5-氮-2'-脱氧胞苷对肺癌A549细胞凋亡及范可尼贫血互补基团F表达的影响

目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因范可尼贫血互补基团F(FANCF)基因表达的影响。方法以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测FANCF基因甲基化状态;以荧光定量PCR检测FANCF mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,细胞增殖抑制率(CPIR)随5-Aza-CdR浓度和作用时间的不同而变化,呈剂量依赖性(P<0.005)和时间依赖性(P<0.001);药物处理后FANCF mRNA表达明显升高,细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(r=0.998,P<0.05)。结论 5-Aza-CdR能使FANCF基因去甲基化,促进细胞凋亡,增强抑癌功能,但同时有增加顺铂耐药的风险。

虎源、小熊猫源副流感病毒5型的鉴定及F基因遗传进化分析

为探究副流感病毒5型（PIV5）的遗传变异状况，对PIV5的预防、诊断、治疗提供依据，于20142016年，收集疑似PIV5感染病例样品14份（小熊猫4份，非洲狮4份，东北虎1份，华南虎1份，环尾狐猴4份）做相应处理，接种VerO细胞并通过PcR检测，对检测到的PIV5的F基因进行扩增，连接目的片段至pMD19-T Simple Vector，测序并做序列分析。结果成功从华南虎、东北虎和小熊猫标本中分离出3株PIV5，分别命名为PIV5-SR，P1V5ST，ZJQ221。3株病毒接种到Vero细胞上，均能使Vero细胞出现空泡、拉网的现象。用相关软件分析该病毒F基因序列发现，3株病毒的F基因分别有5，6，4处突变；建立遗传进化树表明，3株病毒处同一分支，均与韩国犬源1168—1分离株亲缘关系最近。

热休克蛋白90α对静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨局部应用外源性热休克蛋白90α(以下简称HSP90α)功能基因"F-5",对大鼠静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤模型皮瓣成活率的影响。方法通过携带pet15b-F-5重组质粒的构建、大肠杆菌细胞培养扩增,以及HSP90α"F-5"基因表达蛋白的纯化,获得外源性HSP90α;以大鼠腹壁浅血管束为蒂设计轴型皮瓣。将大鼠随机分为3组(每组20只):A组为空白对照组;B组为HSP90α预处理组;C组为HSP90α治疗组。每组又分为2个亚组,根据再灌注时间点分为缺血6 h亚组和缺血8 h亚组。模型建立过程中采用激光多普勒血流仪检测皮瓣血流灌注量,术后每天观察皮瓣的颜色、皮纹、质地、毛发生长、毛细血管充盈试验、针刺出血情况等;比较3组皮瓣的成活率、病理组织学变化以及微血管密度等指标。结果 B组在静脉阻断过程中和再灌注后,皮瓣的血流灌注量较其他2组高;术后7 d,A组皮瓣成活率为(19.3±3.8)%,B组为(85.6±17.6)%,C组为(78.9±20.5)%;B组皮瓣的成活率最高(P<0.05)。术后1、3、7、10、14 d观察,B组及C组皮瓣的炎性细胞浸润较A组明显减少,血管内较少有血栓形成,成纤维细胞及血管内皮细胞增殖显著,新生血管密度增加明显;且缺血6 h亚组的参数均优于8 h亚组。结论建立轴型皮瓣静脉淤血型缺血再灌注损伤大鼠模型,将阻断静脉的时间控制在6 h为宜;外源性HSP90α"F-5"表达蛋白可增加皮瓣血流再灌注量,降低细胞渗透,促进新血管形成,从而对静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤有较好的治疗作用,而且提前干预的效果更优。