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Genome-Wide Analysis of the F3′5′H Gene Family in Blueberry(Vaccinium corymbosum L.)Provides Insights into the Regulation of Anthocyanin Biosynthesis
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作者 Xiaolan Guo Jinbin Hu +2 位作者 Shimei Yang Delu Wang Jianbing Wang 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第9期2683-2697,共15页
The F3′5′H gene family plays an important role in regulating anthocyanin biosynthesis,abiotic stress,and hormone signaling.In this study,14 F3′5′H genes were identified from the blueberry genome.The chromosomal di... The F3′5′H gene family plays an important role in regulating anthocyanin biosynthesis,abiotic stress,and hormone signaling.In this study,14 F3′5′H genes were identified from the blueberry genome.The chromosomal distribution,physicochemical properties,F3′5′H domain,conserved motifs,cis-acting elements,and intron/exon compositions were analyzed.The functional prediction analysis of these VcF3′5′Hs indicated that their biological functions included light response and other secondary metabolites.The results of qRT-PCR showed that VcF3′5′Hs(especially VcF3′5′H4)were highly expressed at the ripening stage.Subcellular localization revealed that VcF3′5′H4 may be located in the endoplasmic reticulum.Co-expression analysis showed that the VcF3′5′H gene family was related to anthocyanin.This research provides an overview of the blueberry F3′5′H family and helps verify the role of these genes in regulating anthocyanin biosynthesis. 展开更多
关键词 BLUEBERRY f3′5′h ANThOCYANIN gene expression CO-EXPRESSION
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红苞凤梨AbF3′5′H基因上游调控因子筛选
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作者 林东璞 臧要强 +2 位作者 张霄鹏 周徐子鑫 马均 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期79-89,共11页
颜色是观赏植物最重要的性状之一,也是当前观赏园艺育种的一个重要方向。为研究红苞凤梨红蓝色彩的呈现机制,初步分析金边红苞凤梨(Ananas comosus var.bracteatus)不同组织中花青素种类与含量,用AbF3′5′H基因启动子构建诱饵载体,利... 颜色是观赏植物最重要的性状之一,也是当前观赏园艺育种的一个重要方向。为研究红苞凤梨红蓝色彩的呈现机制,初步分析金边红苞凤梨(Ananas comosus var.bracteatus)不同组织中花青素种类与含量,用AbF3′5′H基因启动子构建诱饵载体,利用酵母单杂交(Y1H)文库筛选其上游调控转录因子;并采用酵母单杂交验证技术,验证筛选出的转录因子与AbF3′5′H启动子的互作关系。结果表明:花青素的种类组成和相对比例决定了组织的颜色性状,AbF3′5′H是花青素合成途径种类分支的关键基因,在花青素种类组成与相对比例调控中具有重要作用;AbBTB/POZ、AbHSP81-1和AbGLOX能够与AbF3′5′H的启动子结合而调控其转录,可能在红苞凤梨花青素合成代谢调控中发挥重要作用。研究结果对于进一步揭示红苞凤梨花青素合成代谢调控机理,研究红苞凤梨呈色机理,培育叶色新品种有着重要的理论和实践意义。 展开更多
