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小麦Ta-SKP2A克隆及其酵母双杂交诱饵载体的构建 被引量:3
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作者 许媛 李铃仙 +3 位作者 魏春茹 魏新燕 于秀梅 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期17-22,共6页
SKP2A是调控细胞周期转录因子降解的F-box蛋白。为研究该蛋白在小麦-叶锈菌互作过程的作用,首先克隆获得中国春小麦Ta-SKP2A全长序列,然后将其与pGBKT7载体连接,转入酵母Y187感受态细胞中,构建酵母诱饵表达载体,并检测其表达产物对酵母... SKP2A是调控细胞周期转录因子降解的F-box蛋白。为研究该蛋白在小麦-叶锈菌互作过程的作用,首先克隆获得中国春小麦Ta-SKP2A全长序列,然后将其与pGBKT7载体连接,转入酵母Y187感受态细胞中,构建酵母诱饵表达载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性和自激活效应。结果表明,Ta-SKP2A编码区序列长度为1 146 bp,其ORF区编码一条由382个氨基酸组成的多肽。在ORF区两侧连接酶切位点(EcoRⅠ和Bam HⅠ),并将其与载体pGBKT7连接,成功构建了包含目的基因的诱饵载体pGBKT7-Ta-SKP2A,且含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,其过夜培养物OD600>0.8,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性。含重组诱饵质粒的酵母菌株在二缺、三缺及四缺营养缺陷平板上不能生长,表明诱饵质粒的表达产物不能自激活报告基因。成功构建了一个包含Ta-SKP2A的重组诱饵质粒,为深入筛选与其互作的靶蛋白,研究其在小麦-叶锈菌互作体系中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 f-box基因SKP2a 诱饵载体构建 毒性检测 自激活效应
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F-box gene FOA2 regulates GA-and ABA-mediated seed germination in Arabidopsis 被引量:3
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作者 Reqing Hei Dashi Yu +5 位作者 Xinmei Li Guifang Duan Yunxuan Zhang Dongying Tang Xiaoying Zhao Xuanming Liu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2016年第11期1192-1194,共3页
Dear Editor, GA and ABA antagonize each other in controlling seed germination, but the molecular mechanism is not fully understood. The F-box proteins act as the most important SCF (SKP1, cullin/CDC53, F-box protein... Dear Editor, GA and ABA antagonize each other in controlling seed germination, but the molecular mechanism is not fully understood. The F-box proteins act as the most important SCF (SKP1, cullin/CDC53, F-box protein) complex subunit of the ubiquitin (Ub)- 26S proteasome system, mediate diverse physiological processes ranging from hormonal signaling cascades to environmental stress responses (Santner and Estelle, 2010). We previously demonstrated that FOAl (F-box overexpressed/oppressed ABA signaling) is an ABA signaling-related gene, 展开更多
关键词 and ABA mediated seed germination in Arabidopsis FOA f-box gene FOA2 regulates GA FIGURE gene
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