耳聋左慈丸治疗慢性分泌性中耳炎临床疗效及作用机制研究

目的 观察耳聋左慈丸联合西医疗法治疗慢性分泌性中耳炎的临床疗效,并分析其作用机制。方法 选择2022年1月—2022年12月于医院耳鼻喉科治疗的200例慢性分泌性中耳炎患者,采用随机数字表法将上述患者分为对照组和试验组,每组100例,对照组患者予以西医常规治疗,试验组在对照组基础上予以耳聋左慈丸治疗。比较两组患者的临床疗效、症状和不良反应情况,以及治疗前后听力水平、耳积液炎症因子水平变化。结果 对照组患者的有效率为(80.00%,80/100),试验组患者的有效率为(90.00%,90/100),与对照组比较,试验组的有效率明显升高(P<0.05)。治疗前、治疗后1周两组患者的ETDQ-7无明显差异(P>0.05);治疗后3周后,试验组患者的ETDQ-7水平相较于对照组均明显下降(P<0.01)。干预完成后,试验组患者耳鸣、耳闷、听力下降以及鼓室积液等主要症状评分水平相较于对照组均明显降低(P<0.01)。干预完成后,与对照组患者比较,试验组患者0.5、1、2 kHz的纯音听阈明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。干预前两组患者的耳积液炎症因子水平差异无统计学意义(P>0.05);干预完成后,试验组患者耳积液中IL-1β、IL-8以及TNF-α水平相较于对照组均明显下降(P<0.01)。干预过程中所有患者的主要不良反应有恶心呕吐、食欲不振、腹痛腹泻、头晕头痛等,两组患者的不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 耳聋左慈丸联合西医疗法治疗慢性分泌性中耳炎具有良好的临床效果,提高患者听力水平,改善临床症状,抑制局部炎症反应,且无不良反应增加。

耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响

目的:通过研究耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响,探讨老年性耳聋的治疗机制。方法:选取75只耳廓反应灵敏的雄性清洁级昆明小鼠,随机抽取15只作为空白对照组,腹腔注射生理盐水。剩余60只进行老年性耳聋小鼠造模,腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg),每日1次,共60 d。造模成功后将老年性耳聋模型小鼠随机分为模型组、耳聋左慈丸低、中、高剂量组。空白对照组和模型组给予生理盐水灌服,耳聋左慈丸低、中、高剂量组给予耳聋左慈丸(0.3、0.6、1.2 g/kg)灌服,每日1次,共14 d。运用耳蜗基底膜铺片技术观察小鼠耳蜗毛细胞形态学变化;采用ELISA法检测耳蜗组织中cAMP含量;用免疫组织化学技术检测PKA的蛋白表达水平;用RT-PCR技术检测PKA mRNA表达水平。结果:与空白对照组相比,模型组小鼠耳蜗基底膜毛细胞明显缺失或散乱,cAMP含量及PKA蛋白和mRNA表达明显下降;与模型组相比,经过耳聋左慈丸治疗的小鼠耳蜗毛细胞排列较整齐,cAMP含量及PKA蛋白和mRNA表达升高,其中高剂量组变化最为明显。结论:耳聋左慈丸可以通过调节耳蜗组织中cAMP含量及PKA的表达水平发挥其对老年性耳聋的治疗作用。

HPLC法测定耳聋左慈丸中马钱苷和丹皮酚的含量

建立耳聋左慈丸中马钱苷和丹皮酚含量的高效液相色谱测定方法。色谱柱：Diamonsil C18,流动相分别为乙腈-甲醇-0.1%磷酸溶液（10∶5∶85）和甲醇-水（70∶30）。马钱苷的线性范围为0.128～1.28μg,r=0.99999,回收率为98.98%,RSD为0.70%（n=6）;丹皮酚的线性范围为0.04～0.4μg,r=0.9999,回收率为98.91%,RSD为0.73%（n=6）。本法操作简便,结果准确。

