CD44表达量对胶质母细胞瘤患者预后的影响分析

目的探讨CD44表达量对胶质母细胞瘤(GBM)患者预后的影响。方法选取2021年7月1日至2023年8月31日解放军总医院第一医学中心收治的102例GBM患者为研究对象,以术中切除肿瘤组织CD44积分光密度(IOD)的平均值为分界线,将研究对象分为CD44高表达组(IOD≥699023,51例)和CD44低表达组(IOD<699023,51例)。比较分析两组患者的一般资料、生存结局。采用单因素分析及Cox多因素回归方法分析GBM患者总生存率的影响因素。结果两组患者的性别、年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)。患者术后随访时间2.6~27.5个月,中位随访时间15.0个月,10例患者存活,其中CD44高表达组有3例患者存活,CD44低表达组有7例患者存活,CD44低表达组患者的中位总生存期为18.3个月,CD44高表达组患者的中位总生存期为13.6个月,log-rank检验结果显示,CD44低表达组患者的总生存率高于CD44高表达组(χ^(2)=22.233,P<0.001)。术后放化疗、手术切除程度、肿瘤性质、MGMT启动子甲基化状态、CD44表达量与GBM患者的总生存率显著相关(P<0.05)。Cox多因素回归分析结果显示,原发GEM、术后放化疗、完全切除、MGMT启动子甲基化、CD44低表达均为GBM患者总生存率的独立保护因素(P<0.05)。结论CD44表达量与GBM患者的预后显著相关,且CD44低表达为GBM患者总生存率的独立保护因素。

木兰花碱调控CD44s/STAT3通路对肺癌细胞迁移、侵袭及干性特征的影响实验研究

目的:探讨木兰花碱(Mag)对肺癌细胞迁移、侵袭、干性特征的影响及其作用机制。方法:使用不同浓度的Mag(0、10、20、40、80、160μmol/L)作用于肺癌细胞A549,检测细胞存活率,根据半抑制浓度(IC 50)值选择10、20、40μmol/L Mag进行后续实验。将肺癌细胞A549随机分为A549组、Mag-L组(10μmol/L Mag培养基培养)、Mag-M组(20μmol/L Mag培养基培养)、Mag-H组(40μmol/L Mag培养基培养)和Mag-H+信号转导及转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin组(40μmol/L Mag+10μmol/L Colivelin培养基培养)。采用平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数量。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Transwell实验检测各组细胞迁移及侵袭能力。采用肿瘤细胞成球实验检测细胞干性。采用Western blot检测各组细胞CD44s/STAT3通路及细胞干性相关蛋白表达。结果:与A549组比较,Mag-L组、Mag-M组、Mag-H组细胞克隆形成数量、迁移及侵袭细胞数、干细胞成球数和细胞中CD44s、STAT3、CD133、八聚体结合转录因子4(OCT4)、SRY-box转录因子2(SOX2)表达水平逐渐降低,而细胞凋亡率逐渐升高(均P<0.05)。在高浓度Mag的基础上加入STAT3激活剂Colivelin逆转了以上指标的变化趋势。结论:Mag能够抑制肺癌细胞迁移、侵袭及干性特征,其机制可能与下调CD44s/STAT3通路有关。

