体重、脑脊液氯含量及肢体抖动方面差异均有统计学意义（P〈0．05）；危重型患儿的血清EV71阳性率（84．9％）高于重型组患儿（76．5％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；危重型患儿的脑脊液EV71阳性率（50．9％）略低于重型组（53．8％），差异亦无无统计学意义（P〉O．05）。结论绝大部分重症病例由EV71感染引起，与血清及脑脊液EV71-IgM抗体阳性率无相关性，但年龄越小、体重越轻、脑脊液氯含量减少及肢体抖动明显的重症手足口病患儿，越容易向危重型发展。

EV71型IgG、IgM和IgA抗体在手足口病诊断中的意义

目的探究EV71型IgG、IgM和IgA抗体在手足口病诊断中的应用价值。方法以2019年3月至2020年3月在我院收治的EV71感染的手足口病患儿116例,通过实时荧光定量聚合酶链式反应法对患儿感染的病毒类型进行检测,使用免疫层析法检测患儿血清中的EV71型IgG、IgM和IgA抗体。结果EV71型IgG、IgM和IgA抗体的阳性检出率分别为62.07%(72/116)、68.10%(79/116)和60.34%(70/116),与EV71核酸检测的阳性检出率72.41%(84/116)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。轻症患儿的EV71型IgM和IgG抗体阳性检出率低于重症患儿,差异有统计学意义(P<0.01)。结论EV71型IgG、IgM和IgA抗体检测对手足口病显示出较好的诊断能力,重症EV71型IgM和IgG抗体阳性率高于普通患儿,提示对疾病的早期诊断和对症治疗有临床应用价值。

肠道病毒Ev71Igm胶体金法与肠道病毒基因检测在临床辅助诊疗手足口病的实践

探究肠道病毒Ev71Igm胶体金法与肠道病毒基因检测在临床辅助诊疗手足口病实践。方法 选取在我院治疗的76例手足口病儿童患者,选取时间区间为{2019.6-2022.6},随机分为两组,观察组与对照组,观察组38例,对照组38例。对照组采用Ev71Igm胶体金法;观察组采用肠道病毒Ev71Igm胶体金法与肠道病毒基因联合检测方式,分析肠道病毒Ev71Igm胶体金法与肠道病毒基因检测的效果。结果 观察组手足口病阳性检出概率高于对照组(P<0.05)。结论 采用肠道毒Ev71Igm胶体金法与肠道病毒基因检测,有利于提升手足口病阳性检出率。

小儿手足口病超敏C反应蛋白和肠道病毒71型IgM的检验研究

目的:分析超敏C反应蛋白水平(hs-CRP)及肠道病毒71型IgM(EV71-IgM)水平检验在小儿手足口病诊断中的应用价值。方法:收治手足口病急性感染期患儿62例作为研究组,选取同期健康小儿62例作为对照组,对比两组hs-CRP水平及EV71-IgM水平。结果:研究组的血清EV71-IgM水平和血清hs-CRP水平均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:小儿手足口病患儿的hs-CRP水平及EV71-IgM水平与健康小儿存在明显差别,可作为手足口病检测的诊断标准。

IgM胶体金法与RT-PCR法对手足口病诊断及随访的价值分析

目的分析IgM胶体金法与RT-PCR法用于手足口病诊断和随访的效果,为开展手足口病防治工作提供科学依据。方法本研究纳入了我院从2017年5月1日至2019年6月30日所有疑似手足口患者共计775例,其中363例患者分别采集发病3日内的咽拭子和末梢血标本进行手足口病毒核酸和IgM抗体检测,阳性患者于发病后两周和四周分别随访检测病毒核酸和IgM抗体。结果两种诊断方法用于是否感染手足口病毒,结果具有一致性,但一致性一般(kappa=0.398,P<0.001)。McNemar-Bowker检验结果 P<0.001,提示两种方法判读的结果差异有统计学意义。随着时间的延长,手足口病毒核酸阳性率呈明显的下降趋势。随访两周时,CA16阳性组、EV71阳性组、双阳性组的核酸阳性率分别为31.21%、6.25%和100.00%,随访4周时其阳性率分别为3.96%、1.25%、0。IgM抗体转阴时间更长。手足口患者随访两周CA16抗体组、EV71组、双阳组抗体阳性率分别为88.89%、57.89%、96.32%,随访4周时其阳性率分别为57.89%、38.60%和85.62%。结论胶体金法有其局限性,手足口病的诊断和随访过程中应结合核酸检测方法。手足口患儿的排毒时间会持续四周以上,建议重新制定患者隔离时间,并在隔离解除前进行病毒核酸检测。

