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Overexpression of estrogen receptor beta alleviates the toxic effects of beta-amyloid protein on PC12 cells via non-hormonal ligands 被引量:1
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作者 Hui Wang Lihui Si +4 位作者 Xiaoxi Li Weiguo Deng Haimiao Yang Yuyan Yang Yan Fu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第14期1095-1100,共6页
After binding to the estrogen receptor, estrogen can alleviate the toxic effects of beta-amyloid protein, and thereby exert a therapeutic effect on Alzheimer's disease patients. Estrogen can increase the incidence of... After binding to the estrogen receptor, estrogen can alleviate the toxic effects of beta-amyloid protein, and thereby exert a therapeutic effect on Alzheimer's disease patients. Estrogen can increase the incidence of breast carcinoma and endometrial cancer in post-menopausal women, so it is not suitable for clinical treatment of Alzheimer's disease. There is recent evidence that the estrogen receptor can exert its neuroprotective effects without estrogen dependence. Real-time quantitative PCR and flow cytometry results showed that, compared with non-transfected PC12 cells, adenovirus-mediated estrogen receptor β gene-transfected PC12 cells exhibited lower expression of tumor necrosis factor a and interleukin 1β under stimulation with beta-amyloid protein and stronger protection from apoptosis. The Akt-specific inhibitor Abi-2 decreased the anti-inflammatory and anti-apoptotic effects of estrogen receptor β gene-transfection. These findings suggest that overexpression of estrogen receptor β can alleviate the toxic effect of beta-amyloid protein on PC12 cells, without estrogen dependence. The Akt pathway is one of the potential means for the anti-inflammatory and anti-apoptotic effects of the estrogen receptor. 展开更多
关键词 estrogen estrogen receptor β Alzheimer's disease beta-amyloid protein ADENOVIRUS neural regeneration
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雌激素受体beta亚型单独活化对CBA/J小鼠Treg细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 金倩 秦娟 +3 位作者 靳小静 李静 单忠艳 滕卫平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期433-437,共5页
目的:研究雌激素受体beta亚型(ERβ)单独活化对CBA/J小鼠Treg细胞的调节作用。方法:应用流式细胞术检测Oil组、E2组、DMSO组、DPN组小鼠胸腺CD4+CD25+Foxp3-GITR+细胞及CD4+CD25+Foxp3+GITR+细胞占CD4+T细胞百分比、小鼠脾脏CD4+CD25+Fo... 目的:研究雌激素受体beta亚型(ERβ)单独活化对CBA/J小鼠Treg细胞的调节作用。方法:应用流式细胞术检测Oil组、E2组、DMSO组、DPN组小鼠胸腺CD4+CD25+Foxp3-GITR+细胞及CD4+CD25+Foxp3+GITR+细胞占CD4+T细胞百分比、小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比、外周脾表达GITR的Treg细胞百分比及Treg细胞中GITR的平均荧光强度。结果:E2组与Oil组之间、DPN组与DMSO组之间小鼠胸腺CD4+CD25+Foxp3-GITR+细胞及CD4+CD25+Foxp3+GITR+细胞占CD4+T细胞百分比无明显变化。与DMSO相比,DPN组的CD4+CD25+Fxop3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比明显下降(P<0.05),表达GITR的Treg细胞下降(P<0.05),Treg细胞中GITR的平均荧光强度下降(P<0.05)。然而,与Oil组相比,E2组上述指标并无明显变化。结论:DPN单独激活ERβ后虽然不影响胸腺nTreg细胞的发育,却对CBA/J小鼠外周脾脏的Treg细胞起明显的抑制作用,提示ERβ单独激活可能促进自身免疫性疾病的发生、发展。 展开更多