CD44通过影响猪流行性腹泻病毒复制调节钠氢交换体3活性

本研究旨在研究CD44(cluster of differentiation 44)对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中钠氢交换体3(NHE3)表达及膜转移的影响。以IPEC-J2为细胞模型,采用RT-qPCR和Western blot检测感染PEDV后不同时间点IPEC-J2细胞中NHE3和PEDV N表达量变化;转染质粒调控IPEC-J2中CD44表达后,采用TCID50和Western blot检测PEDV感染后不同时间点PEDV复制水平和NHE3蛋白表达变化,采用火焰原子吸收法检测IPEC-J2细胞内外Na^(+)浓度变化。转录组数据和细胞试验结果显示,与对照组相比,PEDV感染后IPEC-J2细胞中CD44蛋白表达水平和mRNA表达量均呈上调趋势,24~48 h内上升显著(P<0.05),而PEDV N蛋白表达水平在12~48 h内则呈显著下降趋势(P<0.05)。此外,CD44重组质粒转染试验结果显示,与PEDV感染组相比,过表达CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而干扰CD44后感染PEDV组细胞中病毒滴度和PEDV N蛋白表达水平则显著上升(P<0.05)。以上结果表明,高表达CD44具有抑制PEDV复制的作用,干扰CD44后PEDV复制增多。同时,为研究PEDV感染情况下,CD44是否参与了IPEC-J2细胞中NHE3表达的调节,采用Western blot和火焰原子吸收法检测了调节CD44后膜NHE3蛋白的表达水平和细胞内外Na^(+)浓度。结果表明,过表达CD44显著促进了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度逐渐恢复正常水平。相反,干扰CD44显著降低了膜NHE3蛋白的表达和活性(P<0.05),细胞内外Na^(+)浓度呈现失衡状态。结果提示,CD44可能是缓解PEDV引发仔猪腹泻的潜在治疗靶点,它通过抑制IPEC-J2细胞中PEDV的复制来增加转移至质膜上的NHE3数量,从而维持细胞内外Na^(+)运转平衡。

CD44异构体在HER23+阳性乳腺癌中的表达及其与预后的关系

背景跨膜蛋白CD44与癌细胞侵袭和转移行为有密切关系,其异构体CD44v6和CD44v8-10在HER23+阳性乳腺癌中的作用尚不明确。目的分析CD44异构体CD44v6和CD44v8-10在HER23+阳性乳腺癌中的表达及其与预后的关系。方法收集2019年1月—2022年6月就诊于东莞市妇幼保健院乳腺科经术前粗针穿刺活检确诊HER23+,并接受新辅助治疗后行手术切除的乳腺癌患者。应用免疫组织化学(IHC)对乳腺癌标本进行CD44v6和CD44v8-10染色,分析两者与HER2、雌激素受体、孕激素受体等临床病理特征和病理完全缓解(pathologic complete response,pCR)之间的关系。结果86例HER23+阳性乳腺癌患者年龄(46.99±10.01)岁,均为女性。全部患者均表现出CD44异构体异质性表达,其中55例(64.0%)CD44v6高表达,58例(67.4%)CD44v8-10高表达。CD44v6高表达组的ER阳性率(76.4%vs 48.4%,P=0.017)、PR阳性率(78.2%vs 19.4%,P<0.001)和Ki67阳性指数(81.8%vs 61.3%,P=0.043)均高于CD44v6低表达组,差异有统计学意义。CD44v8-10高表达组的PR阳性率(70.7%vs 28.6%,P<0.001)和淋巴结转移发生率(72.4%vs 14.3%,P<0.001)均高于CD44v8-10低表达组,差异有统计学意义。此外,CD44v6低表达组和CD44v8-10低表达组的pCR率均显著高于CD44v6高表达组(54.8%vs 30.9%,P=0.039)和CD44v8-10高表达组(71.4%vs 24.1%,P<0.001),差异有统计学意义。多因素Logistic回归分析显示HER2弥漫3+和CD44v8-10高表达的患者pCR率更低(OR=5.281,95%CI:1.346~20.718,P=0.017;OR=5.062,95%CI:1.232~20.799,P=0.024)。结论CD44异构体与HER23+阳性乳腺癌的恶性特征相关,CD44v8-10可作为HER2弥漫3+预后不良的标志物。

