经典名方羌活胜湿汤中12种成分的LC-MS/MS定量分析

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)分析方法用于测定羌活胜湿汤颗粒中5-O-甲基维斯阿米醇苷、紫花前胡苷、蔓荆子黄素、羌活醇、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯、异甘草苷、甘草苷、绿原酸、异甘草素、甘草素、阿魏酸12种成分的含量。[方法]色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为0.1%的甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL。采用电喷雾离子源(ESI)、多反应监测模式(MRM)进行正负离子同时扫描。[结果]羌活胜湿汤颗粒中12种成分在线性范围内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性及加样回收率试验均满足要求。[结论]实验建立的含量测定方法高效、稳定、可靠,可用于羌活胜湿汤颗粒的质量控制研究。

HPLC-MS/MS法同时测定胆木不同部位6个成分的含量

目的:测定胆木茎、枝和叶中异长春花苷内酰胺、喜果苷、乌檀酰胺C、绿原酸、3,4,5-三甲氧基苯基-1-O-β-呋喃芹糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、3,4-二甲氧基苯基-1-O-β-呋喃芹糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷6个成分的含量。方法:采用HPLC-MS/MS法,色谱柱为Phenomenex Kinete EVO C18100Å(50 mm×2.1 mm,2.6μm)柱;流动相为0.5‰甲酸溶液-甲醇,梯度洗脱;流速为0.4 mL/min;柱温为40℃;进样量为3μL;电喷雾离子源,多反应监测负离子模式。结果:异长春花苷内酰胺、喜果苷、乌檀酰胺C、绿原酸、3,4,5-三甲氧基苯基-1-O-β-呋喃芹糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、3,4-二甲氧基苯基-1-O-β-呋喃芹糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷的线性范围分别为0.025~2μg/mL、0.0125~2μg/mL、0.05~2μg/mL、0.025~2μg/mL、0.0125~2μg/mL、0.0125~2μg/mL(r≥0.9991),精密度、稳定性(24 h)、重复性试验RSD<5.00%,平均加样回收率为95.13%~103.02%(RSD<4.00%)。含量测定结果显示6个成分在胆木不同部位中的含量存在较大差异。结论:所建立的方法简便、快速、灵敏,适用于胆木药材中6个成分的同时检测。

滇紫草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量分析

目的:建立液质联用法分析滇紫草中印美定、石松胺、蓝蓟定及其氮氧化物的含量。方法:采用沃特世HSS T3(长度100 mm、直径2.1 mm,粒径1.8μm)为色谱柱,以各含0.05%甲酸的乙腈水系统为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1);进样量为1μL;电喷雾离子源,正离子多反应监测模式测定。结果:滇紫草中4种成分分别在0.972~97.2 ng·mL^(-1)、0.988~98.8 ng·mL^(-1)、1.024~102.4 ng·mL^(-1)、0.996~99.6 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好(r>0.9990),回收率分别为93.5%、89.2%、88.1%和85.4%,RSD分别为3.5%、4.2%、3.2%和4.3%。结论:该方法专属性强,准确性好,可用于滇紫草中吡咯里西啶生物碱类成分的检测。

协日嘎-4味散成分组成分析及6种成分含量测定

目的分析协日嘎-4味散成分组成,并测定黄柏碱、绿原酸、栀子苷、小檗碱、芦丁、姜黄素的含量。方法高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)定性分析采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描。高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS)定量分析采用Shim-pack GIST-HP C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm);流动相甲醇-0.1%甲酸;体积流量0.25 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。结果共鉴定出65种成分,包括19种生物碱、13种有机酸、13种黄酮、7种姜黄素、6种环烯醚萜、4种脂肪酸、2种醛、1种氨基酸。6种成分在各自范围线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率96.44%~102.37%,RSD 2.05%~3.74%。结论本研究可为协日嘎-4味散的质量控制提供参考。