关键词 红苞凤梨 f3′5′h基因 花青素 酵母单杂交 调控因子
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矮牵牛F3′5′H基因的克隆及其在不同着色花药中的表达 被引量:4
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作者 花庆 王蕾 +2 位作者 韦灵林 刘迎团 徐虹 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期152-158,共7页
通过品种间杂交和后代筛选,从模式植物矮牵牛中筛选出具有蓝花冠蓝花药的稳定株系。为了明确蓝色花药形成的分子机制,对蓝色花色素苷合成途径中的关键酶黄烷酮3′,5′-羟化酶(F3′5′H)进行研究,比较不同花药着色的矮牵牛植株中,F3′5′... 通过品种间杂交和后代筛选,从模式植物矮牵牛中筛选出具有蓝花冠蓝花药的稳定株系。为了明确蓝色花药形成的分子机制,对蓝色花色素苷合成途径中的关键酶黄烷酮3′,5′-羟化酶(F3′5′H)进行研究,比较不同花药着色的矮牵牛植株中,F3′5′H基因组DNA的PCR扩增模式、基因组序列,以及花发育第3阶段的花药组织中基因表达差异。结果表明,蓝色花药植株与对照材料间的F3′5′H基因组DNA扩增模式基本相同,都存在两个基因编码位点Hf1和Hf2。在蓝色花药植株中,Hf1位点扩增出两个片段,一个与已公布的Hf1的序列完全一致,另一个是不能编码完整蛋白的假基因;Hf2基因位点也扩增出两个基因片段,其中有一个片段的5′-末端序列与已公布的Hf2序列有96%同源性,另一个是非特异性扩增产物。此外,Hf1基因可以在花药组织中表达,但仅在蓝色花药中有转录,而Hf2基因在花药组织中没有表达。根据上述结果认为,矮牵牛植株中,编码F3′5′H的Hf1基因与蓝色花药的形成相关,这一结论为进一步揭示矮牵牛蓝色花药形成的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 f3′5′h基因 矮牵牛 蓝色花药 基因组DNA MRNA
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矮牵牛编码F3′5′H的蓝色基因表达载体构建及转化 被引量:4
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作者 李莉 祁银燕 +2 位作者 解燕 刘雅莉 娄倩 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1090-1096,共7页
类黄酮3′,5′羟基化酶(Flavonoid-3′,5-′hydroxylase,F3′5′H)是花色苷代谢途径中的一个关键酶,能使花色素合成趋向于形成蓝色的飞燕草色素,从而使花色向蓝紫色偏移。本研究从蓝紫色矮牵牛(Petunia hybrida)花瓣中克隆了编码F3′5’... 类黄酮3′,5′羟基化酶(Flavonoid-3′,5-′hydroxylase,F3′5′H)是花色苷代谢途径中的一个关键酶,能使花色素合成趋向于形成蓝色的飞燕草色素,从而使花色向蓝紫色偏移。本研究从蓝紫色矮牵牛(Petunia hybrida)花瓣中克隆了编码F3′5’H的蓝色基因Hf1,并通过PCR技术获得百合花特异表达启动子(PchsA),将百合PchsA与Hf1基因融合,构建了百合花特异表达启动子调控的Hf1基因植物表达载体,通过农杆菌介导的叶盘法转化粉红色矮牵牛。抗性筛选和PCR检测鉴定转基因植株,结果表明,成功地获得了转基因阳性植株。 展开更多
关键词 矮牵牛 类黄酮3′ 5′羟基化酶 hf1基因 花特异表达启动子 转化
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矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建 被引量:4
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作者 李吉莲 姚宁涛 +1 位作者 祝建波 邓福军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第17期7897-7899,共3页
[目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝... [目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550 bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553 bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98.55%。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与"F3′5′H"构建成能够在植物中进行遗传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。 展开更多
关键词 矮牵牛 PchsA启动子 克隆 蓝色基因f3′5′h 表达载体
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紫色马铃薯类黄酮3',5'-羟化酶基因(StF3'5'H)的克隆及分析 被引量:1
