牛呼吸道合胞体病毒G和F蛋白的生物学功能

牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus, BRSV)是一种在世界范围内引起牛呼吸道疾病的病毒性病因之一,主要引起1岁龄以下犊牛的严重下呼吸道感染。BRSV共编码9种结构蛋白,其中附着蛋白(G蛋白)和融合蛋白(F蛋白)是BRSV表面主要的包膜糖蛋白,参与病毒吸附、融合宿主细胞的过程。G和F蛋白含多种识别表位,能够刺激机体产生中和抗体反应,常常是牛呼吸道合胞体病(bovine respiratory syncytial disease, BRSD)疫苗开发所关注的重点。探究G和F蛋白在BRSV侵染中的作用机理对于病毒致病机理分析、疫苗开发具有重要意义。本文旨在对牛呼吸道合胞体病毒G和F蛋白的结构功能及有关疫苗的开发加以综述,以期为BRSV疫苗的研制和BRSD的防控提供参考。

前列腺癌组织中硒结合蛋白1、硒蛋白F表达与患者临床病理特征及预后的关系研究

目的研究前列腺癌(PC)组织中硒结合蛋白1(SELENBP1)、硒蛋白F(SELENOF)表达与患者临床病理特征关系和预后的关系。方法选取2017年1月至2020年1月邯郸市中心医院诊治的104例PC患者作为研究对象。检测PC患者癌组织和癌旁组织中SELENBP1、SELENOF表达水平,并分析两者与PC患者临床病理特征和预后的关系。采用多因素COX回归分析影响PC患者预后的因素。结果PC患者癌组织中SELENBP1、SELENOF阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。不同Gleason评分、TNM分期及术前前列腺特异性抗原(PSA)水平的PC患者癌组织中SELENBP1、SELENOF阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。SELENBP1阴性患者、SELENOF阴性患者3年无进展生存率分别低于SELENBP1阳性患者、SELENOF阳性患者(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、Gleason评分>7分、SELENBP1阴性、SELENOF阴性是影响PC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论PC患者癌组织中SELENBP1、SELENOF表达降低,且两者与PC患者不良临床病理特征相关,可导致PC患者不良预后。

RhoF介导的Th17极化在急性胰腺炎发生中的作用及机制

目的探讨Rho相关GTP结合蛋白F(RhoF)介导的Th17极化在重度急性胰腺炎(SAP)发生中的作用及机制研究。方法将RhoF转基因小鼠随机分为3组:对照组(n=10)、SAP组(n=10)和SAP+Y-27632组(n=10)。另将WT小鼠随机分为3组:对照组(n=10)、SAP组(n=10)和SAP+Y-27632组(n=10)。除对照组外,其他组建立SAP模型。SAP+Y-27632组在模型建立后,通过尾静脉输注Y-27632。分离小鼠血液样本中的T细胞,用于RhoF、p-MYPT1蛋白检测和ROCK活性测定,并采用流式细胞仪分析产生IL-17的淋巴CD4+T细胞的百分比。结果与对照组相比,SAP组小鼠T细胞中RhoF、p-MYPT1表达量增加(P<0.01),并且RhoF的水平与p-MYPT1的水平密切相关(P<0.05)。与WT组相比,RhoF组小鼠T细胞的RhoF蛋白水平的表达增加约30%,并且CD4+T细胞自发产生IL-17的水平显著增加(P<0.01)。与WT小鼠相比,RhoF转基因小鼠胰腺损伤的组织学评分,T细胞的RhoF、p-MYPT1表达量,IL-17+T细胞数量和血清IL-17水平明显增加(P<0.05)。SAP+Y-27632组的组织学评分,T细胞的RhoF、p-MYPT1表达量,IL-17+T细胞数量和血清IL-17水平显著低于SAP组(P<0.05)。结论RhoF/ROCK信号通路介导的Th17细胞极化参与SAP的发病机制。

