期刊文献+
共找到809篇文章
< 1 2 41 >
每页显示 20 50 100
Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
1
作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p e2f3
下载PDF
CircMYBL2 facilitates hepatocellular carcinoma progression by regulating E2F1 expression 被引量:2
2
作者 JUNZHE YI BINBIN LI +7 位作者 XIAOMIN YIN LINGRUI LIU CAILU SONG YING ZHAO MANBO CAI HAILIN TANG DONG CHEN NING LYU 《Oncology Research》 SCIE 2024年第6期1129-1139,共11页
Circular RNAs(circRNAs)have been recognized as pivotal regulators in tumorigenesis,yet the biological functions as well as molecular mechanisms of the majority of circRNAs in hepatocellular carcinoma(HCC)remain elusiv... Circular RNAs(circRNAs)have been recognized as pivotal regulators in tumorigenesis,yet the biological functions as well as molecular mechanisms of the majority of circRNAs in hepatocellular carcinoma(HCC)remain elusive.We sought to unveil the expression profile and biological role of circMYBL2 in HCC.Initial microarray analyses were conducted to probe the expression profile of circMYBL2 in HCC cells,and qRT‒PCR analysis was then performed in HCC cell lines and tissues,revealing significant upregulation of circMYBL2.Subsequent experiments were conducted to evaluate the biological function of circMYBL2 in HCC progression.Furthermore,bioinformatics analysis,qRT‒PCR analysis,luciferase reporter assays,and western blot analysis were employed to investigate the interplay among circMYBL2,miR-1205,and E2F1.CircMYBL2 was found to exhibit marked upregulation in tumor tissues as well as HCC cell lines.Elevated expression of circMYBL2 increased the proliferation and migration of HCC cells,whereas circMYBL2 knockdown elicited contrasting effects.Mechanistically,our results indicated that circMYBL2 promoted E2F1 expression and facilitated HCC progression by sponging miR-1205.Our findings revealed that circMYBL2 contributed to HCC progression through the circMYBL2/miR-1205/E2F1 axis,suggesting the potential of circMYBL2 as a novel target for HCC treatment or a prognostic biomarker for HCC. 展开更多
关键词 Circular RNas circMYBL2 miR-1205 e2f1 Hepatocellular carcinoma
下载PDF
miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖
3
作者 鲍祯 乔亚红 《河南医学研究》 CAS 2024年第17期3106-3113,共8页
目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点... 目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3’UTR区域的靶向关系。其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期。qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3’UTR 514-520位点,抑制E2F7表达。转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡。将A549细胞周期阻滞在G 1期。调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平。结论非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-30a-5p e2f7 基因表达 细胞周期 凋亡
下载PDF
Investigating the Genetic Bases of Growth Regulation by E2F3 in Dwarf Surf Clams Mulinia lateralis
4
作者 YAO Ruixing WANG Chen +3 位作者 KONG Lingling WANG Yujue BAO Zhenmin HU Xiaoli 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期1347-1358,共12页