关键词 雌激素 雌激素受体beta DPN TREG GITR 自身免疫
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Gengnianchun recipe inhibits apoptosis of pheochromocytoma cells from beta-amyloid 25-35 insult, better than monotherapies and their compounds 被引量:1
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作者 Jun Li Wenjun Wang +1 位作者 Dajin Li Wenjiang Zhou 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第36期2815-2821,共7页
This study aims to determine and compare the protective effects of Gengnianchun recipe drug serum and compounds of its representative drug monotherapies against sympathetic nerve pheochromocytoma cell line PC12 cells ... This study aims to determine and compare the protective effects of Gengnianchun recipe drug serum and compounds of its representative drug monotherapies against sympathetic nerve pheochromocytoma cell line PC12 cells damaged by beta-amyloid 25-35 at the cellular apoptosis and related signal pathway levels. PC12 cells cultured with medicated rat serum showed enhanced cell viability and reduced cellular apoptosis rates compared with those of monotherapies and their compounds. Furthermore, Gengnianchun recipe up-regulated expressions of anti-apoptotic protein Bcl-2, estrogen receptor-beta and phosphorylated extracellular-signal-regulated kinase 1/2; and down-regulated expressions of pro-apoptotic proteins Bax and caspase-3. Gengnianchun recipe was superior to representative drug monotherapies, such as paeoniflorin, berberine, timosaponin A-III, icariine and their compounds in protecting PC12 cells. Mitogen-activated protein kinase blocker and estrogen receptor antagonist were found to reverse the above effects of Gengnianchun recipe. The experimental findings indicate that, Gengnianchun recipe protects PC12 cells from beta-amyloid 25-35 insult; its inhibitory effect on apoptosis may be achieved through the mitogen-activated protein kinase and estrogen receptor pathways. 展开更多
关键词 Gengnianchun recipe Alzheimer's disease apoptosis medicated serum beta-amyloid 25-35 estrogen receptor mitogen-activated protein kinase
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雌激素受体β蛋白在乳腺癌中表达的意义 被引量:5
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作者 秦凤展 佘明金 +2 位作者 汪子书 吴穷 郑荣生 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2006年第8期571-574,共4页
目的:检测乳腺癌组织中雌激素受体β(ERβ)蛋白的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理特性的关系。方法:采用免疫组化法检测96例乳腺癌组织中ERβ蛋白的表达情况。结果:ERβ蛋白在96例乳腺癌组织标本中的阳性表达率为75·0%(72/96),... 目的:检测乳腺癌组织中雌激素受体β(ERβ)蛋白的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理特性的关系。方法:采用免疫组化法检测96例乳腺癌组织中ERβ蛋白的表达情况。结果:ERβ蛋白在96例乳腺癌组织标本中的阳性表达率为75·0%(72/96),癌旁组织中的阳性表达率为90·5%(57/63),二者差别具有显著性(P<0·05);ERβ蛋白表达水平与患者乳癌组织中的ERα蛋白水平、PR蛋白水平及组织学分级相关(P<0·05),与年龄、肿瘤大小、腋淋巴结转移、病理分型、绝经状态无关(P>0·05)。结论:ERβ在乳腺癌癌旁组织内广泛表达,在癌组织内亦有表达,但阳性表达率低于癌旁组织;ERβ蛋白的阳性表达可能是乳腺癌预后良好的一项参考指标。 展开更多
