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细胞骨架F-actin在层流剪切应力诱导EPCs内皮分化中的作用 被引量:6
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作者 崔晓栋 官秀梅 +4 位作者 张晓芸 李宏 李鑫 王建英 成敏 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期548-555,共8页
目的探讨细胞骨架F-actin在层流剪切应力促内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)向内皮分化中的作用。方法对大鼠骨髓来源的EPCs施以层流剪切应力(1.2 Pa),以荧光定量RT-PCR及流式细胞术检测特异性内皮细胞标记分子vWF、CD31 ... 目的探讨细胞骨架F-actin在层流剪切应力促内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)向内皮分化中的作用。方法对大鼠骨髓来源的EPCs施以层流剪切应力(1.2 Pa),以荧光定量RT-PCR及流式细胞术检测特异性内皮细胞标记分子vWF、CD31 mRNA及蛋白的表达来反映EPCs分化程度;以免疫荧光染色观测F-actin的排列情况;应用Ras GTPase Pull-Down方法检测Ras活性。结果层流剪切力处理后,EPCs分化标记vWF及CD31的基因及蛋白表达较静止组明显升高(P<0.05),细胞骨架F-actin发生重排,Ras活性明显增高。细胞骨架稳定剂Jasplakinolide(JAS)及细胞骨架松弛剂Cytochalasin D(CytoD)预处理均不同程度地抑制了层流剪切应力所致的细胞骨架的重排、Ras活性的上调及EPCs分化效应(P<0.05),而过表达Ras则对层流剪切应力诱导的EPCs分化有明显促进作用(P<0.05)。结论一定大小的层流剪切应力可促进EPCs向内皮细胞分化,其机制可能与层流剪切应力重塑细胞骨架F-actin,进而影响Ras活性有关;这对于揭示受损血管内皮修复的具体机制、阐明动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机理及临床防治此类疾病具有一定的意义。 展开更多
关键词 层流剪切应力 内皮祖细胞 细胞骨架 细胞培养 细胞分化
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灯盏细辛注射液对血瘀型急性脑梗死患者血清VEGF、MMP-9、EPCs水平的影响 被引量:21
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作者 侯凌波 乔利军 郭建文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2373-2378,共6页
目的研究灯盏细辛注射液对血瘀型急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及内皮祖细胞(EPCs)水平的影响,了解其促血管新生机制。方法采用前瞻性随机、对照试验方案,连续选取40例住院治疗的急性脑梗死患者,... 目的研究灯盏细辛注射液对血瘀型急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及内皮祖细胞(EPCs)水平的影响,了解其促血管新生机制。方法采用前瞻性随机、对照试验方案,连续选取40例住院治疗的急性脑梗死患者,在常规治疗基础上均分为灯盏细辛注射液治疗组和对照组,两组疗程均为7d。治疗前和后进行中医症征积分(SSTCM)、血瘀证积分、神经功能缺损评分(NIHSS)的比较;对治疗前和治疗后第1、3、7天的VEGF、MMP-9、EPCs血清学水平比较。结果 (1)两组患者经治疗后,SSTCM、血瘀证积分、NIHSS均较治疗前有改善(P<0.05);治疗组与对照组相比改善更明显(P<0.05)。(2)血清VEGF、MMP-9、EPCs水平随时间变化显著(P<0.05);灯盏细辛注射液治疗组血清VEGF在治疗后第3天明显增高,治疗7 d后与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且治疗后第7天VEGF仍呈继续上升趋势;血清MMP-9在治疗3 d后达到高峰,与对照组相比,灯盏细辛注射液治疗组明显抑制血清MMP-9水平增高(P<0.05),之后逐渐回落,但仍高于正常水平;随着治疗时间的延长,治疗组、对照组血清EPCs水平均逐渐升高,但组间比较无统计学差异(P>0.05)。相关性分析发现,血瘀型急性脑梗死患者经灯盏细辛注射液治疗后第7天EPCs与VEGF呈线性正相关(r=0.561,P=0.010);EPCs与MMP-9呈线性负相关(r=-0.449,P=0.047)。结论灯盏细辛注射液可促进VEGF高表达,降低MMP-9血清学水平,从而动员外周血EPCs,促进血管新生,保护脑组织。 展开更多
关键词 灯盏细辛注射液 急性脑梗死 血瘀证 VEGF MMP-9 epcs 血管新生
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急性髓系白血病患者造血微环境中EPCs数量、微血管密度与VEGFR-2表达的意义 被引量:3
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作者 申政磊 朱萍 +5 位作者 毛文文 尹列芬 梁进 沈丽达 王存德 杨玲 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期961-965,共5页