耳聋左慈丸防治庆大霉素诱发大鼠肾耳毒性实验研究

目的观察耳聋左慈丸对庆大霉素所致大鼠肾毒性和耳毒性的防治作用。方法将21只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、庆大霉素组、中药防治组,每组7只。庆大霉素组和中药防治组均肌肉注射庆大霉素(80μg·g-1·d-1),每日2次,持续14天;中药防治组同时灌胃给予耳聋左慈丸(6 g·kg-1·d-1),每日1次,持续14天。对照组通过肌肉注射和灌胃给予等剂量的0.9%NaCl溶液,持续14天。采用听性脑干反应(ABR)检测听力水平,测定肾系数、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN),光镜下观察肾组织的形态学改变。结果与对照组比较,庆大霉素组大鼠各频率ABR值显著增高(P<0.01),肾系数、血肌酐、血尿素氮升高(P<0.01)。与庆大霉素组比较,中药防治组大鼠各频率ABR值显著降低(P<0.01),肾系数显著下降(P<0.01),血肌酐、血尿素氮下降(P<0.05)。光镜下显示,庆大霉素组大鼠肾小管扩张、肾小管上皮细胞水肿、肾小管腔内有蛋白管型和细胞管型,而中药防治组肾小管结构基本正常。结论耳聋左慈丸可同时减缓庆大霉素引起的肾毒性和耳毒性。

基于网络药理学的耳聋左慈丸治疗耳聋耳鸣作用机制研究

目的运用网络药理学探讨耳聋左慈丸治疗耳聋耳鸣的作用机制。方法借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索耳聋左慈丸的化学成分和相关作用靶点,同时利用Gene数据库查询与耳聋耳鸣疾病相关的靶点,从而构建出化合物-靶点网络、蛋白互作(PPI)网络、成分-靶点-信号通路网络图,研究耳聋左慈丸的作用机制。结果耳聋左慈丸处方的8味药材中筛选得出87个化合物和235个靶点,其中32个化合物未检索到相关靶点;与耳聋耳鸣疾病交集的靶点37个,PPI网络显示其中29个有相互作用关系;基因本体条目365个,前20条中包括生物过程相关条目11个,分子功能相关条目2个,细胞组成相关条目7个;京都基因与基因组百科全书通路26条,主要涉及糖尿病并发症的AGE-RAGE信号通路、FAS信号通路、PI3K-Akt信号通路和细胞外基质-受体相互作用信号通路;耳聋左慈丸处方中化合物18个(槲皮素、茵陈黄酮、山酮C排前三),相关靶点中处于前列的为钙调蛋白1(CALM1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL6)和酪氨酸蛋白磷酸酶非受体Ⅱ型(PTPNⅡ)。结论耳聋左慈丸处方中槲皮素、茵陈黄酮等18种活性化合物通过作用于CALM1、TNF、IL6、PTPN11等关键靶点,实现调控26条生物学信号通路,从而达到治疗耳聋耳鸣的作用。

高效液相色谱法测定耳聋左慈丸中马钱苷含量

目的建立耳聋左慈丸中马钱苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(8∶4∶88)为流动相,检测波长为236nm,流速为1.0mL/min。结果方法精密度和稳定性均良好,马钱苷进样量线性范围是101.6～812.4ng,r=0.9999(n=5),平均回收率为99.8%,RSD=0.61%(n=9)。结论该方法适用于耳聋左慈丸中马钱苷的含量测定。

超临界流体萃取耳聋左慈丸中丹皮酚的研究

目的建立一种用超临界流体萃取和高效液相分析耳聋左慈丸中丹皮酚的方法。方法用正交试验法,考察时间、温度、压力、夹带剂的种类对耳聋左慈丸中丹皮酚的提取量的影响。结果最佳超临界流体萃取条件为:95%乙醇作为夹带剂,压力为20 MPa,温度为50℃,提取时间为90 min。结论该方法可有效的提取和分析耳聋左慈丸中丹皮酚的含量。

耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清SOD、MDA、PKC的影响

目的研究耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清SOD、MDA、PKC含量的影响,探讨治疗老年性耳聋的机制。方法将100只健康雄性SPF级昆明小鼠随机分为2组,对照组(CG)15只和造模组85只,造模组采用腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg.d),对照组腹腔注射等剂量0.9%生理盐水,每日1次,连续2个月。造模成功后,将75只小鼠随机分为5组,模型组(MG)、VitC组(VCG)、中药低剂量组(LDG)、中药中剂量组(MDG)、中药高剂量组(HDG),每组15只。VCG灌胃Vit C注射液(150 mg/kg.d),中药治疗组灌胃不同浓度耳聋左慈丸溶液,分别是LDG(0.3 g/ml)、MDG(0.6 g/ml)、HDG(1.2g/m)l,CG和MG灌胃等剂量的0.9%NaC l,每日1次,连续14天。采用听性脑干反应(ABR)检测听力水平,用比色法测定血清的SOD活性、MDA含量的变化,用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测血清中PKC的含量。结果与对照组相比,模型组小鼠的一般情况均减退,且各频率ABR值显著增高(P<0.01或P<0.05),血清SOD活性降低、血清MDA含量增高(P<0.01)、血清PKC的含量升高(P<0.01)。与模型组相比,中药组小鼠的一般情况均得到改善,且各频率ABR值降低(P<0.01),依次是HDG<MDG<LDG,血清SOD活性升高,依次是HDG>MDG>LDG,血清MDA含量逐渐降低,依次是LDG>MDG>HDG,,减轻了氧自由基引起的病理损伤;VCG小鼠血清的SOD活性、MDA含量与LDG相近。中药各组显著降低血清PKC的含量(P<0.01)。结论耳聋左慈丸可以减轻老年性耳聋模型小鼠的病理损害,对氧自由基的损伤有一定的保护作用;降低PKC浓度,从而对c AMP/PKC信号通路起调节作用。

