应用VITEK-32分析仪检测细菌ESBLs酶的探讨

目的 探讨VITEK-32检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶 （ESBLs）的可靠性,分析两种菌产ESBLs的情况.方法 用VITEK-32专用药敏卡GNS-506进行ESBLs检测.用NCCLS（美国临床实验室标准化委员会标准）确证法检测ESBLs作对照.结果 仪器检测61株肺炎克雷伯菌中有17株ESBLs为阳性,用NCCLS（1999）确证法检测同样的61株肺炎克雷伯菌中有20株ESBLs为阳性;39株大肠埃希菌中,仪器检出16株阳性,用NCCLS确证法检测同样的39株大肠埃希菌中有21株ESBLs为阳性.两种方法检测结果差异无统计学意义（χ2=1.37,P〉0.05）.结论 VITEK-32检测产ESBLs菌株尚可能存在一定的局限性,故各地VITEK-32检测出产ESBLs酶的细菌,建议再用NCCLS确证法检测.

仪器法与纸片协同法检测超广谱β-内酰胺酶的结果比较

目的 了解VITEK AMS检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的可靠性 ,并调查本院这两种菌的产ESBLs情况。方法 用VITEK AMS专用药敏卡GNS 5 0 6进行ESBLs检测 ,并以头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为底物 ,用纸片协同试验作对照。结果 仪器检测 48株肺炎克雷伯菌中有 2 4株ESBLs为阳性 ,用纸片协同法对照结果一致。检测 10 2株大肠埃希菌中 ,仪器检出 41株阳性 ,纸片协同法对照也为阳性 ,但仪器检测的 6 1株阴性菌中 ,纸片协同法对照有 19株为阳性。结论 VITEK AMS检测本地区产ESBLs菌株尚可能存在一定的局限性 ,建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况 。

多重耐药基因cfr在食品动物源大肠杆菌中流行特点的调查

为调查多重耐药基因cfr在我国多个地区食品动物源大肠杆菌中的流行情况及耐药现状,对2014年从广东、山东、江苏等11个省份分离得到的4 702株大肠杆菌,采用PCR和测序方法验证cfr阳性菌株,并通过临床常用药物敏感性测定、脉冲场凝胶电泳分型（PFG E）和Southern杂交定位等方法,确定分离株的耐药表型和cfr基因在大肠杆菌中的传播方式。结果显示,共检出cfr阳性菌株9株,检出率为0.19%。药敏试验结果显示,9株cfr阳性菌株对氯霉素、氟苯尼考、氨苄西林、四环素、多西环素均耐药,对亚胺培南均表现为敏感,对庆大霉素、新霉素耐药率在60%以上,对其他药物耐药率介于10%~50%之间。PFGE结果显示,有2株来自同一养殖场的菌株谱型相似,表明存在克隆传播。Southern杂交结果显示,cfr基因定位于大小为70~400 kb之间的质粒上。上述调查结果表明,多重耐药基因cfr在食品动物源源大肠杆菌中的检出率较低,但在广东地区较为流行。

人转化生长因子β1基因在pET表达系统中的表达

目的：研究人转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）成熟肽基因在大肠杆菌中的表达。方法：利用ｐＥＴ－３ｂ载体，分别从宿主、培养基、诱导时间及转录终止子的距离等方面对ＴＧＦβ１的表达进行了优化。结果：ＴＧＦβ１在大肠杆菌中获得一定程度的表达，并存在于包涵体中。结论：利用ｐＥＴ表达系统，可使ＴＧＦβ１基因在大肠杆菌胞内获得表达。