目的探讨急性髓系白血病(AML)患者外周血及骨髓中内皮祖细胞(EPCs)的数量变化以及骨髓活检标本中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)表达的临床意义。方法采用流式细胞仪检测30例AML患者以及10例健康对照组外周血及骨髓... 目的探讨急性髓系白血病(AML)患者外周血及骨髓中内皮祖细胞(EPCs)的数量变化以及骨髓活检标本中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)表达的临床意义。方法采用流式细胞仪检测30例AML患者以及10例健康对照组外周血及骨髓中EPCs的数量,进行相对及绝对计数;应用常规石蜡包埋骨髓病理切片进行免疫组织化学染色检测30例AML患者骨髓活组织中MVD和VEGFR-2表达水平,分析其与临床特征的关系。结果 (1)治疗前AML患者外周血和骨髓中EPCs计数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后AML患者完全缓解(CR)组与未缓解(NR)组外周血中EPCs比较,差异有统计学意义(P<0.01);CR与NR组骨髓中EPCs计数比较差异也有统计学意义(P<0.05)。(2)AML骨髓切片上MVD和VEGFR-2表达水平与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Spearman秩相关检验,EPCs绝对计数、MVD、VEGFR-2三者之间呈正相关关系。(3)观察外周血中EPCs绝对计数≥20个/微升以及<20个/微升两组生存曲线,以100周为观察终点,<20个/微升组生存期明显优于前者。(4)经Cox回归分析,发现治疗前外周血EPCs绝对计数、WBC计数、VEGFR-2、β2-微球蛋白为危险因素。骨髓巨核细胞数与ECOG评分为保护因素。结论 EPCs计数结合MVD和VEGFR-2检测对评价AML血管内皮功能可能有一定的临床意义,可作为判断患者疗效及预后的指标之一。 展开更多
关键词 内皮祖细胞计数 急性髓系白血病 微血管密度 血管内皮生长因子受体-2
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丹酚酸B预处理EPCs对AMI大鼠移植骨髓间充质干细胞后心肌微环境的影响 被引量:7
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作者 华声瑜 赵桂峰 +1 位作者 李庆雯 范英昌 《天津中医药》 CAS 2012年第2期117-120,共4页
[目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)后心肌微环境的影响。[方法]56只AM I模型大鼠随机分为假手术组、模型组、BM SCs组、EPCs+BM SCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓... [目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)后心肌微环境的影响。[方法]56只AM I模型大鼠随机分为假手术组、模型组、BM SCs组、EPCs+BM SCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs与BM SCs混合,在大鼠AM I区周边分5点注射。免疫荧光和免疫组化方法检测AM I大鼠梗死区心肌收缩蛋白α型肌球蛋白重链(α-M H C)和I型胶原蛋白的表达。[结果]细胞移植4周后,各细胞联合移植组中,2∶14、∶1和8∶1组在Brdu集中表达区域均有不同强弱程度的α-MHC阳性表达,除假手术组较少外,所有接受冠状动脉结扎的大鼠心肌梗死区I型胶原表达均升高。[结论]BMSCs在丹酚酸B预处理的EPCs干预的心肌微环境下可向心肌细胞分化,可预防或改善心室重塑的发生。 展开更多
关键词 丹酚酸B 急性心肌梗死 内皮祖细胞 骨髓间充质干细胞 细胞移植
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丹酚酸B预处理EPCs联合BMSc移植对AMI大鼠心功能的影响 被引量:5
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作者 南亚昀 李庆雯 +2 位作者 谭俊珍 王宇春 范英昌 《天津中医药》 CAS 2009年第1期60-62,共3页
[目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMSc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况。[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法... [目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMSc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况。[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs,以不同比例(1∶1,2∶1,4∶1,8∶1)与BMSc混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。[结果]各细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能。超声心动图结果:同一时间细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能,与模型组相比,4∶1组、8∶1组左室射血分数及心输出量明显升高(P<0.05)。[结论]丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 内皮祖细胞 骨髓间充质干细胞 丹酚酸B 细胞移植
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内皮祖细胞(EPCs)在心脏移植物血管病变(CAV)中的研究进展 被引量:3