Bivalve aquaculture plays a crucial role in the aquaculture industry due to the economic value of many bivalve species.Understanding the underlying genetic basis of bivalve growth regulation is essential for enhancing... Bivalve aquaculture plays a crucial role in the aquaculture industry due to the economic value of many bivalve species.Understanding the underlying genetic basis of bivalve growth regulation is essential for enhancing germplasm innovation and ensuring sustainable development of the industry.Though numerous candidate genes have been identified,their functional validation remains challenging.Fortunately,the dwarf surf clam(Mulinia lateralis)serves as a promising model organism for investigating genetic mechanisms underlying growth regulation in bivalves.The GWAS study in the Yesso scallop(Patinopecten yessoensis)has pinpointed the E2F3 gene as a key regulator of growth-related traits.However,the specific role of E2F3 in bivalve growth remains unclear.This study aimed to further confirm the regulatory function of the E2F3 gene in the dwarf surf clam through RNA interference experiments.Our results revealed several genes are associated with individual growth and development,including CTS7,HSP70B2,and PGLYRP3,as well as genes involved in lipid metabolism such as FABP2 and FASN.Functional enrichment analysis indicated that E2F3 primarily modulates critical processes like amino acid and lipid metabolism.These findings suggest that E2F3 likely regulates growth in the dwarf surf clam by influencing amino acid and lipid metabolism.Overall,this study advances our understanding on the function of E2F3 gene in growth regulation in bivalves,providing valuable insights for future research in this field. 展开更多
关键词 growth regulation e2f3 RNa interference experiment transcriptomic analysis dwarf surf clam Mulinia lateralis BIVaLVe
下载PDF
Impact of an oligosaccharide-based polymer on the metabolic profiles and microbial ecology of weanling pigs experimentally infected with a pathogenic E.coli
5
作者 Kwangwook Kim Cynthia Jinno +4 位作者 Xunde Li David Bravo Eric Cox Peng Ji Yanhong Liu 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期749-764,共16页
Background Our previous study has reported that supplementation of oligosaccharide-based polymer enhances gut health and disease resistance of pigs infected with enterotoxigenic E.coli(ETEC)F18 in a manner similar to ... Background Our previous study has reported that supplementation of oligosaccharide-based polymer enhances gut health and disease resistance of pigs infected with enterotoxigenic E.coli(ETEC)F18 in a manner similar to carbadox.The objective of this study was to investigate the impacts of oligosaccharide-based polymer or antibiotic on the host metabolic profiles and colon microbiota of weaned pigs experimentally infected with ETEC F18.Results Multivariate analysis highlighted the differences in the metabolic profiles of serum and colon digesta which were predominantly found between pigs supplemented with oligosaccharide-based polymer and antibiotic.The relative abundance of metabolic markers of immune responses and nutrient metabolisms,such as amino acids and