苏木对肺癌干细胞荷瘤小鼠原发肿瘤CD44v6表达的影响

目的研究苏木对肺癌干细胞样细胞PG-BE1荷瘤小鼠原发瘤中CD44v6蛋白表达的影响。方法利用无血清培养法分选PG-BE1细胞中的干细胞样细胞,将干细胞样细胞亚群接种于小鼠下肢脚垫。采用药物对小鼠进行干预,第21天剥取小鼠原发瘤组织,采用Western Blot法、免疫组化法检测原发瘤组织CD44v6的表达。结果原发瘤重方面,苏木联合顺铂组较空白组、苏木组和顺铂组减少(P<0.05)。苏木加顺铂组较顺铂组、苏木组、空白组CD44V6表达较少(P<0.05)。免疫组化法检测苏木在原发瘤组织中CD44v6均有表达。结论苏木可以协同顺铂减少CD44v6蛋白的表达从而增加肺癌干细胞样细胞荷瘤小鼠模型原发肿瘤的抑瘤率。

CD44的生物特征及在恶性肿瘤中的研究进展

CD44是一种复杂的跨膜糖蛋白,在肿瘤干细胞上过度表达。CD44表达失调与肿瘤发生和发展有关。CD44参与多种重要信号通路的调控,与肿瘤增殖、侵袭、转移和治疗耐药密切相关。CD44过度表达抑制化疗药物在多种癌症中的细胞毒作用。因此,CD44可以作为癌症患者的不良预后标志物。CD44过度表达为化疗耐药患者的治疗干预提供新的分子靶点。本篇综述重点概述CD44的结构功能,CD44在肿瘤细胞干性和肿瘤发生发展中的作用,及与癌症患者预后的关系。

血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用及与Hp-IgG表达的关系

目的 探究血清微小RNA-133a(miR-133a)、可溶性CD44变体6(sCD44v6)和胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用,并研究其与幽门螺杆菌-免疫球蛋白G(Hp-IgG)表达的关系。方法 回顾性选取2020年1月至2023年1月在重庆市开州区人民医院就诊的胃癌患者103例(胃癌组)、癌前病变患者112例(癌前病变组)及同期在本院进行体检的健康志愿者100名(对照组)作为本次研究对象。收集各组对象的血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平,并探究其对胃癌及癌前病变筛查的诊断价值。比较癌前病变组及胃癌组患者Hp-IgG检测结果,并分析胃癌组及癌前病变组Hp-IgG阳性率与血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平的相关性。结果 癌前病变组、胃癌组患者血清miR-133a相对表达水平低于对照组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于对照组,且胃癌组血清miR-133a相对表达水平低于癌前病变组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于癌前病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断癌前病变的曲线下面积(AUC)值分别为0.621、0.932、0.945(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断胃癌的AUC值分别为0.864、0.876、0.845(P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率为79.61%,高于癌前病变组(41.07%),差异有统计学意义(P<0.05)。癌前病变组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性(r=-0.065,P>0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.404、0.344,P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平呈负相关(r=-0.693,P<0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.765、0.766,P<0.05)。结论 在胃癌和癌前病变中,血清miR-133a的相对表达水平较低,而sCD44v6和胃泌素-17的水平较高,且具有一定诊断价值,可用于胃癌和癌前病变的筛查。胃癌患者的Hp-IgG阳性率较高,并且与血清miR-133a呈负相关,与sCD44v6和胃泌素-17呈正相关。在癌前病变患者中,Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性,但与sCD44v6和胃泌素-17的水平呈正相关,应密切关注Hp-IgG在患者中的表达情况。

编码基因/非编码基因调控CD44在多种肿瘤耐药机制中的研究进展

多种肿瘤(胰腺癌,肺癌,结直肠癌等)长效耐药细胞显著增强其转移性,且诱导CD44蛋白表达.CD44是一种非激酶受体,在多种肿瘤中作为肿瘤干细胞标记物在侵袭和转移中发挥重要作用.早期联合一线化疗药和靶向CD44的药物、探索靶向CD44的合理给药时间点可能提升临床已转移的恶性肿瘤患者的总体生存率.从编码基因(转录因子、异质核糖核蛋白、上皮剪接调节蛋白、细胞因子以及蛋白激酶)和非编码基因(LncRNA、miRNA和circRNA)两方面介绍CD44上游调控因子介导的肿瘤耐药和转移机制.此外,还总结在耐药肿瘤细胞中CD44的亚型转换、表达调控、CD44下游效应分子的信号通路和CD44作为癌症治疗靶点的临床意义.