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作者 胡馗 洪涛 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期491-494,共4页
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能分化为成熟内皮细胞(endothelial cells,ECs)的内皮前体细胞,具有促进损伤血管修复和新生血管形成的特点。研究发现EPCs在心脏移植物血管病变(cardiac allograft vasculopathy,C... 内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能分化为成熟内皮细胞(endothelial cells,ECs)的内皮前体细胞,具有促进损伤血管修复和新生血管形成的特点。研究发现EPCs在心脏移植物血管病变(cardiac allograft vasculopathy,CAV)的发生和发展中起着重要作用,移植后供心血管内皮损伤可以触发EPCs的修复过程。本文综述了移植物血管病变的发生发展过程中EPCs的归巢和分化,探讨了EPCs对CAV的预测、诊断和治疗价值。 展开更多
关键词 心脏移植物血管病变(CAV) 内皮祖细胞(epcs) 归巢 分化 预测 治疗
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BMSc联合淫羊藿苷预处理的EPCs移植对AMI大鼠心功能的影响 被引量:2
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作者 南亚昀 李庆雯 +1 位作者 王宇春 范英昌 《山西中医》 2009年第2期44-46,共3页
目的:探讨中药淫羊藿苷预处理的内皮祖细胞(EPCs)与骨髓间充质干细胞(BMSCs)共移植后,对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法:密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞... 目的:探讨中药淫羊藿苷预处理的内皮祖细胞(EPCs)与骨髓间充质干细胞(BMSCs)共移植后,对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法:密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞。结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠急性心肌梗死模型;淫羊藿苷最佳药物浓度处理的EPCs,与BM-SCs混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。大鼠超声心动仪测定左室功能。结果:细胞移植4周后,EPCs与BMSCs共移植组LVDd、LVDs分别为6.925±0.848与4.323±1.193,EF、CO分别为76.71±9.78和0.111±0.029,与对照组差异具有统计学意义。结论:淫羊藿苷预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 急性心肌梗死 淫羊藿苷 内皮祖细胞 细胞移植 实验研究
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丁苯酞对急性缺血性脑卒中患者外周血EPCs的影响 被引量:4
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作者 彭飞飞 黄岩 《实用药物与临床》 CAS 2016年第3期311-313,共3页
目的观察丁苯酞对急性缺血性脑卒中(AIS)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)的影响,并分析其临床疗效。方法收集2014年4月至2015年4月我院神经内科收治的AIS患者88例,随机分为常规治疗组(对照组)和丁苯酞治疗组(观察组),每组44例。流式细胞仪... 目的观察丁苯酞对急性缺血性脑卒中(AIS)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)的影响,并分析其临床疗效。方法收集2014年4月至2015年4月我院神经内科收治的AIS患者88例,随机分为常规治疗组(对照组)和丁苯酞治疗组(观察组),每组44例。流式细胞仪检测外周血EPCs细胞,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者神经功能,比较两组的临床疗效以及不良反应发生率。结果两组治疗前外周血EPCs细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05),对照组治疗14 d后,EPCs细胞逐渐减低(P<0.05),而观察组治疗7 d后,外周血EPCs细胞逐渐升高(P<0.05),到14 d后达到高峰(P<0.05),治疗7、14、28 d后,观察组患者外周血EPCs细胞计数均高于对照组(P<0.05、P<0.01)。治疗前与治疗7 d后,两组NIHSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗14 d后和28 d疗程结束后,观察组患者NIHSS评分均低于对照组(P<0.05、P<0.01)。观察组临床治疗有效率为93.2%,显著优于对照组的81.8%(P<0.05)。对照组临床治疗不良反应率为9.1%,观察组临床治疗不良反应率为11.4%,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丁苯酞可以动员AIS患者外周血EPCs细胞,有利于神经功能的恢复,临床疗效显著,使用安全,具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 丁苯酞 急性缺血性脑卒中 内皮祖细胞