carbohydrates,were significantly differentiated between the oligosaccharide-based polymer and antibiotic groups(q<0.2 and fold change>2.0).In addition,pigs in antibiotic had a reduced(P<0.05)relative abundance of Lachnospiraceae and Lactobacillaceae,whereas had greater(P<0.05)Clostridiaceae and Streptococcaceae in the colon digesta on d 11 post-inoculation(PI)compared with d 5 PI.Conclusions The impact of oligosaccharide-based polymer on the metabolic and microbial profiles of pigs is not fully understood,and further exploration is needed.However,current research suggest that various mechanisms are involved in the enhanced disease resistance and performance in ETEC-challenged pigs by supplementing this polymer. 展开更多
关键词 CaRBaDOX Colon microbiota enterotoxigenic e.coli f18 Metabolomics Oligosaccharide-based polymer Weaned pigs
下载PDF
膀胱癌细胞高表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)通过上调CD24抑制NK细胞的杀伤
6
作者 姚田军 周幸春 +2 位作者 杨帆 刘静 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期333-341,共9页
目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流... 目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流式细胞术检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。转录组测序分析膀胱癌细胞E2F3a过表达组与对照组之间的基因表达差异,免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织中E2F3a与差异基因在蛋白水平上表达的相关性。进一步利用染色质免疫沉淀(ChIP)、实时定量PCR、 Western blot法及小干扰RNA(siRNA)等方法探索膀胱癌细胞过表达E2F3a后对NK细胞活化及杀伤影响的具体机制。结果 在膀胱癌细胞中过表达E2F3a能显著抑制NK细胞的活化及杀伤。膀胱癌细胞过表达E2F3a可显著上调CD24基因的表达,膀胱癌组织中E2F3a和CD24蛋白的表达呈显著正相关。CHIP结果显示,E2F3a能够结合CD24的启动子区并促进CD24基因的转录。干涉E2F3a过表达膀胱癌细胞中的CD24表达后,发现膀胱癌细胞E2F3a过表达所介导的NK细胞活化及杀伤抑制被显著缓解。结论 在膀胱癌细胞中E2F3a可结合CD24的启动子区促进CD24基因的转录及CD24蛋白的表达。膀胱癌细胞E2F3a通过上调CD24表达来抑制NK细胞的活化及杀伤。 展开更多
关键词 膀胱癌 e2因子转录因子家族成员3a(e2f3a) 自然杀伤(NK)细胞 CD24 免疫抑制
下载PDF
人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响 被引量:2
7
作者 王建新 王琳茜 +3 位作者 朱波 时沛 孙义长 韩立 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期853-858,共6页
目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Trans... 目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell实验测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞迁移及侵袭的影响;Western blot测定不同浓度人参皂苷Rg3对E2F1、MMP-2、MMP-9、BCL-2、Bax表达的影响。结果80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞存活率与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞凋亡率与空白对照组比较明显增加,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞迁移数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞侵袭数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组E2F1 mRNA与E2F1蛋白表达量相较空白对照组明显减少且,呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞中MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达量与空白对照组比较明显降低,BCL-2与空白对照组比较明显升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3能降低胃癌SGC-7901细胞增殖能力,抑制细胞迁移及侵袭能力,同时还促进SGC-7901细胞凋亡,且具有浓度依赖性,其作用机制可能通过E2F1因子下调MMP-2、MMP-9、BCL-2表达,上调Bax表达有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 e2f1 胃癌 增殖 迁移和侵袭 凋亡
下载PDF
miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖 被引量:6
8
作者 林爱琴 卜文婕 +4 位作者 汪萍 高继光 杨建课 丁飞雨 李铁臣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期13-19,共7页