白血病抑制因子通过调控CD44的表达增强结直肠癌细胞干性特征

目的:探讨白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)通过调控肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)分子标志物CD44的表达增强结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞干性特征的分子机制。方法:利用TCGA公共数据库和RNAscope原位杂交方法分析LIF基因在CRC组织中的表达情况;应用慢病毒感染系统构建稳定敲减LIF的CRC细胞系(HCT116和Caco2细胞);实验分CRC细胞对照组、CRC细胞添加LIF组、CRC细胞敲减LIF对照组和CRC细胞敲减LIF组;应用干细胞成球实验、MTT、RTCA、平板集落及迁移实验检测LIF对CRC细胞的影响;应用RT-qPCR和Western blot检测LIF对CRC肿瘤球细胞干性相关标志物CD44和转录因子ELF3表达的影响;应用RT-qPCR检测敲减LIF后CD44剪接变异体的表达变化。结果:CRC组织中LIF的表达水平高于癌旁组织(P<0.01),且LIF高表达的CRC患者无病生存期缩短(P<0.05),外源性LIF可增强CRC细胞的成球、增殖和迁移能力(P<0.05),敲减LIF可抑制CRC细胞的增殖和迁移(P<0.05)。外源性LIF可上调CRC肿瘤球细胞CD44的表达(P<0.05),而敲减LIF可抑制CD44的表达(P<0.01),同时CD44剪接变异体的转录水平降低。外源性添加LIF和敲减LIF可分别增强和降低转录因子ELF3的表达水平(P<0.05)。结论:LIF通过上调转录因子ELF3,增强CRC细胞CD44的表达,进而增强CRC细胞的干性特征,促进CRC细胞的恶性进展。

双花坤孕方配合孕三烯酮对子宫内膜异位症患者血清CD44及TNF-α的影响

目的探讨双花坤孕方配合孕三烯酮对子宫内膜异位症患者血清CD44及TNF-α的影响。方法选择2022年5月至2023年4月,收治的90例子宫内膜异位症患者,随机分为对照组和观察组,每组45例。对照组给予孕三烯酮治疗,观察组给予双花坤孕方配合孕三烯酮治疗。比较2组治疗前后免疫功能情况;比较2组治疗前后性激素水平变化情况;比较2组治疗前后血清CD44及TNF-α水平变化情况;比较2组疗效症状评分及不良反应情况。结果治疗后,2组血清IgA、Ig G、IgM水平均降低(P<0.05),且观察组更明显(P<0.05);治疗后,2组促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平均降低(P<0.05),且观察组更明显(P<0.05);治疗后,2组血清CD44及TNF-α水平均下降,且观察组更明显(P<0.05);观察组疗效优于对照组(P<0.05)。观察组症状评分及总分均低于对照组(P<0.05)。2组患者药物不良反应无明显差异(P>0.05)。结论对子宫内膜异位症患者给予双花坤孕方配合孕三烯酮治疗,可提高免疫力,改善异常的性激素水平,降低血清CD44及TNF-α水平,改善临床症状,疗效显著,且安全可靠。