关键词 乳腺癌 雌激素受体β蛋白 预后
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穹窿海马伞切断和卵巢切除对大鼠不同脑区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶共存表达的影响 被引量:1
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作者 金丽英 郭宗君 崔红波 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期782-784,I0001,共4页
目的:探讨穹窿-海马伞切断和卵巢切除大鼠大脑雌激素受体α(ERα)与β淀粉样蛋白前体蛋白β位点裂解酶(BACE)共存表达的变化。方法:成年健康雌性Wistar大鼠28只,随机分为穹窿-海马伞切断组(FF组)、卵巢切除组(OVX组)、穹窿-海马伞切断... 目的:探讨穹窿-海马伞切断和卵巢切除大鼠大脑雌激素受体α(ERα)与β淀粉样蛋白前体蛋白β位点裂解酶(BACE)共存表达的变化。方法:成年健康雌性Wistar大鼠28只,随机分为穹窿-海马伞切断组(FF组)、卵巢切除组(OVX组)、穹窿-海马伞切断加卵巢切除组(OF组)和对照组。每组7只。免疫荧光双标细胞化学法染色,激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区ERα、BACE阳性细胞表达的变化。结果:FF组、OVX组和OF组大鼠皮质区和海马CA1区ERα阳性细胞与对照组比较显著减少(皮质区:4.71±1.11,5.29±2.01,4.42±3.99vs9.71±4.53;海马区:6.91±2.63,7.58±4.16,5.14±3.80vs12.57±3.59,均P<0.05);FF组、OVX组和OF组大鼠皮质区和海马CA1区BACE阳性细胞与对照组比较显著增多(皮质区:15.78±6.01,17.63±4.42,20.00±5.16vs5.71±3.14;海马区:15.91±5.12,12.34±5.07,17.14±4.45vs6.85±1.95,均P<0.05)。但三组之间两两比较无显著性差异(P>0.05)。OF组大鼠皮质区ERα和BACE双标阳性细胞数与对照组比较显著增多(P<0.05),但海马CA1区无显著性变化(P>0.05)。结论:穹窿-海马伞切断或卵巢切除可以导致大鼠大脑皮质区、海马CA1区ERα表达减少、BACE表达增多,两种方法同时作用导致皮质区共存细胞表达增多。 展开更多
关键词 穹窿下器官 海马 卵巢切除术 受体 雌激素 淀粉样Β蛋白前体
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雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响 被引量:5
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作者 邓盎 张宏其 +5 位作者 郭超峰 王昱翔 高琪乐 唐明星 刘少华 刘金洋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第29期4261-4268,共8页
背景:雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少,其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的:分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法:实验分3组:空白对照组(即h FOB 1.19,未感染任何反转录... 背景:雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少,其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的:分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法:实验分3组:空白对照组(即h FOB 1.19,未感染任何反转录病毒)、阴性对照组(即含无效干扰片断雌激素受体β-sh RNA-nc)、最佳RNAi组(即ERβ-sh RNA-3)。将前期最佳RNAi组的雌激素受体β-sh RNA反转录病毒载体感染人成骨细胞,通过抗性筛选并扩大培养,利用MTT法检测雌激素受体β稳定抑制后对细胞增殖的影响;随后在雌激素干预下,通过Western blot技术检测雌激素受体β蛋白表达的稳定抑制效率,并使用半定量RT-PCR和Western blot技术检测雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。结果与结论:(1)成功筛选出稳定感染ERβ-shR NA-3反转录病毒载体的人成骨细胞,MTT法检测显示雌激素受体β稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响(P>0.05);(2)在雌激素干预下,雌激素受体β蛋白的抑制率为(93.11±0.57)%(P<0.05),且雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1 mR NA和蛋白的上调率分别为(26.65±3.81)%和(23.79±3.76)%,骨形态发生蛋白2 mR NA和蛋白的上调率分别为(16.62±1.71)%和(18.08±3.20)%(均P<0.05);(3)结果提示雌激素受体β可能通过调控转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2的表达在骨代谢中发挥作用。 展开更多
关键词 雌激素受体Β 成骨细胞 转化生长因子β1 骨形态发生蛋白2 组织工程 组织构建 骨细胞 人成骨细胞 RNA干扰 基因沉默 骨代谢 雌激素 反转录病毒 细胞模型 国家自然科学基金
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雌激素受体α、β及细胞周期蛋白D1、癌基因蛋白质P21在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义 被引量:14
