Hp感染的胃癌组织中Eph A2和Ephrin A1的表达与远处转移的关系

采用蛋白印迹法和逆转录-聚合酶链反应法检测胃癌及正常胃黏膜组织中Eph A2、Ephrin A1和E-cadherin的蛋白及mRNA水平,分析其与临床资料的关系,初步探讨幽门螺杆菌(Hp)促进胃癌发展的机制。结果胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平显著高于正常胃黏膜组(P<0.05),且伴Hp感染组显著高于未伴Hp感染组(P<0.05);胃癌组Eph A2和Ephrin A1蛋白及mRNA水平与存在淋巴结转移呈正相关;Eph A2和Ephrin A1分别与E-cadherin蛋白表达量呈负相关。说明Hp可能通过诱导胃癌细胞合成更多的Eph A2和Ephrin A1,从而抑制E-cadherin蛋白的表达,使胃癌细胞通过淋巴系统发生转移。

乳腺癌组织中EphA2、SIAH2、β-catenin的表达量及其与肿瘤恶性程度的相关性

目的分析乳腺癌组织中Eph A2、SIAH2、β-catenin的表达量及其与肿瘤恶性程度的相关性。方法将2012年8月至2015年12月间接受乳腺肿瘤切除治疗的患者128例作为研究对象,根据肿瘤的良恶性不同分为乳腺癌组54例,乳腺腺瘤组74例。将手术切除的肿瘤组织碾磨成匀浆,并应用Western-blot蛋白表达检测及酶联免疫吸附法(ELISA)血清学检测,对比两组患者的肿瘤组织Eph A2、SIAH2、β-catenin表达,肿瘤组织增殖相关指标,血清侵袭转移相关指标等水平差异,并进一步分析肿瘤组织Eph A2、SIAH2、β-catenin表达与恶性程度的相关性。结果乳腺癌组患者的肿瘤组织Eph A2、SIAH2、β-catenin表达量均显著高于乳腺腺瘤组患者(P<0.05);乳腺癌组患者的肿瘤黑素瘤抗原(MAGE)-A11、FOXM1、细胞增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期素D1(Cyclin D1)表达量高于乳腺腺瘤组患者,E-cadherin表达量低于乳腺腺瘤组患者(P<0.05);乳腺癌组患者的血清肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、Six1、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、胸苷激酶1(TK1)、中期因子(MK)值均显著高于乳腺腺瘤组患者(P<0.05);乳腺癌组织的Eph A2、SIAH2、β-catenin表达量与MAGE-A11、FOXM1、Ki67、Cyclin D1、HGF、TGF-β、Six1、b FGF、TK1、MK值呈正比,与E-cadherin值呈反比(P<0.05)。结论乳腺癌组织中高表达的Eph A2、SIAH2、β-catenin与肿瘤的增殖及侵袭转移等特性均关系密切,可以作为宏观判断肿瘤恶性程度的有效指标。

血管内皮生长因子、Eph受体酪氨酸激酶A2、基质金属蛋白酶-2和-9在卵巢癌血管生成拟态中的作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在卵巢癌血管生成拟态中的作用。方法收集临床和预后资料完整的卵巢癌组织标本84例,切片经明确诊断后进行CD31和过碘酸-雪夫(PAS)双重染色,证实肿瘤组织中存在血管生成拟态,行VEGF、EphA2、MMP-2和MMP-9免疫组织化学染色,根据染色指数统计免疫组织化学染色结果。结果有血管生成拟态组(36/84)和无血管生成拟态组卵巢癌组织(48/84)的VEGF、EphA2、MMP-9表达差异有统计学意义,有血管生成拟态组的卵巢癌细胞VEGF、EphA2、MMP-9表达明显高于无血管生成拟态组。但有血管生成拟态组和无血管生成拟态组患者的MMP-2表达差异无统计学意义。结论在卵巢癌中血管生成拟态和内皮依赖性血管并存,VEGF、EphA2和MMP-9等参与了卵巢癌血管生成拟态的形成。检测VEGF、EphA2和MMP-9可作为预测卵巢癌预后的间接指标。

