酶底物光谱法与酶底物法检测水中大肠菌群的比较分析

采用新型酶底物光谱法和酶底物法对不同类型水样中总大肠菌群、大肠埃希氏菌及粪大肠菌群指标进行同步检测。两种方法各有优势,采用SPSS软件对检测结果处理后进行配对t检验,结果显示:两组总大肠菌群的数据P=0.057,相关系数r=0.904;两组大肠埃希氏菌的数据P=0.593,相关系数r=0.972;两组粪大肠菌群的数据P=0.136,相关系数r=0.986,表明两种检测方法具有相关性,且没有统计学意义上的显著性差异。采用酶底物光谱法检测有证质控样品,总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪大肠菌群的检测结果均在质控样真值范围内,证明该方法检测准确度符合要求。酶底物光谱法与酶底物法相比,反应原理类似,操作更加简便,具有仪器自动化和智能化快速检测、判读、存储、联网传输数据等优点,可满足实验室常规检测需求,在应急突发事件现场检测方面有较强的运用前景和优势。

水中粪大肠菌群的测定-酶底物法与荧光光度法的比较

采用酶底物法和荧光光度法对水源水、景观水、污水中粪大肠菌群进行检测。通过检测高浓度标准样品与低浓度标准样品发现,酶底物法和荧光光度法相比,荧光光度法检测结果相对误差更小,跟接近于真值,其结果更为准确。荧光光度法相对标准偏差低于酶底物法,表明荧光光度法检测的稳定性优于酶底物法。通过选取不同类型的实际样品分别用2种方法测定,并对结果进行统计学分析,发现2种方法在统计学中具有相关性,无显著差异。采用荧光光度法测定粪大肠菌群具有测定时间短,减少了人为误差,同时避免了测定时间对结果的影响,特别适合应急检测。

酶底物法测定污泥中粪大肠菌群的方法研究及比对

为了提高污泥微生物学指标粪大肠菌群的检测效率,验证采用酶底物法检测该指标的可行性及适应性,开展方法研究及比对试验。采用酶底物法和多管发酵法对污泥中粪大肠菌群进行同步测定,检测结果采用SPSS软件进行数据处理及配对t检验,全国6家实验室201组比对结果显示:两组数据P=0.141(>0.05),相关系数r=0.964,表明两种检测方法相关性较好,没有统计学意义上的显著性差异,具有一致性。3家实验室的6个实验组分别对低、中、高三个浓度的实际样品以及有证标准物质配制的样品进行了6次重复测定:实验室内相对标准偏差范围分别为4.5%~13.7%、1.6%~6.7%、1.4%~3.6%和1.1%~4.5%;实验室间相对标准偏差分别为8.7%、5.2%、5.3%、3.1%;重复性限依次为0.44、0.39、0.43和0.27;再现性限依次为0.44、0.49、0.81和0.31;实验室内的相对误差范围为0.91%~2.8%;相对误差最终值为1.9%±1.5%。通过试验验证,酶底物法测定污泥中粪大肠菌群的方法精密度、准确度符合要求,确认方法检出限为10MPN/g。多管发酵法、滤膜法分别是现行检测污泥中粪大肠菌群的国标方法和行标方法,酶底物法与前两者相比,具有操作简单、准确度高、不需要确证试验、检测效率高等特点。酶底物法可作为测定污泥中粪大肠菌群指标的补充方法。

新型水中总大肠菌群与大肠埃希氏菌检测方法的应用分析

为应对水质突发情况,减少检测时间,提高检测效率,文章对全自动微生物检测分析仪法的检测准确度、检测时间做了针对性的研究,并与国标中检测方法(酶底物法、滤膜法)检测实际样品的结果进行了对比分析。利用全自动微生物检测分析仪法分别检测高、低两种浓度的质控样品发现,所有检测结果均符合质控真值要求,检测结果可靠。利用梯度稀释并记录检测结果与时间发现,当样品浓度为0~1.0×10^(8)CFU/(100 mL)时,检测时间为2~18 h,样品浓度越高,检测时间越短。实际水样检测对比发现,全自动微生物检测分析仪法分别与国标中检测方法(滤膜法、酶底物法)检测结果配对t检验,总大肠菌群的配对t检验结果为P=0.122(>0.05)与P=0.351(>0.05),无显著性差异;大肠埃希氏菌的配对t检验结果为P=0.086(>0.05)与P=0.082(>0.05),无显著差异性。在保证数据准确性的前提下,利用全自动微生物检测分析仪法检测可以大幅缩短检测时间,适宜检测各类应急水质情况。