人乳中叶黄素及叶黄素酯的测定

人乳中的叶黄素对婴幼儿视力和认知功能的发育起着至关重要的作用。该研究利用超高效液相色谱串联质谱对不同分娩年龄和泌乳阶段的人乳中叶黄素及叶黄素酯的组成和含量进行测定,最终实现定性定量分析人乳中的叶黄素和16种叶黄素酯。研究发现人乳中叶黄素与叶黄素酯的含量呈较强的正相关关系(皮尔逊相关系数为0.721),适龄组(分娩年龄<35岁)乳汁中叶黄素和叶黄素酯的含量与高龄组(分娩年龄≥35岁)相近,两者之间的差异并不显著(P>0.05),可知分娩年龄对人乳中叶黄素及叶黄素酯含量的影响较小。叶黄素与叶黄素酯的含量均随着泌乳期的延长而逐渐降低,初乳中两者的含量均最高,其中叶黄素的平均含量达183.78μg/L,叶黄素酯的平均含量达45.89μg/L。分别从初乳、过渡乳、成熟乳中检出了10、14、6种叶黄素酯,其中叶黄素棕榈酸-硬脂酸酯的含量在整个泌乳期中最高,叶黄素二硬脂酸酯的含量次之。研究结果可为人乳成分的研究及婴配食品的研发提供一定的实验和理论基础。

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱同时测定乳制品中的苯并咪唑类药物及其代谢物残留量

建立了乳制品中苯并咪唑类药物及其代谢物固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱的分析方法。样品经含0.2%甲酸的乙腈提取后离心,上清液使用固相萃取柱进行净化,UPLC HSS T_(3)色谱柱分离,电喷雾正离子模式下多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)测定。结果显示,在1.0~50μg/L范围内的线性相关系数r≥0.995(除三氯苯达唑为0.9578),方法检出限(Limit of Detection,LOD)(S/N=3)为0.002 mg/kg(除阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯达唑和噻苯咪唑-5-羟基为0.003 mg/kg),方法定量限(Limit of Quantitation,LOQ)(S/N=10)为0.005 mg/kg(除阿苯达唑-2-氨基砜、噻苯达唑和噻苯咪唑-5-羟基为0.010 mg/kg)。在0.005、0.01、0.05 mg/kg三个加标水平下回收率在62.5%~117.6%之间,相对标准偏差RSD在1.92%~12.17%之间。该方法操作简单、灵敏度高,适用于乳制品中苯并咪唑类药物及其代谢物的定量分析。

三子养亲汤中11种成分含量同时测定及其胰脂肪酶抑制作用研究

目的同时测定三子养亲汤中3,6′-二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、阿魏酸、芥子酸、咖啡酸、木犀草素、原告依春、芹菜素、异鼠李素、原儿茶醛的含量,并考察其对胰脂肪酶的抑制作用。方法高效液相色谱-串联三重四级杆质谱(HPLC-QQQ-MS/MS)分析采用Halo-C 18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相水(含0.05%甲酸)-乙腈(含0.05%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温25℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。采用分子对接进行模拟,对硝基苯酚法评价抑制作用。结果11种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9920),平均加样回收率85.79%~117.52%,RSD 0.78%~3.73%。3,6′-二芥子酰基蔗糖、咖啡酸、芥子酸和原儿茶醛与胰脂肪酶具有良好的亲和力,三子养亲汤、咖啡酸、芥子酸、原儿茶醛IC_(50)值分别为41.16 mg/mL、4.006 mmol/L、6.798 mmol/L、10.48 mmol/L。结论该方法稳定可靠,可为具有胰脂肪酶活性抑制作用的三子养亲汤质量控制提供理论基础。

基于超高效液相色谱-串联质谱检测三黄膏主要成分

目的:采用超高效液相色谱-串联质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS)对三黄膏的化学成分进行分析和鉴定。方法:取三黄膏50 mg加入甲醇内标提取液,涡旋后取上清液,用微孔滤膜过滤后准备检测。液相条件:Agilent SB-C18 1.8μm,2.1 mm×100 mm色谱柱,以超纯水(加入0.1%的甲酸)和乙腈(加入0.1%的甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.36 mL/min,柱温40℃,进样量2μL。质谱条件:电喷雾离子源温度500℃;离子喷雾电压5 500 V(正离子模式)/–4 500 V(负离子模式);离子源气体I(GSI)、气体II(GSII)和气帘气分别设置为50、60和25 psi,碰撞诱导电离参数设置为高。三重四级杆扫描使用多反应检测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)模式,并将碰撞气体(氮气)设置为中等。通过进一步的去簇电压(Declustering Potential,DP)和碰撞能(Collision Energy,CE)优化,完成了各个MRM离子对的DP和CE。根据每个时期内洗脱的代谢物,在每个时期监测一组特定的MRM离子对。采用电喷雾离子源,正负离子模式下采集数据。结果:共鉴定和推测出30个化合物,包括11种生物碱类、11种黄酮类、3种萜类、5种酚酸类。结论:通过UPLC-MS/MS鉴定的30种化合物与黄芩、黄连、黄柏主要化合物进行对比后发现,经过加工处理后的三黄膏保留了黄芩、黄连、黄柏的主要化学成分。为今后三黄膏的物质基础研究奠定了基础。

