AML和ALL患者骨髓EVI1表达水平及其与白血病分型、临床特征和预后的相关性分析

目的:探讨白血病患者骨髓中的EVI1基因在AML和ALL中的表达情况,以及其与白血病分型、患者临床特征以及预后的相关性。方法:选取2012年至2016年间中南医学院收治的白血病患者333例,其中AML患者263例,ALL患者70例,正常对照的志愿者13例。抽取患者及志愿者的骨髓样本,用Ficoll法分离骨髓样本中的单个核细胞,提取总DNA,然后采用实时荧光定量PT-PCR检测法检测EVI1 mRNA的相对表达水平,比较EVI1mRNA在AM L、ALL患者中的表达差异。采用相关的统计学方法分析EVI1表达与白血病分型、患者临床特征以及患者预后之间的相关性。结果:根据实时荧光定量PT-PCR检测的EVI1 mRNA表达结果,EVI1 mRNA在AM L、ALL患者中均有较高的表达水平,因此2组的EVI1 mRNA表达水平比较没有显著的差异(t=1. 756,P>0. 05),但是ALL患者在EVI1 mRNA发生过表达及低表达的表达率高于AM L患者,而正常表达的表达率低于AM L患者,差异存在统计学意义(χ~2=13. 698,P <0. 05)。在AM L-M1中,T-ALL两个亚型中患者的Plt水平与EVI1 mRNA表达水平呈正相关(r=0. 393,P <0. 05;ρ=0. 442,P <0. 05),而在AM L-M3亚型中,患者的Blasts(%)在AML-M3与EVI1 mRNA表达水平有显著的负相关性(r=-0. 518,P <0. 01)。在EVI1 mRNA表达分布上,EVI1 mRNA的表达分布与AML患者年龄存在相关性(χ~2=6. 684,P <0. 05)。AM L患者中有高表达EVI1mRNA的患者的有较差的预后(Log-Rank检验,P <0. 05),且AM L-M3亚型的EVI1 mRNA高表达患者比非高表达的患者有更显著的较差预后(Log-Rank检验,P <0. 01)。结论:在EVI1的表达水平上,AML及ALL患者并没有太大的差异,但在EVI1的表达分布差异明显,并且其差异与患者的年龄有一定的相关性。同时患者的一些临床特征以及急性白血病的部分亚型均与EVI1的表达水平存在一定相关性。

siRNA特异性抑制HEL细胞evi1基因的实验研究

本研究探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默人红白细胞白血病细胞(HEL)的evi1基因后对细胞evi1基因表达的抑制作用及细胞生物学特征变化及其作用机制。体外合成3条evi1基因特异性的siRNA(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3)并转染HEL细胞,并设对照。用四甲基偶氮唑蓝法评价细胞增殖抑制情况,半定量逆转录聚合酶链反应(semiquantitative RT-PCR)检测evi1基因mRNA的表达,台盼蓝染色试验测定细胞活性的变化,流式细胞术检测细胞周期变化和凋亡率。结果显示,细胞转染24、48、72小时后,以siRNA-1作用最强,转染后48小时抑制作用最明显。siRNA浓度为120nmol/L时,抑制率达到最大。转染48小时后siRNA-1对HEL细胞的增殖抑制率为(72.22±2.80)%,evi1-mRNA相对表达率为(27.31±1.11)%,HEL细胞活率为(26.05±2.49)%,与其他各组相比有显著性差异(p<0.001)。siRNA可使细胞周期阻滞在G0/G1期,S期细胞明显减少,凋亡率明显增高(p<0.01)。结论:evi1基因特异性siRNA可抑制HEL细胞增殖,使evi1-mRNA表达水平降低,细胞活性下降,HEL细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制细胞的有丝分裂,促进细胞凋亡。

MDS1-EVI1基因多态性与鼻咽癌相关性研究

目的探讨MDS1-EVI1基因SNP rs6774994多态性与云南鼻咽癌之间的相关性研究.方法采用TaqMan-PCR方法检测MDS1-EVI1基因rs6774994基因型与等位基因频率.结果 (1)鼻咽癌组和对照组MDS1-EVI1基因rs6774994各基因型(P=0.843)和等位基因频率(P=0.784)组间分布差异无统计学意义(P>0.05);(2)鼻咽癌患者MDS1-EVI1基因rs6774994,有家族遗传史患者GG基因型携带者高于无家族遗传史患者(P<0.01),且病理分化类型为非低分化鳞癌的患者GG基因型携带者高于低分化鳞癌患者(P<0.01).结论 MDS1-EVI1基因rs6774994可能不增加云南人罹患鼻咽癌的风险.MDS1-EVI1基因rs6774994GG等位基因可能与家族遗传史和病理分化类型有一定相关性.