目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中... 目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01)。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 胃癌 miR-449a/b e2f1 细胞增殖
下载PDF
靶向E2F1的shRNA抑制眼内视网膜母细胞瘤生长 被引量:3
9
作者 王丰 马家烈 +3 位作者 李惠明 陈霞芳 王煜非 黄倩 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期587-591,共5页
视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象.根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜... 视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象.根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb-44和人肝癌细胞株SMMC-7721,通过荧光定量PCR检测E2F1表达水平的变化,PI(碘化丙锭)染色检测细胞周期各时相细胞数量以检测其对细胞周期的影响.根据筛选出的有效shRNA序列构建腺病毒载体并包装出腺病毒Ad-shE2F1,在裸鼠前房模型中,体外按50moi的感染系数感染稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人视网膜母细胞瘤细胞株48h后,收集细胞,将2×105细胞注射到裸鼠眼前房内,连续观察眼内肿瘤细胞生长情况并拍照记录.通过转染肿瘤细胞株检测E2F1转录水平,筛选到1个能明显抑制肿瘤细胞内E2F1表达的shRNA序列,并使细胞周期中S期细胞数减少.经Ad-shE2F1感染的RB肿瘤细胞与对照相比较,其在裸鼠眼前房内肿瘤生长减缓.结果说明,有效抑制hE2F1表达的shRNA具有抑制体内外人视网膜母细胞瘤生长的作用. 展开更多
关键词 e2f1 SHRNa 视网膜母细胞瘤
下载PDF
砷对角质形成细胞DNA合成及E2F1表达的影响 被引量:5
10
作者 毕新岭 顾军 米庆胜 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期9-11,共3页
目的探讨砷剂对角质形成细胞DNA合成和相关转录因子E2F1表达的影响。方法以体外培养的角质形成细胞株为对象,不同浓度砷剂处理后,采用3H-TdR实验检测角质形成细胞DNA合成,并用RT-PCR方法研究细胞E2F1表达情况。结果在0.5~16 nmol/L药... 目的探讨砷剂对角质形成细胞DNA合成和相关转录因子E2F1表达的影响。方法以体外培养的角质形成细胞株为对象,不同浓度砷剂处理后,采用3H-TdR实验检测角质形成细胞DNA合成,并用RT-PCR方法研究细胞E2F1表达情况。结果在0.5~16 nmol/L药物浓度范围内,DNA合成加速,促进细胞增殖。但随着砷剂浓度继续升高,3H-TdR掺入量降低,逐渐回到基线水平;RT-PCR结果显示:DNA合成加速的HaCaT细胞组,伴有E2F1mRNA水平的上调。结论一定浓度范围内的砷剂可促进角质形成细胞株HaCaT细胞的DNA合成加速,增强转录因子E2F1的表达,可能是砷相关皮肤病的病理机制之一。 展开更多
关键词 砷剂 角质形成细胞 细胞增殖 e2f1
下载PDF
E2F1的siRNA真核表达载体转染对胆管癌细胞的作用 被引量:3
11
作者 汪昕 唐滔 +2 位作者 陈波 苏瑛 邹声泉 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第2期130-133,共4页
目的探讨E2F1蛋白信号的转导通路对胆管癌细胞凋亡的影响中的作用。方法根据E2F1基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入U6启动子下游,克隆到真核表达载体pGsensil中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。采用脂质体介导法将... 目的探讨E2F1蛋白信号的转导通路对胆管癌细胞凋亡的影响中的作用。方法根据E2F1基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入U6启动子下游,克隆到真核表达载体pGsensil中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。采用脂质体介导法将构建好的4个siRNA表达载体分别转染于QBC939细胞中;以RT-PCR检测E2F1基因在转染前后的表达,流式细胞术检测转染后对细胞凋亡率的影响。结果重组质粒酶切后呈线性化,酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。转染48h后,4个siRNA表达载体均抑制了E2F1 mRNA的表达,沉默E2F1基因后细胞的凋亡率显著增加。结论E2F1的siRNA真核表达载体转染QBC939细胞后,该表达载体具有抑制E2F1基因表达、促进细胞凋亡的功能,可以用于后续胆管癌的实验研究。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 转录因子 e2f1 siRNa 真核表达载体
下载PDF
逆转录病毒载体介导的RNAi对MCF-7细胞E2F1 mRNA表达的影响 被引量:3
12
作者 黄慧敏 李惠翔 +3 位作者 张红 姜国忠 高冬玲 张岚 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第5期804-806,共3页
目的:采用逆转录病毒载体介导的RNAi技术靶向抑制乳癌细胞MCF-7 E2F1 mRNA的表达.方法:构建重组的表达E2F1siRNA的逆转录病毒载体.将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中,共分9组:空载体组、未转染组和7个转染组.筛选出稳定转染的单克隆... 目的:采用逆转录病毒载体介导的RNAi技术靶向抑制乳癌细胞MCF-7 E2F1 mRNA的表达.方法:构建重组的表达E2F1siRNA的逆转录病毒载体.将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中,共分9组:空载体组、未转染组和7个转染组.筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养.应用RT-PCR方法检测转染细胞和未转染细胞E2F1 mRNA的表达情况.结果:筛选出7个转染逆转录病毒载体的单克隆,命名为SIR1~7,其E2F1 mRNA表达量分别为0.857±0.015,0.850±0.037,0.907±0.029,0.878±0.021,0.900±0.021,0.912±0.031,0.913±0.023;转染空载体和未转染的细胞E2F1 mRNA表达量分别为1.563±0.031和1.544±0.018;SIR1~7 E2F1 mR-NA表达量低于空载体及未转染组,差异有统计学意义(P<0.05),SIR1~7 E2F1 mRNA表达均受到抑制;SIR1~7之间以及空载体转染与未转染组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:逆转录病毒载体介导的RNAi技术特异、高效抑制靶基因的表达,为肿瘤基因治疗提供了新的思路和工具. 展开更多
