血清endostatin、AQP-4对急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的预测价值

目的探讨内皮抑制素(endostatin)、水通道蛋白4(AQP-4)对急性一氧化碳(CO)中毒后迟发性脑病的预测价值。方法选取2019年1月至2022年6月于该院进行治疗的90例急性CO中毒患者作为研究组,根据疾病的严重程度将其分为轻度组(n=26)、中度组(n=42)、重度组(n=22);根据是否发生迟发性脑病将其分为迟发性脑病组(n=26)和非迟发性脑病组(n=64);选取同期90例体检健康者作为对照组。观察比较各组血清endostatin、AQP-4水平,采用Pearson法分析急性CO中毒患者血清endostatin水平与AQP-4水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析急性CO中毒后发生迟发性脑病的影响因素。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清endostatin、AQP-4水平对急性CO中毒后发生迟发性脑病的预测价值。结果研究组患者血清endostatin、AQP-4水平显著高于对照组(P<0.05),且二者均随着病情严重程度的增加逐渐升高(P<0.05);迟发性脑病组血清endostatin、AQP-4表达水平显著高于非迟发性脑病组(P<0.05)。急性CO中毒患者血清endostatin水平与AQP-4水平呈显著正相关(r=0.618,P<0.001)。血清endostatin、AQP-4、脑电图异常、头颅MRI异常、昏迷持续时间是急性CO中毒患者发生迟发性脑病的影响因素(P<0.05)。血清endostatin、AQP-4二者联合预测急性CO中毒后发生迟发性脑病的曲线下面积(AUC)为0.963,灵敏度为88.46%,特异度为98.42%,优于各自单独检测(P<0.05)。结论急性CO中毒患者血清endostatin、AQP-4表达上调,二者联合检测可较好地预测迟发性脑病的发生。

血清胃蛋白酶原与血清endostatin对胃癌的诊断价值分析

血清胃蛋白酶原与血清endostatin对胃癌的诊断价值分析。方法 取我院(2021年12月~2022年12月)患者(80例)。分别以血清胃蛋白酶原和血清endostatin检查,比较效果。结果 与对照组相比,观察组血清胃蛋白酶原PGⅠ偏低、PGⅡ偏高、PGR偏高,Endostatin测定偏高,(p<0.05)。结论 检测血清中胃蛋白酶原和Endostatin水平与胃癌密切相关。因此,测定血清胃蛋白酶原和Endostatin水平可作为评估胃癌恶性程度和手术疗效有效性的指标。

抗血管生成因子Angiostatin与Endostatin作用下肿瘤血管生成的二维数值模拟

目的数值模拟抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin对肿瘤血管生成的影响。方法建立肿瘤内外血管生成的二维离散数学模型。模型耦合两种抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin的抑制效应,数值模拟在促血管生成因子诱导下肿瘤微血管网生成,讨论血管生成抑制因子的影响。结果抗血管生成因子Angiostatin对肿瘤内外血管网络生成的速度和成熟度有抑制作用。抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin耦合作用时,在肿瘤血管生成的早期有明显的抑制效应;在肿瘤血管生成的中后期,它们可以降低肿瘤血管化程度。结论本文模型能够较好的模拟抗血管生成因子Angiostatin和Endostatin对内皮细胞迁移和增殖的抑制作用。

化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用

目的 :了解化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用 ,为肿瘤的免疫治疗提供条件。方法 :构建小鼠En dostatin原核表达质粒 ,在大肠杆菌表达小鼠Endostatin融合蛋白。分离纯化后 ,与丝裂霉素C联合应用 ,治疗种植在小鼠腿部肌肉内的小鼠肝癌H2 2肿瘤。观察瘤重 ,免疫组化检测肿瘤血管密度和肿瘤坏死情况。结论 :单纯应用重组Endostatin治疗种植瘤即产生明显的抑制作用 ,和化疗合用后 ,抑制作用更强 ,肿瘤血管密度减少 ,肿瘤细胞大量坏死。