Evi1基因表达在慢性粒细胞白血病急性变中的意义

目的 探讨Evi1基因表达在慢性粒细胞白血病 (慢粒 )急性变中的意义。方法 应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系、87例慢粒患者 (慢性期 5 8例 ,加速期 4例 ,急性变期 2 5例 )及 10名正常对照的Evi1基因的表达。结果 10名正常对照骨髓单个核细胞中未测到Evi1mRNA ;HEL细胞系Evi1阳性 ;87例慢粒中 ,慢性期组、加速期组、急性变组、急性髓性变组Evi1基因表达的阳性率分别为 3 .5 % (2 5 8)、5 0 .0 % (2 4)、48 0 % (12 2 5 )、66.7% (12 18) ) ;但加速期及急性变组的Evi1基因表达率高于慢性期组 (P <0 .0 1) ,而加速期组和急性变组的阳性率无显著性差异 (P =1.0 0 ) ,急性髓性变组的阳性率高于急淋变组 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;慢性期组的阳性率较正常对照相比差异无显著性 (P =1.0 0 ) ;Evi1基因阳性表达与慢粒临床分期、急性变分型及预后相关 ,而急性变期Evi1阳性表达与年龄、性别、外周血象、bcr abl融合基因无关。结论 Evi1基因是预测慢粒患者发生急性变的一个有用的基因标志 ,可看做是一个由慢性期向急性期转化的信号 。

伴EVI1高表达的中高危急性髓系白血病临床特点及早期治疗效果

目的:探讨EVI1基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者的临床生物学特点及其对早期化疗疗效的影响。方法:选择2015年3月至2016年7月在北京大学血液病研究所诊治的361例AML患者病例资料进行回顾性分析,其中33例AML患者EVI1基因阳性,分析比较其临床特征和生物学特征,并比较中危及高危伴EVI1+AML患者的临床与生物学特征及诱导缓解率,分析获得完全缓解(complete remission,CR)的影响因素。32例健康供者进行EVI1/ABL基因水平检测,确定EVI1表达的异常界值。结果:以EVI1/ABL基因定量表达≥8.0%作为EVI1的阳性表达。在361例初发AML中,EVI1+AML患者共33例(9.1%),其中男性16例,女性17例,中位年龄45(18~67)岁,中位随访期为6.6(0.7~13.2)个月。中危核型17例,包括正常核型9例,1例+8;高危核型14例,包括7例-7/7q-,4例t(v;11q23),3例inv(3)/t(3;3),2例未见分裂象。33例患者1个疗程完全缓解率为42.4%,总CR率为60.6%。按《美国国立综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)指南》预后分层,分为中危组16例,高危组17例,无低危组患者。中危组与高危组1个疗程CR率分别为68.8%和17.6%(P=0.005),总CR率分别为81.3%和41.2%(P=0.032),复发率为7.7%和14.3%。单因素分析,高危染色体核型对1个疗程CR率及总体CR率均有影响(P=0.004、0.029)。高危组患者病死率显著高于中危组(41.2%vs.6.3%,P=0.039),且总生存(overall survival,OS)显著低于中危组(P=0.012)。结论:EVI1基因在AML中常伴中、高危核型表达,对于AML患者来说可能不是独立的预后因素,伴-7/7q-、t(v;11q23)及inv(3)/t(3;3)等高危染色体核型的预后差,其1个疗程CR率及总CR率、长期生存率低,病死率高,应尽早行异基因造血干细胞移植。