CD44差异表达在胶质母细胞瘤中的生物信息学分析及细胞实验验证

目的探究CD44差异表达在胶质母细胞瘤(GBM)中的临床意义以及相关通路的富集并以胶质母细胞瘤细胞系U87进行实验验证。方法通过差异表达和Cox分析确定泛癌转录组中肿瘤患者与健康人的CD44表达是否具有差异以及风险比(HR);比较GBM患者CD44高、低表达组的免疫浸润及干细胞相关评分,并进一步分析各免疫细胞亚群是否具有差异及其与CD44的相关性;对GBM患者CD44高、低表达组差异表达的基因进行通路富集;通过构建、包装慢病毒和运用电转核糖核蛋白复合体的方法在U87细胞中过表达(OE)、敲低(KD)以及敲除(KO)CD44;对U87和U87 CD44 OE细胞进行CD44的免疫荧光染色;敲低CD44对U87细胞的活力与凋亡进行检测,敲除CD44对U87细胞的迁移与侵袭能力进行检测。结果CD44在GBM中表达较高与健康人差异明显(P<0.05),且HR>1。高表达CD44的GBM患者具有较高的基质细胞与免疫浸润评分以及较低的细胞干性,CD44高、低表达的GBM患者的树突状细胞、CD4^(+)记忆T细胞和调节性T细胞具有明显差异,且与CD44表达呈正相关(P<0.05)。CD44高、低表达的GBM患者的差异基因富集在与细胞迁移与凋亡的相关通路(P<0.05)。U87细胞实验表明,CD44正常情况定位在细胞膜,但CD44 OE后会在细胞质中发生蓄积。CD44 KD会导致细胞活力下降,细胞发生凋亡,CD44 KO的细胞迁移与侵袭能力也会下降(P<0.05)。结论CD44表达降低可以促进U87细胞活力降低、凋亡比例升高,侵袭与迁移能力下降,可能是影响GBM患者预后的相关因素。

小儿分泌性中耳炎耳积液中CD44和TLR4表达与腺样体肥大的相关性

目的检测小儿分泌性中耳炎患儿耳积液中分化簇44(CD44)和Toll样受体4(TLR4)表达水平,并分析二者与腺样体肥大的相关性。方法选取纳入80例小儿分泌性中耳炎患儿为观察组,选取同期接受健康体检的100例健康儿童为对照组。检测观察组患儿及对照组儿童耳积液中CD44和TLR4表达水平,并分析二者与腺样体肥大的相关性。采用Pearson法分析耳积液中CD44与TLR4表达水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD44、TLR4对腺样体肥大的诊断价值。结果CD44、TLR4在观察组患儿外周血、耳积液中的表达水平相较于对照组儿童外周血中的表达水平显著升高(P<0.05);CD44、TLR4在观察组患儿耳积液中的表达水平相较于观察组患儿外周血中的表达水平显著升高(P<0.05);CD44、TLR4在观察组浆液性耳积液中的表达水平相较于黏液性耳积液中的表达水平显著降低(P<0.05);CD44、TLR4在观察组慢性中耳炎患儿耳积液中的表达水平相较于急性中耳炎耳积液中的表达水平显著降低(P<0.05);CD44、TLR4在腺样体肥大中耳炎患儿耳积液中的表达水平相较于腺样体正常中耳炎耳积液中的表达水平显著升高(P<0.05);小儿分泌性中耳炎耳积液中CD44和TLR4表达呈正相关(r=0.516,P=0.000)。CD44、TLR4二者联合诊断腺样体肥大的诊断价值显著高于二者单独诊断。结论CD44、TLR4均在小儿分泌性中耳炎耳积液中的表达水平上调,且相较于腺样体正常的患儿,腺样体肥大的患儿耳积液中CD44、TLR4表达水平显著升高,与腺样体肥大密切相关。

Long Non-coding RNA PCED1B Antisense RNA 1 Promotes Cell Proliferation and Invasion in Hepatocellular Carcinoma by Regulating the MicroRNA-34a/CD44 Axis

