ELISA及ECLIA法在乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测中的应用效果对比

目的观察乙型肝炎(乙肝)病毒感染血清学标志物应用酶联免疫吸附测定(ELISA)及电化学发光免疫分析(ECLIA)法检测的应用效果。方法90例乙型肝炎病毒感染患者,均予以ELISA及ECLIA法检测。对比两种检测方式的诊断准确率及对乙型肝炎病毒血清学标志物[乙型肝炎E抗体(HBeAb)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)]的阳性检出率。结果ECLIA法诊断准确率92.2%高于ELISA法的80.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。ECLIA法对HBeAb、HBsAg、HBeAg的阳性检出率分别为91.1%、91.1%、86.7%,显著高于ELISA法的80.0%、78.9%、66.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。两种检测方式对HBsAb、HBcAb的阳性检出率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ECLIA法对乙型肝炎病毒血清学标志物的阳性检出率均显著高于ELISA法,同时可对病情进行监测,具有更高的临床应用价值。

电化学发光免疫测定技术对桥本氏甲状腺炎的灵敏性、特异性分析

目的 探讨桥本氏甲状腺炎(HT)患者应用电化学发光免疫测定技术(ECLIA)的灵敏性、特异性。方法 选取2020年8月至2022年8月在河南新乡医学院第二附属医院检查的疑似HT患者共计68例,所有患者均接受ECLIA、放射免疫法(RIA)测定,以症状、病理检查及随访结果作为金标准,比较不同测定技术的测定结果、阳性率、诊断价值及测定时间。结果 ECLIA测定游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA测定FT3、FT4、TSH、TPOAb、TgAb、TRAb阳性率较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性、曲线下面积(AUC)分别为95.83%、95.00%、97.87%、90.48%、95.59%、0.861,RIA分别为79.17%、60.00%、82.61%、54.54%、73.53%、0.753,ECLIA较RIA更高,差异具有统计学意义(P <0.05);ECLIA平均测定时间时间较RIA更短,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 ECLIA用于HT患者灵敏性、特异性均较高,且可缩短测定时间。

ECLIA和CMIA检测HE4对卵巢癌的诊断价值探讨

目的探讨全自动电化学发光免疫分析法(ECLIA)和化学发光微粒子免疫法(CMIA)检测人血清附睾蛋白4(HE4)对卵巢癌的诊断价值。方法收集39例卵巢癌、63例卵巢良性疾病和50名体检健康者血清。分别采用ECLIA和CMIA法检测血清HE4,评估两种检测方法对卵巢癌的诊断价值。结果两种方法测定的HE4值,呈高度正相关(r=0.997,P<0.01);卵巢癌组HE4水平均显著高于同种方法检测的卵巢良性疾病组和体检健康人群组,差异具有统计学意义(P<0.01);以卵巢良性疾病为对照,ECLIA测定血清HE4用于辅助诊断卵巢癌,ROC曲线下面积为0.813;CMIA测定血清HE4用于辅助诊断卵巢癌,ROC曲线下面积为0.782。两种检测方法均具有较高的特异性和较好的准确性。结论ECLIA和CMIA测定血清HE4结果较为一致,均可作为临床卵巢癌辅助诊断的良好方法。

ECLIA与RIA测定血清C肽结果差异分析

目的:探讨ECLIA与RIA测定血清C肽结果出现差异的原因。方法:采用ECLIA和RIA测定40例健康体检者及8例门诊病人空腹及餐后2小时血清C肽的含量;统一C肽标准品后,用这两种方法测定上述96份血清C肽。结果:当标准品不同时,两法测定结果差异有统计学意义(P<0.05),但相关性良好;当统一标准品后,两法测定结果差异无统计学意义(P>0.05),并具有良好的相关性。结论:对于血清C肽的测定,ECLIA与RIA方法学没有差异,只要标准品统一,两法结果可比,且具有高度相关性。