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Apelin and vascular endothelial growth factor are associated with mobilization of endothelial progenitor cells after acute myocardial infarction 被引量:16
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作者 Jiaxin Ye Ping Ni +1 位作者 Lina Kang Biao Xu 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2012年第6期400-409,共10页
This study was designed to determine the levels of early endothelial progenitor cells (EPCs), apelin, vascu- lar endothelial growth factor (VEGF) and stromal cell-derived growth factor-1 (SDF-1) after acute myoc... This study was designed to determine the levels of early endothelial progenitor cells (EPCs), apelin, vascu- lar endothelial growth factor (VEGF) and stromal cell-derived growth factor-1 (SDF-1) after acute myocardial infarction (AMI), and to investigate the relationships between these cytokines and early EPCs. Early EPCs, de- fined as CD133+, KDR+, and CD34~ cells, were quantified by flow cytometry. The levels of early EPCs and those cytokines in AMI patients were significantly different from those with coronary artery disease or controls (P 〈 0.05). Plasma apelin levels were inversely correlated with Gensini score and early EPCs (both P 〈 0.01). Early EPCs, VEGF and SDF-1 showed different patterns of changes in AMI patients during the first 24 h. The trend in the change of early EPCs was proportionally correlated with that of VEGF (P 〈 0.05). AMI patients exhibited in- creased early EPCs with remarkably decreased apelin levels and enhanced VEGF levels. 展开更多
关键词 APELIN vascular endothelial growth factor (VEGF) stromal cell-derived growth factor-1 (SDF-1) endothelial progenitor cells (epcs
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Transfusion of CXCR4-priming endothelial progenitor cells reduces cerebral ischemic damage and promotes angiogenesis and neurogenesis in db/db diabetic mice
10
作者 CHEN Yan-fang (Department of Pharmacology & Toxicology,Boon-shoft School of Medicine,Wright State University, Dayton,OH 45435) 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期20-20,共1页
Previous studies suggest that reduction and dysfunction of circulating endothelial progenitor cells(EPCs),and dysregulation in stromal cell derived factor-1/CXC-chemokine receptor 4(SDF-1/ CXCR4) axis in diabetes coul... Previous studies suggest that reduction and dysfunction of circulating endothelial progenitor cells(EPCs),and dysregulation in stromal cell derived factor-1/CXC-chemokine receptor 4(SDF-1/ CXCR4) axis in diabetes could be therapeutic targets for diabetic