动态浊度法定量检测能力验证样品中细菌内毒素含量及分析

检测能力验证样品中细菌内毒素的含量和分析检测过程的注意事项。依据《中国药典》2020年版4部通则1143细菌内毒素检查法的光度测定法中的动态浊度法。建立细菌内毒素检查的标准曲线,通过预实验确定样品最佳稀释倍数及预估细菌内毒素含量,并选定最佳稀释倍数对样品中细菌内毒素含量进行独立平行3次检测。细菌内毒素检测浓度线性范围为0.0625~1.0EU/mL,标准曲线为LgT=2.8059+(-0.28966LgC)(|r|值=0.9982);样品在稀释1000倍时对试验无干扰作用;细菌内毒素回收率50%~200%;3次平行检测结果 T1、T2、T3分别为83.80 EU/mL、82.70 EU/mL、83.00 EU/mL。动态浊度法测定该能力验证样品的检测方法可靠、结果准确、稳定。

动态显色法检测能力验证样品中细菌内毒素的含量

目的:检测中国食品药品检定研究院下发的能力验证样品中细菌内毒素的含量。方法:选用光度测定法中的动态显色法,建立细菌内毒素检查的标准曲线,通过测定样品外加内毒素的回收率进行干扰试验,确定样品检测浓度线性范围,并测定样品中的细菌内毒素含量。结果:内毒素检测浓度线性范围为0.005~50 EU·mL^(-1)(|r|值均大于0.980);样品检测与标准曲线检测变异系数(CV)均小于10%;细菌内毒素回收率为50%~200%;两批能力验证检测结果分别为12.21 EU·mL^(-1)和93.24 EU·mL^(-1)。结论:动态显色法测定该能力验证样品的检测方法可靠、结果准确,可用于能力验证的盲样细菌内毒素含量测定。

注射用头孢哌酮钠-舒巴坦钠与四种输液的配伍稳定性

[目的]考察注射用头孢哌酮钠-舒巴坦钠在0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、5%葡萄糖氯化钠注射液、乳酸钠林格注射液四种输液中的配伍稳定性。[方法]将注射用头孢哌酮钠-舒巴坦钠分别与上述4种输液进行配伍,在0-6 h内测定pH值、微粒变化、细菌内毒素含量及含量变化。[结果]分别与上述四种输液配伍后,每毫升中粒径分别≥10μm和≥25μm以上的微粒数均符合中国药典（2005年版）规定,小粒径的微粒数有明显增加;细菌内毒素含量：0 h及6 h均〈3.0 EU.mL^-1,且随放置时间的增长有明显增加;注射用头孢哌酮钠-舒巴坦钠与5%葡萄糖氯化钠注射液配伍后含量下降约10%,而与其他3种输液配伍后含量下降不超过5%。[结论]注射用头孢哌酮钠-舒巴坦钠可与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、乳酸钠林格注射液配伍使用,但不能与5%葡萄糖氯化钠注射液配伍使用;低浓度（5 mg.mL^-1 L）在0-6 h内含量没有明显变化,稳定性较好。

动态显色基质法测定地佐辛注射液中细菌内毒素的含量

目的:采用动态显色基质法测定地佐辛注射液中的细菌内毒素含量。方法:根据《中华人民共和国药典》(2015年版)四部通则1143细菌内毒素检查法,对样品进行干扰预实验和干扰实验,确定样品的最小不干扰浓度。结果:地佐辛注射液可采用稀释200倍的溶液进行定量检测。结论:动态显色基质法可用于检测地佐辛注射液中的细菌内毒素含量。

动态浊度法测定奥拉西坦注射液的细菌内毒素含量

目的建立奥拉西坦注射液的细菌内毒素含量测定方法。方法采用《中国药典》2015年版四部细菌内毒素动态浊度测定法。结果将奥拉西坦注射液稀释至10mg·mL^-1(20倍),用细菌内毒素浊度法测定无干扰因素影响,其平均回收率均在50%~200%之间。结论该法快捷、灵敏、准确,可用于奥拉西坦注射液的细菌内毒素测定。