电化学发光免疫分析与酶联免疫吸附测定法应用于乙型肝炎病毒血清学检验中的效果分析

目的对比乙型肝炎病毒血清学检验过程中采用电化学发光免疫分析(ECLIA)与酶联免疫吸附测定法(ELISA)的效果。方法90例乙型肝炎患者,分别以电化学发光免疫分析、酶联免疫吸附测定法进行病毒血清学检验。对比两种诊断方法对乙型肝炎病毒[乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)]阳性检出率以及不同浓度下两种检验方法HBsAg重复性。结果电化学发光免疫分析对HBcAb、HBsAb、HBeAg、HBsAg、HBeAb的阳性检出率分别为85.56%、33.33%、48.89%、31.11%、64.44%;酶联免疫吸附测定法对HBcAb、HBsAb、HBeAg、HBsAg、HBeAb的阳性检出率分别为83.33%、32.22%、45.56%、27.78%、44.44%。两种检验方法对HBcAb、HBsAb、HBeAg、HBsAg的阳性检出率对比无统计学差异(P>0.05),电化学发光免疫分析对HBeAb的阳性检出率明显高于酶联免疫吸附测定法(P<0.05)。两种检验方法在高浓度HBsAg批次间重复性相近,而电化学发光免疫分析在高浓度HBsAg批次内及中、低浓度HBsAg批次间、批次内重复性均明显低于酶联免疫吸附测定法。结论乙型肝炎患者接受病毒血清学检验可首选电化学发光免疫分析,其具有检出率高、结果准确等优点,值得临床运用并推广。

ELISA与ECLIA对HBsAg弱反应性标本检测的比较

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)和电化学发光(ECLIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱反应性标本的结果。方法将由酶联免疫法(ELISA)检测的HBsAg结果(S/CO)在0.7～5.0之间的824份弱反应性血清标本进行电化学发光(ECLIA)测定。结果①352例S/CO在0.7～0.99区间,即ELISA定性为阴性,ECLIA检测结果有48例COI≥1.0(阳性),差异有统计学意义(P<0.05);②432例S/CO在1.0～LPC(弱阳性质控),即ELISA定性为阳性,ECLIA检测结果有248例COI(cutoff指数)<1.0(阴性),差异有显著统计学意义(P<0.01);③40例S/CO在LPC～5.0,即ELISA定性为阳性,ECLIA检测结果COI≥1.0(阳性)。结论 S/CO在0.7～0.99的标本,ECLIA灵敏度优于ELISA;S/CO在1.0～LPC的标本,ELISA的影响因素较多,容易造成假阳性结果,应分析原因并进一步复查;S/CO在LPC～5.0的标本,ELISA和ECLIA方法均能准确地判断。

ROC曲线对ECLIA法预测HCV感染的最佳S/CO值的确定和分析

目的应用受试者工作特征(ROC)曲线分析丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性预测值≥95%的最佳S/CO值,以此临界值来限制临床上需要进行确证试验的患者数量。方法收集2017年2月至2018年6月该院门诊和住院患者经过电化学发光免疫分析(ECLIA)法初筛检测有反应性标本(S/CO≥1)167份,阴性标本(S/CO<1)10份,并进行HCV RNA和重组免疫印迹试验(RIBA)的补充确证试验,得到临床上可信的真阳性及假阳性标本,经ROC曲线分析得出结果。结果将初筛结果为1≤S/CO<10的54份标本进行双重确证试验后得到阳性标本17份(34.0%),阴性标本33份(占66.0%),不确定的4份标本(定期随访)。当S/CO≥10,经HCV RNA及RIBA双重确证后得到的结果均为阳性。经ROC曲线分析,得到曲线下面积(AUC)为0.971,此时的最佳诊断临界值为8.83。结论若ECLIA法检测结果显示"1≤S/CO<8.83",应提示为"有反应性标本",并注以阳性预测值≤95%,建议1个月后复查或进一步确证检测。