ischemic stroke.This study investigated the efficacy of CXCR4-priming EPCs on cerebral repair following ischemic stroke in db/db diabetic mice.Bone marrow derived EPCs from db/+ control mice were transfected with adenovirus(1×10~7 IU) carrying CXCR4(Ad-CXCR4-EPCs)or null(Ad- null-EPCs).The db/db mice were divided into three groups for EPCs injection(2×10~5 cells/100μl): Ad-CXCR4-EPCs,Ad-null-EPCs or saline(vehicle), via tail vein 2 hrs after middle cerebral artery occlusion (MCAO) surgery.Cerebral blood flow(CBF) was measured with laser Doppler flowmeter.Mice were sacrificed at 2 or 7 days thereafter.Level of circulating EPCs was measured by flow cytometry. Ischemic damage,cerebral microvascular density (MVD),angiogenesis and neurogenesis were determined by histological staining with Fluoro-J,CD31, CD31 +BrdU,NeuN +BrdU,GFAP+BrdU,respectively. Results(table) showed:1) Levels of CXCR4 expression were reduced in the brain and EPCs of db/db mice as measured by real-time RT-PCR and western blot analyses(data not shown);2) The level of circulating EPCs was more in the mice treated with Ad-CXCR4-EPCs;3)EPC transfusion improved CBF,increased MVD,angiogenesis and neurogenesis in peri-infarct area,and decreased ischemic damage.The efficacies were better in Ad-CXCR4 -EPCs group.Data suggest that transfusion of Ad-CXCR4-EPCs could be a therapeutic avenue for ischemia stroke in diabetes. 展开更多
关键词 epcs Transfusion of CXCR4-priming endothelial progenitor cells reduces cerebral ischemic damage and promotes angiogenesis and neurogenesis in db/db diabetic mice CXCR
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黄芪、三七促进骨髓干细胞体外转化并扩增血管内皮前体细胞(EPC)作用的研究 被引量:12
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作者 杨博华 朱陵群 +2 位作者 张娟子 牛福玲 崔巍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1761-1763,共3页
目的:探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外转化并扩增EPC的促进作用及其可能的机制。方法:常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,不同条件下贴壁扩增细胞。镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD3+4细胞的百分比... 目的:探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外转化并扩增EPC的促进作用及其可能的机制。方法:常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,不同条件下贴壁扩增细胞。镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD3+4细胞的百分比。结果:细胞呈梭形,束状排列,间杂有少量圆形细胞。与对照组相比,黄芪中、低剂量组,三七中、高剂量组CD3+4细胞的百分比均显著增加。结论:黄芪、三七能促进EPC的转化和增殖。 展开更多
关键词 黄芪 三七 骨髓干细胞 CD34^+细胞 血管内皮前体细胞
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受体骨髓源性内皮祖细胞(EPC)对小鼠移植性动脉硬化的影响
12
作者 杨兆华 洪涛 +2 位作者 朱仕杰 夏利民 王春生 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期360-364,413,共6页