EVI1基因在儿童急性髓细胞白血病中的表达及意义

目的探讨EVI1基因表达与儿童急性髓细胞白血病(AML)临床表现及预后的关系。方法检测AML患儿EVI1基因表达,分析EVI1阳性AML患儿临床和实验室检查特点以及预后。结果 145例AML患儿中EVI1阳性38例,占26.21%。与阴性组相比,阳性组患儿的年龄、性别、血红蛋白量、白细胞及血小板计数、细胞形态学FAB分型、异常核型检出率差异均无统计学意义(P>0.05);阴性组复杂核型检出率高于阳性组,差异有统计学意义(χ2=5.50,P=0.019)。38例阳性患儿中,14例化疗与7例异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患儿的无事件生存(EFS)率差异有统计学意义(χ2=4.00,P=0.045)。阳性组与阴性组患儿化疗完全缓解率差异无统计学意义(91.67%对91.18%,P>0.05),阳性组患儿复发率高于阴性组,差异有统计学意义(64.29%对22.22%,P=0.009);两组EFS率差异也有统计学意义(χ2=5.76,P=0.015)。2例阳性组患儿骨髓复发时EVI1基因仍阴性。结论 EVI1基因是儿童AML的不良预后因素,allo-HSCT可改善EVI1阳性AML患儿预后。定量检测EVI1基因表达可能不适用于微小残留病监测。

miR-206调控小细胞肺癌干细胞EVI1基因表达及细胞生物学行为

背景:通过对小细胞肺癌体外分选鉴定,可以发现肿瘤干细胞的存在是促使肿瘤细胞恶性增殖的重要因素。肿瘤的发生与细胞内多种分子的异常表达以及靶向基因的调控障碍密切相关。前期研究发现,EVI1具备原癌基因特性,在肺癌中其表达上调。miR-206可靶向调控EVI1基因和蛋白的表达。目的:探讨miR-206靶向调控EVI1转录基因的表达对小细胞肺癌干细胞增殖和分裂周期的影响。方法:首先采用miR-206转染实验验证靶向调控EVI1基因,实验分3组:miR-206 mimics组、miR-206 inhibitor组和miR-NC组,分别转染小细胞肺癌干细胞,Western blot法检测细胞中EVI1蛋白的表达。然后采用慢病毒干扰法下调小细胞肺癌干细胞中miR-206表达验证细胞的信号转导通路和生物学行为,实验分3组:pLB-miR-206组、空载体组和对照组,RT-PCR法检测细胞中miR-206和EVI1 mRNA表达水平,Western blot法检测p-Akt和p-JNK蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期中分裂细胞和凋亡细胞的百分比。结果与结论:①miR-206 mimics组Evi1蛋白水平显著高于miR-NC组(P<0.05),miR-206 inhibitor组Evi1蛋白水平显著低于miR-NC组(P<0.05),提示miR-206可能靶向调控小细胞肺癌干细胞EVI1基因的表达;②经miR-206慢病毒转染后,pLB-miR-206组miR-206和EVI1 mRNA表达水平明显低于空载体组和对照组,p-Akt和p-JNK蛋白表达水平下降,细胞增殖率减少,分裂细胞比例下降(P<0.05),提示miR-206可能通过靶向调控小细胞肺癌干细胞中EVI1基因的表达和Akt/JNK信号通路的激活,对细胞增殖和分裂周期产生影响。

EVI1基因阳性急性髓系白血病的临床特点与预后分析

目的探讨EVI1基因阳性急性髓系白血病(AML)患者的临床特点、预后并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。方法观察309例AML病例,分析EVI1基因阳性AML患者的临床特征、细胞形态学、融合基因、早期死亡(ED)、CR率、总体生存率(OS)、无复发生存率(RFS)、造血干细胞移植效果等,并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。结果 EVI1基因阳性AML患者白细胞数显著增高(P<0.05),FAB分型中M4/M5比例偏高(P<0.05)。EVI1阳性患者的染色体核型主要为预后较差的11q23(MLL基因阳性)、inv(3)/t(3;3)、-7等重现性染色体异常,而一些预后较好的核型如t(15;17)、t(8;21)、inv(16)发生率较低。EVI1基因阳性AML患者CR率明显低于EVI1基因阴性者(54.3%∶74.1%)(P<0.05)。allo-HSCT可明显提高EVI1基因阳性AML患者OS(P<0.05)。结论 EVI1基因阳性AML白细胞数高,生存期短,化疗效果差,预后不良。