基于超高效液相色谱-串联质谱技术对葡萄籽提取物化学成分的分析及其多成分含量测定

该研究应用液质联用技术结合UNIFI筛查平台,对葡萄籽提取物中化学成分进行快速定性分析,并建立葡萄籽提取物中有效成分的含量测定方法。首先利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间高分辨质谱技术采集葡萄籽提取物的质谱数据,根据UNIFI软件自建数据库匹配的结果,结合对照品保留时间、特征碎片离子及相关文献确认,从葡萄籽提取物中共鉴别出20个化学成分,包括7个多酚类、1个三萜类,1个黄酮醇类、1个不饱和脂肪酸类、1个多羟基茋类、3个酚酸类、6个氨基酸类。另外,采用超高效液相色谱三重四极杆质谱法同时定量测定了葡萄籽提取物中4种有效成分(儿茶素、表儿茶素、原花青素B2、原花青素C1),其在各自范围内线性关系良好(r≥0.998),平均加样回收率为96.7%~102.6%,RSD为1.6%~3.1%。该研究结果为葡萄籽提取物中化学成分的定性及定量分析提供了一种快速、简便、准确的方法,为其质量评价及药效物质基础研究提供了重要的理论参考。

基于超高效液相色谱-串联质谱法研究大黄蒽醌苷元在大鼠体内的药代动力学

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚在大鼠血浆中浓度的方法。方法采用AB SciexQtrap5500三重四极杆液质联用系统,色谱柱为Waters UPLC BEH C_(18)柱(100.0 mm×2.1mm,1.7μm),体积流量为0.3 mL/min,柱温为25.0℃,进样量为3μL,流动相为0.1%甲酸-乙腈梯度洗脱。采用电喷雾离子源,多反应监测模式进行检测。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在1.000~64.000、1.000~1000.000、0.300~32.000、1.000~250.000和1.000~64.000μg/m L质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,标准曲线的相关系数均在0.99~1.00之间,大黄素的定量限为0.3μg/mL,其余4种大黄蒽醌成分定量限均为1.0μg/mL;精密度和稳定性试验的RSD值均小于8.7%;平均加样回收率为88.7%~98.8%,RSD值为0.9%~2.4%;基质效应在89.8%~96.2%之间。结论:本研究建立的UPLC-MS/MS法简单、快速、准确灵敏,可用于大黄蒽醌苷元在大鼠体内的含量测定。

基于液相色谱串联质谱法的人血清中亚胺培南、美罗培南、万古霉素和替考拉宁的含量测定分析

目的:基于液相色谱串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS),建立同时快速测定人血清中亚胺培南、美罗培南、万古霉素和替考拉宁含量的方法,为临床感染患者的治疗药物监测提供参考。方法:采用Agilent 1260系列液相色谱仪和API 4000三重串联四级杆质谱仪,以Phenomenex KINETEX XB-C18(2.6μm,3×50 mm)为色谱柱,以0.1%甲酸-水和纯乙腈为流动相,以电喷雾离子源、多反应离子监测结合正离子模式作为质谱条件,建立同时快速测定人血清中亚胺培南、美罗培南、万古霉素和替考拉宁4中抗菌药物含量的方法。结果:测定结果显示,4种抗菌药物和2种内标物质在保留时间处均未出现干扰峰;4种抗菌药物在各自的浓度范围内线性关系良好,其相关系数(r^(2))均大于0.99,其最低定量限的S/N均大于10;精密度和准确度检测结果显示,4种抗菌药物测定结果的日间和日内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于10.00%,而其相对误差(relative error,RE)则均在±10.00%以内;4种抗菌药物测定结果的回收率均在85.00%~115.00%之间;稳定性考察显示,在不同温度和放置时间条件下,4种抗菌药物测定结果的RE则均在±10.00%以内。结论:LC-MS/MS可以同时快速测定血清中亚胺培南、美罗培南、万古霉素和替考拉宁4种抗菌药物的含量,且具有精密度和准确度高、稳定性强的特点,因而可以为临床治疗药物监测提供较好支撑。