水中粪大肠菌群四种监测方法的对比分析

粪大肠菌群作为一项能够反映水质卫生安全程度的因子,已成为水体污染评价的重要指标。目前,国内环境监测领域主流的测定方法有多管发酵法、纸片快速法、酶底物法和滤膜法4种。从原理、阳性判别方式、适用范围、检出限、方法特点和干扰因素等方面对上述4种方法进行对比论述,表明了4种方法所具有的特性,总结了实际工作中应当因地制宜选择合适的测定方法,有助于提升监测质量、提高工作效率。

基于酶底物法检测饮用水中大肠埃希氏菌的研究

为探究酶底物法检测饮用水中大肠埃希氏菌的准确性和便捷性,从不同地点采集水样,采用标准检测法和酶底物法同时检测饮用水中的大肠埃希氏菌。结果表明,标准检测法检测出16份阳性样品和3份阴性样品,酶底物法检测出17份阳性样品和2份阴性样品,两种方法检测的阳性率无显著性差异(P>0.05);14份样品最大可能数一致,5份样品最大可能数有差异,酶底物法检测的灵敏度高于标准检测法。本研究为饮用水中微生物的快速、高效检测提供了数据基础。

水中粪大肠菌群的测定——多管发酵法与酶底物法的比较

采用多管发酵法和酶底物法,同步测定30个平行样品中的粪大肠菌群。比较数据结果表明,2种方法测定的实验结果具有相关性,且在统计学上没有显著差异。多管发酵法虽作为经典的粪大肠菌群检测方法,需要的试剂和器材比较多,分析步骤多,检测周期长,样品检测结果的相对偏差明显高于酶底物法。酶底物法检测周期短,操作方便,对试验环境条件要求低,弥补了多管发酵法的不足能更好满足环境监测要求。

罗定市城乡生活饮用水水质微生物检测方法研究

目的:评估罗定市城乡生活饮用水水质微生物安全性,并比较多管发酵法与酶底物法在水质微生物检测中的应用效果。方法:分别于枯水期和丰水期,在城市和乡村各采集40份出厂水水样和40份末梢水水样,合计320份水样。采用多管发酵法和酶底物法检测样品中总大肠菌群、大肠埃希氏菌。结果:对于城乡枯水期和丰水期饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检出率,酶底物法均高于多管发酵法,但差异无统计学意义(P> 0.05);对于城乡出厂水及末梢水饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检出率,酶底物法也高于多管发酵法,但差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:酶底物法在检测饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌方面具有较高的灵敏度,且其操作便捷、高效,适合推广使用。但酶底物法的检测成本较高,在实际应用中还需要权衡成本与效率之间的关系。

水中菌落总数测定方法的比较

本研究采用平皿计数法、酶底物法和Easy Disc法3种不同的菌落总数测定方法对有证质控样品、阴性样品及不同细菌浓度的实际样品进行检测。对比结果表明,3种检测方法均能准确检测有证质控样品。通过对比实际样品及阴性样品的检测结果发现,酶底物法和Easy Disc法相较于传统的平皿计数法,在检测菌落总数时具有准确度更高、操作更简便、稳定性好等优势,抗环境因素干扰更强,检测适用性更广,更适合多数条件受限的实验室进行菌落总数的测定。

固定酶底物法测定水中粪大肠菌群的优点及影响因素分析

固定酶底物法是一种常用的检测水中粪大肠菌群的方法,其优点包括操作简便、检测灵敏度高、结果可靠等。然而,该方法的准确性和稳定性受到多种因素的影响,如底物浓度、酶反应条件、水样处理等。为了进一步提高该方法的检测准确性和稳定性,研究人员可以从优化底物选择、优化反应条件、优化水样处理等方面进行探索。介绍了固定酶底物法测定水中粪大肠菌群的基本概念和研究背景,重点探讨了该方法的优点和影响因素。通过优化底物选择、反应条件和水样处理等方面的研究,进一步提高该方法的准确性和稳定性,有助于更好地应用固定酶底物法来监测水质,保障公共卫生安全。