肾癌组织EphA2、E-cadherin表达及其与肾癌临床病理特征的关系

目的探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(Eph A2)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)在肾癌组织中的表达及其与肾癌临床病理特征的关系。方法选择52例肾癌患者的手术标本,采用免疫组化SP法检测肾癌组织Eph A2及Ecadherin蛋白的表达,计算每张切片的阳性细胞百分数及HSCORE分值。分析Eph A2表达、E-cadherin表达与患者临床病理特征(包括年龄、性别、TNM分期、肿瘤直径、病理类型)的关系,计算3年生存率,应用COX比例风险模型分析肾癌患者预后影响因素。结果肾癌组织中Eph A2蛋白高表达率为71.2%,E-cadherin蛋白低表达率为76.9%。肿瘤直径≥5 cm者的Eph A2蛋白高表达率高于直径<5 cm者(P<0.05),肿瘤直径≥5 cm者E-cadherin蛋白低表达率高于直径<5 cm者(P<0.05)。Eph A2蛋白高表达是肾癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论肾癌组织中Eph A2蛋白表达增加、E-cadherin蛋白表达降低,Eph A2蛋白高表达是肾癌患者预后的独立影响因素。

EphA2表达水平与食管鳞癌临床病理特征关系研究

目的分析不同临床病理特征食管鳞癌患者Eph A2表达水平的差异,探讨血清中Eph A2表达水平对食管鳞癌临床病理特征的评估价值。方法收集2010—2012年新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科行手术治疗的食管鳞癌患者100例为研究对象。取得患者手术切除癌组织标本100例,同时取得远隔癌旁组织标本100例。食管鳞癌患者血清标本由新疆肿瘤防治研究所标本库提供,同时选择新疆医科大学附属肿瘤医院体检科的体检健康者血清60份。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测Eph A2 mRNA表达水平、Western blotting法检测Eph A2表达水平、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中Eph A2表达水平。采用SPSS 16.0统计学软件绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)并计算曲线下面积。结果癌组织中Eph A2 mRNA表达水平高于远隔癌旁组织(t=17.964,P<0.05)。癌组织中Eph A2表达水平高于远隔癌旁组织(t=12.100,P<0.05)。食管鳞癌患者血清中Eph A2表达水平高于体检健康者(t'=18.240,P<0.05)。Ⅰ期+ⅡA期食管鳞癌患者癌组织Eph A2 mRNA表达水平、Eph A2表达水平及血清中Eph A2表达水平均低于ⅡB期+Ⅲ期食管鳞癌患者(P<0.05)。有淋巴结转移食管鳞癌患者癌组织Eph A2 mRNA表达水平、Eph A2表达水平高于无淋巴结转移食管鳞癌患者(P<0.05)。T1期+T2期食管鳞癌患者癌组织Eph A2 mRNA表达水平、Eph A2表达水平及血清中Eph A2表达水平均低于T3期+T4期食管鳞癌患者(P<0.05)。血清中Eph A2表达水平评估食管鳞癌TNM分期的ROC曲线下面积为0.646,95%CI(0.532,0.761),最佳截断值为50.17 ng/L,灵敏度为69.0%,特异度为61.0%;血清中Eph A2表达水平评估食管鳞癌浸润深度的ROC曲线下面积为0.650,95%CI(0.528,0.772),最佳截断值为53.93 ng/L,灵敏度为73.0%,特异度为57.0%。结论 Eph A2表达水平与食管鳞癌的发生发展及转移浸润有关,其在血清中的表达水平对术前疾病分期及浸润深度有一定的评估价值。

EphA2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达情况,分析其与HCC临床病理特征和预后之间的相关性。方法收集52例HCC及对应癌旁组织,运用免疫组化技术检测EphA2蛋白在HCC及对应癌旁组织中的表达情况,研究EphA2蛋白表达与HCC临床病理特征及肿瘤术后复发之间的相关性。结果 EphA2蛋白在HCC组织中的表达显著高于对应的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);EphA2蛋白在HCC中的高表达与肿瘤数目大于1、肿瘤包膜缺失、门脉侵犯和高TNM分期显著相关(P<0.05);多变量Cox比例风险分析提示EphA2蛋白表达与HCC术后复发显著相关(P<0.05)。结论 HCC组织中EphA2蛋白表达上调,且其表达上调与HCC的恶性病理特征及术后复发相关,提示EphA2蛋白可能在HCC进展和转移中发挥重要作用。

