Ebselen对自由基诱发的皮层神经元和皮层线粒体脂质过氧化损伤的保护作用

观察了ｅｂｓｅｌｅｎ对超氧阴离子Ｏ·－２和羟自由基·ＯＨ诱发的体外培养大鼠皮层神经元乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）释放，和ＴＢＡＲＳ（ｔｈｉｏｂａｒｂｉｔｕｒｉｃａｃｉｄｒｅａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅ）含量升高及制备的皮层线粒体ＴＢＡＲＳ含量升高的影响。结果表明：超氧阴离子和羟自由基引起了培养神经元和线粒体明显的损伤。浓度在５～５０μｍｏｌ·Ｌ－１之间，ｅｂｓｅｌｅｎ能剂量依赖性地抑制ＬＤＨ释放和ＴＢＡＲＳ含量的增加，对线粒体的ＴＢＡＲＳ含量升高也有显著的抑制作用。但浓度为０．２～５０μｍｏｌ·Ｌ－１时，药物无直接清除超氧阴离子和羟自由基的活性。因此，ｅｂｓｅｌｅｎ对氧自由基诱发的神经元脂质过氧化损伤有拮抗作用，这种作用与直接清除自由基无关。

谷胱甘肽和Ebselen对胰岛素硝化的抑制及其相互作用机理的研究

生物体内NO和超氧阴离子快速反应生成的过氧亚硝酸根离子(ONOO-,peroxynitrite)是一种强细胞毒性物质,它诱导蛋白质酪氨酸残基硝化是其损伤生物系统的重要途径之一。为了探讨谷胱甘肽和ebselen对胰岛素硝化的抑制及其相互作用机理,采用UV鄄Vis、HPLC和ESI鄄MS等方法,研究了ONOO-对胰岛素的硝化作用、小分子抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)和ebselen对ONOO-硝化胰岛素的影响以及它们之间的相互作用。结果表明单独的GSH和ebselen对ONOO-引发的胰岛素硝化均有明显的抑制,而作为谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的底物GSH与GPx的模型化合物ebselen之间存在相互拮抗作用,经过对其产物分析,确定其机理是GSH和ebselen能够直接反应生成一种加合物,从而抑制了GSH和ebselen各自的抗硝化能力。

Ebselen对大强度耐力训练大鼠肝脏细胞凋亡及自由基代谢的影响

目的:探讨ebselen对运动训练大鼠肝细胞凋亡表达、自由基代谢等指标的影响,为其在运动医学领域的应用提供实验依据。方法:30只SD雄性健康大鼠,随机分为3组:安静对照组(A)、运动对照组(B)和运动加药组(C),每组10只。将ebselen溶于5%的DMSO生理盐水溶液中,用量为50mg/kg/d,灌胃给运动加药组,其他两组灌服给同等量的DMSO生理盐水作为对照。建立为期8周的大强度耐力训练模型。常规方法检测大鼠肝脏MDA、TAOC、SOD、GSH-Px等指标,免疫组化法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达;TUNEL检测肝细胞凋亡指数;透射电子显微镜观察肝细胞超微结构的改变。实验数据由SPSS11.0统计软件进行处理。结果:与安静组相比,运动组大鼠肝脏内MDA含量显著升高,抗氧化酶SOD、GSH-Px均下降,T-AOC下降,细胞凋亡指数AI显著增高,Bax/Bcl-2比值下降,肝细胞超微结构损伤明显;加入ebselen进行干预后,大鼠抗氧化酶SOD、GSH-Px均有所升高,MDA含量显著下降,总抗氧化能力显著升高,细胞凋亡指数AI下降,Bax/Bcl-2比值上升,肝细胞超微结构损伤被有效抑制。结论:Ebselen对运动训练导致的肝细胞损伤有明显的保护作用,机制可能与ebselen可以抑制运动诱导的肝细胞凋亡、提高大鼠肝脏抗氧化酶表达等有关。

