中药土鳖虫药理活性成分及其临床应用的研究进展

中药土鳖虫在临床上应用广泛,本文主要从土鳖虫的药理活性成分、临床使用方法及其应用的方向来进行阐述。土鳖虫的主要药理活性成分包括氨基酸、挥发油和生物碱等,具有降脂、抗凝、抑瘤和散瘀止痛等作用,临床上常与其他中药配伍使用,可用于高血脂、肝硬化、肿瘤以及骨科疾病等的治疗。本文旨在通过对相关内容进行归纳总结,为该药材的深入研究提供依据。

土鳖虫水煎剂对人多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖的影响

目的 :观察中药土鳖虫对多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖的影响。方法 :以灌服中药土鳖虫水煎液的 SD大鼠血清为含药血清 ,灌服等量生理盐水的 SD大鼠血清为对照血清。将囊肿衬里上皮细胞培养于含有下述物质的 RPMI 16 4 0液中 :(1)上皮生长因子 (EGF) 0、2 .5、5、10、2 0 ng/m l;(2 )含药血清 1%、2 .5 %、5 % ,以等量对照血清为对照 ;(3) EGF 10 ng/ml分别加含药血清 1%、2 .5 %、5 % ,并以等量 EGF加对照血清作为对照。培养 4 8h后 ,以 5 -溴 - 2 -脱氧尿核苷嘧啶 (Brdu)掺入法检测细胞增殖。结果 :EGF能显著地刺激囊肿衬里上皮细胞增殖 ,一定范围内呈剂量依赖性 ;与对照血清比较 ,土鳖虫含药血清能明显抑制经或未经 EGF刺激的囊肿衬里上皮细胞增殖 ,并呈剂量依赖性。结论

地鳖虫人工饲养和食用、药用研究进展

对地鳖虫的人工饲养、营养价值现状、药用价值现状以及当前开发利用研究的热点问题等方面进行了较全面的概括。

蛰虫对肝纤维化大鼠IV.C、LN、HA的影响

目的 :研究蛰虫抗肝纤维化的作用。方法 :以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型 ,以IV .C、LN、HA及肝脏组织病理变化为指标 ,观察蛰虫对大鼠肝纤维化的影响。结果 :蛰虫有降低IV .C、LN、HA的作用 ,并能改善肝脏组织病理学变化。结论 :蛰虫有减少纤维组织增生 ,阻止纤维化发展 。

仿生酶解法提取土鳖虫的工艺研究

目的:研究土鳖虫仿生酶解的工艺条件。方法:在胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解温度已固定的基础上,以PT/APTT为指标,筛选酶底比和酶解时间主要工艺参数;并以血小板聚集率、血凝-纤溶动态图为指标,对酶解法提取土鳖虫的工艺合理性进行考察。结果:土鳖虫酶解条件为:37℃人工胃液温浴30min,再加入2.0%(酶底比)胃蛋白酶酶解3h,残渣转入45℃人工肠液,加入4%(酶底比)胰蛋白酶酶解2h。结论:该工艺条件简单、稳定。

土鳖虫多肽F2-2的体外药效研究

目的:通过体外试验,考察土鳖虫多肽F2-2的抗凝、抗血小板聚集与舒张血管药效。方法:以凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原含量(FIB)、血小板聚集率、纤溶图参数与离体血管环张力等为指标,评价多肽F2-2是否具有活血化瘀的作用。结果:土鳖虫多肽F2-2具有延长家兔血浆APTT/PT/TT、降低FIB、降低血小板聚集率、延长凝血启动时间并降低最大凝固程度以及增加大鼠离体血管环张力的作用。结论:体外实验表明,多肽F2-2是中药土鳖虫的活性组分,有继续研究的价值。