着丝粒蛋白F、miR-1-3p在中晚期胃癌患者血清中的表达及与预后的相关性

目的探讨着丝粒蛋白F(CENPF)、miRNA-1-3p(miR-1-3p)在中晚期胃癌患者血清中的表达及与预后的相关性。方法选取2019年3月至2020年3月我院收治的60例中晚期胃癌患者即为研究组,同期在我院体检中心体检健康的志愿者60例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组血清CENPF、miR-1-3p的表达水平;采用Pearson法分析血清中CENPF、miR-1-3p水平的相关性;采用Kaplan-Meier法分析CENPF、miR-1-3p表达与中晚期胃癌患者预后的关系;COX回归分析影响中晚期胃癌患者预后的危险因素。结果与对照组比较,研究组患者CENPF水平明显升高,miR-1-3p水平明显降低(P<0.05)。相关性分析结果显示,中晚期胃癌患者血清中CENPF和miR-1-3p水平呈负相关(r=-0.650,P<0.001)。不同TNM分期和淋巴结转移状况下CENPF、miR-1-3p水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。CENPF高表达组患者3年生存率63.33%(19/30)显著低于低表达组93.33%(28/30)(χ^(2)=7.954,P<0.001);miR-1-3p高表达组患者3年生存率96.67%(29/30)显著高于低表达组60.00%(18/30)(χ^(2)=11.882,P=0.001)。多因素COX回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移、CENPF、miR-1-3p表达是影响中晚期胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论中晚期胃癌患者血清中CENPF水平显著升高,miR-1-3p水平显著降低,二者与预后有关。

FBXW7/MCM7信号轴介导肝癌细胞增殖的研究

目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7的表达;采用Western blot检测FBXW7对MCM7蛋白表达的影响,CCK-8实验检测肝癌细胞的增殖活性,EdU细胞增殖检测分析肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验分析肝癌细胞的集落形成能力。结果 在MHCC-97H细胞中,FBXW7与MCM7存在互作关系:过表达FBXW7抑制了MCM7的蛋白表达水平、并抑制了肝癌MHCC-97H细胞的增殖(P <0.05),在过表达FBXW7的基础上增加MCM7的表达后,细胞增殖能力提高(P <0.05);下调FBXW7后细胞中MCM7表达增加、细胞增殖能力增强(P <0.05),而下调FBXW7的同时干扰MCM7表达后,细胞增殖能力减弱(P <0.05)。结论 FBXW7能抑制肝癌细胞增殖,其机制与负向调节肝癌细胞中促癌蛋白MCM7的表达水平有关。

^(18)F-FAPI-42的自动化合成及小动物PET/CT显像研究

成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在多数上皮来源恶性肿瘤中高度表达,FAP抑制剂(FAPI)经核素标记后已用于肿瘤的早期诊断。为实现PET显像剂^(18)F-FAPI-42的自动化合成并进行质量控制,本研究基于Allinone合成器及其配套的空白试剂盒,通过一锅反应自动化制备^(18)F-FAPI-42,并在荷胶质母细胞瘤U87-MG模型鼠行小动物PET/CT(positron emission tomography/computed tomography)动态显像对其进行评价。结果显示,^(18)F-FAPI-42的自动化合成时间在60 min以内,放化产率为(15.8±3.2)%(n=10,未经衰变校正),放化纯度>95%,比活度14~52 GBq/μmol。小动物PET/CT动态显像显示,^(18)F-FAPI-42对肿瘤显影清晰,放射性滞留时间长,具有较高的肿瘤与肌肉摄取比,活度与时间曲线显示其主要通过肾脏排泄。以上结果表明,Allinone合成器能够稳定高效地合成符合药物质控标准的^(18)F-FAPI-42,所得产品质量满足临床要求。该合成方法可为NOTA类修饰化合物的^(18)F标记提供参考和借鉴。