EphA2、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌中的表达及其意义。方法用免疫组化SP法检测EphA2和VEGF在63例非小细胞肺癌中的表达情况。结果在NSCLC中EphA2和VEGF呈高表达。EphA2的表达与NSCLC病理分型、分化程度无关,但是与临床分期及淋巴结转移密切相关。VEGF的表达与分化程度、淋巴结转移、临床分期有显著性差异。EphA2与VEGF表达呈正相关。结论EphA2可与VEGF结合作为判断NSCLC恶性程度及预后的指标,及早期诊断指标和治疗的新靶点。

侵袭性垂体腺瘤中EphA2和E-cadherin的表达及临床意义

目的研究侵袭性垂体腺瘤中Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及EphA2、E-cadherin与肿瘤血管之间的关系,并分析临床监测EphA2、E-cadherin表达变化的意义。方法选择2012~2015年期间采集的100例垂体腺瘤标本,50例侵袭组和50例非侵袭组。并应用免疫组化方法及HE染色方法,检测垂体腺瘤标本内的EphA2、E-cadherin表达情况,同时采用CD34方法,计算垂体腺瘤标本内腺瘤组织的微血管密度(MVD),研究分析临床中EphA2、E-cadherin、MVD表达在垂体腺瘤患者侵袭性垂体腺瘤组织内的关系。结果侵袭组中EphA2阳性表达率达到(88.0%),E-cadherin阳性表达率(35.0%),非侵袭组阳性表达率(16.0%),E-cadherin阳性表达率(80.0%);侵袭组EphA2阳性表达显著高于非侵袭组EphA2阳性表达,侵袭组E-cadherin阳性表达显著低于非侵袭组E-cadherin阳性表达;而EphA2表达与MVD呈正相关。EphA2表达与E-cadherin呈负相关。结论侵袭性垂体腺瘤中EphA2表达水平增加,E-cadherin表达则并不断降低。进一步研究证实,侵袭性垂体腺瘤中EphA2过表达,与EphA2参与垂体腺瘤血管生成及EphA2有侵袭性有关。因而临床可以将EphA2、E-cadherin作为判断垂体腺瘤侵袭性的生物学指标并有可能成为侵袭性垂体腺瘤诊断和治疗的新靶点。

EphA2在鼻咽癌致病过程中的作用及治疗靶点展望

促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,Eph)及其配体ephrin,是最大受体酪氨酸激酶(RTK)家族,由于配体ephrin和Eph受体均结合在细胞膜上,激活的信号转导通路,一般发生在直接接触的细胞之间,具有双向信号转导的独特特点。Eph受体-ephrin配体导致排斥性细胞收缩反应在许多生理和病理过程中起重要作用,在16种Eph受体中,EphA2与肿瘤的联系最强,因此已被广泛研究。肿瘤细胞中的EphA2信号传导可能具有促进肿瘤或抑制肿瘤的作用,取决于肿瘤微环境,EphA2具有需要配体和激酶活性的经典信号,也具有不需要配体或激酶活性的非经典信号形式。本文就近年来Epha2在鼻咽癌致病过程中非受体依赖机制和作为EB病毒感染关键分子的作用及治疗靶点展望等研究进展进行综述,以期为鼻咽癌的预防和治疗提供新的思路。

EphA2、FAK在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和局部黏着斑激酶(FAK)在口腔鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达情况及其在口腔鳞癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测51份口腔鳞癌组织的EphA2和FAK表达情况,并与正常口腔黏膜组织作比较,同时分析口腔鳞癌EphA2和FAK的表达和病理因素的关系。结果:EphA2和FAK在口腔鳞癌阳性率均明显低于正常口腔黏膜(P<0.05)。不同临床分期及病理分期口腔鳞癌EphA2和FAK的表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。EphA2与FAK的阳性率呈正相关(r=0.431,P<0.05)。结论:EphA2和FAK在口腔鳞状细胞癌发生、发展中共同作用,对于两者的综合评价有望作为判断口腔癌恶性程度的指标及选择治疗新靶点的参照。