利用HPLC法测定不同产地土鳖虫中尿囊素的含量

[目的]建立土鳖虫中尿囊素含量的测定方法,考察不同产地土鳖虫中尿囊素的含量,为土鳖虫药材质量标准的制订提供依据。[方法]采用HPLC法对土鳖虫的尿囊素进行定量分析,色谱柱为Agilent ODS-C18（4.0 mm×250.0 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%醋酸,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm。[结果]各产地土鳖虫中尿囊素含量差异较大,其中以＂致信药材＂土的鳖虫尿囊素含量最高。尿囊素在0.2~2.0μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为97.42%（RSD=4.5%,n=5）。[结论]所建立的方法准确可靠,重复性好,可用于土鳖虫药材的质量控制。

HPLC法测定土鳖虫中尿嘧啶和尿囊素的含量

目的建立土鳖虫药材中尿嘧啶和尿囊素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为AlltimaNH2（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-水（90：10）;流速为1.0 ml/min,检测波长205 nm;柱温35℃。结果尿囊素和尿嘧啶的线性范围分别是：0.404~3.23μg（r=0.999 5,n=5）,0.820~6.56μg（r=0.999 5,n=5）。平均回收率分别为98.8%、99.0%,RSD分别为0.96%、0.79%（n=6）。结论该方法简便、准确,可作为土鳖虫药材的质量控制方法。

反相高效液相色谱法测定冬虫夏草等6味动物药中尿嘧啶含量

目的：采用反相高效液相色谱法（reverse phase—high performance liquid chromatography，RPHPLC）测定冬虫夏草、蛤蚧、土鳖虫、蜈蚣、中华蟾蜍、蜚蠊药材中尿嘧啶的含量。方法：色谱柱为Shim—pack CLC—ODS C18柱；流动相：0．05mol／L磷酸氢二铵溶液（pH8．4）；流速：0．6ml／min；检测波长：254nm。结果：尿嘧啶对照品浓度为2．49～49．80μg／ml时与峰面积呈良好的线性关系；回归方程：A=145874 c-45893，r=0．9999（n=7）。精密度试验RSD=0．08％，样品加样回收率为99．79％，RSD=1．93％（n=5）。结论：本法操作简单、准确、重现性好，为冬虫夏草、蛤蚧、土鳖虫、蜈蚣、中华蟾蜍、蜚蠊的鉴定和质量控制提供了依据。

蛰虫抗大鼠免疫性肝纤维化研究

目的 :研究蛰虫抗肝纤维化的作用。方法 :以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型 ,以ALT、GGT、TP、Alb、A /G比值、IV .C、LN、HA及肝脏组织病理变化为指标 ,观察蛰虫对大鼠肝纤维化的影响。结果 :蛰虫能提高肝纤维化大鼠TP、ALb含量及A/G比值 ,有降低ALT、GGT、IV .C、LN、HA的作用 ,并能改善肝脏组织病理学变化。结论 :蛰虫有保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死 ,恢复肝细胞结构和功能 ;减少纤维组织增生 ,阻止纤维化发展 。

HPCE法研究土鳖虫镇痛作用与其指纹图谱的关系

目的建立高效毛细管电泳(HPCE)法研究土鳖虫Eupolyphaga seu Steleophaga镇痛作用与其指纹图谱的关系。方法分析采用熔融硅胶毛细管(75μm,30 cm×21 cm);10 mmol/L硼砂(p H=9.7)为缓冲液;进样电压5 k V10 s;分离电压15 k V;检测波长214 nm。然后,通过醋酸致小鼠扭体实验来探索各组分对镇痛作用的影响。结果土鳖虫指纹图谱中有7个特征峰,其中有2个为尿囊素与氯氮卓。两者的含有量与土鳖虫的镇痛作用成正比关系。结论各批次土鳖虫样品间存在差异,其镇痛作用可用于质量评价。