不同方法检测肠道病毒71IgM抗体在手足口病诊断上的应用价值

探讨免疫层析法(ICA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肠道病毒(EV71)IgM 抗体来帮助诊断手足口病的应用价值。 方法:采集 110 例已确诊的手足口病患儿和 41 例非手足口病患儿的血清标本,采用 ICA 和 ELISA 两种方法检测EV71IgM 抗体。 结果:在 110 例手足口病患儿中,ICA 法检测的阳性率是 21.82% (24 / 110),ELISA 法检测的阳性率是 20.91%(23 / 110)。 结论:ICA 和 ELISA 法检测 EV71IgM 抗体,简单易行,方便省时,有助于手足口病的快速诊断和筛查。

肠病毒EV71-IgM抗体与核酸检测在手足口病诊断中的价值

目的对2010年本院手足口病病例进行EV71核酸与EV71-IgM抗体检测,比较两方法的阳性符合率,评价抗体与核酸检测的临床诊断价值和两检测方法在诊断手足口病的互补性与意义。方法分别用RT-PCR方法与酶联免疫方法检测EV71-RNA和EV71-IgM抗体,选取其中住院60例核酸阳性并已同时进行血清学抗体检测的患者进行研究,结合病历资料,分析临床症状出现与抗体产生的时间关系。结果对临床320例病例分别进行抗体与核酸检测,两方法的阳性率分别为15.8%和32.9%;60例核酸阳性的患者,有49例检出抗体阳性,两种方法的阳性符合率是81.7%(49/60);此49例患者临床症状均较轻,多在出现低热、部分皮疹后2～3d才入院;而核酸阳性抗体阴性的11例病例,均为出现手、足、口、臀皮疹12h～1d入院的患者,多以高热病重急诊入院,此时抗体尚未产生,入院后2～3d均进行了抗体检测为阳性。结论核酸与抗体检测在EV71型手足口病中有重要临床诊断价值,两种方法同时检测具有较好的互补效果。对未能开展核酸检测的基层医院,可选用血清学方法检测抗体,对诊断和防控EV71型肠病毒感染引起的手足口病有重要意义。

EV71-IgM抗体检测在婴幼儿肠道病毒感染早期诊治和防控中的意义

目的探讨EV71-IgM抗体检测在婴幼儿肠道病毒感染早期诊治和防控中的意义。方法对2017年4月1日—9月30日来蚌埠医学院第一附属医院就诊的发热和(或)皮疹的101例婴幼儿行血清胶体金法EV71-IgM抗体检测。据检测结果进行快速分诊,对阳性患儿进行消毒隔离,保护易感患儿,防止院内交叉感染;据阳性检测结果,并结合病史、临床表现等进行诊断;对确诊的病例行针对性治疗,并及时填报传染病报告卡行网络直报。对101例患儿按性别、年龄段和检测月份的不同进行分组,比较各组间EV71-IgM抗体阳性检出率有无差异。结果 101例患儿中EV71-IgM抗体阳性者17例,阳性检出率为16.83%。男性阳性检出率为20.69%(12/58),女性阳性检出率为11.63%(5/43),差异无统计学意义(χ~2=1.448,P>0.05);各年龄段间阳性检出率差异有统计学意义(χ~2=9.166,P<0.05);各月份均检出阳性病例,阳性检出率折线图呈现季节性趋势。对EV71-IgM抗体阳性患儿快速分诊和隔离,及时安排就诊,14例被确诊为EV71感染的手足口病;3例被确诊为EV71感染的疱疹性咽峡炎。3例较重患儿住院治疗,13例行门诊对症治疗,所有患儿均治愈,并均获门诊或电话随访,预后佳。14例确诊EV71感染的手足口病患儿的传染病疫情信息通过接诊医生工作站上传至医院预防保健科,完成网络直报,无漏报现象。结论 EV71-IgM抗体检测对早期诊断手足口病病原体有良好的应用价值,实现了早期识别肠道病毒EV71感染、早期预检分诊、早期诊断治疗和早期干预。