Ebselen和谷胱甘肽对低密度脂蛋白氧化修饰的抑制和终止作用

研究了人工合成的谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）模拟物－ｅｂｓｅｌｅｎ及其辅助因子谷胱甘肽（ＧＳＨ）对Ｃｕ２＋及紫外线（ＵＶ）诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的抑制和终止作用。结果显示：在ＧＳＨ存在的情况下，低主５－μｍｏｌ／Ｌ的ｅｂｓｅｌｅｎ就可完全抑制由５μｍｏｌ／ＬＣｕ２＋引发的ＬＤＬ氧化修饰，单独的ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ没有抑制作用，５０μｍｏｌ／Ｌ的维生素Ｅ只有很微弱的抑制作用。Ｅｂｓｅｌｅｎ对Ｃｕ２＋引发的ＬＤＬ氧化修饰的抑制作用时间的长短与ＧＳＨ的浓度有关。对已由Ｃｕ２＋引发启动的ＬＤＬ氧化修饰，加入ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ可防止其进一步的氧化。Ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ对紫外线引起的ＬＤＬ氧化修饰也有一定的抑制作用。

羟墓自由基引起神经细胞［Ca^（2＋）］i增高的机制和Ebselen的抑制作用

用Ｆｕｒａ－２显微荧光测量技术研究了羟基自由基对单个皮层神经细胞内游离钙离子浓度［Ｃａ２＋］ｉ影响和硒化合物Ｅｂｅｌｅｎ对［Ｃａ２＋］ｉ的抑制作用。结果表明羟基自由基的作用首先引起胞内［Ｃａ２＋］ｉ以时间常数τ＝３８９５．４±５０７．２Ｓ速度缓慢增加，然后加入了以τ＝４２０．６±１２２．０Ｓ的外钙大量涌入。钙通道阻断剂、疏基还原剂、疏基还原制和自由基清除剂对羟基自由基损伤作用的影响提示外钙的大量涌入部分与通道的开放有关，疏基损伤在羟基自由基引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高中起着重要的作用。具有类谷胱甘肽过氧化酶活性的小分子硒化合物Ｅｂｓｅｌｅｎ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ）抑制羟基自由基引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，推测它可以抑制钙库的释放或促进内钙的外排以及抑制外钙的流入。

Ebselen对羟基自由基作用的ESR研究

本文用ESR研究了Ebselen对羟基自由基的作用.结果表明:Ebselen能清除羟基自由基;其清除作用随浓度增加而增加;Ebselen的清除效果远大于SeO_2.

Ebselen对妊娠铅负荷干预

目的 探讨防止宫内铅暴露对婴儿健康影响。方法 应用原子吸收测定孕妇血铅 ,对志愿者采用Ebselen进行干预流行病学调查。结果 至 38周干预组血铅增加 2 1 5 % ,明显低于对照组 (6 4 5 % )。Zn含量 (13 39μmol/L→ 17 35 μmol/L)和GSH Px 活性 (73 5U/L→ 95 4U/L)增加 ,LPO含量(6 82nmol/L→ 5 2 2nmol/L)降低 ,差异有极显著性 (P均 <0 0 1)。结论 Ebselen对孕妇期铅增高的趋势有阻遏作用 ,Ebselen中的Se不参加贮存而具有增强抗氧化活性 ,但能促进Zn的储备。Ebselen有用于预防婴儿铅中毒的可能。

Ebselen对大强度耐力训练大鼠心肌自由基代谢和超微结构影响的实验研究

目的探讨Ebselen对大强度耐力训练大鼠心肌组织MDA、T-AOC、NO、NOS系统与心肌超微结构的影响。方法SD雄性健康大鼠30只,适应性饲养、筛选,淘汰个别不适应跑台训练者。将剩余大鼠随机分为3组:安静对照组8只、运动对照组8只、运动加药组8只;进行为期8周的大强度耐力跑台训练。测定心肌组织MDA、T-AOC、NO、NOS含量,透射电子显微镜观察心肌超微结构。结果与安静对照组相比,运动对照组以上各指标均有显著性变化,心肌结构损伤明显;加入药物干预后,各项指标较运动对照组有显著变化,心肌结构明显好转。结论Ebselen对大强度耐力运动导致的自由基损伤有明显的抑制作用,原因可能与Ebselen具有模拟谷胱甘肽过氧化物酶活性有关。