目的探讨输入受体骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对移植性动脉硬化的影响。方法密度梯度离心法联合贴壁诱导法分离培养小鼠骨髓源性EPC,并对其进行鉴定。利用小鼠同种异体腹主动脉移植(以C57BL/6小鼠为供体,BALB/... 目的探讨输入受体骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对移植性动脉硬化的影响。方法密度梯度离心法联合贴壁诱导法分离培养小鼠骨髓源性EPC,并对其进行鉴定。利用小鼠同种异体腹主动脉移植(以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体)建立移植性动脉硬化模型,术后通过尾静脉将体外培养的EPC输入模型体内,2周后观察移植动脉内膜损伤修复情况及病理改变;术后4周用计算机图像分析系统测量移植动脉新生内膜增生情况。结果骨髓源性单个核细胞(mononuclear cell,MNC)体外可诱导培养出EPC,其细胞表面既表达干细胞标记,又表达内皮细胞特异性标记,并具有内皮细胞的生物学功能。小鼠腹主动脉移植术后2周,EPC输入组移植动脉内膜损伤较对照组明显加重。术后4周,EPC输入组移植动脉新生内膜厚度及管腔狭窄程度较对照组显著增加。结论受体骨髓源性EPC参与移植动脉新生内膜形成。输入外源性EPC加重移植动脉内膜损伤,对移植性动脉硬化起促进作用。 展开更多
关键词 内皮祖细胞(epc) 移植性动脉硬化 内膜损伤 小鼠
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TNF-α和VEGF协同作用小鼠胚胎干细胞衍生的血管内皮祖细胞促伤口愈合
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作者 杨影 陈东升 +6 位作者 赵艾艾 何才蓉 陈凤娇 何运雪 郑梅 陆莹 丁洁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期240-250,共11页
皮肤伤口愈合是世界范围内的重大临床难题之一,血管生成和炎症反应是影响伤口愈合和组织再生的关键环节。内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)在血管内皮修复和招募炎症细胞促伤口愈合过程中发挥重要作用。然而,体内直接输送EP... 皮肤伤口愈合是世界范围内的重大临床难题之一,血管生成和炎症反应是影响伤口愈合和组织再生的关键环节。内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)在血管内皮修复和招募炎症细胞促伤口愈合过程中发挥重要作用。然而,体内直接输送EPC低效且会损害细胞存活力和功能进而影响治愈效率。因此,改善EPC的生物学功能以促进伤口愈合很有必要。本研究将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESC)在10 ng/mL VEGF和5 ng/mL bFGF的作用下诱导获得CD133+CD34+EPC。以mESC衍生的EPC为研究对象,将外源性肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作用于mESC-EPC,结果表明,10 ng/mL TNF-α和10 ng/mL VEGF协同处理组相比于单因子处理显著促进EPC的黏附、细胞迁移和管腔形成能力(P<0.01)。进一步通过建立小鼠局部皮肤全层创伤模型,在创周处注射10 ng/mL TNF-α和10 ng/mL VEGF协同EPC治疗明显加速伤口愈合(P<0.05),再生皮肤真皮层增厚(P<0.001),促进血管生成素ANG1和ANG2介导CD31+内皮细胞构成的毛细血管网络成熟。随着伤口愈合程度的加深,促炎因子TNF-α在蛋白质水平的表达下调(术后13 d,PBS组、EPC组、VE组、TE组和VTE组的TNF-α相对表达量分别为0.73±0.01、0.60±0.02、0.42±0.02、0.36±0.01和0.34±0.03),创造有利于伤口愈合的炎症微环境。综上所述,10 ng/mL TNF-α和10 ng/mL VEGF的协同作用强化EPC的生物学功能,并通过促进新血管生成和早期炎症反应加速小鼠皮肤伤口闭合和组织重塑,为细胞干预伤口愈合治疗提出新的思路。 展开更多
关键词 小鼠胚胎干细胞 血管生成因子 内皮祖细胞 伤口愈合 肿瘤坏死因子-Α
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健脾补肾活血方含药血清调控PI3K/Akt信号通路影响大鼠内皮祖细胞功能的机制 被引量:3
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作者 张伟 刘向哲 +3 位作者 韩红艳 张燕平 路永坤 周红霞 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第1期227-234,共8页
目的探讨健脾补肾活血方含药血清影响大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管功能的机制,以期为该方治疗缺血性脑血管病提供理论依据。方法SD大鼠12只,随机分为两组:中药组和对照组,每组6只。分别给予每毫升含生药为3.25 g健脾补... 目的探讨健脾补肾活血方含药血清影响大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管功能的机制,以期为该方治疗缺血性脑血管病提供理论依据。方法SD大鼠12只,随机分为两组:中药组和对照组,每组6只。分别给予每毫升含生药为3.25 g健脾补肾活血方颗粒药液和CMC-Na溶液灌胃,采集血清,组内混合,保存备用。SD大鼠2只,取骨髓EPCs,并培养、鉴定。将EPCs随机分为8组:空白组(KB),低、中、高浓度含药血清组(Lx、Mx、Hx),PI3K抑制剂组(PI),低、中、高浓度含药血清+PI3K抑制剂组(Lp、Mp、Hp)。