血清VEGF和Endostatin水平与消化系肿瘤临床病理特征的关系

目的:探讨消化道肿瘤患者手术前后血清血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和Endosta-tin的动态变化规律及其与临床病理特征的关系。方法:ELISA法检测胃癌、肝癌、结直肠癌患者术前及术后2周血清VEGF和Endostatin水平,并分别以慢性胃炎、慢性乙型肝炎、结肠腺瘤患者和健康人群作对照。结果:胃癌、肝癌、结直肠癌患者术前血清VEGF和Endostatin水平分别显著高于慢性胃炎、慢性乙型肝炎、结肠腺瘤患者及健康人群组(P<0.01);术前血清VEGF、Endostatin水平与细胞分化程度、肿瘤大小、浸润深度、区域淋巴结转移、远处转移及临床分期密切相关(P<0.05),与性别、肿瘤部位等因素无关(P>0.05);术后2周血清VEGF水平较术前均有显著性下降(P<0.01),而血清Endostatin水平较术前升高(P<0.01)。结论:胃癌、肝癌、结直肠癌患者血清VEGF和Endostatin水平升高,且与肿瘤细胞分化程度、肿瘤大小、浸润深度、区域淋巴结转移、远处转移及临床分期密切相关,它们可推荐作为评价胃癌、肝癌、结直肠癌恶性行为、预测浸润和转移程度的有效指标。

VEGF、Endostatin、Endothelin-1在大肠腺瘤及大肠癌中的表达及意义

目的探讨大肠腺瘤及大肠癌中血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(Endostatin)、内皮素(Endothelin-1)的表达与病理组织学特征的关系以及三者之间的关系及意义,并分析三者在大肠腺瘤癌变过程中的相互作用。方法分别应用聚合酶链式反应PCR法和免疫组织化学SP法,联合检测VEGF、Endostatin、Endothelin-1在20例大肠腺瘤、40例大肠癌及20例正常大肠组织中的表达情况,并分析其与大肠腺癌临床病理特征之间的关系。结果①在正常大肠组织、大肠腺瘤及大肠癌中,VEGF、Endothelin-1的阳性表达率呈依次递增,VEGF、Endothelin-1在大肠腺癌与正常大肠黏膜之间差异有显著性(P<0.01);Endostatin在正常大肠组织、大肠腺瘤及大肠癌中的阳性表达率呈依次递减,在大肠腺癌与正常大肠粘膜之间差异有显著性(P<0.01);②40例大肠腺癌中,VEGF、Endothelin-1的阳性表达率与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移密切相关,Dukes C+D期组高于Dukes A+B期组(P<0.05﹚;Endostatin表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移呈负相关,Dukes C+D期组低于Dukes A+B期组(P<0.05﹚。结论随着大肠癌的发生发展,VEGF、Endothelin-1的阳性表达率依次增加,提示可作为大肠腺癌发生发展的分子标志,二者在大肠腺癌的发生发展过程中可能具有协同促进作用;两者在大肠腺癌中的表达高于大肠腺瘤组,表明两者在腺瘤向腺癌转变的部分分子机制中起着重要作用。随着大肠腺癌的发生发展,Endostatin的表达逐渐降低,腺癌组低于腺瘤组,提示Endostatin在大肠癌的发生发展、腺瘤癌变的过程中可能受到抑制。联合检测VEGF、Endothelin-1和Endostatin的表达对筛选高危大肠腺瘤、判断大肠癌的发生发展、转移及预后具有重要的参考价值。

非霍奇金淋巴瘤患者血清VEGF及Endostatin水平检测的临床相关研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma,NHL)患者血清VEGF及Endostatin(ES)水平变化与其临床特征、治疗、预后因素的关系。方法采用ELISA法检测162例NHL患者和50例正常健康人血清VEGF及ES水平。结果①162例NHL患者血清中VEGF、ES水平(198·97±17·92)pg/ml和(34·82±7·91)pg/ml,均分别显著高于正常健康人(31·58±6·68)pg/ml和(16·80±3·87)pg/ml(P<0·01),V/E比值也非常显著高于正常人。②NHL患者血清中VEGF、ES水平以及V/E比值与其恶性程度、临床分期和骨髓侵犯(VEGF除外)等显著相关(P<0·05),而与其年龄、性别、细胞类型之间无明显关系。③50例NHL完全缓解(CR)患者血清中VEGF、ES水平及V/E比值均非常显著低于122例NHL初治患者(IP)(P<0·01);但血清中VEGF、ES水平仍非常显著高于正常健康人(P<0·01),而两者V/E比值差异并不明显(P>0·05)。39例复发/难治NHL患者(RRP)血清中VEGF水平显著高于IP组(P<0·05),但其ES水平差异并不明显(P>0·05),其V/E比值非常显著高于IP组(P<0·01)。④NHL患者血清VEGF、ES水平以及V/E比值与其预后指标LDH、CRP、β2-MG均呈显著正相关;血清VEGF、ES两者之间亦呈显著正相关。结论NHL患者血清中VEGF、ES水平升高,与淋巴瘤的恶性程度及肿瘤负荷大小密切相关,其两者的比值(V/E)对NHL患者的治疗、预后判断有重要意义。