超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中金刚烷胺和氟虫腈的含量

目的:建立超高效液相色谱串联质谱法测鸡蛋中金刚烷胺和氟虫腈的方法。方法:在样品溶液中加入内标工作液,用乙腈提取,经QuEChERS净化管净化;金刚烷胺采用正离子扫描,内标法定量;氟虫腈采用负离子扫描,外标法定量。结果:金刚烷胺、氟虫腈在0.20~20.00 ng·mL^(-1)时线性关系好,待测物的回收率在85.0%~103.3%,精密度在1.6%~8.9%,金刚烷胺定量限为2μg·kg^(-1)、氟虫腈定量限为5μg·kg^(-1)。结论:本方法准确度高、灵敏度高、稳定性好、操作简单,可以快速有效地测定鸡蛋中金刚烷胺和氟虫腈的含量。

气相色谱串联质谱法测定水体中10种多溴联苯醚

建立了气相色谱串联质谱法快速测定水体中10种多溴联苯醚(PBDEs)含量的分析方法。使用10%样品体积的二氯甲烷溶液进行液液萃取,重复2次,合并的萃取液经减压浓缩后使用二氯甲烷复溶;采用15 m的DB-5 HT色谱柱分离,在280℃进样口温度、1.8 mL/min氦气流速、320℃离子源与GC接口温度、离子监测模式等条件下进行测定。方法学验证结果表明,10种多溴联苯醚在0.5~150 ng/L质量浓度范围内决定系数R^(2)>0.9990,检出限在0.14~1.89 ng/L,回收率在84.06%~106.99%,精密度在0.96%~5.43%(n=6)。该方法操作简便快速、灵敏度高、稳定性好,适用于水中10种多溴联苯醚化合物含量的快速测定。实际样品测试结果显示,海水中未检出PBDEs,生活污水及养殖废水中PBDEs含量在0.13~0.35 ng/L。

液相色谱-串联质谱法快速测定化妆品中游离的乙醇胺类物质

建立稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定化妆品中游离的3种乙醇胺类物质。样品经异丙醇提取后,使用乙腈和0.1%甲酸-水溶液(体积分数,下同)梯度洗脱,Kinetex HILIC色谱柱分离,电喷雾电离源正离子模式电离,多反应监测模式进行测定。采用单因素试验优化得到最佳前处理条件:提取溶剂为异丙醇、超声波提取、提取时间为20 min、不改变样品pH直接提取。使用内标法曲线定量,一乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺内标曲线分别在5.0~200,2.0~200和1.0~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数R^(2)大于0.999,平均回收率范围在87.1%~97.0%,相对标准偏差(RSDs)在1.68%~6.57%之间,方法检出限为3.00~15.0μg/kg,定量限为10.0~50.0μg/kg。建立的方法适用于61批次化妆品样品的检测。该方法操作简便,定量准确,回收率稳定、灵敏度高、精密度高,适用于测定化妆品中的乙醇胺类物质。

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定部分动物源性食品中6种除草剂残留

为建立Qu ECh ERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定部分动物源性食品中6种常见除草剂残留的检测方法,将畜禽肉及内脏、蛋类、生乳等样品经体积分数为10%的甲酸乙腈溶液提取,C_(18)粉和无水硫酸镁净化,采用Hypersil GOLD^(TM)C_(18)色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,苯嘧磺草胺、灭草松、噻草酮、唑啉草酯在0.2~20.0μg/L、氯丙嘧啶酸和氯氨吡啶酸在1.0~50.0μg/L线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.995,方法的定量限均为1.0μg/kg;以牛肉、鸡蛋、猪肝、牛奶为基质,6种除草剂在1.0、5.0、20.0μg/kg 3个加标水平下的回收率为72.8%~98.5%,相对标准偏差为1.13%~6.28%。