大肠癌组织中的EphA2和Ki-67蛋白与患者手术预后的相关性研究

目的探讨大肠癌组织中Eph受体酪氨酸激酶A2(Eph receptor tyrosine kinase A2,EphA2)、Ki-67蛋白在大肠癌组织中的表达与患者预后的相关性。方法选取2016年7至12月收治的行手术治疗的大肠癌患者115例,使用免疫组化法分别检测癌组织和癌旁组织中EphA2、Ki-67蛋白表达情况,分析两种蛋白表达与肿瘤大小、癌组织分化、Dukes分期、淋巴结转移的相关性,Kaplan-Meier曲线对比癌组织中EphA2、Ki-67蛋白表达与患者生存时间的关系。结果癌组织中EphA2表达率为89.57%,Ki-67表达率为66.96%,均显著高于癌旁组织的23.78%、29.57%;EphA2和Ki-67蛋白表达与癌组织分化程度、Dukes分期、淋巴结转移均密切相关(P<0.05);随访36个月,Kaplan-Meier曲线显示EphA2、Ki-67蛋白表达阴性患者生存率明显高于表达阳性(P<0.05),Cox分析显示EphA2、Ki-67均是影响大肠癌预后的独立危险因素(P<0.001)。结论EphA2、Ki-67蛋白高表达可能在大肠癌发病、进展中参与度较高,并且可以预测患者近中期预后状况。

EphA2和EphrinA 1在宫颈鳞癌中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨Eph A2和Ephrin A1在宫颈鳞状细胞癌变过程中的表达及其与临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测Eph A2和Ephrin A1在15例宫颈慢性炎症、35例宫颈上皮内瘤变(CIN)和70例宫颈鳞癌组织中的表达,并采用CD 34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析Eph A 2和Ephrin A1的表达与MVD之间的相关性及其与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。结果 70例宫颈鳞癌组织中,Eph A2和Ephrin A1阳性率分别高于CIN组和宫颈慢性炎症组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Eph A2与Ephrin A1的表达与淋巴结转移和侵润深度有关(P<0.05);Eph A2与Ephrin A1的表达呈正相关(r=0.306,P<0.05)。Eph A2和Ephrin A1与年龄、FIGO分期及病理分级之间差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈鳞癌的MVD与年龄无关,而与肿瘤分化程度、FI-GO分期、淋巴结转移及局部侵润深度有关(P<0.05)。经Spearman等级相关分析,Eph A2与Ephrin A1的表达与MVD呈显著正相关(P<0.01)。结论 Eph A2和Ephrin A1表达均与宫颈鳞癌的发生、发展密切相关,联合检测有助于宫颈鳞癌早期诊断和预后评价,可以为今后宫颈鳞癌的靶向治疗提供新的靶点。

EphA2调控结直肠癌细胞耐药的初步研究

目的:探究Eph受体A2(Eph A2)在结直肠癌细胞化疗耐药中的作用及相关机制。方法:Western blot及real-time PCR检测人结肠癌细胞株Lo Vo及结肠癌耐药细胞株Lo Vo/5-FU中Eph A2的表达情况。转染Eph A2 siRNA干扰结肠癌耐药细胞株Lo Vo/5-FU中Eph A2的表达,CCK-8法检测细胞对化疗药物的敏感性,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力的变化,Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)及相关信号通路分子的蛋白水平。结果:耐药细胞株Lo Vo/5-FU中Eph A2的mRNA及蛋白表达水平均明显高于亲本细胞株(P<0.05);并且在亲本细胞株Lo Vo中,Eph A2的蛋白表达水平随着5-FU浓度的增加有升高趋势。沉默Eph A2可降低结肠癌耐药细胞株Lo Vo/5-FU的细胞活力,增加其对化疗药物的敏感性,并抑制细胞的侵袭迁移;同时上调细胞中上皮细胞标志物E-cadherin和β-catenin的表达并下调间充质细胞标志物N-cadherin和vimentin的表达,可抑制结肠癌耐药细胞株Lo Vo/5-FU的EMT进程。此外,干扰Eph A2的表达之后,Notch和Snail的表达也明显降低。结论:沉默Eph A2可部分恢复结肠癌耐药细胞株Lo Vo/5-FU对化疗药物的敏感性,其机制可能与抑制细胞侵袭和迁移、同时通过Notch/Snail信号通路影响细胞的EMT进程有关。

