Hp感染的胃癌组织中Eph A2和Ephrin A1的表达与远处转移的关系

采用蛋白印迹法和逆转录-聚合酶链反应法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Eph A2、Ephrin A1和E-cadherin的蛋白及mRNA水平,分析其与临床资料的关系,初步探讨幽门螺杆菌(Hp)促进胃癌发展的机制。结果胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平显著高于正常胃黏膜组(P<0.05),且伴Hp感染组显著高于未伴Hp感染组(P<0.05);胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平与存在淋巴结转移呈正相关;Eph A2和Ephrin A1分别与E-cadherin蛋白表达量呈负相关。说明Hp可能通过诱导胃癌细胞合成更多的Eph A2和Ephrin A1,从而抑制E-cadherin蛋白的表达,使胃癌细胞通过淋巴系统发生转移。

Ephrin-A1、Ephrin-B1融合蛋白的构建、表达和活性测定

目的克隆并合成Eph受体的两个主要配体ephrinA1和ephrinB1的融合蛋白。方法利用RTPCR技术,分别扩增了ephrinA1、ephrinB1胞外序列和小鼠IgG2b的Fc序列,将其连接后,插入pAlterMax表达载体,得到两个重组子pAlterMaxephrinA1Fc和pAlterMaxephrinB1Fc,经序列测定,确认无突变产生后转染至293T细胞,使之表达分泌型ephrinA1Fc和ephrinB1Fc可溶性融合蛋白,并利用蛋白A琼脂糖凝胶纯化。利用免疫沉淀和Westernblot检测了ephrinA1Fc和ephrinB1Fc的相应受体的活性。结果EphrinA1和ephrinB1融合蛋白可以成功刺激其相应的Eph受体,使之发生磷酸化。结论制备得到的两个融合蛋白具有相应的生物活性,为进一步研究Eph受体酪氨酸激酶家族的功能打下了基础。

EphA2和EphrinA 1在宫颈鳞癌中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨Eph A2和Ephrin A1在宫颈鳞状细胞癌变过程中的表达及其与临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测Eph A2和Ephrin A1在15例宫颈慢性炎症、35例宫颈上皮内瘤变(CIN)和70例宫颈鳞癌组织中的表达,并采用CD 34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析Eph A 2和Ephrin A1的表达与MVD之间的相关性及其与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。结果 70例宫颈鳞癌组织中,Eph A2和Ephrin A1阳性率分别高于CIN组和宫颈慢性炎症组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Eph A2与Ephrin A1的表达与淋巴结转移和侵润深度有关(P<0.05);Eph A2与Ephrin A1的表达呈正相关(r=0.306,P<0.05)。Eph A2和Ephrin A1与年龄、FIGO分期及病理分级之间差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈鳞癌的MVD与年龄无关,而与肿瘤分化程度、FI-GO分期、淋巴结转移及局部侵润深度有关(P<0.05)。经Spearman等级相关分析,Eph A2与Ephrin A1的表达与MVD呈显著正相关(P<0.01)。结论 Eph A2和Ephrin A1表达均与宫颈鳞癌的发生、发展密切相关,联合检测有助于宫颈鳞癌早期诊断和预后评价,可以为今后宫颈鳞癌的靶向治疗提供新的靶点。

宫颈癌组织Ephrin A1的表达及其临床意义

目的:探讨Ephrin A1在宫颈癌中的表达意义及其与宫颈癌缺氧微环境、血管形成的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测65例宫颈癌组织、73例宫颈上皮内瘤样变组织和49例正常宫颈组织中Ephrin A1、EphA1受体、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达及微血管密度(MVD),并分析宫颈癌临床病理参数和缺氧状态间的关系。结果:Eph A1在宫颈各种组织中的阳性表达率无显著性差异(P>0.05),而宫颈上皮内瘤样变、宫颈癌组织中Ephrin A1的表达明显高于正常宫颈(P<0.05),但Ephrin A1的表达在宫颈上皮内瘤样变、宫颈癌组织中无明显差异(P>0.05)。且Ephrin A1的表达与宫颈癌临床分期呈正相关(P<0.05),与组织学类型、淋巴结转移、病理分级及年龄无关(P>0.05)。在宫颈癌组织中,Eph A1的表达与HIF-1α的表达及MVD无关(r=-0.152、P=0.227,r=0.061,P=0.628),而Ephrin A1与HIF-1α的表达及MVD正相关(r=0.487,P=0.000;r=0.541,P=0.000)。结论:Eph A1在宫颈组织中的表达是稳定的,而宫颈癌发生过程中HIF-1α的高表达可能是通过刺激Ephrin A1表达而促进宫颈癌的血管形成。