EV71-IgM抗体阳性的手足口病患儿免疫球蛋白血糖和脑脊液检测结果分析

目的分析肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)抗体阳性的手足口病患儿免疫球蛋白、血糖、脑脊液的检测结果,探讨其临床意义。方法选取胶体金法检测EV71-IgM阳性、阴性的手足口病患儿各50例,行血清免疫球蛋白、血糖及脑脊液检查,采用SPSS 12.5软件统计分析2组病例各项实验指标的差异。结果 50例EV71抗体阳性组患儿血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM分别为(0.52±0.38)、(8.36±2.15)和(1.52±0.26)g/L,50例EV71抗体阴性组患儿血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM分别为(0.41±0.21)、(8.45±2.34)和(1.48±0.27)g/L,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。50例EV71抗体阳性患儿中有26例血糖升高,血糖升高率为52.0%;22例脑脊液检查异常,脑脊液检查异常率为44.0%。而50例EV71抗体阴性组患儿中有4例血糖升高,血糖升高率为8.0%;3例脑脊液检查异常,脑脊液检查异常率为6.0%。2组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在手足口病患儿中开展EV71抗体的检测同时检测患儿血糖和脑脊液有助于危重患儿的早期诊断和治疗。

25490例儿童手足口病血清CoxA16-IgM和EV71-IgM检测结果分析

目的回顾性分析儿童手足口病血清CoxA16-IgM和EV71-IgM表达情况。方法选取经清远市妇幼保健院确诊的儿童手足口病25 490例,对所有患儿均进行血清CoxA16-IgM和EV71-IgM检测,对检测结果进行统计分析。结果25 490例患儿共检出血清CoxA16-IgM阳性1715例(6.73%),血清EV71-IgM阳性3617例(14.19%),血清CoxA16-IgM和血清EV71-IgM双阳性182例(0.71%)。血清CoxA16-IgM阳性率和血清EV71-IgM阳性率差异有统计学意义(χ^2=757.72,P<0.05)。男性患儿抗体阳性率为30.15%,女性患儿的抗体阳性率为11.60%,男性患儿与女性患儿抗体阳性率差异有统计学意义(χ^2=1 325.91,P<0.05).CoxA16-IgM和EV71-IgM均在2~3岁组阳性率最高。结论小儿手足口病以柯萨奇病毒A16型和EV-71型感染最为常见,尤其是2~3岁年龄段,是手足口病高发阶段。

EV71抗原检测方法的建立及初步临床应用

目的建立EV71抗原双抗体夹心检测方法,并初步探讨其在临床血清样品检测中的应用。方法用抗EV71病毒单克隆抗体包被酶联反应板,加入待检标本反应后,用HRP标记的抗EV71病毒单克隆抗体进行检测,建立EV71抗原双抗体夹心检测方法;采用抗人IgM单克隆抗体包被96孔酶联板,辣根酶标记的EV71抗原,建立ELISA捕获方法检测抗EV71-IgM。2种方法同时检测230份体检人员血清,确定方法的cut-off(CO)值,并检测140份手足口病患者血清,采用Graraph Pad Prism 4软件作图并绘制ROC曲线。结果EV71抗原检测方法的CO值为0.168,抗EV71-IgM ELISA检测方法的CO值为0.173。在140例手足口病患者血清中,EV71抗原检测方法的阳性检出率为45.00%,抗EV71-IgM ELISA检测方法的阳性检出率为42.86%,其中共同阳性患者45例,单独EV71抗原阳性患者18例,单独抗EV71-IgM抗体阳性患者15例,如果2种方法联合检测,其阳性检出率可提高到55.71%。结论ELISA检测EV71抗原诊断HFMD具有很好的准确性,结合EV71-IgM抗体捕获检测技术,可进一步提高灵敏度,具有很好的临床应用前景。

3090例疑似手足口病患儿病毒血清学检测分析

目的：对2014年宝鸡市手足口病患儿病原血清学进行调查,为制定手足口病防治措施提供科学依据。方法：采用ELISA法检测疑似HFMD患儿血清EV71Ig M、CA16Ig M、Echo Ig M,了解患儿病原血清学特征。结果：HFMD全年均有发病,4～11月为发病高峰期,致病以EV71为主,CA16检出率明显增高为18.75%（210/1120）,呈双重或多重感染占21.96%（246/1120）,以EV71Ig M阳性模式为主,且临床症状亦为重。结论：对疑似HFMD患儿应尽早检测血清抗体Ig M以明确病毒谱,利于临床诊治与防控。