犬瘟热病毒F蛋白融合信号肽单克隆抗体的制备及其表位的鉴定

为制备犬瘟热病毒(CDV)F蛋白融合信号肽(FSP)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达系统表达CDV HLJ1-13株重组FSP蛋白(rFSP)。将其免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选到1株能够稳定分泌抗FSP蛋白MAb的杂交瘤细胞株G8D6E3E5,亚类鉴定结果显示该株MAb重链为Ig G2a型,轻链为κ型。构建一系列表达部分重叠的重组FSP片段,经western blot鉴定该株MAb识别的抗原区域为aa1~aa55,通过合成一系列重叠多肽,经ELISA进一步鉴定该株MAb识别的抗原表位为^(21)QQHSTRSTET^(30)。采用western blot检测该株MAb与r FSP的反应原性;采用间接免疫荧光试验(IFA)检测该株MAb与天然FSP的反应原性。Western blot结果显示,CDV Snyder Hill和HLJ1-13株r FSP蛋白样品在34 ku左右均出现特异性条带;IFA结果显示,感染CDV Snyder Hill株48 h后的vero细胞出现红色荧光。以上结果表明,该株MAb既能够与原核表达的CDV Snyder Hill和HLJ1-13株的r FSP蛋白反应,也能够与天然表达的CDV Snyder Hill株FSP蛋白反应。上述研究结果为CDV的检测以及FSP生物学功能的研究奠定了坚实基础。

表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建

目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表达载体pcDNA3.1(+)上插入具有不同突变位点的HRSV F蛋白编码序列,利用融合前F蛋白单克隆抗体AM14和D25筛选HRSV F蛋白突变体;通过同源重组将筛选出的前构象F蛋白突变体编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,在HEK293细胞中进行重组病毒的包装和扩增,经氯化铯密度梯度法获得纯化的重组病毒;应用夹心ELISA法和Western blot鉴定F蛋白的表达及构象。结果通过AM14和D25单克隆抗体筛选出了2个稳定维持在融和前构象的HRSV F蛋白序列(SC-3M和SC-5M)。将SC-3M和SC-5M编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,对两种重组人5型腺病毒(pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M)和空载体(pAd5-vector)纯化,病毒滴度分别达到2.016×10^(10),2.52×10^(10)和2.948×10^(11)IU/mL。pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M感染HEK293后均能高效表达HRSV融合前构象的F蛋白并维持三聚体结构,且pAd5-SC-5M感染细胞中F蛋白表达量高于pAd5-SC-3M。结论成功在体外传代细胞中获得可高效表达A型HRSV融合前F蛋白的重组人5型腺病毒,为进一步通过动物试验评价该HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。

FBXL2和Dkk-1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的研究结直肠癌(CRC)组织中F-盒富含亮氨酸的重复蛋白2(FBXL2)、Wnt信号通路抑制剂1(Dkk-1)的表达及临床意义。方法选取2017年10月—2019年5月保定市第一中心医院普通外科诊治CRC患者75例作为研究对象。应用荧光定量PCR及免疫组化检测CRC癌组织和癌旁组织中FBXL2、Dkk-1 mRNA及蛋白表达水平。比较不同临床病理特征CRC患者癌组织中FBXL2、Dkk-1蛋白表达差异。Kaplan-Meier生存分析(Log-rank检验)FBXL2、Dkk-1蛋白表达与CRC患者生存预后的关系。多因素COX回归分析影响CRC患者生存预后的危险因素。结果CRC癌组织中FBXL2、Dkk-1 mRNA表达水平低于癌旁组织(t=25.053、34.053,P均<0.001)。CRC癌组织中FBXL2、Dkk-1蛋白表达阳性率低于癌旁组织(χ^(2)=58.134、51.042,P均<0.001)。CRC癌组织中FBXL2与Dkk-1蛋白表达呈显著正相关(r s=0.714,P<0.001)。TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结转移阴性CRC患者癌组织中FBXL2、Dkk-1蛋白表达阳性率高于TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移阳性患者,差异均有统计学意义(χ^(2)/P=7.588/0.006、5.220/0.022)。FBXL2阴性表达组患者3年累积生存率明显低于阳性表达组患者(χ^(2)=5.991,P=0.014);Dkk-1阴性表达组患者3年累积生存率明显低于阳性表达组患者(χ^(2)=8.058,P=0.005)。肿瘤分期Ⅲ期、淋巴结转移阳性、FBXL2阴性表达、Dkk-1阴性表达是影响CRC患者预后的独立危险因素[HR(95%CI)=1.613(1.223~2.126),1.917(1.314~2.799),1.837(1.229~2.745),1.738(1.246~2.426),P均<0.001]。结论CRC癌组织中FBXL2、Dkk-1表达降低,两者表达与CRC肿瘤分期及淋巴结转移有关,是评估CRC患者生存预后新的肿瘤标志物。