血管生成抑制素Endostatin研究新进展

１９９７年Ｏ’ Ｒｅｉｌｌｙ从小鼠血管内皮细胞瘤中分离到一种新的２０ ｋＤ具有特异抑制血管内皮细胞生长的抑制因子─—Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ，它对牛毛细血管内皮细胞、牛肺主动脉内皮细胞有特异的抑制增殖作用，而对非血管内皮细胞系细胞如 ＮＩＨ３Ｔ３，Ａ１０平滑肌细胞等则无增殖抑制作用，实验证实大肠杆菌生产的复性及未复性的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ及杆状病毒生产的重组Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ均有抑制鸡胚血管生成的作用，而且Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ没有象肿瘤化疗药物那样引发肿瘤产生抗药性，其作用机理尚待进一步研究。

中国人血管抑制素Endostatin基因的分子克隆与序列鉴定

目的：内抑素（Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）是一种有效的血管生成抑制因子，分离、克隆和测定中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ基因，为进一步研究Ｅｎｄｏｃｔａｔｉｎ的功能奠定了基础。方法：从中国人胎肝组织中提取ｍＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ方法将Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ的ｃＤＮＡ扩增出，克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，测定其ＤＮＡ序列。结果：中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ ｃＤＮＡ序列被成功克隆，序列分析证实为 Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ基因。结论：中国人的Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ ｃＤＮＡ基因编码序列与国外文献报道的相应序列完全一致。

脂质体介导endostatin基因转染抑制脉络膜新生血管的实验研究

目的 探讨脂质体介导endostatin基因体内转染对脉络膜新生血管 (choroidalneovascularization ,CNV)模型的抑制效应。方法 激光光凝方式建立brownnorway大鼠CNV模型 ,随机分为endostatin组 ,空质粒组 ,对照组 ;脂质体介导法分别导入重组endostatin基因真核表达载体pSecTagA hEndostatin或空载质粒pSecTagA。原位杂交、免疫组化和ELISA法检测endostatin基因mRNA转录及其蛋白表达 ;脉络膜血管平铺、FFA、CD10 5免疫组化观察对CNV的抑制效应。结果 Endo statin基因可有效转染视网膜、RPE及脉络膜并得到表达。转基因后 7、14d眼组织匀浆endostatin蛋白表达量为 ( 5 0 14±3 43 )ng /眼和 ( 3 1 5± 2 2 1)ng/眼 ;Endostatin组CNV面积、荧光渗漏程度、CD10 5阳性细胞表达量与空质粒组及对照组差别显著。结论 脂质体介导endostatin基因体内转染可以有效抑制CNV的形成。

重组endostatin抑制小鼠膀胱癌生长及血管形成研究

目的 观察内源性血管形成抑制剂 (endostatin)对膀胱癌生长的抑制作用。方法 用大肠杆菌表达重组小鼠endostatin ,Ni NTA亲和层析纯化。予endostatin 2 0mg·kg-1 ·d-1 皮下注射T73 9膀胱癌荷瘤小鼠 ,观察肿瘤生长情况及对肿瘤血管形成的影响。结果 重组endostatin治疗后小鼠肿瘤生长缓慢 ,抑瘤率达 81 4%;肿瘤微血管密度 (MVD)明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论 重组endostatm对膀胱癌的血管形成及生长有明显的抑制作用。

Endostatin裸DNA对人脑胶质瘤的抑瘤效应

目的 探讨 endostatin裸 DNA对裸鼠皮下人脑胶质瘤生长的影响特点 .方法 用脂质体包埋法将 endostatin基因的真核表达载体 pc DNA- S- Endo注入裸鼠皮下 SHG44人脑胶质瘤内 ,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率 ,结合免疫组化、电镜、微血管和瘤体坏死区计数 ,确定 endostatin裸 DNA治疗人脑胶质瘤的特点 .结果 Endostatin裸 DNA在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达 ,裸鼠皮下胶质瘤血管生成能力显著下降 ,肿瘤生长受到抑制 ,抑瘤率达到 41.6 % .结论 Endo-statin裸 DNA能够抑制人脑胶质瘤生长 ,它是通过抑制肿瘤血管生成 ,导致肿瘤坏死实现的 .本研究为应用裸 DNA药物治疗人脑胶质瘤奠定了初步基础 .

