Acid Value Determination and Pre-Esterification of Crude Euphorbia lathyris L. Oil

There were various problems in the determination of oil acid value of the national standard method, and this paper developed a low cost, simple and effective way to determine the acid value of oil and grease. Furthermore, the esterification of high acid Euphorbia lathyris L. oil (ELO) with methanol could be efficiently catalyzed by hydrochloric acid to produce biodiesel, and the influencing factors such as the amount of catalyst, reaction time, reaction temperature and molar ratio of oil to methanol were also studied. Under the optimized conditions with the oil to methanol molar ratio of 1:30 and a reaction temperature of 70℃, 95.8% oil conversion was obtained within 40 min in the presence of only 2.0 wt% of catalyst. Therefore, the low-cost non-edible Euphorbia lathyris L. oil as a raw material had good potential for the synthesis of biodiesel in industry.

续随子转录因子ElWRI1的鉴定及功能分析

续随子(Euphorbia lathyris L.)种子可积累大量油脂且富含油酸,WRINKLED1(WRI1)为AP2/EREBP类转录因子,参与调控脂肪酸的合成及种子发育等生命过程。本研究通过对续随子的全基因组鉴定,获得了11个续随子ElWRI1转录因子基因,命名为ElWRI1-1~ElWRI1-11。结果显示,它们均具有两个AP2结构域;其编码蛋白均属于不稳定亲水蛋白,无跨膜结构;亚细胞定位预测显示所有WRI1蛋白均位于细胞核。表达分析结果表明,ElWRI1-6与ElWRI1-8在种子发育时期的表达量较高,且后者的表达模式与种子油脂积累模式一致。在本氏烟草(Nicotiana benthamiana L.)叶片中异源过表达ElWRI1-8,叶片中总油脂含量增加,且油酸含量显著上升。研究结果表明ElWRI1-8可能是调控续随子种子油脂和油酸生物合成的一个重要转录因子。

NaCl胁迫对续随子离子吸收及荧光特性的影响

以续随子为材料采用温室盆栽法,研究了NaCl胁迫处理对其生长发育、离子分布和叶绿素荧光特性的影响。结果表明:(1)25mmol.L-1NaCl胁迫时续随子幼苗的鲜重、干重和株高比对照略有下降,但不显著;随着NaCl浓度的继续增加,三指标均显著降低。(2)盐胁迫影响植物组织的离子分布,Na+浓度增加时,K+、Ca2+和Mg2+浓度均持续下降,K+/Na+、Ca2+/Na+、Mg2+/Na+也急剧下降。(3)NaCl胁迫下,续随子幼苗叶片的初始荧光(Fo)、最大荧光(Fm)、PSⅡ实际光化学效率均降低。但在0～25mmol.L-1NaCl浓度下,Fo、Fm与对照差异不显著。

黔产千金子HPLC指纹图谱研究

文章采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004年A版对所得HPLC图谱进行相关分析,建立了黔产千金子药材的指纹图谱并确定了8个特征峰,该方法简便、可靠、重现性好,可用于对黔产千金子药材的质量评价。

续随子溶血磷脂酸酰基转移酶基因家族的鉴定与表达分析

该研究利用组学方法从续随子(Euphorbia lathyris)基因组数据库中鉴定出续随子溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase, LPAT)家族基因,并对其基因结构、蛋白理化性质、进化关系进行生物信息学分析,利用qRT-PCR等技术对该基因家族的时空表达特性进行分析,以探讨ElLPAT家族基因在调控种子脂肪酸生物合成中的作用。结果表明:(1)从续随子基因组共检测出5个LPAT家族基因,分别命名为ElLPAT1~5;ElLPAT1~5基因编码氨基酸长度介于237~388 aa之间,理论等电点在6.23~9.56之间。(2)系统进化分析显示,5个ElLPATs蛋白分别属于3个亚类,其中ElLPAT1属于1型LPAT,ElLPAT2和ElLPAT3属于2/3型LPAT,ElLPAT4和ElLPAT5属于4/5型LPAT。(3)实时荧光定量qRT-PCR结果显示,5个ElLPATs基因在续随子不同组织中均有表达,ElLPAT1和ElLPAT4在各组织中表达量较低;ElLPAT2在各组织中表达量较高,且在种子中表达量最高。研究推测,ElLPAT2在续随子种子油脂合成代谢过程中可能发挥重要作用。

