茯砖茶中冠突散囊菌纤维素酶的酶学性质研究

从茯砖茶中分离出冠突散囊菌,对其进行液体发酵培养,制备成粗酶液。在不同条件下处理粗酶液,运用3,5-二硝基水杨酸(DNS)还原糖法测定纤维素酶活性。试验结果表明,冠突散囊菌所产纤维素酶酶活最佳温度是50℃,最佳pH值是4.8;在30～50℃,pH4～6范围内有较高的稳定性;Ca2+、Mg2+离子对酶活有激活作用,Mn2+、Zn2+、Pb2+离子对酶活有抑制作用。

茯茶“散茶发花”加工过程中茶多酚和碳水化合物及冠突散囊菌数量的变化研究

为探明"散茶发花"技术在不同嫩度茶叶原料上的发花情况及发花对各茶叶原料带来的影响,采用2008年一品茯砖茶原料(A)、2008年金湘益茯砖茶原料(B)、边销茶原料(C)以及2008年金湘益茯砖茶原料"快速醇化"后的成品(D)作为"散茶发花"加工原料,考察发花过程中主要生化成分及"发花"特征性微生物——冠突散囊菌数量的变化。结果表明,4种茶叶中的茶多酚、儿茶素、黄酮类、可溶性糖、粗纤维等的含量均有不同程度的下降;多糖的含量有小幅度的增加;在5天的发花期间,冠突散囊菌繁殖增长较快,第3天进入对数生长期,随后增长速率逐渐放缓直至发花结束。4种茯茶成品较其对应原料品质均有改善,加工过程中冠突散囊菌参与生化成分复杂的变化为品质的改善奠定了基础。

中药桑叶固体发酵前后抗氧化活性的研究

目的探讨桑叶固体发酵前后70%乙醇提取物的体外抗氧化活性。方法应用"药用真菌固体发酵工程"的原理和方法,以桑叶为药性基质,冠突散囊菌为发酵菌种,在一定条件下进行固体发酵,对发酵物用70%乙醇进行提取。并以维生素C(Vc)和乙二胺四乙酸(EDTA)为阳性对照,以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、·OH自由基、铁还原能力及与Fe2+螯合能力5个指标对发酵前后桑叶体外抗氧化活性进行评价;同时对发酵前后总黄酮、总酚酸含量进行测定。结果未发酵桑叶70%乙醇提取物清除自由基能力及铁还原能力优于固体发酵7 d后桑叶的70%乙醇提取物,但对于Fe2+螯合能力而言,发酵后的桑叶70%乙醇提取物较未发酵前有所升高。其中未发酵桑叶70%乙醇提取物DPPH、ABTS、Fe2+螯合能力的IC50值分别为:4.69、2.03、20.89 mg/m L,而固体发酵7 d后的桑叶70%乙醇提取物三者的IC50值分别为:17.63、1.87、9.20 mg/m L;同时含量测定结果显示,发酵后桑叶中总多酚含量较发酵前明显下降,而发酵后桑叶中总黄酮含量却高于发酵前总黄酮含量。其中发酵前桑叶中总黄酮、总酚酸含量分别为4.39、3.95 mg/m L,而发酵后桑叶中总黄酮含量上升至5.37 mg/g,总酚酸下降为1.55 mg/g。结论固体发酵7 d,能够降低桑叶清除自由基的能力及铁还原能力,但却能升高其螯合能力。

冠突散囊菌抑菌产物培养基优化及分离鉴定

采用响应面法优化冠突散囊菌FS-10产抑菌活性物质的发酵培养基配方,采用高效液相色谱、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和傅里叶红外光谱对其抑菌活性产物进行分离纯化及结构鉴定。结果表明,冠突散囊菌FS-10产抑菌物质最佳培养基的配方为:碳源(无水葡萄糖)7.5%、氮源(硝酸钠)0.65%、氯化钾4.5%,优化后发酵液对浓度为1×10^(5) CFU/mL嗜冷菌菌悬液的抑菌率为54.4%。经分离纯化获得两个抑菌活性组分FS-Ⅳ、FS-Ⅵ,分子质量分别为1630.8 u和840.5 u,推测其结构分别为杂多糖的衍生化合物和酰胺类衍生化合物。这两个组分对食源性腐败菌,包括假单胞菌、希瓦氏菌和嗜冷菌有显著的抑制作用,并有良好的热稳定性和酸碱稳定性。

冠突散囊菌菌落计数方法的优化

茯砖茶中冠突散囊菌(Eurotiumcristatum)的数量是评判其产品质量的重要因素,目前大多数检测机构均使用传统的国标法来检测冠突散囊菌的菌落数量。冠突散囊菌有闭囊壳构造,传统国标法中计数方法存在缺陷,不能检测出茯砖茶中冠突散囊菌的真实数量。通过对传统方法的优化和改进,对样品充分粉碎并过60目筛,利用200颗玻璃珠增加振摇强度,延长振摇时间至60min,从而打破冠突散囊菌闭囊壳,释放其中的子囊孢子,能获得茯砖茶中所含冠突散囊菌的真实数量。结果表明:该方法优化效果明显,操作简单、经济实用性好。