广西鸡球虫虫株早熟系的初步选育及繁殖力的研究

应用单卵囊分离技术从广西患球虫病的鸡中成功地分离出了几个纯种球虫虫株,并对其中一株进行了鉴定和早熟系的初步选育。通过对该株球虫卵囊的形状、大小、潜在期、寄生部位、卵囊孢子化时间等特征的测定和观察研究,鉴定为早熟艾美耳球虫(Eimeriapraecox);对早熟艾美耳球虫进行了连续6代的初步选育,已获得了具有早熟倾向的早熟系,该早熟系的潜在期已比原代的缩短7h,另外对其繁殖力测定的结果表明,该早熟系的繁殖力已明显下降,其繁殖力仅为原代的47 1%。研究结果为对广西鸡球虫的进一步选育和鸡球虫病的免疫预防研究奠定了基础。

温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响

从混合鸡球虫卵囊中分离单卵囊,感染增殖后收获大量单一种类球虫卵囊,将卵囊分别置于10～36℃、38～39℃、40℃恒温箱内培养,研究了温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响.结果显示,10～36℃时,孢子囊形成时间随温度提高而提前,每小时孢子囊形成率和增长幅度也随温度的提高而上升.10℃时,77 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达19.047%,经98 h孢子囊形成率达92.360%;36℃时,5 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达26.471%,经8 h孢子囊形成率达94.180%;38～39℃时,孢子囊形成率达一定时就不再上升,且随温度提高孢子囊形成率反而下降.38℃时,最高孢子囊形成率为52.800%,39℃时最高孢子囊形成率为12.500%;40℃时,球虫卵囊不会形成孢子囊,39～40℃是球虫卵囊形成孢子囊的临界温度.将卵囊分别置于40～65℃恒温干燥箱内经0.5 h处理后又经25～30℃培养24 h的结果表明,卵囊经40～50℃处理后仍可形成孢子囊,而经55℃以上温度处理就被杀死,45～50℃是球虫卵囊的生死临界温度.

和缓艾美球虫与早熟艾美球虫的分离与鉴定

采用单卵囊分离技术,获得了2株纯种球虫,鉴定为和缓艾美球虫与早熟艾美球虫。主要鉴定指标:和缓艾美球虫:卵囊呈球形或亚球型,囊壁光滑无色,卵囊内有1极体,无内、外残余体;测100个卵囊的平均大小为(14.96±1.38μm×(13.65±1.20)μm,测100个孢子囊的平均大小为(9.23±1.20)μm×(5.29±0.53)μm;潜在期96h,最短孢子化时间15.5h;虫体主要寄生于小肠下段。早熟艾美球虫:卵囊呈椭圆形或卵圆形,有极体,无内、外残余体;测100个卵囊的平均大小为(19.21±2.10)μm×(16.40±1.75)μm,测100个孢子囊的平均大小为(10.62±0.90)μm×(6.85±0.75)μm;潜在期84h,最短孢子化时间20h;虫体主要寄生于鸡十二指肠与空肠前段。分别用此2株纯种球虫的孢子化卵囊20×104、60×104个感染30日龄黄羽肉鸡各10只,另设1个不感染对照组,结果感染2株纯种球虫的鸡均未发生死亡,但平均增重与不感染对照组差异显著(P<0.05),感染和缓艾美球虫的2组鸡肠道均出现可见病变,感染早熟艾美球虫的2组鸡肠道病变计分为零。

早熟艾美耳球虫上海株的分离鉴定及生物学特性观察

为分离和鉴定早熟艾美尔球虫(Eimeria praecox),观察其主要生物学特性,本研究采用单卵囊感染技术分离单一虫株,通过卵囊形态学、PCR技术和18SrRNA基因检测,对其进行性状观察、虫种鉴定和系统发生关系分析。在获得的5株单一虫株中,对其中一株的卵囊形态、寄生部位、最短孢子化时间和最短潜在期进行观察。结果表明:该株球虫具有E. praecox的主要生物学特征;分离自肠道的卵囊明显小于分离自粪便的卵囊;最短潜在期为81h;经PCR鉴定为E. praecox,命名为E. praecox上海株。测序结果显示,其18SrRNA基因序列长1747bp,与GenBank登录的相关基因序列同源性为99.4%;该虫株对雏鸡呈轻度致病性。该虫株的分离和鉴定为丰富我国鸡球虫虫种资源,开展球虫病防治研究提供了依据。