续随子油脂肪酸组成分析

通过索氏抽提法测定续随子含油量,同时用气相色谱-FID法分析鉴定其油中各种脂肪酸组成及相对含量。结果表明,3个不同产区续随子含油量存在差异,分别为45.13%(安徽)、45.75%(河南)和43.66%(福建);主要脂肪酸为油酸,达83%以上。续随子油脂肪酸组成与理想柴油替代品的分子组成相类似,是我国发展生物柴油的理想原料。

千金子甲醇提取物抗肿瘤作用的实验研究

目的 观察千金子甲醇提取物体内、外抗肿瘤活性及其量效关系。方法 体外药效试验用MTT法 ,体内用小鼠移植性肿瘤 ,观察千金子甲醇提取物的抑瘤活性。结果 千金子甲醇提取物体外对人宫颈癌细胞 (Hela)、人红白血病细胞 (K562 )、人单核细胞性白血病细胞 (U93 7)、人急性淋巴细胞性白血病细胞 (HL60 )和人肝癌细胞 (HepG2 )的IC50 值分别为 15 .5 μg/ml、13.1μg/ml、10 .5 μg/ml、17.5 μg/ml、2 9 .6 μg/ml;体内对小鼠移植性肿瘤细胞株也显示出较显著抑制作用。 结论 千金子甲醇提取物体外对Hela、K562 、U93 7、HL60 、HepG2 有明显的细胞毒活性 ,体内对小鼠肉瘤 180 (S180 )和艾氏腹水癌 (EAC)

千金子Ⅰ号体内外抗肿瘤药理作用的实验研究

目的 观察千金子Ⅰ号体内、外抗肿瘤活性及对免疫器官的影响。方法 体外药效试验用MTT法 ,观察千金子Ⅰ号对人宫颈癌细胞 (HeLa)增殖作用的影响 ;体内用小鼠移植性肿瘤 ,采用荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率检测千金子Ⅰ号对肉瘤 180 (S180 )和艾氏腹水癌 (EAC)的抑制作用 ;通过检测胸腺指数、脾脏指数等指标观察千金子Ⅰ号对免疫器官的影响。结果 千金子Ⅰ号体外对HeLa细胞的增殖有显著的抑制作用 ;对荷瘤小鼠肉瘤 180 (S180 )和艾氏腹水癌 (EAC)也有抗肿瘤活性。结论 千金子Ⅰ号具有一定的体内外抗肿瘤活性 。

续随子冷榨油脂肪酸及蛋白质氨基酸组成分析

采用机械压榨法获取续随子冷榨油,通过化学方法分析其理化指标,并用气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪分析续随子油脂肪酸的组成和含量,用氨基酸自动分析仪确定续随子蛋白质氨基酸的组成和含量。结果表明:续随子冷榨油含7种脂肪酸,主要为油酸(达84.42%),不饱和脂肪酸占其总量的92.98%,具有很好的营养价值;且续随子油脂肪酸组成与理想柴油替代品的分子组成相类似,是我国发展生物柴油的理想原料。氨基酸分析结果表明:续随子蛋白质含17种氨基酸,主要为谷氨酸(3.597%),天冬氨酸(1.953%)等,氨基酸种类齐全,含量较高,是一种具有很高的药用价值的蛋白质资源。

中药材续随子病害的调查与室内药剂毒力测定

对贵州省中药材续随子病害进行了调查和病原鉴定。结果表明:续随子立枯病病原由镰刀菌引起。对其选用了4种杀菌剂进行室内活性测定,其中,3%广枯灵AS对续随子立枯病菌丝生长的抑制活性最强,500μg/mL时抑制率为96%,EC50值为20.5μg/mL。

