表皮生长因子Epiregulin促进牙周膜干细胞成骨分化

目的研究表皮生长因子Epiregulin(EREG)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)成骨定向分化能力的影响。方法利用EREG shRNA基因敲除EREG进行丧失性功能研究,利用重组EREG活性蛋白进行获得性功能研究。通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨分化相关基因的表达研究牙周膜干细胞体外成骨分化能力。结果随着牙周膜干细胞向成骨分化,EREG的表达明显升高。基因敲除EREG抑制牙周膜干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨分化相关基因骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和Osterix(OSX)的表达。人重组EREG活性蛋白增强牙周膜干细胞ALP活性和体外矿化能力。结论表皮生长因子EREG具有促进牙周膜干细胞成骨分化的潜能,可以作为一个候选的细胞因子用于牙周组织工程技术再生牙周组织。

epiregulin在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨表皮生长因子epiregulin在涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)肺转移中的作用。方法 SACC石蜡组织标本30例。通过免疫组织化学方法(SP方法)检测epiregulin在SACC石蜡组织标本中的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果 (1)Epiregulin广泛地表达于细胞质或细胞核。(2)SACC发生肺转移15例,阳性着色率86.7%(13/15),H-score(Hs)定量分析平均为1.26±0.65;未发生肺转移15例,阳性着色率33.3%(5/15),Hs为0.48±0.25。与Ⅰ+Ⅱ期相比,epiregulin在SACCⅢ+Ⅳ期表达显著升高。(3)Kaplan-Miere生存曲线分析未发现epiregulin的表达与SACC患者的预后相关。结论 Epiregulin的表达与涎腺腺样囊性癌肺转移有一定相关性,但仍需要大样本研究进一步证明。

表皮调节素、上皮有丝分裂原和干细胞因子对山羊精原干细胞增殖的影响

为了揭示表皮调节素(Epiregulin/EREG)、上皮有丝分裂原(Epigen/EPG)和干细胞因子(SCF)对山羊精原干细胞(SSCs)增殖的影响,改进SSCs体外培养体系。在含有胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白细胞抑制因子(LIF)的SSCs培养基基础上,分别添加20 ng/mL干细胞因子、20 ng/mL表皮调节素、20 ng/mL和100 ng/mL上皮有丝分裂原。对富集后山羊SSCs进行12 d的培养,测定培养过程中山羊SSCs生长曲线和细胞活性。结果表明:添加100 ng/mL上皮有丝分裂原和20 ng/mL的表皮调节素相比其他组能够显著促进山羊SSCs的体外增殖和细胞活力(P<0.05);其中培养12 d后添加20 ng/mL表皮调节素的细胞活力显著高于其他组,但细胞数量与100 ng/mL上皮有丝分裂原组无显著差异。20 ng/mL SCF相比对照组能够显著提高体外增殖和细胞活力(P<0.05),但低于100 ng/mL上皮有丝分裂原和20 ng/mL表皮调节素组(P>0.05)。因此,添加100 ng/mL上皮有丝分裂原、20 ng/mL干细胞因子和20 ng/mL表皮调节素能够提高山羊SSCs的增殖,其中添加20 ng/mL表皮调节素效果最佳。

急性ST段抬高型心肌梗死患者PCI后血清EREG水平及其与预后的关系

目的探究急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠脉介入术后血清表皮调节素(epiregulin,EREG)水平及其与预后的关系。方法前瞻性选取2017年6月-2018年4月接受救治的182例STEMI患者作为研究对象。根据STEMI患者预后情况将其分为预后良好组(n=157)和预后不良组(n=25)。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测STEMI患者血清EREG水平,并分析其与预后的关系。结果预后不良组血清EREG水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P <0. 05)。血清EREG评估STEMI患者1年预后的ROC曲线下面积、敏感性和特异性分别为0. 931、100. 00%和84. 71%。EREG高水平组平均生存时间低于EREG低水平组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Cox单因素和多因素分析结果显示年龄、舒张压、低密度脂蛋白胆固醇和EREG与STEMI患者预后关系密切。结论 STEMI患者血清EREG水平与预后关系密切,血清EREG水平较高提示其预后不良。

血小板源性生长因子-BB对大鼠血管平滑肌细胞表皮调节素表达的影响

目的:研究表皮调节素(epiregulin)在血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)促进大鼠血管平滑肌CS-54细胞株增殖中的作用。方法:针对大鼠表皮调节素基因的mRNA序列合成siRNA,采用脂质体转染法将其转染CS-54细胞;用蛋白质印迹检测PDGF-BB及siRNA转染对CS-54细胞表皮调节素蛋白表达的影响;用MTT法分析干扰表皮调节素表达对PDGF促进CS-54细胞增殖效应的影响。结果:PDGF-BB促进细胞增殖,效应具有浓度和时间依赖性,在50 ng/ml PDGF-BB作用24 h时其效果最为明显;PDGF-BB可以刺激CS-54细胞表皮调节素蛋白的表达;表皮调节素siRNA转染细胞,可使表皮调节素蛋白表达水平明显降低,并明显阻断PDGF-BB对CS-54细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB刺激CS-54细胞增殖的作用是通过诱导CS-54细胞表达表皮调节素蛋白实现的。