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作者 李军 龚一富 +1 位作者 胡朝阳 王何瑜 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期23-28,共6页
类黄酮3',5'-羟化酶(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)是植物花青素生物合成途径中的一个关键酶,紫色土豆(Solanum tuberosum)F3'5'H基因的克隆将为花青素合成调控和花青素代谢工程研究提供优质基... 类黄酮3',5'-羟化酶(flavonoid 3',5'-hydroxylase,F3'5'H)是植物花青素生物合成途径中的一个关键酶,紫色土豆(Solanum tuberosum)F3'5'H基因的克隆将为花青素合成调控和花青素代谢工程研究提供优质基因资源。研究采用RACE技术克隆了紫色土豆F3'5'H基因的cDNA全长序列,用生物信息学方法对其核苷酸和蛋白质序列进行了分析,并用半定量PCR技术分析了F3'5'H基因在不同组织中的表达情况,同时研究了赤霉素和蔗糖处理后F3'5'H基因表达与花青素积累之间的相关性。研究结果表明,克隆的紫色土豆F3'5'H的cDNA全长为1854 bp,包含一个1530 bp的完整ORF,共编码509个氨基酸。生物信息学分析表明,StF3'5'H基因推测编码的氨基酸序列与其它植物的F3'5'H蛋白的相似性很高。StF3'5'H基因的表达具有组织特异性,在紫色土豆根、茎和叶柄中都有表达,其中在叶柄中表达最强,而在块茎、叶轴和叶片中几乎检测不到StF3'5'H基因的表达。赤霉素和蔗糖能促进紫色土豆StF3'5'H基因的表达,进而促进花青素的积累。 展开更多
关键词 紫色土豆 类黄酮3′ 5′-羟化酶 花青素 基因表达
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蝴蝶兰F3′5′H基因转化OT杂种百合Robina的研究 被引量:4
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作者 刘爱玲 刘雅莉 +1 位作者 娄倩 张海芹 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期874-880,共7页
为了定向育种获得蓝色百合,该研究以百合Robina为蓝色基因最佳受体,以其花丝诱导产生的胚性愈伤组织和再生小植株小鳞片作为转化材料,利用农杆菌介导法,将蝴蝶兰F3′5′H基因导入百合Robina中。结果表明:以小鳞片为转化材料,预培养3d,OD... 为了定向育种获得蓝色百合,该研究以百合Robina为蓝色基因最佳受体,以其花丝诱导产生的胚性愈伤组织和再生小植株小鳞片作为转化材料,利用农杆菌介导法,将蝴蝶兰F3′5′H基因导入百合Robina中。结果表明:以小鳞片为转化材料,预培养3d,OD_(600)为0.8,侵染10min,共培养3d,加入100μmol/L AS稳定转化率最高为12.78%;而以胚性愈伤为转化材料,预培养2d,OD_(600)为0.8,侵染10min,共培养3d,加入100μmol/L AS稳定转化率最高为12.22%。2种转化材料的最适潮霉素筛选浓度均为20mg/L。对抗性植株分别进行PCR和反转录PCR检测,获得9个阳性株系,Southern印记分析进一步确定了6株转基因百合中携带蓝色基因F3′5′H,为后续进一步获得蓝色百合奠定了基础。 展开更多
关键词 f3′5′h Robina百合 胚性愈伤组织 小鳞片 遗传转化
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矮牵牛F3’5’H基因在花瓣呈色中的作用解析 被引量:1
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作者 符真珠 王锐 +8 位作者 张泰然 王慧娟 高杰 李艳敏 蒋卉 王利民 袁欣 李彦邦 张和臣 《河南农业科学》 北大核心 2021年第12期121-127,共7页
为了揭示F3’5’H基因对矮牵牛花瓣的呈色作用,对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明,矮牵牛基因组中共有HF1和HF2两个位点编码F3’5’H基因。不同类型的矮牵牛具有不同的F3’5’H基因型。F3’5’H1^(R27)在第3个内含子上有1个dT... 为了揭示F3’5’H基因对矮牵牛花瓣的呈色作用,对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明,矮牵牛基因组中共有HF1和HF2两个位点编码F3’5’H基因。不同类型的矮牵牛具有不同的F3’5’H基因型。F3’5’H1^(R27)在第3个内含子上有1个dTPH9转座子的插入,使其产生2个类型的转录本,其中1个转录本的非正常编码是矮牵牛花瓣呈现粉色的主要原因。在矮牵牛M1×R27中超表达不同类型的F3’5’H基因,除F3’5’H1^(R27)外,其他基因型都能正常行使分子功能,促使转基因后代的矮牵牛花瓣呈现紫色。 展开更多
关键词 矮牵牛 f35h 花色 分子机制