关键词 转录病毒载体 RNaI e2f1 抑制 MCf-7细胞
下载PDF
miRNAs调控E2F5在癌症发生发展中的作用及其机制研究进展 被引量:3
13
作者 李婷婷 朱心怡 +1 位作者 李思浓 邵阳光 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第2期367-373,共7页
E2F转录因子5(E2F transcription factor 5,E2F5)是腺病毒E2启动子结合因子(adenovirus E2 promoter binding factor,E2F)转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种重要细胞过程。由于E2F5在细胞周期调控中发挥重要作用,因此... E2F转录因子5(E2F transcription factor 5,E2F5)是腺病毒E2启动子结合因子(adenovirus E2 promoter binding factor,E2F)转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种重要细胞过程。由于E2F5在细胞周期调控中发挥重要作用,因此它与多种癌症的发生,发展和预后密切相关。近来随着对微小RNA(microRNAs,miRNAs)研究的进展,发现多种miRNAs通过靶向E2F5来影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭和耐药。本文结合最新研究报道,对E2F5在癌症中的研究进展,特别是不同肿瘤中miRNAs与E2F5之间的关系作一综述,为制定癌症的治疗策略提供新的思路。 展开更多
关键词 e2f5 e2f转录因子 MIRNaS 癌症
下载PDF
MicroRNA-218下调肝细胞癌中的E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究 被引量:7
14
作者 王涛 马思聪 +6 位作者 戚星星 汤晓寅 崔丹 王智 池嘉昌 李萍 翟博 《肝脏》 2016年第3期179-182,共4页
目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印... 目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT生长曲线表明,当miR-218过度表达时(Huh7中的miR-218 P=0.001;在MHCC-97中的miR-218 P=0.013)细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实,转染了miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01),荧光酶报告基因含有E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明E2F2是miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比,转染了miR-218模拟物的Huh7和MHCC-97细胞株中的E2F2的相对mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论 miR-218通过直接作用于E2F2基因的第3′非翻译区调节E2F2的表达,从而抑制HCC细胞增殖。 展开更多
关键词 MicroRNa-218 肝细胞癌 e2f2基因 细胞增殖
下载PDF
膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析 被引量:3
15
作者 任海林 孙岩 +1 位作者 李世斌 韩瑞发 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第20期23-25,共3页
目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western ... 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 e2f3 miR-17-5p miR-20a
下载PDF
siRNA沉默E2F3基因对人膀胱癌细胞的增殖抑制作用 被引量:2
16
作者 洪泉 张文岚 +3 位作者 赵军 傅耀文 胡海龙 韩瑞发 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期523-526,608,F0003,共6页
目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/... 目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/Neo系统,重组构建E2F3siRNA的RNAi质粒,以质粒转染DH5α菌株筛选得到稳定表达siRNA的细胞,转染5637细胞E2F3基因沉默,RT-PCR及Western blotting检测E2F3表达,流式细胞术检测5637细胞周期,采用Annexin-V/PS双染法检测细胞凋亡率。结果:RT-PCR及Western blotting检测干扰后5637细胞E2F3基因表达抑制,3条干扰序列对5637细胞周期抑制且G1期细胞比例增高,与阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.05和P<0.001);细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.001)。结论:siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌5637细胞具有明显增殖抑制和促进凋亡的作用。 展开更多
关键词 RNa干扰 小分子干扰 e2f3 膀胱肿瘤 细胞增殖抑制
下载PDF
P14ARF和E2F1在结直肠肿瘤中的表达及意义 被引量:3
17
作者 沈勤 陈德滇 +2 位作者 高倩 周晓军 王芳 《医学研究生学报》 CAS 2009年第1期16-19,23,114,共6页