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作者 胡观丽 张晶波 +5 位作者 董洁 胡胜男 刘建维 孟琳 王晴 张蓓 《安徽医药》 CAS 2019年第9期1769-1773,共5页
目的探讨雌激素受体α(ERα)、β(ERβ)及细胞周期调控因子CyclinD1、P21在子宫内膜癌组织中的蛋白表达水平及相关的临床意义。方法选取徐州市中心医院2016年1月至2017年12月65例子宫内膜癌组织、30例子宫内膜不典型增生组织以及30例正... 目的探讨雌激素受体α(ERα)、β(ERβ)及细胞周期调控因子CyclinD1、P21在子宫内膜癌组织中的蛋白表达水平及相关的临床意义。方法选取徐州市中心医院2016年1月至2017年12月65例子宫内膜癌组织、30例子宫内膜不典型增生组织以及30例正常子宫内膜组织,利用免疫组织化学染色检测各组组织中ERα、ERβ、CyclinD1和P21的蛋白表达水平。结果ERα、ERβ、CyclinD1和P21蛋白在子宫内膜癌(47.69%、32.31%、76.92%、49.23%)、子宫内膜不典型增生(90.00%、46.67%、43.33%、66.67%)和正常子宫内膜(73.33%、63.33%、13.33%、96.67%)三组间的阳性表达率均差异有统计学意义(P<0.05)。ERα在子宫内膜不典型增生组织中阳性表达率最高,ERβ和P21在正常子宫内膜组织中阳性表达率最高,CyclinD1在子宫内膜癌组织中阳性表达率最高。在子宫内膜癌组织中,ERα在Ⅲ?Ⅳ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2以及有淋巴结转移的组织中阳性表达率降低(P<0.05);ERβ在Ⅲ?Ⅳ期组织中的阳性表达率低于Ⅰ?Ⅱ期病人(P<0.05);CyclinD1在低分化和肌层浸润深度≥1/2的组织中具有较高的阳性表达率(P<0.05);而P21在Ⅰ?Ⅱ期、高中分化以及肌层浸润深度<1/2的组织中具有较高的阳性表达率。结论ERα和ERβ可能在子宫内膜癌形成及进展过程中发挥不同的作用,CyclinD1在子宫内膜癌中可能发挥促进癌症形成及进展的作用,P21在子宫内膜癌中则可能发挥抑制癌症形成及进展的作用。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 子宫内膜不典型增生 雌激素受体Α 雌激素受体Β 细胞周期蛋白D1 癌基因蛋白质P21
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TAT-GFP-ER融合蛋白的原核表达与鉴定
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作者 于林 王春雨 +3 位作者 杨睿 王亮 石建党 张琚 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期55-58,共4页
从前列腺中提取总RNA,RT-PCR获得ERβ基因,将其联入pEGFP载体,得到重组质粒pEGFP-ERβ,再将上述质粒的GFP-ERβ片段亚克隆于pTAT-2.1质粒,形成pTAT-GFP-ERβ重组质粒.在BL21工程菌中IPTG诱导表达TAT-GFP-ERβ融合蛋白.用Western Blot鉴... 从前列腺中提取总RNA,RT-PCR获得ERβ基因,将其联入pEGFP载体,得到重组质粒pEGFP-ERβ,再将上述质粒的GFP-ERβ片段亚克隆于pTAT-2.1质粒,形成pTAT-GFP-ERβ重组质粒.在BL21工程菌中IPTG诱导表达TAT-GFP-ERβ融合蛋白.用Western Blot鉴定纯化的融合蛋白的免疫原性.用纯化的蛋白转导事先转染ERE-Luc报道质粒的Hela细胞,用Luciferase Assay鉴定转导蛋白的生物学活性.证明TAT-GFP-ERβ蛋白具有完整的生物活性. 展开更多
关键词 TAT 蛋白转导 原核表达 雌激素受体Β
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异补骨脂素对紫外线诱导人真皮成纤维细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量:4
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作者 刘俊岑 刘海洋 +4 位作者 刘国良 王月莹 高海南 耿放 张宁 《国际中医中药杂志》 2018年第4期339-344,共6页
目的 研究异补骨脂素对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblasts, HDF)增殖活性及抗老化相关蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。方法 将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组、异补骨脂素组、雌激素受体拮抗剂+雌二... 目的 研究异补骨脂素对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblasts, HDF)增殖活性及抗老化相关蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。方法 将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组、异补骨脂素组、雌激素受体拮抗剂+雌二醇组、雌激素受体拮抗剂+异补骨脂素组、P38通路阻断剂组。分别给予不同药物进行干预24 h。除空白组外,其余各组细胞给予紫外线照射,照射剂量为150 mJ/cm2。采用MTT法检测细胞增殖率,采用Western blot法检测细胞中胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ, COLⅠ)、MMP-1、雌激素受体b(estrogen receptor b, ERb)、P38、p-P38蛋白表达量,实时荧光定量PCR法检测MMP-1 mRNA表达。结果 与模型组比较,异补骨脂素10、1、0.1、0.01 μmol/L组HDF细胞增殖率升高(P<0.01);异补骨脂素10 μmol/L组HDF细胞COLⅠ[(0.326±0.006)比(0.176±0.007)]、ERb[(0.281±0.011)比(0.143±0.006)]蛋白表达升高(P<0.01),MMP-1[(0.256±0.006)比(0.395±0.006)]和p-P38[(0.224±0.003)比(0.318±0.005)]蛋白表达降低(P<0.01);与异补骨脂素10 μmol/L组比较,雌激素受体拮抗剂+异补骨脂素组ERb[(0.120±0.007)比(0.281±0.011)]蛋白表达下降、MMP-1 mRNA[(1.377±0.012)比(1.024±0.010)]表达升高(P<0.01)。结论 异补骨脂素可能通过ER-P38 MAPK信号通路使MMP-1降解,进而促进胶原合成,达到预防和治疗光老化的目的。 展开更多