急性肺损伤大鼠前爪对应部位血EB含量变化研究

目的研究肺损伤前后大鼠前爪特定区域内血液中伊文思蓝(Evans blue,EB)含量的变化数据,通过数据的变化,研究肺与前爪特定区域的对应关系,为通过手部可以诊断西医疾病的手诊提供动物模拟实验依据。方法 20只雄性SD大白鼠按随机数字表法分为模型组(10只)、对照组(10只),模型组大鼠腹腔注射内毒素复制急性肺损伤模型,6 h后两组均从尾静脉注射2.5%EB生理盐水溶液,然后测量手掌各个特定不同区域内EB的吸光度(A)值大小,根据A值大小的变化,间接地了解各区域内前爪特定部位左右两侧血液中EB含量的变化情况。结果对照组大鼠左右同一部位A值比较无明显差异,内毒素型肺损伤大鼠3区的A值左右之间比较,差异有统计学意义(P=0.018)。结论在急性肺损伤的状态下,前爪与内脏之间应该存在着特定的相关性联系。

有关《中国药典》的几点商榷

目的:完善《中国药典》的有关标准,增加可操作性。方法:就《中国药典》的“制剂通则”、“细菌内毒素检查法”、葡萄糖注射液的含量测定等相关问题进行分析和探讨。结果与结论:收载剂型有限,有些制剂品种难以归类;鲎试剂与细菌内毒素形成的凝胶在多长时间内不脱落判为阳性,应给出具体的时间限;采用旋光度测定法测定葡萄糖注射液含量时,半成品需加氨试液促进达到平衡,而成品则不需加,应予以区别。

预配制氯化钾注射液稳定性研究

目的:观察氯化钾注射液在5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液和葡萄糖氯化钠注射液四种常用输液液体中的配伍稳定性。方法:采用目测法观察溶液的外观;采用酸度计依据《中国药典》(2015年版)四部通则0631中的相关规定进行pH值的测定;依据通则0903进行不溶性微粒的测定;采用高效液相色谱法进行氯化钾含量测定;采用鳖试剂进行细菌内毒素检查,并行无菌检查。结果:通过目测法观察溶液均为无色澄清液体;供试品溶液在48 h内pH值基本无明显变化,符合要求;不溶性微粒48 h内也符合规定;供试品溶液的氯化钾含量在48 h内均保持在100%~105%,基本稳定。供试品溶液在配伍后0,24,48 h的细菌内毒素和无菌检查均符合相关规定,配伍稳定。结论:预配制的氯化钾注射液经各项检查均符合相关规定,表明其稳定性良好,保障了临床使用的安全性。

超滤在灯盏花素注射液中的应用研究

目的:考察4种不同规格的超滤膜对灯盏花素注射液的细菌内毒素和化学成分的影响,选择适合生产使用的超滤膜。方法:分别选取10KD聚醚砜、10KD纤维素、30KD聚醚砜、30KD纤维素超滤膜对灯盏花素注射液进行超滤,测定不同超滤过程前后细菌内毒素、含量、有关物质以及膜通量变化,筛选适宜灯盏花素注射液使用的超滤膜。结果:不同截留相对分子质量的超滤膜对灯盏花素注射液的过滤效果存在差异:10KD超滤膜对药液灯盏花素含量及有关物质截留率较高,相应的水通量恢复率较低;聚醚砜超滤膜膜通量大于纤维素超滤膜,过滤时间短。结论:10KD聚醚砜超滤膜能有效去除细菌内毒素,保留有效成分并去除杂质分子,同时能保证较高的膜通量,适用于灯盏花素注射液的生产。

动态浊度法测定丙泊酚中细菌内毒素含量

目的建立丙泊酚中细菌内毒素定量测定的动态浊度法。方法通过测定供试液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,确定样品无干扰浓度,定量测定样品中的细菌内毒素含量。结果内毒素检测浓度线性范围为0.031 25~2.0 EU/m L(r=-0.995 4);样品在稀释成1.25 g/L及以下时对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率为50%~200%;3批样品的内毒素定量测定结果符合规定。结论丙泊酚中细菌内毒素的定量检测用动态浊度法可行。