Endostatin-Angiostatin融合基因治疗大鼠C6胶质瘤的3.0T磁共振动态观察

目的探讨3.0T磁共振在重组单纯疱疹病毒介导的Endostatin-Angiostatin(Endo-Angio)融合基因对大鼠C6胶质瘤疗效评价中的作用。方法30只雄性Wistar大鼠采用立体定向方法在颅内接种C6细胞,将荷瘤大鼠随机分为两组,治疗组与对照组;两组大鼠分别于接种后1、2、3周进行MR检查;第2、3周检查结束后每组留取2只鼠脑标本进行病理学检查;治疗组大鼠于第1周检查后于肿瘤接种位置原位注入Endo-Angio融合基因进行治疗。结果第1周检查共25只大鼠成瘤(成功率83%),第2周两组肿瘤体积均增大,二者无统计学差异(P>0.01),病理检查显示治疗组大鼠微血管腔减少,间质水肿及细胞水肿较对照组明显严重;第3周时治疗组大鼠体积减小,小于对照组(P<0.01)。结论重组单纯疱疹病毒介导的Endo-Angio融合基因对大鼠C6胶质瘤的生长有抑制作用,3.0T磁共振可以较好地动态观察大鼠C6胶质瘤的生长及治疗变化。

脂质体介导EndostatinIL-12基因联合治疗移植型鼠肝癌的实验研究

目的:探讨脂质体介导Endostatin及IL-12基因联合治疗肝癌的可行性。方法:将已构建的Endostatin和IL-12真核表达载体给荷瘤BALB/c鼠瘤内注射,每周两次测量瘤体积。ELISA法检测肿瘤局部IL-12、IL-2、Endostatin含量,MTT法检测NK细胞杀伤活性,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:联合治疗组肿瘤体积明显小于其它各组(P<0.05);肿瘤局部IL-12、IL-2、Endostatin的表达明显高于pVAX1空载体和生理盐水对照组(P<0.05);NK细胞杀伤率和肿瘤细胞凋亡率分别为52.0%和48.2%。结论:联合应用Endostatin和IL-12基因可有效抑制鼠肝癌的生长。

抗血管生成药物Endostatin作用下实体肿瘤血管网络血液灌注数值模拟

目的研究抗血管生成治疗肿瘤主要药物之一的血管生成抑制素ES(Endostatin)对肿瘤血液灌注的影响。方法在数值生成ES作用下肿瘤血管的基础上,设血液为不可压缩牛顿流体,用扩展的Poiseuille定律和Starling定律分别计算管内流量和跨壁流量,肿瘤内间质流动遵循Darcy定律,肿瘤微血管渗透率受Endostatin的影响,用差分法数值模拟在ES作用下肿瘤血管网络的血液灌注。结果在ES作用下,肿瘤微血管生成减少,间质压力下降,压力梯度增大。结论ES药物在减少肿瘤血管生成数量的同时,改变肿瘤血管渗透性,改善肿瘤血液动力学环境,有利于其他治疗肿瘤药物的输运。

用ELISA检测肺癌患者血清中Endostatin的变化

目的 建立快速敏感的ELISA方法检测肺癌患者血清内皮抑素(Endostatin)。方法 对41例肺癌患者及22例良性肺病患者进行血清Endostatin测定并与20例正常人进行比较。结果 肺癌患者体内Endostatin水平高于良性肺病患者和正常人。结论 快捷的ELISA检测法可以成为人们在临床及基础研究Endostatin的新方法。