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茂金属配合物[2,5-(Me_3Si)_2MeC_5H_2FeI(CO)_2]的电子结构研究 被引量:5
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作者 邝代治 冯泳兰 周秀中 《分子科学学报》 CAS CSCD 2003年第1期51-56,共6页
 运用G98W程序,采用Lan12dz基组,对茂金属配合物[2,5-(Me3Si)2MeC5H2FeI(CO)2]进行从头算研究,探讨了配合物结构单元的稳定性、分子轨道能量、原子净电荷布居规律,以及一些前线分子轨道的组成特征等.结果表明,标题配合物在能量上可作...  运用G98W程序,采用Lan12dz基组,对茂金属配合物[2,5-(Me3Si)2MeC5H2FeI(CO)2]进行从头算研究,探讨了配合物结构单元的稳定性、分子轨道能量、原子净电荷布居规律,以及一些前线分子轨道的组成特征等.结果表明,标题配合物在能量上可作为结构单元而稳定存在.该结构单元为茂金属配合物的合成、分子组装分析和催化活性研究提供理论依据. 展开更多
关键词 茂金属配合物 电子结构 从头算 稳定性 分了轨道能量 原子净电荷 [2 4-(Me3Si)2MeC5h2f3I(CO)2]
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山葡萄花色苷生物合成结构基因F3′H和F3′5′H的表达 被引量:1
10
作者 赵权 《贵州农业科学》 CAS 2015年第9期7-10,共4页
为阐明山葡萄次生代谢产物生物合成意义,以山葡萄双优果实为材料,应用HPLC-MS/MS技术,研究其果实发育过程中果皮花色苷生物合成结构基因F3′H和F3′5′H的表达。结果表明:转色至采收,共检测出花色苷花翠素类7种、花青素类5种、花葵素类... 为阐明山葡萄次生代谢产物生物合成意义,以山葡萄双优果实为材料,应用HPLC-MS/MS技术,研究其果实发育过程中果皮花色苷生物合成结构基因F3′H和F3′5′H的表达。结果表明:转色至采收,共检测出花色苷花翠素类7种、花青素类5种、花葵素类1种。F3′H花后1周为上调表达,至转色为下调表达,转色后至采收为上调表达;F3′5′H自花后至转色为下调表达,转色后至采收为上调表达。 展开更多
关键词 山葡萄 花色苷 结构基因 f3′h f3′5′h 基因表达
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马铃薯‘转心乌’F3'5'H的cDNA克隆、原核表达和生物信息学分析 被引量:1
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作者 杨晓娜 赵昶灵 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第22期165-169,共5页
花色苷合成途径中,类黄酮-3'5'-羟基化酶是合成-3'5'-羟基花色素苷的关键酶。从‘转心乌’块茎嫩芽提取总RNA,通过RT-PCR克隆到F3'5'H的cDNA序列(GenBank登录号为HQ860267),SDS-PAGE获得表达蛋白的分子量约为55... 花色苷合成途径中,类黄酮-3'5'-羟基化酶是合成-3'5'-羟基花色素苷的关键酶。从‘转心乌’块茎嫩芽提取总RNA,通过RT-PCR克隆到F3'5'H的cDNA序列(GenBank登录号为HQ860267),SDS-PAGE获得表达蛋白的分子量约为55 k Da。该基因全长1 518 bp,编码区长1 485 bp,共编码494个氨基酸。 展开更多
关键词 马铃薯'转心乌’ 花色苷 f3′5′h 克隆 原核表达
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芒果F3'5'H基因的克隆及其表达分析
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作者 赵志常 高爱平 +3 位作者 陈业渊 黄建峰 党志国 罗睿雄 《计算生物学》 2016年第1期1-7,共7页
黄酮-3',5'-羟基化酶(flavonoid-3',5'-hydroxylase, F3'5'H)是合成飞燕草色素苷的关键酶基因,缺乏F3'5'H的植物不能形成蓝色花,故又被称为“蓝色基因”。本研究根据已经报道的F3'5'H基因的序... 黄酮-3',5'-羟基化酶(flavonoid-3',5'-hydroxylase, F3'5'H)是合成飞燕草色素苷的关键酶基因,缺乏F3'5'H的植物不能形成蓝色花,故又被称为“蓝色基因”。本研究根据已经报道的F3'5'H基因的序列设计兼并引物,采用3'RACE和5'RACE方法,克隆得到了一个全长cDNA序列为1598 bp的芒果果实F3'5'H基因。该基因开放阅读框为1539 bp,编码512个氨基酸,分子重量为57.20 KD。对基因组扩增得到了1633 bp长度的片段,分析发现该基因含有一个内含子。通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与石斛、马鞭草等植物具有较近的亲缘关系。对不同芒果品种的F3'5'H基因的表达进行分析发现:红色的贵妃品种中表达量较高,而绿色的桂七品种中表达量较低。 展开更多
关键词 芒果 花色素苷 f35h 基因克隆
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3-氯-6-甲基二苯并[c,f][1,2]硫氮杂卓-11(6H)-酮5,5-二氧化物的合成 被引量:4
