乳酸杆菌细胞裂解物对家兔实验性阴道炎的治疗作用

目的观察乳杆菌DM8909裂解物及发酵物在体内对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果,探索一种替代活菌制剂的生态制剂。方法用阿莫西林和甲硝唑接种家兔建立脱污染模型,再用大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的混合液接种,建立实验性感染模型后,随机分为5组,分别用乳杆菌裂解物原液、裂解物稀释液、发酵上清液、乳杆菌活菌制剂及生理盐水(对照组)进行治疗,分析和考察阴道菌群变化。结果德氏乳酸杆菌裂解物具有治疗实验性家兔细菌性阴道炎的效果,其疗效与活菌制剂相近。结论德氏乳酸杆菌裂解物可作为乳酸杆菌活菌制剂的替代物。

我院产EsBL肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分布及耐药分析

目的了解我院临床分离的产超广谱β内酰胺酶(EsBL)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的临床分布特点及耐药状况,为临床用药提供实验依据。方法收集2013年青岛大学附属医院临床分离的1 418株肺炎克雷伯菌和1 463株大肠埃希菌。采用VTEK 32全自动微生物分析系统进行菌种鉴定及药敏试验。结果 1 418株肺炎克雷伯菌中分离出产EsBL菌677株(占47.74%),1 463株大肠埃希菌中分离出产EsBL菌677株(占50.03%)。产EsBL肺炎克雷伯菌来自痰标本456株(占67.34%),产EsBL大肠埃希菌来自尿标本271株(占36.97%),且两者均在内科中分离率最高,分别为49.02%(332株)和54.61%(400株)。产EsBL大肠埃希菌的耐药率高于相应的产EsBL肺炎克雷伯菌,且两者对青霉素类、喹诺酮类及头孢类均具有较高的耐药性,而对比阿培南、厄它培南、亚胺培南、美罗培南等药高度敏感。结论临床分离菌中的产EsBL菌日趋增多,对抗菌药物的耐药率增高,应重视产EsBL菌的检测和药敏试验,合理有效地选用抗菌药物,避免产EsBL菌的院内流行。

大肠杆菌qseC基因敲除及其缺陷株运动能力研究

目的通过Red同源重组法构建qseC基因缺失的大肠杆菌突变株,探讨qseC基因对大肠杆菌运动能力的影响.方法 PCR扩增两翼与目的基因上下游同源、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化入大肠杆菌MC1000,在Red同源重组酶作用下,用含同源臂的氯霉素抗性片段置换目的基因qseC,并利用FLP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除.测定qseC基因缺失株运动能力的变化.结果 qseC基因已被成功敲除.在LB培养基中,qseC基因缺陷株的生长状况与亲株无明显差异.MC1000与MC1000qseC基因缺失株运动圆环的直径分别为(6.10±0.36)mm和(3.20±0.53)mm(P<0.01).结论成功构建大肠杆菌qseC基因缺失突变株,且qseC基因对细菌运动能力具有重要调控作用.

大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)无毒突变体mLT63在大肠杆菌中的融合表达及纯化

目的在大肠杆菌中表达并纯化大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体mLT63融合蛋白,并探索其免疫反应性。方法采用不同的诱导温度,IPTG浓度,葡萄糖含量,pH值以及不同的培养基优化重组菌TB1(pMAL-c2X-mlt)的表达条件,表达产物经超声粉碎,超声上清经初步盐析、应用直链淀粉亲和层析柱纯化,Western blot鉴定纯化产物的免疫学反应性。结果融合蛋白在诱导表达产物中的含量达到16.11%,纯化产物的纯度达到72.58%。纯化产物能够被抗CT血清所识别。结论成功表达并纯化出了大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体mLT63,获得了纯度较高并具有良好免疫反应性的融合蛋白。