两种测定大鼠心肌缺血再灌注损伤后梗死面积方法的比较

目的:探索一种在体测定大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌梗死面积的方法,并与传统的离体染色方法进行了比较,确定其可行性。方法:结扎雄性成年Sprague-Dawley大鼠冠状动脉前降支,给予缺血30 min,再灌注6 h,用超声心动图评价大鼠的心功能,用生化分析仪测定血清中的肌酸激酶(creatine kinase,CK)活性。再灌注24 h后,用离体和在体两种方法进行TTC(triphenyltetrazolium chloride,2,3,5-氯化三苯基四氮唑)-Evans blue双染,比较两种方法的成功率、心梗面积/缺血区面积(in-farct area/risk area,IA/RA)与血清CK活性的相关性。结果:在体染色法的IA/RA与离体染色法没有显著性差异,但成功率高。其IA/RA与血清CK活性的相关性高于离体染色法。结论:在体染色法与离体染色法相比,操作简易,能更准确地反映心肌缺血再灌注损伤的程度。

伊文思蓝特异性染色技术快速鉴定新型隐球菌

目的探讨伊文思蓝特异性染色技术快速鉴定新型隐球菌在临床检验医学诊断工作中的应用。方法配制伊文思蓝特异性染色液,评估伊文思蓝特异性染色液的稳定性及特异性;用伊文思蓝特异性染色液对新型隐球菌、白色念珠菌等常见真菌及白细胞染色,综合评价其染色效果,进一步比较伊文思蓝特异性染色液、阿利新蓝染色液、墨汁对新型隐球菌的染色效果。结果新型隐球菌被伊文思蓝特异性染色液染成蓝色或深蓝色,白细胞及其他常见真菌不着色,易于将新型隐球菌与白细胞及其他常见真菌区分;伊文思蓝特异性染色液稳定性好,染色效果稳定,优于阿利新蓝染色和墨汁染色,伊文思蓝特异性染色能在计数板中计数新型隐球菌,阿利新蓝染色易凝集对计数有一定的影响,而墨汁染色则无法计数。结论伊文思蓝特异性染色技术快速鉴定新型隐球菌设备要求简单、方法快速敏感,有很好的特异性和稳定性,适合各类医院推广应用。

两种不同的染色方法评价大鼠心肌缺血-再灌注损伤程度

目的:探讨评估心肌缺血-再灌注损伤程度的两种染色方法。方法:大鼠冠状动脉左前降支结扎缺血30min,再灌注6h形成缺血-再灌注损伤动物模型。超声检测心功能指标,并分别用TTC单染法和Evans blue-TTC双染法评价心肌的损伤程度。结果:Evans blue-TTC双染法可以评价出心肌的缺血组织面积、梗死组织面积和正常组织面积,而TTC单染法只能测出组织的梗死面积和缺血面积,不能排除由于结扎位置不同而引起的误差。同时,双染法得出的梗死面积/危险面积的比值(I/R)与心功能指标的相关性,比单染法得出的梗死面积/左心室的面积比值(I/T)与心功能指标的相关性更高。结论:Evans blue-TTC双染法比TTC单染法能更客观更准确的反映出心肌组织缺血-再灌注损伤的程度。

改良线栓法建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型

目的:建立一种SD大鼠局灶性脑缺血再灌注改良模型,以降低模型制备难度,提高模型的稳定性。方法:SD雄性大鼠30只,随机分为模型组24只和假手术组6只。采用经改良的颈外动脉进线栓法建立模型,并通过神经功能缺损评分、伊文思蓝(EB)染色及TTC染色进行综合评价。结果:该改良方法建模成功率为87.5%,梗死区可明显看到EB渗出,TTC染色显示梗死体积占大脑总体积的(10.65±4.41)%。结论:经改良后,明确了颈总动脉结扎位置,以及颈外动脉结扎、剪断位置,采用颈外动脉残端直接进线栓建立模型,降低了模型制备难度,提高了模型的稳定性和成功率。

基于小鼠耳廓蓝染实验评价静注人免疫球蛋白(pH4.0)类过敏反应

目的采用小鼠耳廓蓝染实验评价静注人免疫球蛋白(pH4.0)的类过敏反应,考察不同多聚体含量的产品引发类过敏反应的情况。方法分别选取含有不同多聚体含量的3批产品,A(1.3%)、B(0.1%)、C(0.5%),另通过加热制备多聚体含量升高的产品作为对照(C产品50℃水浴分别加热10 min、20 min),以小鼠注射给药后的症状以及耳廓蓝染率、蓝染评分、伊文思蓝渗出量作为类过敏评价指标。结果不同多聚体含量的产品引发类过敏反应症状有明显差异,耳廓蓝染率、蓝染评分以及EB渗出量差异具有统计学意义。同时产品加热后,随着多聚体含量不断升高,类过敏反应症状愈发严重。结论小鼠耳廓蓝染实验可用于初步评价不同多聚体含量产品的类过敏反应,对静注人免疫球蛋白(p H4.0)的质量控制及安全评价具有指导意义。

祛痰化瘀通脉颗粒对急性心肌缺血大鼠血管新生的影响及机制研究

目的:探讨祛痰化瘀通脉颗粒对急性心肌缺血大鼠血管新生的影响及其机制。方法:对大鼠行左冠状动脉前降支结扎术致急性心肌梗死模型,术后1至5d口服灌胃给予大、中、小剂量祛痰化瘀通脉颗粒,每日1次。采用伊文氏蓝-氯化三苯基四唑(TTC)双重染色法测定心肌缺血和心肌坏死面积,用免疫组化法测定缺血心肌微血管密度(MVD),检测心梗边缘区血管内皮生长因子(VEGF)及VEGFR-2的表达,观察不同剂量祛痰化瘀通脉颗粒对心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生的影响。结果:各剂量祛痰化瘀通脉颗粒组术后可明显缩小心肌梗死及缺血面积,明显增加新生血管密度,VEGF、VEGFR-2表达均有明显升高,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:祛痰化瘀通脉颗粒能促进心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生,增加微血管密度,其作用机制可能与与上调心肌局部VEGF、VEGF-2相关。

伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌

目的:探讨伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌在临床检验医学诊断工作中的应用。方法:配制伊文思蓝染色液,评估伊文思蓝染色液的稳定性及其;用伊文思蓝染色液对新型隐球菌、白色念珠菌等常见真菌及白细胞染色,综合评价其染色效果,进一步比较伊文思蓝染色液、阿利新蓝染色液、墨汁对新型隐球菌的染色效果。结果:新型隐球菌被伊文思蓝染色液染成蓝色或深蓝色,白细胞及其他常见真菌不着色,易于将新型隐球菌与白细胞及其他常见真菌区分;伊文思蓝染色液稳定性好,染色效果稳定,优于阿利新蓝染色和墨汁染色,伊文思蓝染色能在计数板中计数新型隐球菌,阿利新蓝染色易凝集对计数有一定的影响,而墨汁染色则无法计数。结论:伊文思蓝染色技术快速鉴定新型隐球菌设备要求简单、方法快速敏感,有很好的和稳定性,适用各类医院推广应用。