新型能源植物续随子的核型分析

采用根尖压片法对新型能源植物续随子(Euphorbia lathyris L.)的染色体数目及核型进行了研究。结果显示,续随子染色体数目为2n=20,核型公式K(2n)=2x=20=18m+2m(SAT),相对长度组成为4L+4M2+8M1+4S,核型分类属Stebbins的1B型,核型不对称系数57.973%。另外在续随子第5对染色体上观察到一对随体。

千金子油理化性质及其脂肪酸和挥发油成分分析

对千金子油理化性质进行了系统的分析测试,并利用气相色谱法分析了千金子油脂肪酸及千金子挥发油,结果表明,千金子油中油酸含量最高占78.158%,其次是软脂酸、硬脂酸,分别为8.513%和5.523%;千金子挥发油中油酸、亚油酸和油酸-2-丙三醇酯含量较高,分别为17.747%,15.852%和13.196%.

^(60)Co γ射线辐照对续随子保护酶活性的影响

以2份续随子纯合品系(续油1号、续油2号)的干种子为试验材料,以1Gy/min的剂量率,用不同剂量的60Coγ射线辐照处理,研究其M1代幼苗体内保护酶活性变化规律。结果显示,60Coγ射线辐照明显影响幼苗体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)及谷胱甘肽还原酶(GR)的活性表达。供试剂量范围内,CAT和SOD活性随剂量增加表现出先升高后降低的趋势,600Gy时出现活性峰值;而POD和GR活性始终呈上升趋势;APX活性在低剂量(<400Gy)时与对照同处较低水平,而高剂量(600~800Gy)对APX活性表达具有很好的正向诱导作用。本研究初步认为续随子的适宜辐照剂量应在600Gy左右。M1代幼苗体内SOD及CAT活性峰值可作为续随子适宜辐照剂量的判定依据。

千金子二萜醇p53依赖性抗肿瘤活性及构效关系研究

采用噻唑蓝(MTT)法测定6种千金子Lathyrol与Ingenol型二萜醇及其衍生物对不同p53基因型非小细胞肺癌细胞株的抗肿瘤活性,研究千金子二萜醇及其衍生物的构效关系及p53蛋白在千金子二萜醇发挥抗肿瘤活性中的作用与机制。结果表明:天然千金子二萜醇3位羟基成酯后可增加非小细胞肺癌毒性,其中以巨大戟醇甲基丁烯酸酯的细胞毒作用最强。表达p53蛋白可以进一步增加二萜醇酯类衍生物的细胞毒性。在千金子二萜母体醇中引入酯基团可以增强其抗肿瘤活性,同时也能增强其p53依赖的抗肿瘤作用。这一研究为千金子二萜醇作为抗肿瘤先导物来源及其进一步结构优化提供了科学依据。

高速逆流色谱法分离纯化续随子种子中的七叶内酯

建立了高速逆流色谱(HSCCC)技术分离纯化续随子种子中七叶内酯的方法。将续随子种子的乙酸乙酯萃取物直接进行高速逆流色谱分离,考察了不同溶剂系统的分离效果。结果表明,最佳的溶剂系统为氯仿-甲醇-水(体积比为4∶3∶2),以其上相为固定相,下相为流动相。从200mg续随子种子乙酸乙酯萃取物中分离得到80mg七叶内酯,纯度为99.04%。HSCCC技术可高效分离纯化续随子种子中的七叶内酯,为得到高纯度的七叶内酯提供了制备技术。

能源油料植物续随子的生物学及开发利用研究

在介绍能源油料植物续随子的生物学及生态学特性、栽培要点、种子油的脂肪酸组分及其生物柴油制备工艺的基础上,评述了贵州续随子能源产业的开发利用前景及存在的问题,并提出了加快良种选育、加强配套栽培技术研究等建议。