血清EREG和MGP水平与胸主动脉瘤的关系

目的:探讨去分化平滑肌分泌的表皮调节素(EREG)和基质Gla蛋白(MGP)与胸主动脉瘤(TAA)的关系。方法:采集36例TAA患者血清和36例正常对照血清,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清EREG和MGP水平,并分析其与胸主动脉病变长度及程度的关系。结果:TAA组血清EREG水平高于对照组,为(70.79±18.00)pg/ml对(33.06±1.34)pg/ml,P=0.045;血清MGP水平低于对照组,为(122.52±6.78)ng/ml对(153.74±8.57)ng/ml,P=0.006;EREG水平与主动脉病变长度和病变程度呈正相关。结论:TAA患者血清EREG水平升高,且升高程度与病变长度和病变程度正相关,而MGP水平降低,有一定的诊断价值。

食管鳞状细胞癌组织中表皮调节素、双调蛋白及表皮生长因子受体mRNA的表达

目的:检测表皮调节素、双调蛋白及表皮生长因子受体mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况。方法:用实时逆转录多聚酶链反应测定47例食管鳞状细胞癌及其正常组织中表皮调节素、双调蛋白和表皮生长因子受体mRNA的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系。结果:与正常组织比较,食管鳞状细胞癌组织中表皮调节素表达水平差异无统计学意义(t=1.597,P=0.119),双调蛋白低表达(t=2.953,P=0.005),表皮生长因子过度表达(t=4.932,P<0.001);食管鳞状细胞癌组织中表皮调节素与临床分型有关(χ2=5.673,P=0.028),双调蛋白与性别有关(χ2=5.034,P=0.042)。结论:表皮调节素、双调蛋白和表皮生长因子受体在食管鳞状细胞癌的发生发展中起一定作用。

急性心肌梗死患者血清表皮调节素水平与患者预后关系研究

目的探究急性心肌梗死(AMI)患者血清表皮调节素(EREG)水平及与患者预后的关系。方法选择2017年6月至2019年6月于贵阳市第三人民医院及贵州医科大学附属医院心内科接受治疗的182例AMI患者作为研究对象。根据AMI患者预后情况将其分为预后良好组(n=157)和预后不良组(n=25)。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测AMI患者血清EREG水平,并分析其与预后的关系。结果预后不良组血清EREG水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清EREG评估AMI患者1年预后的工作特征曲线(ROC-AUC)、敏感度及特异度分别为0.931、100.00%和84.71%。EREG高水平组平均生存时间低于EREG低水平组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox单因素及多因素分析结果显示,年龄、病变支数及EREG与AMI患者预后关系密切。结论AMI患者血清EREG水平与预后关系密切,血清EREG水平较高多提示患者预后不良。

表皮生长因子样因子在LH峰效应中的作用及临床研究进展

表皮生长因子样因子(epidermal growth factor-like factor)——双调蛋白(amphiregulin,Areg)、上皮调节蛋白(epiregulin,Ereg)和细胞调节素(betacellulin,BTC)通过旁分泌和自分泌方式介导黄体生成素(luteinizing hormone,LH)峰效应,从而诱导卵母细胞减数分裂恢复、卵丘扩展以及排卵。

miR-192-5p通过靶向表皮生长因子增加非小细胞肺癌对顺铂的药物敏感性

目的探讨miR-192-5p靶向表皮生长因子增加非小细胞肺癌对顺铂药物敏感性的作用机制。方法加入不同浓度顺铂处理非小细胞肺癌细胞系A549细胞,CCK-8检测IC50,筛选耐药细胞株(A549/DDP);Real-time PCR检测A549/DDP细胞中miR-192-5p的表达,Western blot检测表皮生长因子的表达。将miR-192-5p模拟物转染到A549/DDP细胞后,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力变化;生物信息学网站预测miR-192-5p靶基因,荧光素酶报告基因实验进行验证。结果miR-192-5p在顺铂耐药的肺癌细胞系A549/DDP中表达下调,过表达miR-192-5p可抑制A549/DDP细胞增殖,下调EREG的表达,提高A549/DDP对顺铂的化疗敏感性;miR-192-5p靶向结合EREG的3′UTR区。结论miR-192-5p能够靶向EREG促进肺癌细胞对顺铂的药物敏感性。

利用肠道类器官培养研究表皮调节素的抗辐射作用

目的利用小肠类器官3D培养技术研究表皮调节素（epiregulin）治疗辐射损伤的作用。方法采用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）法分离小肠隐窝，以3D技术体外培养小肠类器官，培养24h后X射线照射．以碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）作为阳性对照．研究建立小肠类器官辐射损伤模型。通过观察类器官存活率、大小和出芽等变化，研究表皮调节素对肠道类器官辐射损伤的治疗作用。结果体外培养的小肠类器官辐射后存活率与照射剂量相关，剂量曲线与体内辐射实验结果类似。照射后24h给药，表皮调节素可促进8Gyx射线照射后小肠类器官存活，400ng／ml组存活率为（12．56±1．02）％．较对照组（4．73±0．38）％明显增加，差异有统计学意义（t=12．43，P〈0．05）。结论表皮调节素在辐射后24h使用具有肠道类器官辐射损伤治疗作用。