60Coγ射线对盐诱导激酶2的诱导表达作用

目的探讨电离辐射对盐诱导激酶2（SIK2）蛋白和mRNA的诱导表达作用及细胞周期相关性。方法HepG2细胞用60Coγ射线照射，蛋白质印迹法和实时定量PCR法分别检测细胞的SIK2蛋白和mRNA的表达，胸腺嘧啶双阻滞法同步化细胞，流式细胞术测定细胞周期的变化。结果HepG2细胞2Gy照射后4、6、10h，SIK2蛋白表达显著增加（t=3．00、3．98、4．17，P〈0．05）；10Gy大剂量照射后，SIK2蛋白表达增加的趋势与2Gy一致，但增加的幅度较前者低。2和10Gy照射后SIK2基因mRNA均在10h出现了增加（t=4．54、2．74，P〈0．05）。照后10h出现了细胞G：／M阻滞高峰。利用同步化细胞分析表明，细胞周期不同时相中SIK2mRNA的表达无明显差别。结论2和10Gy照射均能诱导SIK2蛋白表达增加，2Gy的作用更加明显。细胞照射后10h，SIK2mRNA的表达水平增加，但与辐射诱发细胞G2／M期阻滞引起不同时相细胞的分布变化无关。

辐射诱导表达载体pEgr-p16的构建及其体外蛋白表达的研究

目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质体介导的方法,将重组载体导入人HeLa细胞,采用免疫细胞化学和流式细胞术的方法检测照射转染后的HeLa细胞p16蛋白表达的变化。结果经全自动测序证明辐射诱导表达载体pEgrp16构建正确;稳定转染可见有明显的p16表达增强;5Gy以内p16蛋白表达呈剂量依赖性的增加,在2Gy照射后2hp16蛋白表达水平即开始增高,4h达到最高,12h趋于正常水平。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pEgrp16,在HeLa细胞中蛋白表达明显增强。

电离辐射诱导microRNA研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类长度为21~23 nt的单链非编码小RNA。在真核生物中miRNA主要通过与编码蛋白质基因的信使RNA（mRNA）配对结合,在转录后水平抑制基因表达。越来越多的证据表明,miRNA与氧化应激特别是辐射生物效应相关,miRNA有可能成为放射病治疗的潜在新靶点。本文概述电离辐射诱导miRNA的研究进展。

重组DNA技术中可诱导的基因表达调控系统

在重组DNA技术中,可诱导的基因表达调控系统可被用来调节目的基因的表达以达到基因功能研究、转基因动物研究、以及基因治疗研究等目的。该系统主要由诱导剂、可诱导的受体或转录因子、顺式作用元件以及载体系统四部分组成。本文以诱导剂为分类依据,叙述目前主要的6类可诱导的基因表达调控系统:类固醇激素受体诱导的基因表达调控系统、四环素诱导的基因表达调控系统、缺氧诱导的基因表达调控系统、高热诱导的基因表达调控系统、电离辐射诱导的基因表达调控系统和lac基因表达调控系统。