水中粪大肠菌群检测方法的对比

文中进行了多管发酵法和酶底物法检测水中(耐热)粪大肠菌群结果的对比。首先,试验通过对认证的商售IDEXXQC大肠埃希氏菌和绿脓假单胞菌分别作为阳性和阴性控制菌株进行检测,其结果显示均在置信范围。其次,用较清洁的水样和污水进水水样分别进行多管发酵法和酶底物法平行检测,并进行配对t检验。较清洁的水样结果显示P=0.818(>0.05)、相关系数r=0.947;污水进水水样结果显示P=0.712(>0.05)、相关系数r=0.602,差异无统计学意义。相关系数均大于0.6,两种检测方法相关性均较强,说明多管发酵法和酶底物法检测水中(耐热)粪大肠菌群具有一致性。

粪大肠菌群酶底物法在环境应急监测中的应用

结合国外粪大肠菌群的酶底物检测方法,针对某次突发环境污染事件,用酶底物法和标准方法多管发酵法同步检测受污染地表水中的粪大肠菌群,讨论酶底物法在应急监测中检测粪大肠菌群的适用性。结果表明,两种方法的测定数据显著相关,没有统计学差异(P>0.05)。相对于多管发酵法,酶底物法特异性强,检测时间短,二次污染少,符合应急监测的要求。

在高于米氏常数的底物浓度下用积分法测定尿酸酶活性

目的 :以尿酸酶为模型 ,考察在底物浓度高于酶米氏常数 (Km)时用积分法测定酶活性 (Vm)的可靠性 .方法 :用 2 93nm光吸收记录尿酸酶反应曲线 .用以反应时间为自变量的积分速度方程 ,以尿酸酶Km 为常数而本底为非线性参数拟合尿酸酶反应曲线 ,搜寻对应最好拟合的Vm.结果 :此积分法测定Vm 主要受剩余底物浓度影响 ,本底基本没有干扰 .剩余底物低于 2 .5 μmol/L时用 1 0～ 70 μmol/L起始底物所得Vm 无差异 .用 2 5和 70 μmol/L起始底物浓度时初速度和Vm 都与酶量呈正比 .在此两种底物浓度下积分法的下限相同 ,且与初速度法下限无明显差异 .但用积分法测定酶活性的上限明显高于初速度法 ,而且起始底物浓度越低则差异越显著 .结论 :在积分法中使用以反应时间为自变量的积分速度方程拟合酶反应曲线 ,在高于Km

土壤水解酶活性测定方法的研究进展

土壤水解酶直接参与有机物质的矿质化过程,对维持生态系统碳和养分的循环过程起重要作用。但不同研究者和实验室测定过程的差异,常给土壤酶测定方法的选定带来困难。针对这一问题,本文围绕土壤酶活性测定过程中样本贮存方式、酶底物选择以及培养条件等,对近二十多年来的研究成果进行了评述。土壤酶来源广泛,存在形式复杂,直接提取土壤酶还有很大的难度。目前土壤酶活性的测定主要是通过一定量底物在酶催化反应过程中的生成物或剩余物量来实现。基于对硝基酚衍生物为底物的分光比色法,因其成本低廉而被广泛使用。针对国际上未能建立统一的测定方法而导致研究数据之间难以进行比较的现状,作者认为现阶段土壤水解酶测定过程中应注意以下几点:1)尽量采用新鲜土样或短时间低温冷藏的土样;2)酶底物种类的选择应与国际接轨,采用饱和底物浓度使其反应速度接近最大值;3)缓冲液的pH值可与土壤pH值相近;4)4 h内培养的土壤酶,可忽略微生物抑制剂的使用。建议我国在近期内:1)应丰富土壤水解酶种类的研究;2)注重灵敏度高、需样量小以及培养时间短的荧光分析技术的应用;3)在强化典型土壤酶动力学特征研究基础上,尽快规范土壤酶活性的测定方法。