目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为... 目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为手术切缘组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织,共6组的P14ARF、E2F1蛋白表达情况,采用半定量和图像分析定量测定含量。结果:①结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织P14ARF、E2F1的表达阳性率逐渐减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。②P14ARF、E2F1在伴有淋巴结转移、肝转移的癌组织内表达阳性率与不伴转移的癌组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。③P14ARF、E2F1蛋白表达在不同临床病理特征的关系之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①P14ARF、E2F1具有抑制癌发生作用,蛋白异常仅是结直肠癌癌变早期事件,与淋巴结、远处器官转移等侵袭活动无关,与临床病理特征无关。②P14ARF、E2F1相互协同抑制细胞生长和诱导凋亡,因而可以作为治疗结直肠癌的新靶点。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 P14aRf e2f1 抑制肿瘤发生
下载PDF
CDK4-pRB-E2F1通路是Aβ_(1-40)诱导皮层神经元凋亡的可能途径 被引量:4
18
作者 陈丽敏 陈晓春 +3 位作者 林挺岩 朱元贵 赵朝晖 周宜灿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1034-1038,共5页
目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 ... 目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 4 (CDK4 )、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (pRB)水平 ;RT -PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计检测半胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶 3(caspase - 3)活力 ;观察在Aβ1-40 诱导凋亡过程中是否伴随上述指标的变化。结果 :①CDK4、磷酸化pRB水平在Aβ1-40 作用后 2 - 4h显著升高 ;②Aβ1-40 孵育 3h后皮层神经元E2F1基因表达上调 ;③Aβ1-40 作用 12 - 2 4h后caspase- 3活力明显升高。结论 :CDK4 -pRB -E2F1信号转导通路可能在Aβ1-40 诱导的大鼠皮层神经元凋亡中起主要作用。 展开更多
关键词 淀粉样β肽 CDK4—pRB—e2f1通路 细胞凋亡 神经元 大鼠
下载PDF
辛伐他汀抑制K562细胞MAPK1、cyclin D1、E2F1、c-myc mRNA的表达 被引量:1
19
作者 杨永长 传良敏 +4 位作者 黄文芳 刘华 曾娅莉 胥国强 刘文 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期241-244,共4页
目的探讨辛伐他汀抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的分子机制。方法不同浓度辛伐他汀作用K562细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,RT-PCR测定MAPK1、cyclinD1、E2F1、c-myc mRNA表达。结果辛伐他汀能... 目的探讨辛伐他汀抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的分子机制。方法不同浓度辛伐他汀作用K562细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,RT-PCR测定MAPK1、cyclinD1、E2F1、c-myc mRNA表达。结果辛伐他汀能抑制K562细胞增殖,增殖抑制效应随药物浓度增加和作用时间延长而增大(P<0.05)。与对照组比较,5、10、20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞48h和72h后能明显增加细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.05),表明辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡。10、20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞72h后,MAPK1、cyclinD1、E2F1、c-mycmRNA表达水平明显降低。结论辛伐他汀可能通过调节Ras-MAPK途径抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 辛伐他汀 K562细胞 MaPK1 CYCLIN D1 e2f1 C-MYC
下载PDF
尿脱落细胞E2F3 mRNA检测在膀胱癌诊断中的价值 被引量:2
20
作者 李家兵 李锦秀 +1 位作者 姚惠 张盼 《川北医学院学报》 CAS 2009年第2期132-134,共3页
目的探讨检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测58例膀胱癌患者,15例泌尿外科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿液脱落细胞E2F3mRNA的表达,并与尿脱落细胞学检查相对照。结果用... 目的探讨检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测58例膀胱癌患者,15例泌尿外科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿液脱落细胞E2F3mRNA的表达,并与尿脱落细胞学检查相对照。结果用RT-PCR法检测尿脱落细胞E2F3 mRNA用于诊断膀胱癌的敏感性为81.03%,高于尿脱落细胞学检测(41.38%)(χ2=19.206,p<0.05),两种方法诊断膀胱癌的特异性无统计学差异(p>0.05)。不同分化程度及不同临床分期膀胱癌患者之间尿脱落细胞E2F3 mRNA的阳性表达率的差异无统计学意义(χ2=0.517,p>0.05;χ2=0.132,p<0.988)。结论RT-PCR法检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的方法可以作为诊断膀胱癌的无创性方法。 展开更多
关键词 膀胱癌 e2f3 逆转录聚合酶链反应 脱落细胞
下载PDF
上一页 1 2 41 下一页 到第
使用帮助 返回顶部