固相萃取-液质联用法测定土鳖虫中12种真菌毒素

目的 建立动物药土鳖虫中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、伏马毒素B1、B2、桔青霉毒素、T-2毒素、呕吐毒素、赭曲霉毒素A及玉米赤霉烯酮等12种真菌毒素的高效液相色谱-串联质谱同时测定方法。方法 土鳖虫样品加入80%乙腈溶液匀浆提取,用水稀释上清浓缩液后使用HLB固相萃取柱净化富集;以乙腈-5mM醋酸铵(pH=3.0)为流动相经C18色谱柱梯度洗脱分离,采用电喷雾(ESI)离子源、多反应监测(MRM)及正负离子模式采集数据。结果 12种真菌毒素的线性良好,低、中、高3个水平的加标回收率在68%-110%之间,RSDs为1.5%-13%。抽查4批市售土鳖虫样品,结果有3批土鳖虫样品黄曲霉毒素有检出,并且超出限量标准。而赭曲霉毒素A、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和伏马毒素类均对土鳖虫有不同程度的污染,其中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的污染较为严重,分别超出限量的30%和60%。结论 土鳖虫易受黄曲霉毒素、伏马毒素以及玉米赤霉烯酮等真菌毒素的污染,本研究以土鳖虫为例建立的检测方法,以期为动物类中药的真菌毒素污染的含量测定提供技术支持及理论依据。

土鳖虫的化学成分研究

利用正相和反相色谱法,从土鳖虫(Eupolyphaga seu Steleophaga)70%丙酮水提取物的乙酸乙酯萃取物中共分离纯化了17个化合物,经波谱分析分别鉴定为:1H-吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂卓1.5(2H)-六氢-二酮,3–对苯基酚(1),3-[(1S)-1-甲基-1-丙基]-(3S,8S)六氢-吡咯并[1,2]吡嗪-1,4-二酮(2),1,4-二氧-八氢吡咯并[1,2]-吡嗪-对乙酰氨基酚(3),1,4-二氧-八氢吡咯并[1,2]-吡嗪-丙酰胺(4),(3S,8a S)-3-丁基环己烷吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮(5),腺苷(6),3-核糖-2,4-二氢嘧啶二酮(7),肌酐(8),2-甲基-6-(2'3'4'-三羟基丁基)吡嗪(9),甲基尿嘧啶(胸腺嘧啶)(10),3-羟基吡啶(11),6-甲基-2,4-二氢嘧啶二酮(12),3-7-二氢嘌呤-2-酮(13),3H-咪唑并[5,9]吡啶(14),3-乙基-6,8-二羟基-7-甲基-3,4-二氢异苯并吡喃-1-酮(15),3-(4-羟基苯基)-N-甲基丙酰胺(16),6,8-二羟基-3,7-二甲基l-3,4-二氢-1H-异苯并吡喃-1-酮(17).其中化合物1为新化合物,化合物2-17为首次从该药材中分离得到.化合物1-17进行了抑制PKD1/TRPP2活性的评价,但结果显示所有化合物均没有活性.

土鳖虫含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨土鳖虫抗肿瘤的可能作用机制。方法将56枚鸡胚制备成鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,随机分为空白组和土鳖虫含药血清高、中、低剂量组;每组14枚。空白组不处理,土鳖虫含药血清高、中、低剂量组分别加入经灌胃含土鳖虫生药11g/(kg·d)、8g/(kg·d)、5.5g/(kg·d)剂量取得的大鼠土鳖虫含药血清,继续孵育72h后,观察各药物组鸡胚的存活情况、CAM模型的形态变化、CAM模型血管生成数量。结果加药72h后,各组鸡胚存活率相当。存活鸡胚可见胚胎活动活跃,CAM透明,分布清晰且血管颜色鲜红。死亡鸡胚CAM血管颜色变浅,脉络不清,胚胎活动消失。土鳖虫含药血清高、中、低剂量组新生血管数量均少于空白组(P<0.05);土鳖虫含药血清高剂量组新生血管数量少于土鳖虫含药血清中、低剂量组(P<0.05);而土鳖虫含药血清中、低剂量组间新生血管数量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论土鳖虫抗肿瘤作用可能与其抑制CAM血管生成有关,且大剂量效果更佳。