着丝粒蛋白F在胶质瘤组织中的表达及预后分析

目的探究着丝粒蛋白F(CENPF)在脑胶质瘤中的表达及预后分析。方法通过对癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤图谱(CGGA)数据库进行生物信息分析,比较CENPF在低级别胶质瘤(LGG)、胶质母细胞瘤(GBM)和癌旁组织中的表达差异以及与患者预后之间的关系,并在数据库中对CENPF mRNA与P53、Ki-67以及IDH-1分型进行相关性分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CENPF mRNA表达水平,免疫组织化学法和Western blotting法检测癌旁组织和不同级别胶质瘤组织中CENPF表达水平。多因素COX分析CENPF与临床病理参数及患者预后的关系,并绘制Kaplan-Meier生存曲线。利用TCGA数据库对CENPF进行KEGG富集分析,探索该基因在胶质瘤中发展中可能参与的信号通路。结果CENPF表达水平与胶质瘤WHO分级呈正相关,且CENPF高表达的胶质瘤患者生存时间短于低表达患者。数据库相关性分析显示CENPF mRNA与P53、Ki-67以及IDH-1野生型呈正相关。qRT-PCR实验结果表明CENPF mRNA在胶质瘤组织中表达增高,免疫组织化学和Western blotting实验结果表明CENPF表达与WHO等级呈正相关。临床病理参数分析表明在胶质瘤组织中CENPF表达情况与胶质瘤WHO分级(P=0.002)、P53(P=0.016)、Ki-67(P<0.001)表达有关。多因素COX分析显示WHO分级(P<0.001)、CENPF表达(P=0.008)、P53(P=0.003)和Ki-67(P=0.006)表达为胶质瘤患者预后不良的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线表明CENPF高表达的胶质瘤患者生存时间短于低表达患者(P<0.0001)。KEGG富集分析显示CENPF在参与细胞周期、DNA复制、WNT/beta-catenin、mTORC1等通路中具有显著富集。结论CENPF在胶质瘤组织中表达增高,其表达与WHO分级、Ki-67以及P53分型相关;CENPF可作为判断胶质瘤患者预后的生物标志物。

FBXO38通过PI3K-Akt信号通路调控眼部黑色素瘤增殖

目的·研究F-box蛋白38(F-box only protein 38,FBXO38)对眼部黑色素瘤增殖的作用以及潜在的调控通路。方法·使用FBXO38短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和FBXO38过表达质粒构建FBXO38敲低以及过表达的人皮肤黑色素瘤A375和葡萄膜黑色素瘤OMM2.3细胞系,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western blotting在转录和蛋白水平验证FBXO38的敲低和过表达效率。通过克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验,探究FBXO38对黑色素瘤细胞增殖的影响。使用肿瘤基因组图谱计划数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA),分析FBXO38高表达和低表达组中的差异表达基因,并进行京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集,揭示与FBXO38相关的信号通路。进一步通过CCK8细胞增殖实验检测信号通路抑制剂对不同FBXO38表达量细胞的抑制率。同时通过qRT-PCR和Western blotting,验证在敲低FBXO38之后该通路是否激活。结果·qRT-PCR和Western blotting验证A375和OMM2.3细胞系中的FBXO38的mRNA及蛋白质表达水平,发现与对照组相比敲低组的FBXO38表达水平下降,与野生型相比过表达组的FBXO38的表达水平提高(P<0.05)。克隆形成实验、BrdU免疫荧光染色和CCK8细胞增殖实验显示,敲低FBXO38显著增强A375和OMM2.3细胞的增殖能力(P<0.05),反之过表达FBXO38抑制A375和OMM2.3细胞增殖(P<0.05)。KEGG通路富集分析显示,在皮肤黑色素瘤和葡萄膜黑色素瘤中,FBXO38的表达影响磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)通路激活。与对照组相比,PI3K抑制剂LY294002和mTOR1抑制剂Everolimus对FBXO38敲低组的抑制率显著提升(P<0.05),对FBXO38过表达组的抑制率则显著下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,敲低FBXO38之后,与PI3K-Akt通路相关的PTEN、P21和P53蛋白水平下降,而MDM2蛋白水平上升。qRT-PCR结果显示在FBXO38敲低细胞中P53转录水平显著下降(P<0.05),而MDM2转录水平显著上升(P<0.05)。结论·FBXO38通过PI3K-Akt信号通路参与调控眼部黑色素瘤细胞的增殖。