Ebselen对耐力训练大鼠GST、CAT和LDH表达的影响

目的探讨ebselen对运动训练大鼠GST、LDH和CAT表达的影响。方法SD雄性健康大鼠30只,随机分为3组:安静对照组10只、运动对照组10只、运动加药组10只;后两组进行为期8 w的跑台训练,建立大强度耐力训练模型。测定上述相应指标。结果运动服药组大鼠GST、CAT表达提高,LDH表达下降。结论Ebselen对保护运动大鼠细胞膜的完整性有积极意义,对提高机体抗氧化能力具有一定意义。

增强谷氨酸与其受体的结合力及EBSELEN的保护作用

用放射配体测定受体法研究了黄嘌呤 (X) /黄嘌呤氧化酶 (XO)体系产生的超氧阴离子自由基 (O·2 )对 [3H]DL 谷氨酸与大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合的影响 ,结果表明O·2 明显增强谷氨酸与其受体的结合力 ,此作用能被 2 苯基 1 ,2 苯并异硒唑 3 ( 2H)酮 (EBSELEN) ( 1 μmol/L)

Ebselen的生物活性及机制

Ｅｂｓｅｌｅｎ（Ｅｂｓ）是一个有机含硒化合物，结构中的硒元素位于一个五元杂环内，在体内不能游离出来，故其毒性比无机硒酸钠低很多。１９８４年Ｍüｌｅｒ和Ｗｅｎｄｅｌ首次报道了Ｅｂｓ可拟谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＰＸ）的活性，增...

Ebselen对Cu_(2+)、Fe_(2+)及巨噬细胞氧化修饰人LDL的抑制作用

目的：研究Ｅｂｓｅｌｅｎ对Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋及巨噬细胞氧化修饰人低密度脂蛋白（ＬＤＬ）的抑制作用及其可能机制。方法：采用紫外分光光度法检测人ＬＤＬ中硫代巴比妥酸反应物（ＴＢＡＲＳ）及共轭双烯（ＣＤ）的含量来表示ＬＤＬ的被氧化程度。结果：Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋及体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞（ＭＰＭ）都能氧化修饰人ＬＤＬ，使其中的ＴＢＡＲＳ和ＣＤ含量显著升高。Ｅｂｓｅｌｅｎ（０．５～４．０μｍｏｌ／Ｌ）能剂量依赖性降低人ＬＤＬ中ＴＢＡＲＳ和ＣＤ含量，其中２μｍｏｌ／Ｌ的Ｅｂｓｅｌｅｎ能完全抑制Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋及ＭＰＭ升高ＬＤＬ中ＴＢＡＲＳ含量的作用。单用谷胱甘肽（ＧＳＨ，０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）对ＬＤＬ中ＴＢＡＲＳ含量没有显著的影响，但ＧＳＨ能显著增强Ｅｂｓｅｌｅｎ对ＴＢＡＲＳ生成的抑制作用。结论：Ｅｂｓｅｌｅｎ能抑制Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋及ＭＰＭ氧化修饰人ＬＤＬ，ＧＳＨ能明显增强Ｅｂｓｅｌｅｎ的这种抑制作用。