HPLC法检测耳聋左慈丸中马钱苷方法研究

目的:建立以HPLC法测定耳聋左慈丸中马钱苷的含量方法。方法:采用Agilent1100高效液相,以波长240nm,柱温20℃,流速1.0mL/min,进样量20uL;从色谱柱种类、流动相种类等方面来筛选马钱苷检测条件;从线性范围、回收率、精密度、重现性及稳定性等方面进行考察。结果:以Hypersil ODS C18柱(5um,250mm×4.60mm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(12:88)为流动相检测效果良好。该方法在0.1272～3.18μg内线性关系良好(R2=0.9994),进样精密度良好(RSD=0.4%,n=6),进样重现性良好(RSD=0.5%,n=6),准确度良好(平均回收率为99.6%,RSD=0.5%,n=6),稳定良好(在27h内检测7次,RSD为0.7%,n=7)。结论:本法简便、准确可靠、专属性强,重现性好。

甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗神经性耳鸣30例

目的探讨甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗神经性耳聋鸣的临床疗效。方法选取2016年1月—2017年1月在大连市友谊医院耳鼻喉头颈外科就诊的60例神经性耳聋患者,随机分为试验组和对照组,对照组30例,采取甲硫酸倍他司汀治疗,试验组30例,在对照组的基础上使用耳聋左慈丸治疗,比较两组患者的耳鸣症状评分、TEOAE有效引出和临床有效率。结果试验组各项指标均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对神经性耳鸣患者采取甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗,可以有效改善临床症状,提高治疗效果,值得推广。

耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4表达的影响

目的观察耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨其作用机制。方法除正常组对照组外,其他小鼠采用腹腔注射氢化可的松方法复制肾虚小鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、中药组,每组16只。中药组予耳聋左慈丸水煎液灌胃,模型组和正常对照组予生理盐水灌胃,共22 d。运用耳蜗铺片技术观察小鼠耳蜗内、外毛细胞与支持细胞的形态学变化;采用免疫组化法、Western blot检测耳蜗组织AQP4蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠耳蜗内、外毛细胞和支持细胞缺失或散乱;与模型组比较,中药组耳蜗内、外毛细胞和支持细胞排列较整齐,边界尚清楚;小鼠耳蜗组织AQP4蛋白表达结果显示,与模型组比较,中药组AQP4蛋白表达增强(P<0.01),中药组与正常对照组AQP4蛋白表达无显著差异。结论耳聋左慈丸可能通过上调耳蜗组织AQP4蛋白表达,达到治疗肾虚小鼠耳聋的作用。

方剑乔教授虚实辨证治疗耳鸣耳聋经验采撷

[目的]总结方剑乔教授治疗耳鸣耳聋的临床经验,提炼其学术思想。[方法]通过临床跟师学习,收集病案,认真研习方师对耳鸣耳聋的诊疗思路与辨证施治要点,归纳整理方师针灸取穴与临证用药经验,从病因病机和治法治则两个方面总结分析方师论治本病的学术思想,并列举验案予以佐证。[结果]方师提出,耳鸣耳聋的诊治应重视虚实辨证,首辨虚实之病机,后辨病因,实证多责之于风火之邪上扰,虚症多责之于气虚或阴精亏损,主要是肾阴肾精的亏损。治疗上辨证与辨经相结合,采用针药相辅的治疗手段,补虚泻实,标本兼顾。针灸治疗方面以患侧的耳前三穴(耳门、听宫、听会)作为治疗耳聋耳鸣的基本穴,结合虚实辨证选择电针频率,虚证用疏波,实证用密波。中药治疗多以耳聋左慈丸加减,以奏三阴并补、利湿泄浊之效,对肝肾亏虚型患者尤为效佳。所举验案中患者为耳鸣耳聋(肾精亏虚证),治拟补肾益精、滋阴养窍,经针灸耳前三穴并随证加减,并结合左慈丸口服后,患者听力及耳鸣情况较前明显改善。[结论]方师治疗耳鸣耳聋,注重辨证与辨经相结合,采用针药相辅的治疗手段,补虚泻实,标本兼顾,临床疗效显著,能明显缓解患者耳鸣症状,提高听力水平。