Objective This study aimed to examine the role of long non-coding RNA PCED1B antisense RNA 1(PCED1B-AS1)in the development of hepatocellular carcinoma(HCC).Methods A total of 62 pairs of HCC tissues and adjacent non-tumor tissues were obtained from 62 HCC patients.The interactions of PCED1B-AS1 and microRNA-34a(miR-34a)were detected by dual luciferase activity assay and RNA pull-down assay.The RNA expression levels of PCED1B-AS1,miR-34a and CD44 were detected by RT-qPCR,and the protein expression level of CD44 was determined by Western blotting.The cell proliferation was detected by cell proliferation assay,and the cell invasion and migration by transwell invasion assay.The HCC tumor growth after PCED1B-AS1 was downregulated was determined by in vivo animal study.Results PCED1B-AS1 was highly expressed in HCC tissues,which was associated with poor survival of HCC patients.Furthermore,PCED1B-AS1 interacted with miR-34a in HCC cells,but they did not regulate the expression of each other.Additionally,PCED1B-AS1 increased the expression level of CD44,which was targeted by miR-34a.The cell proliferation and invasion assay revealed that miR-34a inhibited the proliferation and invasion of HCC in vitro,while CD44 exhibited the opposite effects.Furthermore,PCED1B-AS1 suppressed the role of miR-34a.Moreover,the knockdown of PCED1B-AS1 repressed the HCC tumor growth in nude mice in vivo.Conclusion PCED1B-AS1 may play an oncogenic role by regulating the miR-34a/CD44 axis in HCC.

CD44和MMP-9在RCC中的表达和CTC分类呈正相关

肾细胞癌(RCC)是所有泌尿生殖系统癌中最常见的恶性肿瘤类型,其发病率迅速上升。在此,我们研究了CD44和MMP-9在肾细胞癌(RCC)中的表达与患者的临床病理特征以及循环肿瘤细胞(CTC)之间的关系。共鉴定出114例肿瘤和非癌性肾组织样本。我们回顾了现有的临床记录。采用免疫组化方法检测104例RCC标本和10例非癌性肾组织标本中CD44和MMP-9的表达。采用阳性富集法进行CTC试验和分类。我们发现MMP-9和CD44的阳性表达率分别为69.2%和65%。肾细胞癌患者的发病率分别高于正常肾组织患者(P < 0.05)。MMP-9和CD44的表达与WHO/ISUP核仁分级相关(P < 0.05)。CTC阳性患者中MMP-9和CD44阳性的阳性表达率(分别为60.6%和57.7%)显著高于CTC阴性患者(8.7%和7.7%;P < 0.05)。间充质型CTC患者RCC中MMP-9和CD44的阳性表达率高于混合型和上皮型CTC患者。综上所述,MMP-9和CD44过表达与肾细胞癌的病理分级、CTC数量和分类相关,提示它们可能是潜在的预后因素,成为RCC患者新的潜在治疗靶点。

miR-299-5p联合CD44对儿童非综合征型唇腭裂的诊断价值

目的探究miR-299-5p联合CD44对儿童非综合征型唇腭裂的诊断价值。方法选择濮阳市第三人民医院2019年7月至2022年7月收治的非综合征型唇腭裂患儿80例,其中唇裂伴或不伴腭裂患儿40例记为A组,单纯腭裂患儿40例记为B组。另选取医院同期体检的健康患儿40例记为C组。分别采用实时荧光定量RT-PCR法和免疫印迹法测定受试者的miR-299-5p、CD44的相对表达量。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并根据曲线下面积(AUC)评估miR-299-5p、CD44对儿童非综合征型唇腭裂的诊断效能。结果A、B组的miR-299-5p相对表达量均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。A、B组的CD44相对表达量均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC分析结果显示,miR-299-5p、CD44单一及联合诊断儿童非综合征型唇腭裂的灵敏度分别为72.50%、62.50%、82.50%;特异度分别为72.50%、82.50%、80.00%;AUC分别为0.716(95%CI:0.573~0.859)、0.718(95%CI:0.572~0.862)、0.821(95%CI:0.716~0.965),且二者联合预测效能高于各指标单一预测效能(P<0.05)。结论miR-299-5p、CD44在儿童非综合征型唇腭裂中的诊断效能良好。