miR-141通过靶向下调EphA2表达而抑制人口腔鳞状细胞癌细胞系的增殖

目的探讨miR-141对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞增殖活性的影响及其与Eph A2的靶向关系。方法构建pre-miR-141、Eph A2野生型(Eph A2-WT)和突变型(Eph A2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRTPCR)检测pre-miR-141的转染效率。用MTT检测细胞增殖活性,用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和Western blot验证miR-141与Eph A2的靶向关系。结果 pc DNATM6.2-GW-pre-miR-141、pmir GLO-Eph A2-WT和pmir GLO-Eph A2-MT表达载体构建成功,转染pre-miR-141的CAL27细胞miR-141的表达显著升高(P<0.001)。miR-141过表达能够明显抑制CAL27细胞的增殖(P<0.05),共转染pre-miR-141和Eph A2-WT的CAL 27细胞其荧光活性显著下降(P<0.001),转染pre-miR-141的CAL27细胞其Eph A2的表达要显著低于转染空质粒组(P<0.001),miR-141的过表达能够显著抑制Eph A2的蛋白表达水平。结论 miR-141的过表达可能通过靶向下调Eph A2的表达从而抑制OSCC的增殖。

曲妥珠单抗治疗前后乳腺癌中USP39、EphA2的表达量及其与肿瘤病理特征的相关性

目的:研究曲妥珠单抗治疗前后乳腺癌中泛素特异蛋白酶39(USP39)和Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)的表达量及其与肿瘤病理特征的相关性。方法:收集2013年5月~2016年9月曲妥珠单抗治疗前后的乳腺癌组织,检测乳腺癌中USP39、EphA2以及增殖抑制基因、侵袭促进基因的表达量,计算治疗后乳腺癌中USP39、EphA2表达量的四分位数。结果:治疗后乳腺癌中USP39、EphA2、Sam68、Gab2的mRNA表达量显著低于治疗前,ALEX1、PTPN14、ARID1A的mRNA表达量显著高于治疗前;不同USP39、EphA2 mRNA表达量乳腺癌中ALEX1、PTPN14、ARID1A、Sam68、Gab2的mRNA表达量差异有统计学意义(P<0.05);USP39、EphA2的mRNA表达量越高,ALEX1、PTPN14、ARID1A的表达量越低,Sam68、Gab2的mRNA表达量越高。结论:曲妥珠单抗治疗能够通过抑制USP39、EphA2的表达来影响肿瘤的恶性生物学行为及病理特征。

EphA2在缺氧条件下的表达及其对食管癌细胞体外三维培养的影响

目的:探讨在正常氧分压和缺氧条件下,食管癌细胞中上皮细胞激酶A2(EphA2)表达变化及其对体外三维培养的影响.方法:正常氧分压及缺氧条件下培养食管癌Eca109及TE13细胞,RT-PCR及Western blot分别监测细胞中EphA2表达的变化;EphA2m i R NA干扰质粒转染E c a109和T E13细胞后,采用Matrigel体外三维培养观察正常氧分压和缺氧条件下,Eca109及TE13细胞在抑制EphA2表达前后管腔形成数量的变化.结果:缺氧条件下Eca109和TE13细胞中EphA2表达明显增加(P<0.05).Matrigel体外培养中,缺氧条件下其管腔形成数量明显高于正常氧分压下(P<0.05).miRNA有效抑制EphA2表达后,在正常氧分压和缺氧条件下,管腔数量明显下降,但常氧条件下数量减少更为明显(P<0.01).结论:缺氧环境能诱导肿瘤细胞EphA2高表达,并导致体外三维培养模型中管腔数量增加,抑制EphA2表达能够阻断此现象的发生,提示EphA2在缺氧条件下血管生成拟态形成过程中发挥重要作用.

Eph受体酪氨酸激酶A2和金属蛋白酶2在大肠癌组织的表达及其与大肠癌发生发展的关系

目的探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和金属蛋白酶2(MMP-2)在大肠癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后关系。方法采用免疫组织化学法检测76例大肠癌患者手术标本中癌组织和癌旁组织的EphA2蛋白和MMP-2蛋白表达情况。结果 EphA2蛋白在大肠癌组织中的表达概率明显高于癌旁组织(92.10%比26.31%,P<0.05),MMP-2蛋白在大肠癌组织中的表达概率同样明显高于癌旁组织(80.20%比15.90%,P<0.05);EphA2蛋白表达水平与组织分化程度大肠癌、Dukes分期、淋巴结转移、年龄密切关联;MMP-2蛋白表达水平与大肠癌组织学分化程度、Dukes分期、淋巴结转移、年龄密切关联。结论 EphA2蛋白和MMP-2蛋白在大肠癌组织中的高表达可能在大肠癌的发生、发展过程中发挥重要作用。