EVI1基因阳性的急性髓系白血病患者临床特点及其造血干细胞移植的疗效观察

目的探讨EVI1基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者及其造血干细胞移植的临床特点、治疗反应及转归。方法收集我院2016年1月至2020年5月确诊急性髓系白血病伴EVI1基因阳性的7例患者,其中男1例,女6例,中位年龄8(3~49)岁。采用巢式PCR检测患者EVI1基因表达水平,并结合患者骨髓形态学类型、细胞遗传学、分子生物学等资料,观察患者的临床特点及造血干细胞移植疗效。结果EVI1阳性的AML患者的危险度分层均为高危。随访至2020年5月31日,7例患者中2例患者在正规化疗过程中复发。有6例患者行异基因造血干细胞移植,5例患者在移植前骨髓细胞学达到完全缓解(complete remission,CR),1例患者行抢救性移植后达细胞学CR;1例患者经正规化疗过程中出现疾病复发未行移植,于确诊后10个月死亡。到随访截止时间,仅1例患者死亡,余6例接受异基因造血干细胞移植的患者均持续缓解。结论EVI1阳性的AML患者预后不良,易复发,但不影响CR率,形态学以M4和M5更常见,异基因造血干细胞移植可以明显改善患者预后。

MLL基因重排阳性儿童急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的分析MLL基因重排阳性儿童AML患者的临床特征及预后情况。方法回顾性分析2016年1月—2020年4月华南地区9家医院初治的MLL基因重排阳性儿童AML(非M3型)患者临床、实验室资料、生存情况,并分析其预后及预后相关因素。结果523例儿童AML(非M3型)患者中检出75例(14.3%)MLL基因重排阳性患者。按FAB分型,49例属于M5型,MLL伙伴基因中MLL/AF 9发生率最高。70例患者可进行疗效分析,死亡15例,其中死于治疗相关并发症4例,死于复发11例,5年OS、EFS分别为71.2%、67.3%。单因素分析显示EVI1基因高表达、MLL/AF6、初治时白细胞≥50×10^(9)/L是影响OS的预后不良因素(P值分别为0.029、0.043和0.048),EVI1基因高表达、MLL/AF6是影响EFS的预后不良因素(P值分别为0.035和0.043),1个疗程获得CR是影响OS、EFS预后良好因素(P值分别为0.037和0.036)。多因素分析显示EVI1基因阳性是影响OS、EFS的独立预后不良因素,一个疗程获得CR是影响OS、EFS的独立预后良好因素。高危组中行造血干细胞移植患者5年OS、EFS均高于高危组未行移植患者(76.2%vs.38.1%,66.7%vs.28.6%),差异均有统计学意义(P值分别为0.045和0.039)。结论MLL基因重排阳性儿童AML患者与单核细胞系白血病密切相关,伴随伙伴基因中以MLL/AF9最常见。在MLL基因重排阳性儿童AML患者中,一个疗程后获得CR是影响OS、EFS的独立预后良好因素,而EVI1基因高表达是影响OS、EFS的独立预后不良因素。造血干细胞移植能提高高危组患者的OS和EFS。