酶底物法与多管发酵法和纸片法监测环境水样大肠菌群的比较

用标准菌株对比了酶底物法和多管发酵法及快速纸片法,监测分析了分组环境水样中的大肠菌群。结果表明,酶底物法操作快速、简单、结果稳定、无二次污染,能满足水质监测和应急监测的需求。

酶底物法快速检测食品中的大肠埃希氏菌

目的将水质检验的酶底物法用于食品检验,探索酶底物法是否能快速检测食品中的大肠埃希氏菌。方法测定食品样品,比较酶底物法与传统鉴定法结果的一致性。结果传统方法检出24份阳性和8份阴性,酶底物法检出25份阳性和7份阴性。实验结果进行X^2检验,结果无显著性差异(X^2=0.087,P>0.05)。32份样品MPN值结果一致,8份样品MPN值有差异,其中7份样品酶底物法的MPN值大于传统法。结论酶底物法可用于食品中大肠埃希氏菌的快速检测,具有快捷简便、特异性高的优势。

蔬菜中大肠杆菌的快速检测方法

蔬莱中埃希氏大肠杆菌的酶-底物快速检测法，以FCM培养液中添加MUG作为与埃希氏菌在培养过程中生成的β-葡萄糖苷酸酶反应的底物，埃希氏菌则作为蔬菜提取物样品加入培养液中．阳性结果系根据MUG被酶作用后的水解产物在3650A紫外线照射下所产生的蓝色荧光反应．培养物中MUG的合适剂量为50μg／mL，获得阳性结果时间不超过24h，本法与传统的多管发酵法比较结果表明，在检测粪源性污染的蔬菜样品时，它的敏感性及准确性与多管发酵法相一致。

生色底物连续速率法测定圆斑蝰蛇凝血因子X激活剂的活性

目的：采用生色底物连续速率法测定凝血因子X激活剂的酶学活性。方法：将凝血因子X激活剂与凝血因子X及生色底物同时加入反应体系,以1 min为间隔时间,连续监测凝血因子Xa的生色底物Suc-Ile-Gly（γP ip）G ly-Arg-pNA在405 nm波长下的吸收值变化。通过吸收值对时间平方作图所得直线的斜率,对凝血因子X激活剂的浓度进行线性回归从而测得供试品的活性。结果：该方法的线性范围为0.45-1.20 u·mL^-1,凝血因子X激活剂制剂与溶液的板间精密度（n=4）分别为6.2%及6.8%,板内精密度（n=3）分别为1.5%和1.8%。结论：本方法进行凝血因子X激活剂的活性测定,快速、准确、重现性良好。

单增李斯特菌便捷检测试纸的制备及检测效果

目的:研究一种快速、便捷检测食品中单增李斯特菌的方法,拟对本实验室制备的单增李斯特菌快速检测试纸(Listeria monocytogenes-fast test paper,LM-FTP)(专利受理号:201510274726.9)进行检测效果评价。方法:采集肉样、乳样、水样和蔬菜,用LM-FTP进行检测,并与市售单增李斯特菌检测试纸片(3M Petrifilm^(TM))进行比对实验。结果:LM-FTP的检测特异性为100%,检测限为2.1×10~4 CFU/m L。增菌培养到报告结果只需5.5 h。LM-FTP和3M Petrifilm^(TM)检测都可对样品完成检测,对农贸市场畜产品及蔬菜检测,二者符合率为75%,对超市同类食品检测,二者符合率为62.5%;对超市熟食检测时,二者符合率为93.75%。结论:与市售3M Petrifilm^(TM)检测方法相比,LM-FTP检测试纸制备简单,操作便捷,较3M Petrifilm^(TM)的24 h报告结果更节省时间,但在检测灵敏度方面有一定差距,尚需进一步研究改进。

漆酶的活性测定及催化单取代Fc—R氧化反应

在二乙二醇单丁醚（ＤＧＢＥ）／磷酸盐缓冲液体系中，以二茂铁（Ｆｃ—Ｈ）为底物，用分光光度法测定湖北毛坝漆树漆酶的活性无副产物干扰．该方法简便、准确、易行．考察了漆树漆酶对２９个单取代二茂铁衍生物（Ｆｃ—Ｒ）和左旋多巴的催化氧化反应，发现了漆酶１４个新的底物。