CIP2A、CD44v6在尖锐湿疣患者皮损组织中的表达及其与患者预后相关性的研究

目的 探究蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)和CD44v6在尖锐湿疣(CA)患者皮损组织中的表达,分析二者与CA患者HPV基因型分布及其预后的相关性。方法 选取本院2020年4月至2023年4月收治的CA患者100例作为研究组,根据预后情况将患者分为预后良好组和不良组,收集术中保留的皮损组织;另选取本院同期行外阴整形或包皮环切术者100例作为对照组,收集切下的外阴组织或正常包皮组织。实时荧光定量PCR法检测组织标本中的CIP2A、CD44v6 mRNA表达水平。比较研究组与对照组、不同HPV分型组、预后良好组与预后不良组中CIP2A、CD44v6 mRNA的表达水平,分析CA组织中CIP2A、CD44v6的表达与临床特征的关系,采用多因素COX回归分析CA患者预后的影响因素;绘制ROC曲线分析CIP2A、CD44v6对CA患者预后不良的预测价值。结果 研究组CIP2A、CD44v6 mRNA的表达水平显著高于对照组(CIP2A:2.19±0.40 vs 1.01±0.24,t=25.24,P<0.05;CD44v6:1.75±0.33 vs 1.02±0.22,t=18.41,P<0.05)。低危组、高危组和混合组CIP2A、CD44v6 mRNA表达水平均依次升高(均P<0.05)。预后不良组CIP2A、CD44v6 mRNA表达水平显著高于预后良好组(CIP2A:3.58±0.62 vs 1.62±0.31,t=21.05,P<0.05;CD44v6:2.57±0.49 vs 1.42±0.26,t=15.26,P<0.05)。CIP2A、CD44v6的表达与疣体数目和直径有关(均P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,CIP2A、CD44v6的表达以及疣体数目、直径是影响CA患者预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,CIP2A预测CA患者预后不良的AUC为0.866,CD44v6的AUC为0.860,二者联合的AUC为0.928,二者联合优于各自单独预测(Z_(联合vs CIP2A)=2.72、Z_(联合vs CD44v6)=2.73,P均<0.05)。结论 CA患者组织中CIP2A、CD44v6的表达水平显著升高,二者均与HPV基因型分布及其预后有关。CIP2A和CD44v6联合可提高对CA患者预后预测的准确性。

CD44、SOX2在结直肠癌组织中的表达及与预后的相关性

目的探讨CD44、SOX2在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系。方法选取2018年1月至2021年6月本院收治的结直肠癌患者60例及同期手术治疗的结肠腺瘤患者50例,采集癌/瘤组织和癌/瘤旁正常黏膜组织标本,采用免疫组化法检测不同组织标本中CD44、SOX2的表达情况;随访2年,采用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素,比较不同CD44、SOX2表达水平患者的疾病无进展生存率。结果结直肠癌组织的CD44、SOX2阳性表达率高于结肠腺瘤组织和癌旁正常组织(P<0.05);Cox回归分析显示年龄、TMN分期、分化程度、淋巴转移、CD44、SOX2表达情况是结直肠癌预后的主要影响因素(P<0.05);CD44、SOX2双阳性患者2年无进展生存率低于单阳性和阴性患者(P<0.05)。结论CD44、SOX2在结直肠癌组织中异常表达,可能参与结直肠癌的进展,或可成结直肠癌潜在的CSC标志物。

cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌的相关性及预后预测分析

目的分析肿瘤组织的细胞周期素E(cyclin E)和p53、CD44s、CD44v6蛋白与早期乳腺癌的相关性及预后预测价值。方法选取2018年7月—2020年7月喀什地区第二人民医院收治的80例临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的早期乳腺癌患者进行回顾性分析,将其分为恶性组;另选取同期喀什地区第二人民医院收治的80例通过病理学检验确诊为良性乳腺肿瘤患者,将其分为良性组。分别对两组患者留存的肿瘤组织进行免疫组化检测,检测cyclin E、p53、CD44s、CD44v6表达,并对比上述指标的阳性率,应用Spearman相关分析方法分析cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌的相关性。所有患者均采取手术治疗,随后对80例早期乳腺癌患者进行3年随访,依照随访结果将患者分为2个亚组,即预后不良组(n=25)和预后良好组(n=55),对比两组患者一般临床特征及cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性率,并应用Logistic回归分析cyclin E、p53、CD44s、CD44v6对早期乳腺癌预后的预测价值。结果恶性组患者cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性率分别为42.50%、61.25%、77.50%、81.25%,明显高于良性组1.25%、5.00%、10.00%、12.50%(P<0.05);Spearman相关分析结果显示:cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌呈正相关(P<0.05);预后良好组与预后不良组患者绝经情况、年龄、病理类型、治疗方式、三阴性乳腺癌、肿瘤大小、组织分化程度对比,差异无统计学意义(P>0.05),预后良好组与预后不良组患者临床分期、cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性例数对比,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果表明:cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性表达为影响早期乳腺癌预后的独立影响因素(P<0.05)。结论cyclin E、p53、CD44s、CD44v6表达水平与乳腺癌的发生、发展具有明显关系,且上述指标呈阳性表达为早期乳腺癌预后不良的独立预测因素。

筛选鉴定CD44v9特异性结合肽并用于胃癌检测的研究

目的筛选并验证CD44v9特异性多肽配体。方法使用噬菌体展示12肽库筛选固相包被的CD44v9。测序发现待选序列,使用ELISA法进行验证,选择最佳序列合成探针。使用免疫荧光法验证C9-3多肽与CD44v过表达HEK-293细胞的结合,免疫组化法验证多肽探针与胃癌组织的特异性结合力。结果噬菌体筛选过程中出现明确的富集效应,测序发现30个克隆包含9条序列,其中C9-3序列重复次数最高。ELISA显示9个待选序列中,C9-3序列具有最高的吸光度绝对值及选择力,因此选定为合成探针序列。C9-3探针结合于CD44v过表达HEK-293细胞,而不结合空质粒转染HEK-293细胞。C9-3探针与胃癌组织及癌旁组织结合的免疫组化评分之间存在统计学差异(t=3.953,P<0.01)。胃癌组织中,C9-3探针与CD44v9的组化评分存在线性正相关关系(r=0.823,P<0.01)。结论本研究成功筛选出CD44v9配体多肽,可以通过CD44v9结合于细胞及胃癌组织,用于胃癌检测的探针。

CD44通过NF-κB信号通路对直肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨CD44通过核转录因子(NF)-κB信号通路对直肠癌细胞SW1463增殖、凋亡的影响。方法将对数生长期SW1463细胞随机分为空白对照组(正常培养)、CD44-NC组(转染CD44的阴性对照)、CD44-siRNA组(转染CD44-siRNA使CD44低表达)、佛波酯(PMA)组(用含有100μg/L NF-κB激活剂PMA的完全培养基培养24 h)、CD44-siRNA+PMA组(转染CD44-siRNA后用PMA培养),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定SW1463细胞中CD44表达水平,CCK-8法测定SW1463细胞活力,流式细胞仪测定SW1463细胞凋亡情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定SW1463细胞中白细胞介素(IL)-2、转化生长因子(TGF)-β1水平,Western印迹法测定SW1463细胞中死亡因子配体(FasL)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)及NF-κB通路相关蛋白的表达。结果与空白对照组相比,CD44-siRNA组SW1463细胞CD44、NF-κB、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、c-Myc表达水平、细胞活力、IL-2、TGF-β1水平显著降低(P<0.05),凋亡率、FasL、Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),PMA组SW1463细胞NF-κB、CyclinD1、c-Myc表达水平、细胞活力、IL-2、TGF-β1水平显著升高(P<0.05),凋亡率、FasL、Caspase-3、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);与CD44-siRNA组相比,CD44-siRNA+PMA组SW1463细胞NF-κB、CyclinD1、c-Myc表达水平、细胞活力、IL-2、TGF-β1水平显著升高(P<0.05),凋亡率、FasL、Caspase-3、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论低表达CD44可抑制直肠癌细胞SW1463的增殖并促进其凋亡,可能是通过抑制NF-κB通路实现的。