千金子中非萜类化学成分的分离与鉴定

目的研究大戟科有毒中药千金子的化学成分。方法采用开放硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、ODS等方法分离化合物,运用现代波谱技术确定化合物的结构。结果从千金子乙醇提取物的氯仿萃取部分分离纯化得到9个化合物,分别鉴定为1-hydroxyl-3,5,8-trimethoxyxanthone(1)、1,5-dihydroxyl-3,8-dimethoxyxanthone(2)、秦皮啶(fraxidine,3)、6,7-二羟基香豆素(esculetin,4)、6-甲氧基-7羟基香豆素(scopoletin,5)、邻羟基苯甲酸(salicylic acid,6)、乌苏酸(ursolic,7)、金色酰胺醇酯(aurantiamide acetate,8)、(E)-8-oxooctadec-9-ennoic acid(9)。结论化合物1-3,9为首次从大戟属植物中得到,化合物6-7为首次从续随子植物中得到。

续随子辐射效应研究及适宜辐射剂量预测

采用7种不同剂量的60Coγ射线辐照续随子干种子,观测射线辐射对M1种子萌发进程中植株形态及生理指标的影响,并对供试材料的适宜辐射剂量进行预测。调查结果显示,低剂量辐射对发芽势及发芽率有促进作用,剂量大于450Gy时,逐渐转化为抑制作用;幼苗生长量、活力指数及田间出苗率随辐射剂量加大表现出明显的下降趋势;SOD、CAT、APX活性及MDA含量随辐射剂量的增加表现出先升高后降低的变化趋势。分析结果表明,辐射对续随子M1的抑制效应主要表现在发芽整齐度及幼苗生长量上,对发芽率影响较小;SOD、CAT、APX活性及MDA含量变化均可反映材料的辐射诱变效应;500Gy是供试材料一个敏感剂量点;450~500Gy为辐射育种的适宜诱变剂量范围。

续随子苗期抗旱性综合评价

以不同地理来源续随子品系为试验材料,分别在干旱胁迫及对照条件下测定其形态及生理指标,并用基于主成分分析的隶属函数综合评价法对各品系抗旱性进行综合评价。结果表明,5个供试续随子品系抗旱性的综合评价值依次为安徽(0.839)>河南(0.524)>吉林(0.321)>福建(0.275)>重庆(0.179)。安徽续随子品系在综合评价中表现出较强的抗旱优势,可作为续随子抗旱性研究的代表材料。以抗旱性综合评价值为因变量,以单项指标相对值为自变量,建立了评价续随子抗旱性的最优回归方程;筛选出MDA含量、SOD酶活性和根冠比等3个对续随子抗旱性有显著影响的指标。在苗期抗旱性鉴定中,有选择地检测这些指标有助于提高续随子抗旱性的鉴定效率。

续随子种子油提取工艺响应面法优化及成分分析

确定续随子种子油的最优提取工艺,并对其脂肪酸成分进行分析。通过比较索氏法、超声法、水酶法对续随子种子油的提取效率,选出最佳提取方法。在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计筛选索氏提取法中影响提取率的因素。以种子油提取率作为响应目标,对筛选出的因素通过中心复合设计(Central Composite Design)进行优化,确定索氏提取法的最优提取工艺。三种方法的最高得率分别为41.97%,36.38%,34.33%。提取溶剂、液料比、温度、时间为影响最明显的因素。确定了索氏提取法的最优提取工艺为:提取溶剂石油醚,液料比30:1(v:m),提取温度90℃,提取时间9 h。采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析种子油成分,共鉴定出8种脂肪酸,占总脂肪酸含量的99%以上。其中,不饱和脂肪酸以油酸、亚油酸、α-亚麻酸和花生酸等为主,其含量达到总脂肪酸90%以上。在此工艺条件下,续随子种子油得率理论值为54.353%,实测值为54.175%,与理论值相比,相对误差为0.120%。研究结果可为续随子种子油的提取工艺提供参考,为续随子的进一步开发利用建立基础。