献血者人类嗜T淋巴细胞病毒电化学发光测定值与免疫印迹确证结果的相关性研究

目的研究电化学发光免疫测定技术在献血者人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)检测中的应用效果,评估发光检测COI值与免疫印迹确证结果的相关性,为血站选择最佳筛查策略并优化确证实验流程提供科学依据。方法将2016~2022年本省参加无偿献血且初筛不合格(HTLV酶免反应性)的1070份献血者血液标本纳入本次研究。所有标本分别使用电化学发光方法和蛋白质印迹方法(金标准)进行检测,对结果进行记录和分析并绘制受检者操作特征曲线(ROC)。利用ROC曲线寻找电化学发光免疫测定的最佳诊断临界值。结果1070份初筛不合格标本经电化学发光检测有285份阳性,阳性率26.64%(285/1070),经蛋白质印迹检测有70份阳性,确证阳性率6.54%(70/1070),该70份标本为发光和印迹双阳性。285份电化学发光阳性标本的平均COI值为81.92,中位数为4.98。按照印迹检测结果分为2组后,印迹阴性组中位数为2.76,印迹阳性组中位数为312.45(Z=-12.53,P<0.01)。根据ROC曲线,最佳诊断临界值为72.10(AUC=1,P<0.01),此时发光检测结果与印迹确证结果的符合率为99.35%。结论电化学发光免疫测定技术是一种灵敏度高、特异性强且适用于大规模检测的技术,合理设置诊断临界值后其检测结果与免疫印迹确证结果有很好的一致性,在献血者HTLV检测方面具有良好的应用前景。

ELISA与ECLIA检验在乙肝标志物诊断中的应用分析

目的对照分析ELISA与ECLIA检验在乙肝标志物诊断中的应用。方法从本院在2017年1月—2018年6月收治的乙型肝炎患者100例为主要研究对象,使用随机筛选方法将这些研究对象随机将其分为观察组和对照组,每组分配50例患者,观察组患者检验方式为化学发光免疫分析技术(ECLIA),对照组检验方式为酶联免疫吸附试验(ELISA),对两组患者的检验结果进行对照分析。结果通过对两组乙型肝炎患者的血清标志物进行检验对比,发现观察组发现的乙型肝炎患者乙型肝炎表面抗原阳性率、乙型肝炎e抗原阳性率、乙型肝炎e抗体阳性率、抗乙型肝炎核心抗体阳性率、抗表面抗体阳性率分别为84.00%、82.00%、82.00%、80.00%和78.00%高于对照组的62.00%、56.00%、60.00%、60.00%和50.00%,与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论通过ELISA与ECLIA检验在乙肝标志物诊断中的应用对照分析表明,在进行乙肝标志物诊断过程中使用ECLIA的检出率高于ELISA。

HBsAg单试剂反应性献血者检测结果追溯性分析

目的对本中心初筛HBsAg ELISA单试剂反应性献血者血液标本进行追溯性检测分析,为进一步巩固献血者队伍提供依据。方法采集初筛HBsAg ELISA单试剂反应性献血者(已屏蔽至少6个月)的血液标本,进行HBsAg ELISA检测及NAT,同时采用罗氏电化学发光免疫分析法检测乙肝两对半,并对结果统计分析。结果51份初筛HBsAg ELISA单试剂反应性标本做追溯性检测,HBsAg双试剂均为阴性45份,单试剂呈反应性6份,追溯检测反应性率为11.76%(6/51)。NAT结果均为阴性。ECLIA法结果均为阴性,乙肝项5指标都为阴性的标本共23份,部分阳性28份,以抗-HBs、抗-HBc及抗-HBe阳性为主。结论通过对初筛HBsAg ELISA单试剂反应性标本的追踪检测,并补充检测HBV血清学标志物,可减少因检测而被屏蔽献血者数量,提高献血者再次献血的积极性,保护献血者权益。

金属有机框架材料在电化学/电化学发光免疫分析中的应用

设计和研制具有超灵敏、高精度、选择性好的免疫传感器对于疾病的早期诊断和筛查以及疾病治疗过程的监测具有十分重要的意义。其中,电化学免疫分析法和电化学发光(ECL)免疫分析法,由于具有稳定性好、灵敏度高、线性范围宽、可控性好等优点而备受关注,已成为当前的研究热点之一。金属有机框架(MOFs)作为一类新型的多孔晶体材料,由于其具有比表面积大、化学稳定性好、孔径和纳米级骨架结构可调节等优点,在电化学和ECL免疫传感器的制备中得到了广泛的应用。MOFs不仅可以作为固定生物识别分子的敏感平台,还可以用于富集痕量分析物和信号分子来放大分析信号,提高电化学或ECL免疫分析的灵敏度。目前,科研人员已合成各种各样具有不同性能和形貌的MOFs纳米材料,并用于开发高性能的电化学免疫传感器和ECL免疫传感器。本文综述了不同类型的基于MOFs纳米材料的电化学/ECL免疫传感器的制备及其在免疫分析中的检测应用。研究表明,MOFs不仅可以作为电极表面修饰的基底、信号探针(包括电活性标记分子和电化学发光发光标记探针)、催化活性标记物,还可以作为负载各种生物分子、纳米材料的载体,最终可用于灵敏的电化学和ECL检测。此外,本综述还讨论了未来发展功能化MOFs纳米材料的挑战和机遇,并为未来设计和制造基于MOFs的高性能免疫传感器提出了一些指导性意见。

