屎肠球菌细菌素Enterocin E9 SPE/HPLC分离纯化方法的建立

为了获得单一的细菌素Enterocin E9成分,使其发挥最大抑菌活性,建立在线SPE/HPLC分离Enterocin E9的方法。通过细菌培养,上清液收集、浓缩,获得细菌素粗提样品,采用Sepbox 2D-250全自动二维液相分离系统,确认流动相组成,流速和洗脱时间等因素。提取的单一成分其抑菌效果是浓缩样品的2.4倍。该方法省时、省力、精密度高,为细菌素结构与功能的研究提供一条有效途径和方法。

屎肠球菌素E9的产生和特性研究

用琼脂扩散法分别检测了不同培养时间的屎肠球菌E9无细胞上清液和连接在菌体上的Enterocin E9活性,同时分析了Enterocin E9的生物学特性。结果显示：含Enterocin E9的上清液和菌体都具有抑菌活性,活性大小存在浓度依赖性。在一定时间范围内,其上清液和菌体的活性都随着培养时间的增加而逐渐升高。取上清液进行稳定性分析,结果发现Enterocin E9有很好耐热和耐酸碱性,经121℃处理20 min后其活性仍大部分保留,在pH2~12的范围内37℃下处理4 h仍保持较高活性;不同浓度的吐温-80对其活性无明显影响;室温放置7周后,活性无明显变化。上述实验说明屎肠球菌E9产生的细菌素不仅分泌到上清液中,同时还有较大部分与菌体结合。Enterocin E9稳定性良好,储藏条件简单,具有在畜牧业中应用的潜能。