447例急性髓系白血病患者EVI1基因表达、临床和细胞遗传学特征研究

目的分析447例急性髓系白血病（AML）患者EVI1基因的表达及其临床和细胞遗传学特征。方法检测2007年1月至2015年4月收治的447例初诊AML患者的EVI1基因表达水平，分析其临床和细胞遗传学资料以及部分患者的分子学突变资料，总结EVI1基因高表达患者的特征。结果EVI1基因高表达者占17．9％，低表达者占82．1％。两组患者的年龄、性别、外周血血红蛋白水平、白细胞计数、血小板计数差异均无统计学意义；EVI1基因高表达组M0、M5和M6患者比例较低表达组显著增高（P值分别为0．027、0．004和0．011）。在细胞遗传学特征方面，EVI1基因高表达组11p15重排、11q23／MLL重排、3q26重排、-7／7q-以及t（9：11）患者比例较低表达组显著增高（P值分别为〈0．001、〈0．001、〈0．001、〈0．001、0．014）；而正常核型、inv（16）、t（8；21）在EVI1基因低表达组占优势（P值分别为0．001、0．009、0．002）。EVI1基因高表达更多见于细胞遗传学高危组。NPM1突变更倾向分布于EVI1基因低表达组（P〈0．001）。EVI1基因高表达组缓解率明显低于低表达组（P〈0．001）。异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）显著改善EVI1基因高表达者的无白血病生存。结论EVI1基因高表达多见于M5；核型分布中11p15重排、11q23／MLL重排、3q26重排、-7／7q-以及t（9；11）占优势；缓解率低，allo-HSCT能够改善预后。

伴WT1、MLL-PTD、EVI1基因的幼儿急性巨核细胞白血病的表型与遗传学分析

目的探讨伴WT1、MLL-PTD、EVI1基因幼儿急性巨核细胞白血病(acute mega-karyoblastic leukemia,AMKL)的表型与遗传学特征。方法采集静脉血进行血常规及血细胞形态分析;抽取骨髓进行细胞形态学、免疫表型、染色体核型及融合基因分析。结果血常规白细胞计数12.3×109/L、血红蛋白73 g/L、血小板计数13×109/L;血细胞形态分析发现幼稚细胞胞体大小似原始幼稚淋巴细胞,呈圆形或不规则形,部分可见明显伪足;胞质嗜碱性,着色不均,内有颗粒;核染色质细致,可见核仁1~3个,此类细胞约占40%;骨髓细胞形态分析符合急性白血病,过氧化物酶染色阴性,酯酶双染色AS-DNCE阴性,α-NBE阴性;流式细胞免疫分型结果可见约52%的原始细胞,伴明显的巨核细胞相关标记表达(cCD41+,CD61+部分,CD36+);染色体核型为46,XX,der(3)add(3)(p21)add(3)(q25),add(9)(q22),-13,+mar[4]/46,XX,del(13)(q12q22)[3]/46,XX[3];融合基因WT1过表达、MLL-PTD阳性、EVI1阳性。结论急性巨核细胞白血病具有独特且复杂的表型特点及遗传学特征。

髓系白血病中EVI1基因的表达及其临床意义

目的研究EVI1基因在成人急性髓系白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)中的表达及其临床意义。方法采用多重逆转录-聚合酶链反应(多重RT-PCR)技术分析2002年9月至2005年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的45例AML和43例CML骨髓单个核细胞中EVI1基因mRNA的表达,分析EVI1mRNA阳性白血病患者的临床特征及疗效。结果45例AML患者中有8例(17.8%)EVI1阳性,其中M11例、M23例、M54例。43例CML患者中有8例(18.6%)EVI1阳性,其中慢性期2例,占5.7%(2/35),加速期与急变期各3例,均占75.0%(3/4),加速期与急变期组的EVI1基因表达率高于慢性期组(P<0.01)。EVI1阳性的AML患者早期病死率高;EVI1基因阳性表达与CML白血病临床分期及预后相关。结论EVI1基因的高表达在髓系白血病的发生中,特别是在慢性粒细胞白血病慢性期向急性期转化中起重要作用。

急性髓系白血病患者EVI1基因表达的研究

目的建立EVI1基因不同转录本的定量表达检测方法，并研究其在各型急性髓系白血病（AML）中的表达模式，探讨EVI1基因表达与AML发生、预后的关系。方法检测AML患者69例，其中男37例，女32例，年龄10～70岁，中位年龄42岁；按照FAB分类标准，M2 16例，M3 36例，M4 8例。对照为9名健康人。采用荧光定量PCR（Taq Man探针）法检测EVIl基因各转录本的表达，以ABL基因作为内参，计算样本EVI1基因表达差异的倍数（EVI1／ABL），统计分析不同AML患者间EVI1基因的表达差异。结果EVI1基因的不同转录本在所有健康对照样品中均表达，而且不同转录本之间的表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）。转录本2和5（同一对引物检测）的表达水平最低，其次为转录本1，再次为转录本6，转录本3的表达水平最高。在健康对照样品中转录本2（5）、1、6及3的中位表达水平分别是阴性、0.005、0.050及0.512。AML患者EVI1基因的表达与融合基因AML-ETO及CBFB-MYH11的表达呈负相关。结论建立了一种稳定、快速、准确的EVI1基因表达的检测方法，而且EVI1基因的表达与AML的预后具有相关性。

