淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖对骨质疏松性骨折模型大鼠骨折愈合的影响

目的探讨淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖对骨质疏松骨折模型大鼠骨折愈合、骨痂形成及塑形情况的影响。方法将60只SD大鼠随机分为全处理组(A组)、后处理组(B组)、对照组(C组),各20只。其中,A组和B组分别灌胃淫羊藿总黄酮提取物与黄芪多糖混悬液(1∶1,m/m)690 g/(kg·d)和等量生理盐水,4周后采用双侧卵巢切除术复制大鼠骨质疏松骨折模型,继续灌胃6周;C组大鼠灌胃等量生理盐水4周后造模,连续灌胃等量生理盐水6周。于造模后第10,17,24,30天拍摄患肢股骨正侧位X线摄片,计算矿化骨组织体积(BV)、骨痂总体积(TV)、骨体积分数(BV/TV)、骨矿密度(BMD)。灌胃6周后,处死所有大鼠,每组随机选取10只进行患肢Micro-CT扫描;于腹主动脉取血,测定Ⅰ型胶原N端前肽(PⅠNP)、碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)水平。结果与本组造模后第10天比较,3组大鼠造模后第17,24,30天的正侧位X线摄片Lane-Sandhu评分均显著升高(P<0.05);与C组比较,A组大鼠造模后第10,30天的正侧位X线摄片Lane-Sandhu评分均显著升高(P<0.05)。与C组比较,A组大鼠的AKP,BGP,PⅠNP,BV,BV/TV,BMD均显著升高(P<0.05),B组大鼠的AKP和BGP均显著升高(P<0.05);与B组比较,A组大鼠的BGP,PⅠNP,BV/TV均显著升高(P<0.05)。结论淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖可有效改善骨质疏松性骨折模型大鼠的骨折愈合情况,促进骨痂形成。

Box-Behnken响应面法优化淫羊藿粗多糖的超声辅助提取工艺

【目的】探明淫羊藿粗多糖的超声辅助提取最佳工艺,为药用植物淫羊藿多糖提取及利用提供依据。【方法】以淫羊藿为研究对象,采用超声辅助提取法结合单因素试验筛选提取淫羊藿粗多糖的最佳提取温度、料液比和提取时间,在此基础上采用响应面法优化淫羊藿粗多糖提取工艺。【结果】淫羊藿粗多糖的最优提取工艺参数为提取温度60℃、料液比1∶20(g∶mL)、提取时间为40 min,此条件下淫羊藿粗多糖提取率为7.47%,与理论值(7.57%)基本相符。重复试验的相对标准偏差(RSD)为0.65%,满足试验要求。【结论】通过响应面法优化了淫羊藿粗多糖提取工艺,能够更加高效快捷进行淫羊藿粗多糖提取,且该提取工艺的提取得率较稳定,为今后更好开发淫羊藿粗多糖资源奠定基础。

淫羊藿多糖提取工艺及其药理活性研究进展

中药淫羊藿富含活性成分,其中淫羊藿多糖是一种天然抗氧化剂,具有免疫调节、补肾壮阳、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗凝血及抑菌等药理活性。综述淫羊藿多糖的提取工艺及药理活性,为淫羊藿多糖的合理开发利用提供参考。

淫羊藿多糖提取、分离纯化、结构特征和生物活性研究进展

淫羊藿为我国传统补益中药,具有补肝肾、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功效。淫羊藿多糖是淫羊藿发挥临床功效的主要成分之一,具有增强机体免疫力、抗病毒、抗衰老、抗氧化、抗辐射等药理作用。本文对淫羊藿多糖提取分离纯化、生物活性以及结构特征等方面的研究进展进行综述,为淫羊藿多糖进一步研究与开发利用提供依据。

淫羊藿多糖组成分析及体外抗氧化抗肾癌活性研究

以中药材淫羊藿为材料,采用水提醇沉法,获得淫羊藿中多糖类成分,采用PMP柱前衍生化HPLC方法,对淫羊藿多糖进行单糖组成分析,利用DPPH和ABTS方法对其进行抗氧化活性的研究,采用CCK8法确定其对肾癌细胞活力的影响,细胞划痕实验分析其对肾癌细胞迁移能力的影响,q RT-PCR分析其对肾癌细胞p21通路关键基因表达的影响。结果显示淫羊藿多糖主要由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成,其DPPH和ABTS抗氧化自由基清除率分别为84.7%和75.6%。淫羊藿多糖能够显著性降低肾癌786-O肾癌细胞活力和迁移能力,显著性提高p21基因的表达,进而抑制CDK1、CDK2和CDK4基因的表达。综上淫羊藿多糖具有良好的抗肾癌和抗氧化活性。