液相色谱串联质谱法和电化学发光免疫分析法检测25-羟维生素D的一致性评价

目的比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清中25-羟基维生素D(25(OH)D)结果的相关性和一致性,以期指导临床选择合适的检验方法。方法收集该实验室临床血清标本94例,分别用LC-MS/MS和ECLIA这两种方法检测25(OH)D。采用Passing-Boblok回归分析两种方法的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性。以血清25(OH)D<20.0 ng/mL为维生素D缺乏,20.0~<30.0 ng/mL为维生素D不足,使用Kappa分析判断两种方法的诊断维生素D营养状况的符合率。结果LC-MS/MS与ECLIA检测25(OH)D结果分别为(26.67±4.79)ng/mL和(39.33±4.09)ng/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测25(OH)D浓度的回归方程为Y ECLIA=-4.5581+1.7198 X LC-MS/MS,斜率为1.7198(95%CI 1.5863~1.8284),不包含1,截距为-4.5581(95%CI-7.6922~-2.1221),不包含0,提示两种方法存在系统差异或比例差异。Bland-Altman图显示两种方法差值的均值为-12.7,界外点数(比率)为3.19%。山形图的山顶值为-9.17 ng/mL,偏离0较多,表明两种方法检测的结果一致性较差。两种方法判断维生素D缺乏的Kappa系数为0.875,诊断符合率为94.68%;两种方法判断维生素D不足的Kappa系数为0.538,诊断符合率为75.53%。结论ECLIA与LC-MS/MS检测结果一致性较差,但依据营养状况诊断维生素D缺乏与不足的符合率较高。

免疫电化学发光

详细介绍了免疫电化学发光（ＩＥＣＬ）的基本原理和技术，评述了电化学发光在免疫分析中的应用，并进行了展望。

AFP抗体的标记及其电致化学发光免疫分析研究

用自制的异硫氰酸异鲁米诺标记 AFP抗体 ,标记率平均为 0 .40 ;标记的抗体免疫活性和电致化学发光效率基本不变 ;研究了标记反应、双抗夹心免疫反应和电致化学发光反应的条件 ,建立了一种测定甲胎蛋白 ( α fetoprotein,简称 AFP)的双抗夹心电致化学发光免疫分析新方法 ,并用于测定人血清中的 AFP,方法线性范围为 5.0～ 1 0 0 .0 ng m L,检测限为 2 .0 ng m L,本方法与放射免疫法比较 ,相关性良好 .

化学发光免疫分析

本文综述了化学发光免疫分析的基本原理及应用。根据标记物的不同 ,化学发光免疫分析主要分为三大类 :化学发光免疫分析 ,化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。引用文献 89篇。

基于电化学聚合固定抗体的电化学发光免疫分析法检测人免疫球蛋白

基于电化学聚合在金电极表面固定兔抗人免疫球蛋白G抗体与人免疫球蛋白G及标记有Ru(bpy)32+的羊抗人免疫球蛋白G抗体之间发生特异性免疫反应,形成三明治结构,成功建立了用于测定人血清中免疫球蛋白G的电化学发光(ECL)免疫技术。利用此方法测定人免疫球蛋白G含量,浓度在50μg/L～2mg/L范围内与电化学发光强度呈良好的线性关系,线性回归方程为y(a.u.)=48.41+0.09x(μg/L)(n=7);检出限为20μg/L(3σ)。测得正常人血清中免疫球蛋白G平均含量为11.2g/L,结果令人满意。