分别给予同等体积的对照组混合血清,10%、20%、40%浓度中药组混合含药血清,30μmol·L^(-1)浓度LY294002,10%、20%、40%浓度中药组混合含药血清+30μmol·L^(-1)浓度LY294002。Western blot、CCK8、Tranwell、体外成血管试剂盒分别检测各组EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力。结果与空白组(KB)比较,健脾补肾活血方低、中、高浓度含药血清组(Lx、Mx、Hx)EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力明显提高(P<0.05)。PI3K抑制剂组(PI)和空白组(KB),低、中、高浓度含药血清+PI3K抑制剂组(Lp、Mp、Hp)和与之分别对应的Lx、Mx、Hx组相比较,EPCs p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的相对蛋白表达量、增殖、迁移、成管能力明显下降(P<0.05)。结论健脾补肾活血方可调控PI3K/Akt信号通路提高大鼠骨髓源EPCs增殖、迁移及成管能力。 展开更多
关键词 健脾补肾活血方 内皮祖细胞(epcs) PI3K/AKT信号通路 缺血性脑血管病 血管新生
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重组人脑利钠肽对急性 ST 段抬高型心肌梗死内皮祖细胞血管生成能力的影响 被引量:11
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作者 吴钟伟 王圣 +2 位作者 李斌 王裕岱 董小莉 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期243-247,290,共6页
目的:观察重组人脑利钠肽( rhBNP)对急性ST段抬高型心肌梗死( STEMI)患者外周血内皮祖细胞( EPCs)数量及功能的影响,并评估对冠状动脉侧枝循环形成及心功能的影响。方法选择海南省人民医院心内科未行急诊血运重建治疗(梗死时间... 目的:观察重组人脑利钠肽( rhBNP)对急性ST段抬高型心肌梗死( STEMI)患者外周血内皮祖细胞( EPCs)数量及功能的影响,并评估对冠状动脉侧枝循环形成及心功能的影响。方法选择海南省人民医院心内科未行急诊血运重建治疗(梗死时间>12 h)的STEMI患者132例,随机分成两组,第一组为静脉使用rhBNP组70例,第二组为未使用rhBNP的对照组62例,分别在发病第1、7天抽取外周血,采用贴壁选择法培养人外周血EPCs,荧光显微镜鉴定EPCs,并检测EPCs数量及体外增殖、迁移、黏附、体外血管生成能力。发病第7天行冠状动脉造影并使用Rentrop侧枝循环分级法评估侧枝循环形成,并心脏彩超测量LVDD、LVEF及检测血浆BNP来评估心功能。结果与对照组比较,rhBNP组外周血EPCs的数量明显增加,EPCs增殖、迁移、黏附、体外血管生成能力明显改善(P<0.01),冠状动脉侧枝循环明显丰富,心功能明显改善(P<0.05)。结论 rhBNP明显改善STEMI患者EPCs功能,促进冠状动脉侧枝循环的形成,改善心功能。 展开更多
关键词 重组人脑利钠肽(rhBNP) 内皮组细胞(epcs) 冠状动脉侧枝循环 急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)
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电针刺激对脑缺血大鼠内源性EPCs及相关血清细胞因子的影响 被引量:29
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作者 赵瑛 陈斯佳 +4 位作者 于文娟 蔡绍皙 张莉 王秀志 唐安科 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1322-1326,共5页
用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)制备局灶性脑缺血/再灌注(MACO)模型,观察内源性内皮祖细胞(EPCs)及其相关细胞因子在电针改善脑缺血中的作用。实验证明:MACO模型稳定性高,电针"曲池"、"足三里"穴后,大鼠神经功能... 用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)制备局灶性脑缺血/再灌注(MACO)模型,观察内源性内皮祖细胞(EPCs)及其相关细胞因子在电针改善脑缺血中的作用。实验证明:MACO模型稳定性高,电针"曲池"、"足三里"穴后,大鼠神经功能恢复较对照组快;脑缺血再灌注损伤提高了外周血中内皮祖细胞(EPCs)的数量,以24 h最为明显,这可能与损伤引起的炎症反应及机体自身修复有关;针刺可在一定程度上降低诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性,减轻脑缺血的炎症反应、减缓损伤,同时调节外周血中EPCs的数量,再灌注后24 h明显增加,48 h最为明显(P<0.01);脑缺血后大鼠血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量有所升高,反映了脑缺血刺激可以一定程度上激发机体的应激反应,针刺使血中VEGF含量更高,推测这种VEGF的高表达可能对EPCs起到了动员作用,促使梗死后的EPCs的趋化、归巢。此外,在调节外周血EPCs过程中,基质金属蛋白酶(MMP-9)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等细胞因子也发挥了相应作用。总之,针刺通过动员外周血中EPCs数量、降低iNOS活性和VEGF的高表达,从而促进血管新生来改善脑缺血,这可能是针刺治疗脑缺血诸多途径之一。 展开更多
关键词 电刺 脑缺血 内皮祖细胞 血清细胞因子