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作者 孙亮 张珩 +2 位作者 杨艺虹 杨建设 张秀兰 《精细化工中间体》 CAS 2009年第3期34-36,55,共4页
以4-氯-2-磺酰氯苯甲酸甲酯为原料,经缩合、甲基化、氢解及环合反应合成噻萘普汀重要中间体3-氯-6-甲基二苯并[c,f][1,2]硫氮杂卓-11(6H)-酮5,5-二氧化物,讨论了缩合反应中傅酸剂吡啶的用量对反应的影响以及氢解反应中氢化钠用量对反应... 以4-氯-2-磺酰氯苯甲酸甲酯为原料,经缩合、甲基化、氢解及环合反应合成噻萘普汀重要中间体3-氯-6-甲基二苯并[c,f][1,2]硫氮杂卓-11(6H)-酮5,5-二氧化物,讨论了缩合反应中傅酸剂吡啶的用量对反应的影响以及氢解反应中氢化钠用量对反应的影响,得到了较优的工艺条件:n(4-氯-2-磺酰氯苯甲酸甲酯)∶n(吡啶)=1∶1.86、n[4-氯-2-(N-甲基-N-苯基-胺磺酰基)-苯甲酸甲酯]∶n(氢化钠)=1∶3。对环合反应条件进行了研究,确定了适宜反应温度为100~110℃。总收率为55.9%,其化学结构经IR、1HNMR、MS得以确证。 展开更多
关键词 3-氯-6-甲基二苯并[c f][1 2]硫氮杂卓-11(6h)-酮5 5-二氧化物 噻萘普汀 缩合 氢解 环合
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非洲紫罗兰F3′5′H基因的克隆及烟草的转化分析
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作者 焦阳 陈洁 +3 位作者 贾海燕 张克 杨凯 王文和 《北京农学院学报》 2014年第3期11-13,共3页
本研究利用PCR技术克隆了非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha)花色合成的关键酶,F3'5'H的基因.对克隆序列的分析表明,F3'5'H基因序列上非洲紫罗兰与金鱼草(Antirrhinum Kelloggii)、矮牵牛(ToreniaH ybrida)有着较近的亲缘关系... 本研究利用PCR技术克隆了非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha)花色合成的关键酶,F3'5'H的基因.对克隆序列的分析表明,F3'5'H基因序列上非洲紫罗兰与金鱼草(Antirrhinum Kelloggii)、矮牵牛(ToreniaH ybrida)有着较近的亲缘关系.构建了该基因的pCAMBIA1304表达载体,采用农杆菌介导叶盘法转化普通烟草(Nicotiana tabacum),获得了转基因植株.利用高效液相色谱法(HPLC)法检测转基因植株类黄酮含量,转基因烟草类黄酮相对含量升高4.0%~16.3%,同时花色向紫色转变.表明该基因对植物花色的形成有重要作用,可为基因工程蓝色花育种提供理论依据和基础. 展开更多
关键词 类黄酮35’羟基化酶(f35h) 载体构建 烟草转化 类黄酮
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黑果枸杞及其白色果实F3′5′H基因启动子克隆及活性分析
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作者 祁银燕 陈雪妍 +2 位作者 陈武生 邓磊 朱春云 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期51-59,共9页
通过3次染色体步移克隆出黑果枸杞及其白化果实F3′5′H基因的启动子片段并测序。分析发现2个启动子序列的同源性高达90.3%,对启动子序列进行预测,发现两者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、... 通过3次染色体步移克隆出黑果枸杞及其白化果实F3′5′H基因的启动子片段并测序。分析发现2个启动子序列的同源性高达90.3%,对启动子序列进行预测,发现两者中均具有TATA-Box、CAAT-Box、TCrich repeats、WUN-motif、Sp1、Box I、G-box、skin-1motif及ARE元件。另外在黑果枸杞启动子中预测到与茉莉酸甲酯响应相关的元件TGACG-motif,而在黑果枸杞白化果实启动子中没有预测到。将2个启动子片段与GUS报告基因融合构建植物表达载体,利用农杆菌介导的瞬时转化法转化烟草叶片,通过组织化学染色来确定启动子的启动活性。结果表明2个启动子均具有启动活性,利用荧光定量对2个启动子所驱动的GUS基因的表达量进行了分析,结果表明黑果枸杞启动子所驱动的GUS基因的表达量是黑果枸杞白化果实的3.09倍。 展开更多
关键词 黑果枸杞 f3′5′h基因 启动子活性分析
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Synthesis and Crystal Structure of N-[(3aR,4R,4aR,5aS,6S,6aS)-1,3-Dioxooctahydro-4,6-ethenocyclopropa[f]isoindol-2(1H)-yl]-3-(trifluoromethyl)phenylmethanimine