黄芪多糖、淫羊藿多糖和淫羊藿总黄酮对新城疫病毒感染细胞的影响

将黄芪多糖 (APS)、淫羊藿多糖 (EPS)、淫羊藿总黄酮 (EF)分别与新城疫病毒 (NDV)Ⅰ、Ⅳ系以 3种顺序加入到培养 2 4h的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,即先加中药后接种病毒、先接种病毒后加中药、病毒和中药混合感作后同时加入。于病毒接种后 72h测定NDVⅠ系的半数组织培养感染剂量 (TCID50 )和NDVⅣ系的血凝效价 ,以评价 3种中药成分对NDV感染细胞的影响。结果表明 ,APS和EPS仅在先于病毒加入时对NDV有抑制作用 ,而EF无论以何种方式给药均呈抑制作用。提示它们有一定的抗病毒作用 。

淫羊藿多糖对叠氮胸苷抑制小鼠造血和免疫功能的对抗作用

给小鼠叠氮胸苷８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×８ｄ，其外周血白细胞数目，骨髓造血干细胞和粒单系祖细胞数量，脾淋巴细胞增殖和产生白介素２的能力显著降低。同时给予淫羊藿多糖１０和２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×３ｄ，上述叠氮胸苷的毒副作用可部分或全部消失，提示淫羊藿多糖可以减少叠氮胸苷的毒副反应．

淫羊藿多糖的研究进展及开发前景

淫羊藿多糖是淫羊藿的主要有效成分之一,具有调节免疫、抗病毒、抗氧化等功能,且安全无毒,具有良好的开发前景。现从化学组成及含量、生物活性、安全性、炮制方法对含量的影响以及提取5个方面,对淫羊藿多糖的研究进展进行综述,探讨淫羊藿多糖的开发前景,为淫羊藿多糖的合理开发利用提供参考。

黄芪多糖和淫羊藿多糖对培养细胞增殖和衰老的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖(astragaluspolysaccharide,APS)和淫羊藿多糖(epimediumpolysaccharide,EPS)分别加入到培养12h和24h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,测定加药后CEF增殖率和成层率的动态变化。结果表明,2种多糖均能促进细胞增殖和延缓细胞衰老,EPS的作用强于APS,具有一定的量效、时效关系。

淫羊藿多糖脂质体对鸡淋巴细胞增殖及IL-2、IL-4和IFN-γ mRNA表达的影响

为研究淫羊藿多糖脂质体(EPSL)增强免疫的作用机理,采用MTT法和实时荧光定量PCR法测定了EPSL对鸡外周血淋巴细胞增殖及IL-2、IL-4和IFN-γmRNA表达的影响,以淫羊藿多糖(EPS)作为对照。结果表明,EPSL在体外可以显著促进淋巴细胞的增殖,其中在31.250和3.906μg·mL-1时,无论是单独作用还是协同PHA作用效果都显著优于EPS;EPSL可提高淋巴细胞IL-2、IL-4和IFN-γmRNA的表达,其中在62.500和31.250μg·mL-1时,EPSL对3种细胞因子的诱生作用显著强于EPS,EPSL在62.500μg·mL-1时的作用最强,在31.250μg·mL-1时次之,并与剂量呈正相关。EPS经过脂质体包封后其提高淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γmRNA表达的作用明显增强。

大孔吸附树脂法去除淫羊藿多糖中蛋白的研究

从4种大孔吸附树脂中筛选出ADS-7,考察了其对淫羊藿多糖中蛋白的去除作用,并讨论了pH值、鞣酸、上样量等对树脂去蛋白效率的影响.结果表明,该方法对淫羊藿粗多糖中的蛋白具有较高的去除效率,淫羊藿粗多糖中的蛋白含量由1.2%下降到0.035%.

淫羊藿叶多糖工艺优化及抗氧化活性

探索和优化超声复合酶解提取淫羊藿叶粗多糖工艺。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化复合酶添加量,再采用Box-Behnken设计和响应面优化超声复合酶解提取工艺参数。结果显示:不同酶添加量对多糖提取得率的影响次序是:纤维素酶>果胶酶>木瓜蛋白酶>α-淀粉酶,最佳复合酶(木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶和α-淀粉酶)的添加量分别为50、250、200、100 U/g;最佳提取条件为提取温度46.8℃、超声时间42.3 min、p H 4.3、超声功率311 W。在此实验条件下,粗多糖提取得率为5.98%,与模型预测值(6.2%)接近。粗多糖通过琼脂糖离子交换和葡聚糖分子筛凝胶柱色谱分离纯化,得到3个主要多糖组分(EPs-1、EPs-2、EPs-3),多糖组分采用DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除和铁离子还原能力实验进行了抗氧化活性评价。结果表明,超声复合酶提取作为一个高效和环保的提取技术,可以应用于从植物原料中提取活性成分;抗氧化活性实验显示3个多糖组分都具有显著的抗氧化活性,其活性呈添加量依赖关系。这些结果说明淫羊藿多糖可以探索作为潜在的抗氧剂应用于功能食品和药品。

淫羊藿总黄酮和多糖对大鼠垂体—肾上腺—免疫网络作用的研究

目的:观察淫羊藿及其提取物总黄酮(EF)和多糖(EPS)对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴和细胞免疫(CI)的不同作用。方法:用皮质酮造成大鼠神经内分泌免疫抑制模型。结果:模型大鼠 HPA 轴和 CI 明显受抑。淫羊藿对受抑大鼠的 HPA 轴和 CI 均有不同程度的改善;EF 能明显提高 HPA 轴的分泌,对 CI 影响不大;EPS 能明显提高 CI 的作用,对HPA 轴无明显影响。结论:淫羊藿提取物 EF 及 EPS 对 HPA 轴和 CI 具有不同侧重的调节作用。