耳聋左慈丸治疗耳鸣的系统评价

目的:系统评价耳聋左慈丸治疗耳鸣的临床疗效。方法:全面检索中国期刊数据总库(CNKI)、维普数据库(VIP)、万方数据库(WanFang Data)、中国生物医学文献数据库(CBM)、The Cochrane Library、PubMed自建库至2019年12月31日耳聋左慈丸治疗耳鸣的相关文献,筛选出符合纳入标准的随机对照研究,采用RevMan 5.2软件对纳入文献的总有效率及各亚组进行Meta分析。结果:共纳入文献9篇总计694例患者,Meta分析显示耳聋左慈丸治疗耳鸣临床疗效显著[OR=4.45,95%CI(2.99,6.64),P<0.05]。其亚组分析结果显示,耳聋左慈丸联合针刺[OR=4.44,95%CI(1.88,10.51),P<0.05]、耳聋左慈丸联合西药[OR=4.26,95%CI(2.20,8.24),P<0.05]、耳聋左慈丸联合穴位注射及耳穴贴压[OR=6.76,95%CI(2.93,15.58),P<0.05]临床疗效优势明显,其中以耳聋左慈丸联合针刺治疗耳鸣效果尤为显著。结论:耳聋左慈丸治疗耳鸣临床疗效颇佳,中医联合应用疗法(耳聋左慈丸联合针刺、穴位注射及耳穴贴压)具有较高的临床疗效,但不能确定耳聋左慈丸治疗耳鸣发生不良反应及复发的可能性。

针刺配合耳聋左慈丸治疗老年性耳鸣25例

目的观察针刺配合耳聋左慈丸治疗老年性耳鸣的临床疗效。方法将50例患者随机分为治疗组和对照组各25例,治疗组取穴为:耳门、听宫、听会、风池、风府、中渚,均为双侧取穴并配合服用耳聋左慈丸;对照组采用口服耳聋左慈丸,观察2组患者治疗前后听阈改变情况及临床疗效。结果治疗组听阈与症状评分较治疗前均有显著改善,临床总有效率为92.0%,与对照组比较,症状改善及临床疗效差异有统计学意义(P<0.01)。结论针刺配合耳聋左慈丸治疗老年性耳鸣疗效值得肯定,而且明显优于药物耳聋左慈丸治疗。

HPLC法测定耳聋左慈丸中的丹皮酚的含量

目的 :应用高效液相色谱法对耳聋左慈丸中的丹皮酚进行含量测定。方法 :选用RPC18分析柱 (2 5 0mm×4 6mm ,5 μm) ,甲醇 -水 -乙酸 (6 5∶30∶5 )为流动相 ,检测波长为 2 74nm ,流速为 0 8mL·min-1。结果 :线性范围为 0 0 5 2～ 0 6 2 4μg (r=0 9999) ,平均回收率为 98 72 % ,RSD为 1 8%。 结论 :本法简便、灵敏、准确。

耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学

建立大鼠血浆中耳聋左慈丸中成分毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的共检测LC-MS/MS定量方法,并运用此方法评价耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学行为。采用甲醇作为蛋白沉淀剂,用蛋白沉淀法处理血浆样本,以甲醇为有机相,0.1%甲酸水溶液为水相,在负离子模式下对毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷进行定量分析方法的建立,并且对所建方法进行方法学考证。选取健康SD大鼠,单次灌胃20 mL/kg(相当于原药10 g/kg剂量)的耳聋左慈丸提取液,运用建立的方法测定在给药后不同时间间隔的待测物质血浆浓度,并利用Phoenix WinNonlin8.3软件经非房室模型拟合计算药代动力学参数。方法学验证结果表明,毛蕊花糖苷(r=0.9937)、氧化芍药苷(r=0.9946)在0.5~50 ng/mL范围内线性良好,松果菊苷(r=0.9936)、苯甲酰芍药苷(r=0.9926)在1~100 ng/mL范围内线性良好,4种物质的批间及批内精密度的RSD均小于15%,批间及批内准确度均在85%~115%之间。提取回收率、基质效应和稳定性均满足相关要求。在大鼠单次灌胃耳聋左慈丸提取液后,4种待测物质都发生了较快的吸收和消除,氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的血药浓度-时间曲线中都出现双峰现象;与其他3种物质相比,氧化芍药苷在大鼠血浆中浓度较高,c_(max1)为(24.40±4.78)ng/mL,c_(max2)为(22.50±2.70)ng/mL。结果表明,该方法的验证结果符合生物样本分析方法指导原则,可用于评价耳聋左慈丸提取液在大鼠体内的药代动力学行为。