FTO调控FBXW7的m6A甲基化修饰促进宫颈癌放化疗抵抗的机制研究

目的探讨肥胖相关蛋白(obesity-associated protein,FTO)和F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)在宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)放化疗抵抗中的作用.方法实时荧光聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western印迹检测CSCC细胞中FTO和FBXW7表达.TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据分析FTO和FBXW7表达及相关性.在CSCC细胞中过表达FTO,免疫沉淀检测FBXW7的mRNA的m6A表达变化.四甲基偶氮唑盐比色法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测FTO和FBXW7在CSCC细胞放化疗抵抗中的作用.结果与人正常宫颈上皮细胞(HUCEC)比较,FTO和FBXW7在CSCC细胞(SiHa,c-33a)中弱表达(P<0.05);FTO调控FBXW7的mRNA的m6A甲基化水平.过表达FTO的CSCC细胞在经过照射和顺铂处理后,细胞存活比例下降,放化疗抵抗减轻(P<0.05);而在此基础上抑制FBXW7,治疗后的细胞存活比例增加,诱导了CSCC放化疗抵抗(P<0.05).结论FTO可以去除FBXW7的m6A甲基化修饰,上调FBXW7的表达,抑制CSCC对放化疗的抵抗.FTO对CSCC恶性表型的影响是通过FBXW7实现的.

喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系

目的探讨喉癌组织中F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)表达与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析83例喉癌患者资料,比较患者癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;分析FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理参数的关系;比较不同预后患者FBXW7、SCC-Ag表达的阳性率。结果患者癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%(P<0.05)。单因素分析显示,癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达具有密切联系(P<0.05);随访6个月内预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率(29.63%)高于预后不良患者(10.34%),癌组织SCC-Ag表达阳性率(62.96%)低于预后不良患者(89.66%)(P<0.05)。结论喉癌组织中FBXW7表达阳性率明显降低,SCC-Ag阳性表达率显著升高。喉癌患者癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况均与其癌组织FBXW7、SCC-Ag表达关系密切,且癌组织FBXW7、SCC-Ag表达对患者预后情况有一定的提示作用。

sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性分析

目的:分析可溶性程序性死亡受体-配体1(sPD-L1)、三结构域蛋白26(TRIM26)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)与脑胶质瘤术后复发的相关性。方法:回顾性分析2020年1月至2022年2月该院收治的80例脑胶质瘤患者的临床资料,设为研究组,另选取同期80名健康体检者,设为对照组。研究组均行脑胶质瘤切除术治疗,随访6个月后,脑胶质瘤术后复发21例。比较两组和不同病理特征患者术前、术后1个月血清s PD-L1、TRIM26、FBXW7水平,并采用Spearman相关性分析血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性及预测效能。结果:术后1个月,研究组血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平高于对照组,FBXW7水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月,未复发患者血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平低于复发患者,FBXW7水平高于复发患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平与脑胶质瘤术后复发均呈正相关(r>0,P<0.05);血清FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发呈负相关(r<0,P<0.05);术后1个月,受试者工作曲线(ROC)分析结果显示,血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平单项及联合检测预测脑胶质瘤术后复发的AUC分别为0.721、0.799、0.787、0.920,其中联合检测的预测价值最高。结论:血清sPD-L1、TRIM26mRNA与脑胶质瘤术后复发呈正相关,血清FBXW7与脑胶质瘤术后复发呈负相关;血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7单项检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值一般,联合检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值最高。