注射用曲克芦丁发生临床ADR后动态浊度法测定细菌内毒素含量

目的:建立细菌内毒素动态浊度法,定量检测涉药物不良反应ADR批次与正常批次注射用曲克芦丁中内毒素含量的差异。方法:依据《中华人民共和国药典》2015年版四部通则1143“细菌内毒素检查法”中动态浊度法,建立细菌内毒素检查的标准曲线并作可靠性分析,对供试品中的细菌内毒素进行定量检测。结果:经干扰预试验选择注射用曲克芦丁稀释40倍即1.25 mg·mL^(-1)浓度时对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率均符合50%~200%范围要求,6批次供试品中内毒素含量均符合规定,但涉ADR的2个批次的内毒素含量显著高于合格样品。结论:建立的动态浊度法可用于定量检测注射用曲克芦丁的细菌内毒素含量,可更清晰、可靠地用于比较产品批次间质量差异。

动态浊度法检测能力验证样品中细菌内毒素的含量

目的:检测能力验证样品中细菌内毒素的含量。方法:选用光度测定法中的动态浊度法。建立细菌内毒素检查的标准曲线,通过测定样品外加内毒素的回收率进行干扰试验,确定样品检测浓度线性范围,并测定样品中的细菌内毒素含量。结果:内毒素检测浓度线性范围为0.03125~2.0 EU·mL-1(r=-0.9962);样品在稀释200~1600倍时对试验无干扰作用;细菌内毒素回收率为50%~200%;检测结果为66.44 EU。结论:动态浊度法测定该能力验证样品的检测方法可靠、结果准确。

细菌内毒素对A群C群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖蛋白质含量测定结果的影响

目的 探究Lowry法测定A群C群脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)多糖原液蛋白质含量时,细菌内毒素对Lowry法的干扰情况。方法 根据《中华人民共和国药典》2015版(三部)规定的方法,测定含不同浓度的细菌内毒素的A群C群脑膜炎球菌多糖原液的蛋白质含量,对检测结果进行分析。以细菌内毒素为干扰物质,设计3种方法进行验证,对验证结果进行离散系数,即CV值分析,确定干扰限值。结果 当细菌内毒素含量较高时,A群C群脑膜炎球菌多糖原液的蛋白质含量明显增高,该结果可能为假阳性。验证试验结果显示,当溶液中细菌内毒素浓度达到0.313EU/mL时,会对检测结果产生干扰,浓度越高,干扰程度越高。结论 为获得准确的检测结果,当细菌内毒素浓度达到干扰限值时,应先消除干扰,再测定蛋白质含量。

自制RO-EDI透析用水处理系统产水质量的分析

本研究自主设计并制造了基于RO-EDI的血液透析用水处理系统,介绍了该系统的基本原理与组成。采用药典法在产水终端输送口取样,测试了细菌总数、细菌内毒素含量及K+、Na+、Cu2+、Pb+、Zn2+、Cd2+、Mg2+等各离子含量等指标。实验结果表明:该台RO-EDI透析用水处理系统产水的微生物指标、细菌内毒素含量、离子含量等均达到了相关的国家标准要求。通过将水样送至相关权威部门检测验证,与我们自行检测结果一致,表明我们的检测方法可行。

药品质量标准与药品质量评价相关性分析

药品质量与医疗卫生工作的开展存在紧密的联系,只有保障药品质量才能够促进医疗卫生工作的优化开展,提高治疗效果。因此新时期在全面推进我国医药卫生制度改革的情况下,要认识到制定药品质量标准以及开展药品质量评价的重要性,并在这方面做出相应的实践探索,确保药品质量标准与药品质量评价工作的落实,为我国医药卫生事业的发展提供良好的支持。本文在简要分析药品质量标准与药品质量评价相关工作的基础上,对药品质量保障限度检查和优化开展药品质量评价工作的措施进行了适当的探索,希望能够为医药部门深化改革提供相应的参考。

不同稀释液对苯磺顺阿曲库铵注射液内毒素测定的影响研究

目的检测苯磺顺阿曲库铵注射液的细菌内毒素含量。方法选用光度测定法中的动态显色法测定苯磺顺阿曲库铵注射液中内毒素的含量。结果采用动态显色法对苯磺顺阿曲库铵注射液进行内毒素含量检测,其稀释剂仅可采用镁离子缓冲液,采用细菌内毒素检查用水进行实验时,实验方法不成立。结论苯磺顺阿曲库铵对鲎试剂与内毒素的凝集反应有较强的抑制作用,采用镁离子缓冲液作为稀释剂对其内毒素进行测定,方法可靠、结果准确。