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作者 周辛波 谢云德 +2 位作者 钟武 王建柏 李松 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2010年第8期1231-1235,共5页
The crystal structure of the title compound(C19H15F3N2O2,Mr = 360.33) was determined by single-crystal X-ray diffraction.The crystal belongs to triclinic,space group P1,with a = 6.5604(7),b = 13.9614(16),c = 18.... The crystal structure of the title compound(C19H15F3N2O2,Mr = 360.33) was determined by single-crystal X-ray diffraction.The crystal belongs to triclinic,space group P1,with a = 6.5604(7),b = 13.9614(16),c = 18.1790(18) ,α = 102.749(7),β = 97.542(6),γ = 94.355(4)°,V = 1600.5(3) 3,Z = 4,Dc = 1.495 g/cm3,λ(MoKα) = 0.71070,F(000) = 744,μ(MoKα) = 0.122 mm-1,R = 0.0434 and wR = 0.1051.A total of 7590 unique reflections were collected,of which 5429 with |F|2 ≥ 2σ|F|2 were observed.The two cyclohexene rings in the molecule adopt boat-boat conformations with the deviations of ring atoms C(9) and C10 from the C(5)/C(6)/C(7)/C(8) plane(Ⅰ) by 1.1204(0.0023) and 1.1132(0.0023) ,respectively,whereas from the C(2)/C(3)/C(5)/C(8) plane(Ⅱ) by 1.1627(0.0022) and 1.1818(0.0021) ,respectively.In the cyclopropane and lactam rings,atoms C(11) and N(1) point towards the double bond of C(9)-C(10) and the dihedral angle between the ring plane(Ⅲ) containing C(1),C(2),C(3) and C(4) and plane(IV) consisting of C(6),C(7) and C(11) is 55.76(0.07)°.The dihedral angles between planes Ⅳ and Ⅰ and Ⅱ and Ⅲare 63.58(0.07)° and 58.10(0.06)°,respectively.The dihedral angle between the benzene ring C(13)~ C(18) and plane Ⅳ is 42.41(0.06)°. 展开更多
关键词 N-[(3aR 4R 4aR 5aS 6S 6aS)-1 3-dioxooctahydro-4 6-ethenocyclopropa[f]isoin-dol-2(1h)-yl]-3-(trifluoromethyl)phenylmethanimine crystal structure synthesis
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Study on differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction 被引量:5
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作者 TANG Rongmei CHEN Bowei +2 位作者 YI Jian LIU Baiyan LIN Huashan 《Digital Chinese Medicine》 2021年第4期305-315,共11页