耳聋左慈丸机械制丸工艺的研究

目的:研究耳聋左慈丸(水蜜丸)机械制丸的工艺参数,确定最佳工艺参数.方法:首先确定药材粉碎的工艺参数,然后以丸药圆整度、重量差异为评价指标,优选耳聋左慈丸的制丸工艺参数,并进行工艺验证.结果:优选机械制丸条件为:原料粉碎成细粉、混匀,药粉与炼蜜比例为1∶0.4,加水量为7%,炼药1遍,输条频率比∶制条频率比约为0.9,出条嘴为5.0 mm,刀具为5.2 mm,制丸,75℃干燥.结论:本研究确定的工艺简便可行,制得产品各项指标稳定,可作为大生产的控制参数,并可作为其他水蜜丸机械制丸的参考.

耳聋左慈丸治疗老年性耳聋临床研究

目的:观察耳聋左慈丸治疗老年性耳聋的临床疗效。方法:将老年性耳聋患者60例随机分为2组,对照组30例采用单纯声治疗,研究组30例在对照组的基础上加用耳聋左慈丸治疗。2组疗程均为3个月,观察比较2组临床疗效、治疗后耳聋分级情况、血清炎症指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平变化。结果:总有效率研究组为86.67%,对照组为60.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,无耳聋患者研究组占比36.67%,对照组占比16.67%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者TNF-α、IL-1β、IL-6水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,研究组患者TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:耳聋左慈丸治疗老年性耳聋疗效显著,可减轻患者耳鸣症状,恢复听力,改善血清炎症因子水平。

针刺联合常规疗法治疗肾精亏虚型耳鸣临床研究

目的:观察在耳鸣咨询和声治疗基础上加用针刺治疗肾精亏虚型耳鸣的临床疗效。方法:将80例肾精亏虚型耳鸣患者随机分为对照组和观察组各40例。2组患者均接受耳鸣咨询和声治疗。对照组以耳聋左慈丸治疗,观察组采用针刺治疗。疗程均为3个月。治疗前后评定耳鸣严重程度评分、主观耳鸣程度视觉模拟评分法(VAS)评分、耳鸣残疾评估量表(THI)评分和肾精亏虚证评分,比较2组的临床疗效、耳鸣残疾程度。结果:治疗后,观察组临床疗效优于对照组(P <0.05),耳鸣残疾程度轻于对照组(P <0.05),耳鸣严重程度轻于对照组(P <0.05)。观察组耳鸣严重程度评分、VAS评分、THI评分和肾精亏虚证评分均低于对照组(P <0.01)。结论:在耳鸣咨询和声治疗的基础上加用针刺治疗肾精亏虚型耳鸣,可减轻患者的耳鸣严重程度和耳鸣残疾程度,改善临床症状,临床疗效显著。

耳聋左慈丸联合声音疗法治疗肾精亏虚型慢性耳鸣临床研究

目的:观察耳聋左慈丸联合声音疗法治疗肾精亏虚型慢性耳鸣的疗效。方法:选取80例肾精亏虚型慢性耳鸣患者,按随机数字表法分为观察组及对照组各40例。对照组采用声音疗法,观察组在对照组基础上联合耳聋左慈丸治疗。2组疗程均为3个月。比较2组临床疗效及不良反应发生率,比较2组治疗前后耳鸣残疾评估量表(THI)评分、耳鸣严重程度评分、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分、中医证候积分的变化。结果:观察组临床疗效总有效率为87.5%,对照组为67.5%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组THI评分均较治疗前下降(P<0.05),观察组THI评分低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组耳鸣严重程度评分均较治疗前下降(P<0.05),观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组PSQI评分均较治疗前下降(P<0.05),观察组PSQI评分低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候积分较治疗前下降(P<0.05),观察组中医证候积分低于对照组(P<0.05)。对照组不良反应发生率为5.0%,观察组不良反应发生率为2.5%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在声音疗法的基础上联合耳聋左慈丸治疗肾精亏虚型慢性耳鸣能提高临床疗效,改善患者临床症状及睡眠质量。