吸附无细胞百白破联合疫苗成品内毒素含量检测

目的 对氢氧化铝佐剂吸附的无细胞百白破联合疫苗（diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,adsorbed,DTaP）成品中内毒素含量进行测定,确定将内毒素检查方法纳入2015版《中国药典》中百白破类疫苗质量标准的可行性和必要性。方法 参考《中国药典》三部（2010版）附录狱E建立动态浊度法,测定解吸附前后DTaP中细菌内毒素含量,并进行标准曲线的可靠性及干扰试验验证。结果 该方法在0.005-10 EU/ml范围内线性较好,r=-0.997 1。干扰试验样品回收率在50%-200%。实测样品内毒素值从低于检测限至433 EU/ml。不同厂家及同一厂家不同批次产品解吸附前后的内毒素测定值差异显著,CV值在36.9%-89.0%之间。结论 该方法可靠性、线性、回收率、灵敏度均符合要求,为进一步制定DTaP相关质量标准提供参考。现有热原检测方法不能全面反映DTaP成品中内毒素水平,有必要将内毒素检测纳入DTaP质量标准,以更好地控制疫苗安全性。

脑膜炎球菌结合疫苗制备过程中各阶段产物的细菌内毒素含量分析

目的:以细菌内毒素检查法(动态浊度法)对脑膜炎球菌结合疫苗生产过程中各阶段产物进行细菌内毒素含量分析,观察疫苗生产过程细菌内毒素来源及其变化,为今后疫苗生产过程中细菌内毒素质量控制提供依据。方法:在对供试品处理和方法的标准化的基础上,以《中华人民共和国药典》2010年版三部所录动态浊度法对疫苗不同生产阶段的过程产物和疫苗成品进行全面监控。结果:影响脑膜炎球菌结合疫苗细菌内毒素含量的主要来源为原料多糖和载体蛋白质,疫苗制备过程可以很好控制细菌内毒素含量。结论:疫苗生产过程可以有效控制疫苗的细菌内毒素含量,降低疫苗中的细菌内毒素含量可从原料着手,对多糖和载体蛋白质纯化工艺改进,进而控制疫苗的细菌内毒素含量至更低水平以提高疫苗的安全性。

不同贮存条件对纯化水质量的影响

目的观察不同贮存条件对纯化水水质的影响,以提供优质的医疗用水。方法采用理化分析和微生物检测方法,对储存中的纯化水的水质指标进行监测。结果在同一贮存周期内,影响微生物生长速率和总有机碳值的对应贮存温度:35℃>15℃>25℃>4℃;在4℃、15℃、25℃和35℃条件下,随着贮存时间延长,纯化水微生物出现先增后减再增的趋势,总有机碳值出现逐渐升高的趋势;细菌内毒素在贮存时间120 h内的四个检测温度条件下均<0.25 EU/ml,电导率未出现显著变化趋势。结论纯化水贮存最佳贮存温度条件为4℃。当纯化水内微生物含量低于20 cfu/ml时,在4℃、15℃和25℃温度条件下,贮存时间应不超过5 d,35℃温度条件下,不宜贮存过夜。根据不同气温确定纯化水贮存时间以及灭菌频率可有效保证纯化水的质量。

动态浊度法测定多西他赛注射液中细菌内毒素的含量

目的:建立测定多西他赛注射液中细菌内毒素含量的方法。方法:采用动态浊度法。确立细菌内毒素检查的标准曲线及稀释倍数,通过测定供试液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,确定样品检测浓度线性范围,并定量测定样品中的细菌内毒素。结果:内毒素检测浓度线性范围为0.03125～2.0EU·mL-1(r=-0.9999);样品在稀释12～96倍时对试验无干扰作用;细菌内毒素回收率为50%～200%;3批样品的内毒素定量测定结果符合规定。结论:动态浊度法可用于多西他赛注射液中细菌内毒素的定量检测。