补充Ebselen对运动训练大鼠心肌Bcl-2和Bax蛋白表达、部分自由基代谢及超微结构的影响

目的:探讨补充ebselen对运动训练大鼠心肌细胞凋亡、自由基代谢及超微结构的影响。方法:健康雄性SD大鼠30只,适应性饲养、筛选,淘汰个别不适应跑台训练者,将剩余大鼠随机分为3组:安静对照组8只、运动对照组8只、运动+给药组8只;后两组进行为期8周的跑台训练。运动+给药组大鼠灌服溶于5%二甲基亚砜生理盐水的ebselen溶液,用量为50mg/kg/d,其它两组灌服同等量的DMSO生理盐水作为对照。测定心肌组织Bcl-2、Bax蛋白表达灰度值和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)的含量,透射电子显微镜观察心肌超微结构。结果:与安静对照组相比,运动对照组SOD、GSH-Px表达显著下降(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白表达比值显著升高(灰度值比值显著降低)(P<0.01),透射电镜观察显示心肌结构损伤明显;运动+给药组大鼠SOD、GSH-Px表达显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白表达比值显著降低(灰度值比值显著升高),透射电镜显示大鼠心肌细胞结构基本正常。结论:Ebselen对运动训练导致的大鼠心肌损伤有明显保护作用,其机制可能与ebselen可以抑制运动诱导的Bax蛋白过度表达、Bcl-2蛋白表达的减少以及提高机体抗氧化酶活性有关。

Ebselen对大强度耐力训练大鼠肾脏NO、NOS系统及自由基代谢的影响

目的:探讨ebselen对运动训练大鼠肾脏丙二醛、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶以及一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响。方法:SD雄性健康大鼠30只,随机分为3组:安静对照组、运动对照组、运动加药组各10只;后两组进行为期8周递增负荷跑台训练,建立大强度耐力训练模型测定肾脏上述相应指标。结果:用ebselen干预后,相比运动对照组,运动服药组各项指标均有明显改善。丙二醛含量显著降低(P<0.05),总抗氧化能力显著升高(P<0.05),谷胱苷肽过氧化物酶活性显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05),一氧化氮合酶和诱导性一氧化氮合酶表达有所下降(P<0.05),NO生成减少(P<0.05)。结论:ebselen对大强度耐力训练中肾脏产生的自由基有良好的清除作用,可以有效对抗运动造成的肾脏缺血再灌注损伤。

Ebselen 抑制 ONOO^- 对神经元[Ca^(2+)]_i 的影响

Ｆｕｒａ－２显微荧光测钙技术研究发现，过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）作用于ＭＮ９Ｄ细胞，数ｓ内即可导致其胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的急剧升高．胞外液换为无钙液或向胞外液中加入硝苯吡啶（Ｎｉｆｅｄｉｐ－ｉｎｅ）、二硫苏糖醇（ＤＴＴ）均可抑制ＯＮＯＯ－对［Ｃａ２＋］ｉ的影响，提示Ｌ－型钙通道的激活是ＯＮＯＯ－引起［Ｃａ２＋］ｉ升高的主要原因，ＯＮＯＯ－的这种作用可能与其氧化特性有关．Ｅｂｓｅｌｅｎ（２－苯基－１，２－苯并异硒唑－３（２Ｈ）酮）明显抑制ＯＮＯＯ－对［Ｃａ２＋］ｉ的影响，并且存在一定的剂量效应关系．

Ebselen卟啉的合成及其与牛血清白蛋白的相互作用

以2-氯硒基苯甲酰氯和5,15-二(4-氨基苯基)-10,20-二苯基卟啉为原料,合成了双ebselen单卟啉(5,15-二ebselen-10,20-二苯基卟啉),用紫外可见光谱(UV-Vis),红外光谱(IR),核磁共振氢谱(1H NMR),高分辩质谱(HR-MS)对其结构进行了确认.同时,考察了新化合物与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的荧光光谱,由实验数据求得该双ebselen单卟啉与BSA的结合常数KA=1.69×105L/mol.分析荧光结果表明双ebselen单卟啉与BSA之间发生了较强的静态猝灭.