保健食品中7种烟酰胺类化合物含量测定

目的:构建一种超高效液相色谱—串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定保健食品中7种烟酰胺类化合物含量的方法。方法:样品用10%甲醇水溶解,通过超声提取,以10 mmol/L乙酸铵—乙腈作为梯度洗脱的流动相,采用电喷雾离子源(ESI),正负离子模式扫描,多反应监测(MRM)模式对7种烟酰胺类化合物进行监测。结果:7种烟酰胺类化合物在各质量浓度范围内呈良好线性,相关系数均>0.996,检出限(LOD)为0.075~0.600 mg/kg,回收率为84.6%~108.6%,相对标准偏差为2.1%~8.7%(n=6)。结论:该方法操作简单、快速、高效,回收率高,精密度良好,可用于保健食品中烟酰胺等类似物的定性定量分析。

超高效液相色谱-串联质谱法检测食品中酚汀(丁)类物质

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测食品中新型非法添加物“酚汀(丁)类物质”的分析方法。方法首先以回收率和精密度为指标,对提取剂的甲醇浓度进行优化,然后在最优的提取条件下以乙腈和含0.1%甲酸的5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3mL/min,选用ACQUITYUPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm)进行分离,正离子模式下通过多重反应监测(multi reaction monitoring,MRM)模式测定食品中8种酚汀(丁)类物质含量,并验证该方法的线性、延迟效应、基质效应、精密度及准确度。结果样品经100%甲醇提取后测定得出8种酚汀(丁)类物质在0.5~50.0ng/mL的线性范围内线性关系良好,相关系数(r)在0.9994~0.9999之间,平均加标回收率在81.35%~96.28%之间,精密度小于10%。本方法中8种酚汀(丁)类物质的检出限为5μg/kg,定量限为10μg/kg。结论本研究建立的检测方法简便准确,可用于食品中非法添加8种酚汀(丁)类物质的定量测定。

采用液相色谱-串联质谱对大鼠血浆中氯氨吡啶酸进行分析方法验证

目的:建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中氯氨吡啶酸浓度的分析方法。方法:使用1%甲酸水调整血浆样本pH后,用含5%异丙醇的乙酸乙酯溶液萃取,萃取液浓缩后用流动相复溶后进行检测LC-MS/MS方法采用Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1mm×50mm,1.8μm),柱温40℃,流动相为甲醇和0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.3mL/min,电喷雾离子源正离子(ESI),扫描离子模式:多反应监测(MRM),采用外标法定量。结果:氯氨吡啶酸在50.0~10000ng/mL范围内线性关系良好,相关系数>0.99,选择性、准确度、精密度、基质效应、提取回收率和稳定性均满足接受标准的要求,建立的方法可用于氯氨吡啶酸大鼠毒代动力学研究。

HPLC-MS/MS测定食糖中4种合成着色剂

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法(High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)测定食糖中4种着色剂的分析方法。方法:样品经80%甲醇超声提取,再用PWA-2固相萃取柱净化后,经VP-ODS C_(18)柱(2.0 mm×150 mm,5.0μm)分离,以乙酸铵和甲醇为流动相,梯度洗脱,用HPLC-MS/MS检测。结果:4种化合物在考察范围内线性良好,相关系数均大于0.999;加标回收率在85.36%~102.30%,RSD为0.42%~2.72%;检出限为2~5μg·kg^(-1)。结论:该方法灵敏度高、分辨率高、分析速度快,适用于食糖中合成着色剂的快速筛查和定量分析。

超高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中10种氨基糖苷类药物残留

【目的】建立同时检测水产品中壮观霉素、潮霉素B、双氢链霉素、链霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素、安普霉素、妥布霉素、庆大霉素、新霉素等10种氨基糖苷类药物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。【方法】样品用10 mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液提取,用氢氧化钠溶液将提取液的pH调为6.6~7.0,取一半体积提取液上HLB固相萃取柱净化,采用Obelisc R柱高效分离,电喷雾正离子多反应监测模式监测。【结果与结论】10种氨基糖苷类药物呈现良好的线性关系(R2>0.999),新霉素的检出限和定量限分别为5.0、10.0μg/kg,潮霉素B和安普霉素的检出限和定量限分别为2.0、5.0μg/kg,其余7种氨基糖苷类药物的检出限和定量限分别为1.0μg/kg和2.0μg/kg。10种分析物的加标回收率为74.8%~104.5%,相对标准偏差(RSD)为4.5%~12.6%。本方法分析时间短,5 min内即完成10种药物的分离,分析物峰形尖锐。方法灵敏度、准确度高,适用于水产品中10种氨基糖苷类药物的同时测定。