^(18)F-FDG和^(68)Ga-FAPI PET/CT在不同恶性肿瘤肺转移诊断中的对比研究

背景与目的:^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-flurodeoxyglucose,^(18)F-FDG)正电子发射计算机体层成像(positron emission tomography and computed tomography,PET/CT)是诊断恶性肿瘤伴远处转移的常用方法,但对肺部转移灶尤其是小病灶的检测仍不理想。^(68)Ga-成纤维细胞激活蛋白抑制剂(^(68)Ga-labeled fibroblast activation protein inhibitors,^(68)Ga-FAPI)已被用于靶向成纤维细胞激活蛋白和肿瘤基质的可视化。^(68)Ga-FAPI PET/CT对大多数癌症的原发灶及其转移灶的诊断价值均高于^(18)F-FDG,但至今尚未见到对恶性肿瘤肺部转移性病变的对比研究。因此,本研究旨在探讨^(18)F-FDG和^(68)Ga-FAPI PET/CT对不同恶性肿瘤肺转移病变的诊断价值。方法:回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院2020年5月—2022年3月于1周内行^(18)F-FDG和^(68)Ga-FAPI PET/CT检查的20例恶性肿瘤肺转移患者的临床、病理学及影像学资料,其中上皮源性恶性肿瘤(癌)11例,间叶源性恶性肿瘤(肉瘤)9例。采用配对t检验比较^(68)Ga-FAPI和^(18)F-FDG的病灶最大标准摄取值(maximum standard uptake value,SUVmax)和肿瘤与本底比值(target-to-background ratio,TBR)参数之间的差异;采用线性相关性分析SUVmax和TBR与肺转移灶短径之间的相关性。结果:20例患者共81个肺转移灶(51个来自癌转移,30个来自肉瘤转移),^(18)F-FDG检出阳性病灶72个,^(68)Ga-FAPI检查阳性病灶70个。与^(68)Ga-FAPI相比,肺转移灶^(18)F-FDG摄取值更高,尤其是癌来源的肺转移病灶(P<0.001)。线性相关性分析结果显示,两种显像探针的半定量代谢参数值与肺转移病灶短径之间呈正相关(P<0.001)。结论:^(68)Ga-FAPI在检测恶性肿瘤肺转移病变时并无明显优势,尤其是在上皮组织来源的恶性肿瘤肺转移诊断中,^(18)F-FDG摄取值往往更高。

S100A16在脂代谢中的作用研究进展

迄今为止,研究人员已发现21种S100蛋白家族成员,尽管它们在结构上高度相似,但其功能却各不相同,如能够对细胞内Ca^(2+)水平和细胞外环境的变化产生独特的适应性反应。作为S100蛋白家族的一员,S100A16位于人染色体1q21中的S100A基因簇,是从星形细胞瘤中分离出来的一种新型E-F hand蛋白,也是一种新型的促脂肪生成因子。目前对S100A16在脂代谢中的直接相关性研究并不多。本文对相关文献进行回顾,综述了S100A16在脂肪生成和脂质代谢过程中的重要作用,为该领域的后续研究提供参考。

靶向着丝粒蛋白F的siRNA调节肝癌细胞增殖的实验研究

目的研究靶向着丝粒蛋白F(CENPF)的siRNA调节肝癌细胞增殖的作用及机制。方法培养肝癌细胞株中SMMC-7721、HepG2、BEL-7402及正常肝细胞株HL-7702,检测细胞中CENPF的表达水平;HepG2细胞进行分组处理,转染阴性对照(NC)siRNA或CENPF siRNA,给予对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)或ERK1/2激动剂表皮生长因子(EGF),检测细胞增殖A490水平及细胞中CENPF、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果肝癌细胞株中SMMC-7721、HepG2、BEL-7402中CENPF的表达水平高于正常肝细胞株HL-7702,差异有统计学意义(P<0.05);HepG2细胞中CENPF的表达水平最高;转染siRNA后,si-CENPF组HepG2细胞的A490水平及CENPF、CyclinD1、Bcl-2、p-ERK1/2的表达水平低于si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);转染siRNA的同时给予ERK1/2激动剂EGF,EGF+si-CENPF组HepG2细胞的A490水平及CENPF、CyclinD1、Bcl-2、p-ERK1/2的表达水平均高于DMSO+si-CENPF组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向CENPF的siRNA可显著抑制肝癌细胞的增殖,相关的分子机制可能是抑制ERK1/2的磷酸化并抑制下游CyclinD1、Bcl-2的表达。