组织中EphA2、GSK-3β水平在非小细胞肺癌患者中的表达分析

目的探讨组织中Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及临床意义。方法选择2018年4月~2020年6月于河南省许昌市中心医院接受治疗的94例NSCLC患者,所有患者均接受手术治疗,术中留取病理组织行病理检查,检测EphA2、GSK-3β水平,分析组织中EphA2、GSK-3β在NSCLC患者中的表达及临床意义。结果 94例NSCLC患者中,EphA2阳性率为73.40%,GSK-3β阳性率为46.81%;经单因素分析显示,EphA2、GSK-3β表达与患者年龄、性别、吸烟史无相关性(P>0.05),但EphA2阳性表达可能与NSCLC淋巴结转移、中低分化、Ⅲ/Ⅳ期有关,GSK-3β阳性表达可能与NSCLC未发生淋巴结转移、高分化、Ⅰ/Ⅱ期有相关性(P<0.05)。结论 NSCLC患者组织中Eph A2阳性率较高,GSK-3β阳性率相对较低,EphA2阳性表达可能促使NSCLC发生淋巴结转移、呈中低分化、进展至Ⅲ/Ⅳ期,有助于临床判断NSCLC高侵袭性,检测EphA2、GSK-3β表达有助于预测疾病预后。

乙肝病毒促进肝癌细胞系的转移侵袭力

目的探讨乙肝病毒（HBV）对肝癌细胞转移能力的影响及其可能机制。方法以初始汇合度为30%,将3种细胞系HL-7702（人正常肝细胞系）、HepG2（未转染HBV-DNA的人肝癌细胞系）、HepG2.2.15（稳定转染HBV-DNA的人肝癌细胞系）种植于96孔板中,待细胞增殖至70%汇合时,利用划痕器制造划痕伤口,置于活细胞动态成像系统中进行多时间点的显微拍照与数据采集,计算相对伤口密度（RWD）,并通过免疫荧光染色与Western blot技术测定细胞中Eph A2蛋白表达,分析其与RWD值的相关性。结果细胞迁移实验中,划痕后24-96 h,HL-7702组RWD显著高于HepG2与HepG2.2.15组（P〈0.01）,划痕后72-144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组（P〈0.01）;细胞侵袭实验中,HL-7702细胞因不能穿过基质胶,而无RWD值;划痕后72-144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组（P〈0.05或P〈0.01）。Eph A2表达：与HL-7702组比较,HepG2与HepG2.2.15组细胞中Eph A2表达水平显著升高（P〈0.01）,其中HepG2.2.15组中Eph A2表达水平显著高于HepG2组（P〈0.01）,且两组肝癌细胞中Eph A2的表达量与划痕实验的RWD值呈显著正相关（迁移实验：P〈0.01;侵袭实验：P〈0.01）。结论乙肝病毒可能促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调Eph A2的异常表达有关。

miR-141的过表达抑制MHCC-97H肝癌细胞的增殖和侵袭迁移

目的观察肝细胞癌组织中miR-141的表达水平,通过上调MHCC-97H肝癌细胞中miR-141的水平观察对MHCC-97H细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法实时定量PCR检测miR-141在肝癌及癌旁组织中的表达水平,并分析miR-141表达水平与临床病理指标的关系及生存率。利用人工合成的miR-141模拟物,瞬时转染MHCC-97H细胞。MTT法检测MHCC-97H细胞的增殖,TranswellTM实验检测MHCC-97H细胞的侵袭及迁移,Westernblot法及免疫组织化学检测miR-141下游潜在靶点肝细胞产生的促红素受体A2(EphA2)的表达。结果miR-141在肝癌组织中表达水平显著低于相应癌旁组织;肝癌组织中miR-141低表达与TNM分期、门静脉侵犯及Edmondson分级显著相关;低表达miR-141患者3年生存率明显低于高表达组;miR-141模拟物转染可上调MHCC-97H细胞miR-141水平,上调miR-141可显著抑制MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移,并下调EphA2的蛋白水平;miR-141低表达组EphA2蛋白水平明显高于miR-141高表达组,相关性分析显示肝癌组织中miR-141与EphA2蛋白表达呈显著负相关。结论miR-141在肝癌组织中表达下调且与EphA2表达呈显著负相关,其低表达与肝癌恶性临床病理特征有关,上调miR-141表达可抑制EphA2的表达抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。