淫羊藿多糖致小鼠胸腺缩小的免疫药理机理研究

淫羊藿多糖(EPS)刺激外周T 细胞功能的同时,引起胸腺缩小。我们发现EFS10～50mg/kg 范围内.胸腺缩小伴随着胸腺内L3T4^+和Lyt2^+细胞数减少,对有丝分裂原的刺激反应降低;但此时胸腺细胞增殖和产生IL-2能力提高。单次大剂量(100mg/kg)皮下注射.能够引起小鼠胸腺细胞释放增加,P<0.01。由此我们认为,EPS 促进胸腺释放成熟细胞是其导致胸腺缩小的机理之一,也是其增强机体细胞免疫功能的重要机制。

淫羊藿多糖和甙的胸腺免疫药理作用

给小鼠sc淫羊藿多糖(EPS)和甙(Icarrin).对二者的胸腺免疫药理作用进行研究,结果发现:胸腺细胞产生IL-2和~3H-TdR的掺入能力增强。EPS使胸腺内L_3T_4^+和Lyt_z细胞数目减少.伴同胸腺细胞对ConA刺激的增殖反应降低。Icarrin对胸腺内上述两个细胞亚群无影响,但使胸腺细胞对ConA刺激的反应增高。故认为EPS和Icarrin对胸腺都有免疫激活作用。EPS可能有促进胸腺释放成熟细胞的作用。

淫羊藿多糖的纯化及其结构初步鉴定

淫羊藿粗多糖经DEAE-52和葡聚糖凝胶柱层析分离纯化得到组分EPSⅠa,通过红外光谱分析发现具有多糖的典型结构;通过HPLC分析发现,EPSⅠa是由鼠李糖、果糖、葡萄糖和2个不确定的单糖组分组成的杂多糖。

淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂作用

目的研究探讨淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂活性。方法淫羊藿多糖G1和G4,生理盐水分别与流感病毒裂解疫苗配伍免疫小鼠,初次免疫后2周收集小鼠血清,ELISA法检测血清中抗体的滴度;MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应;ELISA测定IFN-γ和IL-4的水平,流式细胞术测定脾淋巴细胞CD4+、CD8+、CD3+和CD19+亚群。结果初次免疫后,淫羊藿多糖G1和G4能显著提高免疫小鼠血清的抗体滴度;能明显增强脾T淋巴细胞的增殖反应,可以显著提高脾淋巴细胞CD4+、CD8+和CD3+的含量及CD3+/CD19+的比值,诱导分泌IFN-γ的水平升高。结论淫羊藿多糖可增强小鼠对H1N1的免疫应答,可以作为甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的一种新型免疫佐剂。

中药多糖对EB病毒早期抗原激活的抑制作用

采用免疫酶的方法,研究了中药多糖对EB病毒早期抗原激活的抑制作用.结果表明:黄芪多糖、灵芝多糖、淫羊藿多糖在一定的剂量范围内均有其抑制作用,而且黄芪多糖、灵芝多糖的抑制作用明显优于淫羊藿多糖,三者都具有明显的量效关系.提示用这种方法可以在天然药物中寻找抗EB病毒药物,阻止其抗原的表达,防止细胞癌变,达到预防和治疗EB病毒相关性疾病的目的;同时也进一步揭示中药有效部位多糖的抗病毒、抗肿瘤的新机制.

不同干燥方法对淫羊藿多糖化学性质和抗氧化活性的影响

为研究不同干燥方法对淫羊藿多糖化学性质及抗氧化活性的影响,以粗毛淫羊藿为材料制备多糖。测定热风干燥多糖(EAP-H)、真空干燥多糖(EAP-V)和真空冷冻干燥多糖(EAP-F)的中性糖、糖醛酸和蛋白质含量,单糖组成及DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除能力。结果表明:淫羊藿多糖为含有少量蛋白质的酸性多糖,不同干燥方法将会影响其单糖组成和糖醛酸含量;EAP-F糖醛酸含量最高并具有最强的DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除能力。因此,真空冷冻干燥是制备淫羊藿多糖的最佳干燥方法。

柱前衍生化高效液相色谱法分析淫羊藿多糖中单糖的组成

目的测定淫羊藿多糖(EPS)中单糖的组成及其摩尔比。方法将淫羊藿多糖样品用1 mol/L硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生,通过简化衍生方法,优化分析条件,采用反相高效液相色谱250nm紫外检测和使用梯度洗脱,分离测定各单糖。结果淫羊藿多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成,其物质的量之比为0.60∶0.74∶1.00∶0.29∶2.29∶1.43。结论该改进后的衍生化方法以及优化的高效液相色谱法具有简单、快速、重现性好等特点,可用于淫羊藿多糖中单糖组成的测定。