Ebselen对扑热息痛的毒性代谢产物NAPQI的体外清除作用

Ｅｂｓｅｌｅｎ，２－ｐｈｅｎｙｌ（－１，２－ｂｅｎｚｉｓｏｓｅｌｅｎａｚｏｌ－３（２Ｈ）－ｏｎｅ），被谷胱甘肽激活后可与扑热息痛的毒性代谢产物ＮＡＰＱＩ反应，但不能与扑热息痛本身起反应。激活形式的ｅｂｓｅｌｅｎ与ＮＡＰＱＩ反应的阈浓度为２．５μｍｏｌ／Ｌ，ｅｂｓｅｌｅｎ单独与ＮＡＰＱＩ反应的阈浓度为５０μｍｏｌ／Ｌ，且激活形式的ｅｂｓｅｌｅｎ比ｅｂｓｅｌｅｎ本身与ＮＡＰＱＩ反应更快而完全。比较２０μｍｏｌ／Ｌ（ｅｂｓｅｌｅｎ与ＧＳＨ）＋２０μｍｏｌ／ＬＮＡＰＱＩ与２０μｍｏｌ／Ｌ（ｅｂｓｅｌｅｎ与ＧＳＨ）＋２０μｍｏｌ／Ｌ扑热息痛的紫外光措，提示ＮＡＰＱＩ被ｅｂｓｅｌｅｎ还原成其母体化合物扑热息痛，反应的速度受ｅｂｓｅｌｅｎ的浓度，ＮＡＰＱＩ的浓度的影响，反应的最佳ｐＨ范围是７．４至８．２。

Ebselen预处理对大强度耐力训练大鼠骨骼肌结构和功能的保护及可能机制研究

目的:通过研究Ebselen在大强度耐力训练大鼠疲劳发生过程中对于骨骼肌活性氧和活性氮自由基的清除,细胞凋亡的调控等方面的作用机制,为Ebselen应用于抗疲劳领域提供实验依据。方法:雄性健康SD大鼠30只,跑台预适应淘汰不适应跑台运动者后,将剩余大鼠随机分为安静对照组(CG)、运动对照组(TG)和Ebselen预处理运动组(TEG),每组8只。Ebselen预处理运动组灌服Ebselen+DMSO生理盐水溶液,安静对照组和运动对照组灌服等量DMSO生理盐水。8周大强度耐力跑台运动训练后,分别检测大鼠股四头肌内源性抗氧化酶SOD、GSH-Px,活性氮自由基、凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax等指标,TUNEL检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察骨骼肌超微结构。结果:大强度耐力训练后大鼠骨骼肌内源性抗氧化酶SOD、GSH-Px活性下降(P<0.05),总抗氧化能力TAOC下降,自由基代谢产物MDA水平升高(P<0.01);活性氮自由基NO及NOS含量升高;Bax/Bcl-2下降(P<0.01),凋亡指数AI升高(P<0.01),骨骼肌超微结构完整性明显受损;相比运动对照组,Ebselen预处理后,运动大鼠骨骼肌SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05),TAOC升高,MDA及NO水平下降(P<0.05),Bax/Bcl-2上升,凋亡指数AI降低(P<0.01),骨骼肌超微结构得到明显保护。结论:Ebselen可以发挥拟似GSH-Px活性,提高骨骼肌内源性抗氧化酶活性,加快运动中活性氧与活性氮自由基降解,降低脂质过氧化产物生成,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的下调,发挥抗细胞凋亡作用,延长大鼠跑台运动至力竭的时间,有效保护骨骼肌结构的完整性。

Ebselen对大强度耐力训练大鼠脑组织自由基代谢的影响

探讨Ebselen对运动训练大鼠脑组织丙二醛、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶以及一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响.选取Sprague Dawley,(SD)雄性健康大鼠30只,随机分为3组,即安静对照组(A)10只、运动对照组(B)10只、运动加药组(C)10只.后两组进行为期8周的跑台训练,建立大强度耐力训练模型.测定脑组织上述相应指标.结果表明,与运动对照组相比,运动加药组大鼠各项指标均有不同程度改善,自由基损伤得到有效抑制.这表明Ebselen对运动训练导致的大脑自由基过度产生有明显的抑制作用,对提高脑组织的抗氧化能力具有积极意义.