Stathmin、着丝粒蛋白F预测宫颈高级别鳞状上皮内病变患者宫颈LEEP后复发的价值

目的探讨Stathmin、着丝粒蛋白F(CENP-F)预测宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)患者宫颈环形电切术(LEEP)后复发的价值。方法回顾性分析120例行宫颈LEEP治疗的宫颈HSIL患者的临床资料。根据随访期间患者的复发情况将其分为复发组和未复发组,比较两组Stathmin、CENP-F阳性表达情况。采用COX回归模型分析宫颈LEEP后复发的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Stathmin评分和CENP-F评分预测宫颈LEEP后复发的价值。结果120例宫颈HSIL患者中,有25例(20.83%)患者术后复发。复发组患者Stathmin和CENP-F阳性表达率均高于未复发组(均P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,切缘阳性、高风险人乳头瘤病毒(HPV)种类数≥2种、腺体受累、受累象限>3个、HPV持续感染、Stathmin阳性表达及CENP-F阳性表达均是宫颈HSIL患者宫颈LEEP后复发的影响因素(均P<0.05)。相关分析结果显示,Stathmin评分与CENP-F评分呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Stathmin评分和CENP-F评分预测宫颈HSIL患者宫颈LEEP后复发的曲线下面积分别为0.843和0.865,且当Stathmin评分和CENP-F评分为2.01分和3.03分时,其预测宫颈HSIL患者宫颈LEEP后复发的灵敏度分别为73.28%和75.32%,特异度分别为62.49%和64.18%。结论宫颈HSIL患者宫颈LEEP后复发者Stathmin阳性表达率、CENP-F阳性表达率升高,Stathmin阳性表达、CENP-F阳性表达是宫颈HSIL患者宫颈LEEP后复发的危险因素,二者可作为评估宫颈LEEP后预后的指标。

LIPF调控MAPK信号通路对胃癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的阐明胃脂酶(LIPF)在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法采用GEPIA和Human Protein Altas评估胃癌组织中LIPF的表达。实时定量PCR(qPCR)和蛋白印迹(Western blot)检测LIPF在胃癌细胞SGC-7901中的表达。SGC-7901细胞分为阴性对照组、LIPF过表达组和LIPF过表达+MAPK激活剂组。通过MTT、划痕实验和Transwell实验分析SGC-7901细胞中的细胞活力、迁移和侵袭能力。qPCR和Western blot用于检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、磷酸化p38(p-p38)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达。结果LIPF在胃癌组织和SGC-7901细胞中表达降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,LIPF过表达组的细胞增殖活力、划痕愈合率和侵袭细胞数均减少且CDK4、MMP9、p-p38和-JNK水平降低(P<0.05)。此外,与LIPF过表达组相比,LIPF过表达+MAPK激活剂组的细胞增殖活力、划痕愈合率和侵袭细胞数增加,且CDK4、MMP9、p-p38和-JNK水平升高(P<0.05)。结论LIPF可通过体外调控p38 MAPK信号通路抑制胃癌的增殖、迁移和侵袭,可能为胃癌患者提供新的治疗干预措施。

鹅副粘病毒F蛋白基因的克隆和序列分析

鹅副粘病毒分离株YG97经 10日龄鸡胚增殖后纯化 ,提取病毒的基因组RNA ,采用RT_PCR一次性扩增出与预期设计的 1.7kb大小相符的特异性条带。将扩增产物提纯后克隆入pGEMR_T载体 ,经转化、筛选及酶切鉴定后 ,初步获得了含鹅副粘病毒F基因的阳性克隆。将所获得的阳性重组质粒进一步进行了序列鉴定。序列分析表明扩增的F基因片段的长度为16 95bp ,共编码 5 5 3个氨基酸 ,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112 R_R_Q_K_P_F117,与NDV的强毒株特征相符 ,同时也与鹅副粘病毒分离株致病性实验结果相符。同源性分析表明 ,与国内标准强毒株F48E9的核苷酸同源性为 86 % ,与国内外其它毒株的核苷酸同源性在 82 %～ 89%之间 。