关键词 白芷素 雌激素受体beta p38有丝分裂原激活蛋白激酶类 胶原 基质金属蛋白酶类 皮肤衰老
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乳腺癌和癌旁组织雌激素受体β亚型构成比分析
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作者 高磊 刘贵建 +4 位作者 朱瑞丽 孙士鹏 路常东 张立新 胡凯文 《肿瘤研究与临床》 CAS 2014年第4期217-219,共3页
目的 探讨乳腺癌和癌旁组织中雌激素受体(ER)β亚型构成比变化.方法 收集87例乳腺癌患者癌和癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应定量测定成对组织中ERβ亚型(ERβ 1、ERβ2和ERβ5)相对表达水平,最终获得各亚型在癌变中的比例.... 目的 探讨乳腺癌和癌旁组织中雌激素受体(ER)β亚型构成比变化.方法 收集87例乳腺癌患者癌和癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应定量测定成对组织中ERβ亚型(ERβ 1、ERβ2和ERβ5)相对表达水平,最终获得各亚型在癌变中的比例.结果 癌组织中ERβ 1、ERβ2和ERβ5的表达水平均较癌旁组织低(P=0.00).在癌组织和癌旁组织,ERβ5在3种主要亚型中所占阳性比例均最高(54.02%和75.84%),尤以癌旁组织为甚,而ERβ 1阳性比例均最低(6.77%和9.74%).ERβ 1和ERβ2在癌旁组织中阳性比例低于癌组织(Z=-2.24,P=0.025和Z=-4.85,P<0.01),而ERβ5在癌旁组织中阳性比例明显高于癌组织(Z=-5.32,P<0.01).结论 乳腺癌变过程中ERβ各亚型表达水平均明显下调,但下调幅度差异显著,亚型构成比变化明显,提示ERβ各亚型在癌变过程中表达调控的差异性机制将成为乳腺癌发病机制研究新的突破口. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 雌激素受体Β 蛋白质亚型 构成比
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新北美圣草苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量:3
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作者 王岩 顾婷 +4 位作者 刘国良 李庆伟 张悦 张宁 雷霞 《国际中医中药杂志》 2021年第5期466-471,共6页
目的研究新北美圣草苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ_(25-35))诱导PC12细胞损伤的保护作用,探讨其防治AD的作用机制。方法采用MTT法检测新北美圣草苷对正常PC12细胞及Aβ_(25-35)损伤PC12细胞增殖的影响,筛选新北美圣草苷溶液的干预浓度... 目的研究新北美圣草苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ_(25-35))诱导PC12细胞损伤的保护作用,探讨其防治AD的作用机制。方法采用MTT法检测新北美圣草苷对正常PC12细胞及Aβ_(25-35)损伤PC12细胞增殖的影响,筛选新北美圣草苷溶液的干预浓度。将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组和新北美圣草苷组。空白组与模型组以DMEM培养24 h;雌二醇组加入DMEM和1×10^(-3)μmol/L雌二醇溶液;北美圣草苷组加入DMEM和6×10^(4)μmol/L新北美圣草苷溶液,培养2 h后,除空白组外,其余各组加入20μmol/L的Aβ_(25-35)储备液,继续培养22 h。采用AnnexinV-FITC/PI双标记检测凋亡率,Western blot法检测雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及p-P38/P38蛋白表达,检测PC12细胞上清中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)含量及胆碱乙酰转移酶(Choline acetyl transferase,ChAT)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholin esterase,AChE)活性。结果与模型组比较,新北美圣草苷组细胞凋亡率[(8.080±0.578)%比(18.500±0.870)%]降低(P<0.01),ERβ蛋白[(0.348±0.042)比(0.273±0.006)]表达升高(P<0.01),p-P38/P38蛋白[(0.372±0.058)比(0.571±0.063)]表达降低(P<0.01),ACh[(14.319±1.039)μg/mg比(9.157±1.605)μg/mg]水平及ChAT[(0.715±0.053)U/mg比(0.280±0.093)U/mg]活性增高(P<0.01),AChE[(2.607±2.048)U/mg比(6.038±1.867)U/mg]活性降低(P<0.01)。结论新北美圣草苷可促进Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞增殖,抑制细胞凋亡,具有一定的细胞保护作用,其作用机制可能与调节ERβ表达,抑制P38蛋白磷酸化,提高胆碱能系统功能有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 乙酰胆碱 p38有丝分裂原激活蛋白激酶 雌激素受体Β 细胞凋亡 新北美圣草苷 PC12细胞
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