人endostatin体外诱导血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨人endostatin抑制血管内皮细胞增殖的作用机制。方法 在含重组人endostatin蛋白和 10 %小牛血清的DMEM培养基中 ,培养人脐静脉内皮细胞ECV30 4。72h后 ,采用透射电镜、流式细胞术细胞周期分析和细胞核DNA的 1.5 %琼脂糖凝胶电泳 ,检测重组人endostatin蛋白作用后 ,血管内皮细胞的凋亡。结果 透射电镜下可见实验组ECV30 4细胞核染色质浓缩、边集、核碎裂及胞浆浓缩等 ,呈典型的凋亡细胞的形态学表现。流式细胞术细胞周期分析显示 ,在G1期峰前存在 1个凋亡峰 (2 0 .6 % )。 1.5 %琼脂糖凝胶电泳显示 ,细胞核DNA呈梯状。对照组ECV30 4细胞表现正常。结论 重组人endostatin蛋白可诱导血管内皮细胞凋亡 ,是其抑制血管内皮细胞增殖的原因之一。

携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合腺病毒载体Ad5/11的构建及其体外实验研究

目的:构建携带报告基因eGFP及人内皮他丁en-dostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11。方法:采用重叠PCR及在细菌E.coli.BJ5183中同源重组的方法,获得表达eGFP报告基因的嵌合腺病毒骨架载体,然后以经PacI线性化的嵌合腺病毒载体骨架与PacI线性化的表达endostatin-K5的腺病毒E1穿梭载体共转染真核细胞HEK293细胞中获得携带报告基因eGFP及人endostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP。以获得的嵌合型腺病毒载体感染U87MG细胞,在荧光显微镜观察eGFP的表达,采用RT-PCR检测endostatin-K5的表达;将所构建的嵌合病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP与未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP在体外感染人胶质瘤细胞系A172及乳腺癌细胞系MDA-MB-231;通过荧光蛋白eG-FP的表达,比较它们对以上肿瘤细胞的感染效率。结果:嵌合病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP可成功地表达eGFP及endostatin-K5。以经过修饰的嵌合型腺病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP感染人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的感染效率,明显高于对照未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP。结论:携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11,可明显提高对人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的感染效率。

人endostatin、K5及endostatin-K5重组腺病毒载体的构建及其表达

目的:人endostatin、K5及endostatin-K5基因克隆,重组腺病毒载体的构建及其表达产物体外活性检测。方法:采用PCR方法扩增基因,通过酶切连接方法将3种基因片段克隆到腺病毒shuttle载体pAd5-CMV-H1H2-MCS-6His中;用磷酸钙沉淀法分别将经PacI酶切的表达人endostatin、K5及endostatin-K5的腺病毒shuttle载体与PacI酶切的腺病毒骨架共转染HEK293细胞;用CsCl密度梯度离心法纯化制备病毒;用重组腺病毒感染HeLa细胞并在不同时间点收获蛋白,Western blot检测24h、48h和72h的蛋白表达量;通过MTT方法检测蛋白对ECV-304生长抑制作用。结果:成功制备表达人endostatin、K5及endostatin-K5重组腺病毒载体;Westernblot可以检测到蛋白表达,蛋白表达量随病毒感染HeLa细胞的时间延长而逐渐增高;由重组腺病毒所表达的3种蛋白对ECV304细胞均有明显的生长抑制作用。结论:由含有人en-dostatin、K5及endostatin-K5基因的重组腺病毒载体所表达的蛋白对ECV-304生长具有明显的抑制作用。

重组IFN-α蛋白联合endostatin基因对碱烧伤诱导角膜新生血管的抑制作用

目的探讨重组IFN-α蛋白联合endostatin基因对碱烧伤诱导角膜新生血管的抑制作用。方法兔眼球结膜下注射包有绿色荧光蛋白表达载体的脂质体,3 d后用激光共聚焦显微镜观察角膜绿色荧光蛋白表达。利用碱烧伤法制备兔眼角膜新生血管模型,球结膜下联合注射重组IFN-α蛋白及包有endostatin真核表达载体的脂质体,用裂隙灯显微镜观察对新生血管的抑制作用。结果实验组角膜有很强的绿色荧光,而在对照组则无荧光。联合应用重组IFN-α蛋白和endostatin基因治疗,第7、10、13天角膜新生血管长度、面积明显小于重组IFN-α蛋白和endostatin基因的单独治疗组(P<0.05)。结论重组IFN-α蛋白联合endostatin基因可有效抑制碱烧伤诱导角膜新生血管的生长。