不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析

目的对酶联免疫吸附试验(ELISA)、时间分辨免疫荧光法(TRFIA)、化学发光法(CLIA)、电化学发光法(ECLIA)检测乙型肝炎血清标志物[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(抗HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(抗HBe)、乙型肝炎核心抗体(抗HBc)]的结果进行分析,评价不同方法学检测结果之间是否具有一致性。方法用ELISA、TRFIA、CLIA、ECLIA分别检测100例乙型肝炎病毒(HBV)感染者和50名正常体检者的乙型肝炎血清标志物。以ECLIA作为参考方法,通过Kappa检验评价不同方法学检测结果之间的一致程度。结果 4种方法检测乙型肝炎血清标志物的结果具有高度以上一致性,CLIA和ECLIA在检测敏感性上更有优势。结论目前广泛使用的检测乙型肝炎血清标志物的方法具有较好的一致性,为实验室结果互认提供了依据。其中ELISA适用于人群初筛,CLIA和ECLIA对于肝炎患者疗效判断更有价值。

电化学发光免疫检测技术研究进展

本文介绍了电化学发光的发展状况和最新研究方向,综述了近年来电化学发光免疫检测技术的应用和研究进展,并展望了电化学发光免疫检测技术的发展前景。

献血者血液筛查HBsAg单试剂阳性结果分析

目的通过对献血者血液筛查HBsAg单试剂阳性标本核酸检测后电化学发光免疫分析法(ECLIA)补充乙肝五项,综合分析ELISA法HBsAg单试剂阳性献血者HBV DNA阳性/阴性标本ECLIA再次检测提高血液安全保障献血者权益的必要性。方法 2019年9月—2020年5月献血者血液标本91 847份,2种不同厂家ELISA HBsAg试剂检测,留取75份HBsAg单试剂阳性标本核酸检测后再用ECLIA补充血清学试验,定量检测HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。结果 75份HBsAg单试剂阳性标本核酸检测HBV DNA+ 15份,核酸定性筛查阳性率20%(15/75)。ECLIA检出HBsAg定量值(0.05-1) IU/mL标本9份,与ELISA阳性符合率12%(9/75)。15份HBsAg单试剂阳性HBV DNA+标本抗-HBc阳性率高达93.3%(14/15),抗-HBs定量均<10 U/L;60份HBsAg单试剂阳性HBV DNA-标本中抗-HBc阳性率达45%(27/60),检测出7种血清学模式,仅抗-HBs阳性,占33.33%(20/60),抗-HBs定量>100 IU/L 11份。结论 ELISA法检测HBsAg单试剂阳性标本补充ECLIA乙肝五项提高血液安全同时保障献血者权益。

血清NT-proBNP在高血压病患者中的表达及其临床意义

目的测定高血压病患者血清N端前体脑钠肽(NT-proBNP)的浓度变化,并探讨其临床意义。方法采用电化学发光免疫试验(ECLIA)测定119例高血压患者及50名健康体检者的血清NT-proBNP浓度,超声心动图测定左室射血分数(LVEF)、左心室质量指数(LVMI)、舒张早期速度峰值(E)/晚期速度峰值(A)比值,比较不同NYHA、LVEF、LVMI分级下NT-proBNP水平的差异,并分析它们之间的关系;绘制受试者工作特性(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUCROC)。结果高血压病患者的血清LgNT-proBNP水平为3.40,明显高于正常对照组的1.42(P<0.001),不同NYHA、LVEF和LVMI分组下的血清NT-proBNP浓度差异均有统计学意义(P<0.001)。NT-proBNP诊断高血压患者心衰的AUCROC为0.863。多变量相关分析表明,血清NT-proBNP浓度与NYHA分级、LVMI、体重指数(BMI)之间具有良好的正相关性(r=0.581,P<0.001,r=0.437,P<0.001及r=0.352,P<0.001),与LVEF分级、E/A比值之间呈良好的负相关关系(r=-0.361,P<0.001和r=-0.626,P<0.001)。Logistic回归分析显示,NT-proBNP是高血压病患者发生左心室肥厚(LVH)强的预测因子(HR=3.392,P<0.01),并与患者的临床治疗结局密切相关。结论高血压病患者血清NT-proBNP水平随着心力衰竭程度的增加而升高,可用来评价患者的心功能状况,且与临床预后关系密切。