Objective To analyze the differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction(ACI)and clarify the changes in gene expression related to cerebral infarction injury and the p... Objective To analyze the differential gene expression profile of serum exosomes in patients with acute cerebral infarction(ACI)and clarify the changes in gene expression related to cerebral infarction injury and the potential serum markers.Methods Four patients with ACI and five healthy people were enrolled in the PhaseⅠstudy.After serum isolation from peripheral blood,exosomes were extracted with exosomes kits,highthroughput detection of m RNA was performed with gene chips,and differentially expressed m RNAs were screened.Gene Ontology(GO)functional analysis and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway enrichment analysis were performed simultaneously.Furthermore,real-time polymerase chain reaction(q RT-PCR)was used to verify the expression levels of the screened differential m RNAs in the serum exosomes collected in PhaseⅡfrom 32 patients each in the ACI case and normal control groups.Results In the PhaseⅠstudy,there were 248 differentially expressed m RNAs(fold change≥2.0,P<0.05)among five patients in the normal control group and four patients in the case group,of which the expression of 242 was upregulated and that of six was downregulated.The results of GO functional enrichment analysis mainly included behavior regulation,cell connection,and antioxidant activity.The results of KEGG pathway enrichment analysis mainly included ribosomes,proteasomes,oxytocin signaling pathways,and oxidative phosphorylation.After researching and screening based on relevant literature,it was found that among the genes with significant differential expression,H3 F3 B m RNA may be associated with and might play an important role in ACI.The q RT-PCR method was used to detect the H3 F3 B mRNA expression in serum exosomes of 32 patients each in the normal control and case groups in PhaseⅡ;the expression was significantly higher in serum exosomes of the case group than in those of the normal control group(P<0.001).H3 F3 B mRNA expression in serum exosomes of the case group positively correlated with age,the National Institutes of Health Stroke Scale(NIHSS)score,and the maximum infarct size(P<0.05).Conclusion ACI can lead to changes in the serum exosomes mRNA expression profile,which may be closely related to the occurrence,development,and prognosis of this condition.These findings will provide direction for research on the molecular mechanism,diagnostic markers,and therapeutic targets of ACI. 展开更多
关键词 Acute cerebral infarction(ACI) EXOSOMES MRNA Expression profile gene chip h3f3B