Evi1基因阳性急性髓细胞白血病14例临床分析

目的：分析Evi1基因阳性急性髓细胞白血病（AML）患者的临床特征以及预后特点。方法：收集14例Evi1基因阳性AML患者的临床以及实验室资料,其中男、女各7例,中位年龄49（31~67）岁,初诊时白细胞计数（27.50±41.61）×109/L,血红蛋白（75.50±20.92）g/L,血小板计数（42.86±46.73）×109/L,骨髓原始细胞百分比（49.60±23.30）%。3例由骨髓增生异常综合征（MDS）转化而来,伴有病态造血的比例为42.86%（6/14）,表现为髓系形态异常。存在染色体异常的比例为22.22%（2/9）,其中伴有3号染色体异常1例,7号染色体缺失1例。结果：14例患者中12例进行诱导化疗,5例（41.67%）获得完全缓解,患者中位生存时间为122.5（10~562）d,12个月总体生存率为47.9%,18个月总体生存率为16.0%。结论：Evi1基因阳性AML常常伴有不同程度的病态造血,且与MDS转化有关,其治疗后的完全缓解率低,总体生存期短,预后差。

Evi1基因特异性siRNA对HEL细胞生长周期的影响

目的研究Evi1基因特异性小干扰RNA(siRNA)对人红白细胞白血病(HEL)细胞增殖及生长周期的影响。方法将HEL细胞分为三组:Evi1基因siRNA组(A组)、siRNA-co对照组(B组)、细胞空白对照组(C组)。转染48 h后,台盼蓝染色实验检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果与B、C组相比,A组HEL细胞活性下降[(97.13±1.58)%、(99.20±2.27)%vs.(26.05±2.49)%],细胞周期阻滞在G0/G1期[(39.61±1.32)%、(35.77±1.31)%vs.(79.07±1.43)%],S期细胞减少[(57.74±1.08)%(、57.36±1.38)%vs.(9.51±0.75)%],凋亡率增高[(9.78±1.14)%(、8.67±1.89)%vs.(49.94±1.75)%](P均<0.05);而B组和C组间各观察指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Evi1基因特异性siRNA可抑制HEL细胞增殖,促进细胞凋亡。

EVI1高表达AML的潜在治疗新靶点GNGT2

EVI1基因高表达的AML患者对化疗药物有耐药性,总体生存率低。寻找针对EVI1高表达AML的潜在治疗新靶点,对于提高这类病人存活率具有重要意义。本研究从GEO数据库获取EVI1高表达和低表达AML的表达谱,利用R软件Limma包进行差异表达分析,共筛选出713个差异基因。用STRING数据库和Cytoscape软件对差异基因进行蛋白互作网络构建并找出7个Hub基因。用Oncomine数据库对Hub基因进行临床生存分析,评估基因的预后价值。本研究发现了一个与AML预后相关的新基因GNGT2,它可能成为EVI1高表达AML治疗药物的重要靶点。

EVI1基因阳性的急性髓系白血病发病机制及潜在治疗靶点的研究进展

原癌基因EVI1在急性髓系白血病(AML)的发病中起到了重要作用,EVI1基因阳性的AML通常伴有EVI1异常高表达,患者预后不良。目前已经对EVI1阳性的AML的发病机制展开了研究,发现EVI1编码的锌指蛋白可以结合多种DNA,并且EVI1和AML细胞的凋亡、分化、增殖、化疗耐药等密切相关。此外,随着二代测序技术的普遍应用,发现了一系列EVI1阳性的AML相关的共突变和下游靶点。文章阐述了EVI1基因导致AML发病的机制和潜在的治疗靶点。