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流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响 被引量:8
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作者 成敏 尹青令 +5 位作者 崔晓栋 张晓芸 李鑫 李宏 官秀梅 王建英 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期60-65,共6页
目的研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外及体内生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪... 目的研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外及体内生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β-半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RT-PCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。结果 1.2 Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力(P<0.01),上调VEGF的基因表达,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡(P<0.01);移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复,减缓内膜的增生。结论流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力,这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。 展开更多
关键词 剪切应力 内皮祖细胞 细胞黏附 再内皮化
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血管衰老及其机制 被引量:20
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作者 姜平 黎健 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第3期295-304,共10页
血管老化是一个古老而又年轻的课题.本文综述了血管衰老的主要结构特征、功能改变及其机制的新近研究进展,重点就血管基质变化、内皮细胞衰老/功能失调、内皮祖细胞衰竭以及细胞间通讯等方面进行了阐述.
关键词 血管衰老 内皮细胞 内皮祖细胞 微粒 外泌体 MICRORNA
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老年急性白血病患者内皮祖细胞的变化及其临床意义 被引量:5
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作者 尹列芬 耿丛丛 +4 位作者 朱萍 申政磊 沈秀芬 佟力 杨玲 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期508-510,共3页
目的探讨老年急性白血病(AL)患者骨髓及外周血中内皮祖细胞(EPCs)的数量变化及其临床意义。方法采用流式细胞仪(FCM)检测66例初治AL患者骨髓及外周血中的EPCs,其中老年AL组28例,非老年AL组38例。以10例良性血液病患者为对照组。结果 (1... 目的探讨老年急性白血病(AL)患者骨髓及外周血中内皮祖细胞(EPCs)的数量变化及其临床意义。方法采用流式细胞仪(FCM)检测66例初治AL患者骨髓及外周血中的EPCs,其中老年AL组28例,非老年AL组38例。以10例良性血液病患者为对照组。结果 (1)老年AL患者骨髓EPCs绝对计数较外周血明显增高(P<0.001),相对计数较外周血无明显差异(P>0.05)。(2)老年AL患者、非老年AL患者骨髓及外周血EPCs水平较对照组明显增高(P<0.01)。老年AL组骨髓及外周血中EPCs水平较非老年AL组降低,两者无统计学差异(P>0.05)。(3)老年AL患者外周血EPCs绝对计数与白细胞计数(r=0.815,P=0.027)、β2-微球蛋白(r1=0.709,P=0.043)、LDH(r2=0.827,P=0.026)呈正相关。结论老年AL患者EPCs水平明显增高,EPCs可能与老年AL发病相关。 展开更多
关键词 急性白血病 内皮祖细胞 流式细胞术
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缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响 被引量:3
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作者 韩艳久 刘国辉 +1 位作者 欧阳柳 王小红 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第1期1-6,共6页
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶... 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 内皮祖细胞集落形成单位(epcs) 基质金属蛋白酶(MMP) 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术 血管新生
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