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类黄酮3′,5′羟基化酶基因的克隆及转化矮牵牛 被引量:4
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作者 张林玲 金志强 +1 位作者 苏伟 徐碧玉 《科学技术与工程》 2003年第4期352-355,共4页
类黄酮3’,5’羟基化酶(Flavonoid 3’,5’-hydroxylase,F3',5'H)是花色素苷代谢途径中的一个关键酶,它使花色素的合成方向趋向于形成蓝色色素翠雀素。利用PCR方法,从“紫蓝色”品系的矮牵牛(Petunia hybrida)总DNA中,克隆到编码F3’,... 类黄酮3’,5’羟基化酶(Flavonoid 3’,5’-hydroxylase,F3',5'H)是花色素苷代谢途径中的一个关键酶,它使花色素的合成方向趋向于形成蓝色色素翠雀素。利用PCR方法,从“紫蓝色”品系的矮牵牛(Petunia hybrida)总DNA中,克隆到编码F3’,5'H的Hf1、Hf2基因。将Hf2基因正向插入到植物表达中间载体中,通过土壤农杆菌介导的方法转化“淡粉色”品系的矮牵牛。现已得到PCR阳性植株。 展开更多
关键词 类黄酮3′ 5′羟基化酶基因 基因克隆 矮牵牛 转基因花卉 花色素苷 植物基因工程
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川乌头F3′5′H基因在矮牵牛中的遗传转化及功能分析 被引量:3
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作者 马璐琳 崔光芬 +4 位作者 贾文杰 王祥宁 段青 杜文文 王继华 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2892-2898,共7页
类黄酮3',5'羟基化酶(flavonid-3', 5'-hydroxylase, F3'5'H)是花色素苷合成途径中催化蓝色花色素飞燕草色素合成的关键酶。为验证川乌头(Aconitum carmichaeli Debx.) Ac-F3′5′H基因的催化功能,构建了该基... 类黄酮3',5'羟基化酶(flavonid-3', 5'-hydroxylase, F3'5'H)是花色素苷合成途径中催化蓝色花色素飞燕草色素合成的关键酶。为验证川乌头(Aconitum carmichaeli Debx.) Ac-F3′5′H基因的催化功能,构建了该基因的植物过表达载体,利用农杆菌介导法将Ac-F3′5′H遗传转化矮牵牛。通过抗性筛选共得到6株在潮霉素抗性培养基上可正常生长的矮牵牛植株,经PCR和RT-PCR验证共得到5株转基因阳性植株,其中2株中目标基因表达量相对较高。相比对照,这2株转基因矮牵牛阳性植株花色变化较明显,由粉色变为紫蓝色,表明该基因可催化合成一定的蓝色花色素。该结果将为观赏植物蓝色花色分子育种工作提供一定的科学依据。 展开更多
关键词 川乌头 Ac-f3′5′h基因 遗传转化 功能验证
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彩色马铃薯品种‘转心乌’类黄酮-3'5'-羟化酶(F3'5'H)基因的生物信息学和表达分析 被引量:12
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作者 肖继坪 杨晓娜 郭华春 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1494-1502,共9页
类黄酮-3'5'-羟化酶(F3'5'H)基因是合成蓝色飞燕草色素类花色苷的关键酶基因。本研究采用RT-PCR法从彩色马铃薯品种‘转心乌’中克隆到了F3'5'H基因的c DNA,并进行了生物信息学和组织表达模式分析,希望能探明F3... 类黄酮-3'5'-羟化酶(F3'5'H)基因是合成蓝色飞燕草色素类花色苷的关键酶基因。本研究采用RT-PCR法从彩色马铃薯品种‘转心乌’中克隆到了F3'5'H基因的c DNA,并进行了生物信息学和组织表达模式分析,希望能探明F3'5'H基因在彩色马铃薯花色苷合成中的作用及表达方式。克隆到的F3'5'H c DNA序列全长1 720 bp,编码509个氨基酸残基,同源比对表明F3'5'H与茄科植物聚在一起,其次是其它双子叶植物。F3'5'H具有信号肽和明显的跨膜结构域,属于分泌蛋白且为稳定的亲水蛋白,定位于细胞质。说明F3'5'H在细胞质中的粗糙型内质网上合成前体后,跨膜运输到其它部位或细胞器中发挥作用。α螺旋和无规则卷曲是F3'5'H的主要二级结构元件。F3'5'H具有细胞色素P450的"PPGP"、"AGTDT"、"FGAGRRICAG"三段基序,且只有一个功能结构域,与细胞色素P450的功能结构域相匹配,属于细胞色素P450家族的一员。组织特异性表达结果表明:F3'5'H相对表达量和花色苷含量均是块茎高于叶片和地上茎,它们的变化趋势基本一致,花色苷含量较高的器官,其F3'5'H的相对表达量也高,说明花色苷的积累与F3'5'H的表达正相关。 展开更多
关键词 彩色马铃薯 类黄酮-35’-羟化酶(f35h) 花色苷 序列分析 表达
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