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木质素合成酶基因F5H的克隆及其鉴定 被引量:7
1
作者 付月 李学龙 薛永常 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第8期1553-1555,共3页
通过RT-PCR从正在分化的2年生欧美杨107号茎的次生木质部提取mRNA,扩增出一基因片段,与pGM-T载体连接,重组质粒经EcoRI酶切、特异性引物扩增、测序鉴定。结果表明,该基因片段长度为867bp,与EMBL核酸序列库中VanDoorsselaere等发表的白... 通过RT-PCR从正在分化的2年生欧美杨107号茎的次生木质部提取mRNA,扩增出一基因片段,与pGM-T载体连接,重组质粒经EcoRI酶切、特异性引物扩增、测序鉴定。结果表明,该基因片段长度为867bp,与EMBL核酸序列库中VanDoorsselaere等发表的白杨杂种F5H的cDNA序列(PAJ10324)相比,同源性高达99.19%,可以断定所扩增的DNA片段即为F5H基因片段。 展开更多
关键词 f5h RT-PCR 木质素 载体构建
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调控S木质素合成基因F5H1研究进展及对竹遗传改良的展望 被引量:5
2
作者 郭晓艺 胡尚连 +1 位作者 曹颖 孙霞 《福建林业科技》 北大核心 2007年第3期234-237,243,共5页
植物特异调控S木质素生物合成F5H1基因的克隆与遗传转化研究,有利于在木质素含量不变的情况下,改变木质素组分,提高制浆效率,减少污染,对造纸工业的可持续发展有着很重要的意义。该文着重综述了近年来不同植物F5H1基因克隆和遗传转化的... 植物特异调控S木质素生物合成F5H1基因的克隆与遗传转化研究,有利于在木质素含量不变的情况下,改变木质素组分,提高制浆效率,减少污染,对造纸工业的可持续发展有着很重要的意义。该文着重综述了近年来不同植物F5H1基因克隆和遗传转化的研究现状,并对未来F5H基因在调控竹木质素组分改变方面的研究前景进行了展望。 展开更多
关键词 f5h1 生物合成 S木质素 C4H启动子
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木质素合成酶基因F5H的RT-PCR引物筛选
3
作者 付月 薛永常 姚奇 《辽宁林业科技》 北大核心 2007年第4期9-11,59,共4页
据EMBL核酸序列库中发表的白杨杂种F5H的cDNA序列,利用Primer 5.0软件设计3组扩增引物。通过PCR及RT-PCR扩增反应,筛选出一组比较合适的引物,确定该引物对的最适反应体系和程序参数。利用该引物对,从正在分化的2年生欧美杨107茎的次生... 据EMBL核酸序列库中发表的白杨杂种F5H的cDNA序列,利用Primer 5.0软件设计3组扩增引物。通过PCR及RT-PCR扩增反应,筛选出一组比较合适的引物,确定该引物对的最适反应体系和程序参数。利用该引物对,从正在分化的2年生欧美杨107茎的次生木质部提取的mRNA中RT-PCR扩增出一个867bp的木质素合成特异表达的f5h基因片段。将其克隆到pGM-T载体上,构建了f5h在大肠杆菌中的表达载体,并对引物筛选进行讨论。 展开更多
关键词 f5h RT—PCR 引物筛选 木质素
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柳枝稷木质素合成酶基因F5H核心片段的克隆与表达特性的分析 被引量:4
4
作者 李园 王珊 方程 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期927-934,共8页
柳枝稷(Panicum virgatum L.)是一种重要的木质纤维作物,但其高木质素含量严重制约了其作为能源植物的开发和利用。以柳枝稷茎秆中的mRNA为模板,采用RT-PCR方法克隆得到控制G/S木质素单体相互转化的关键酶基因F5 H家族的2个基因,分别命... 柳枝稷(Panicum virgatum L.)是一种重要的木质纤维作物,但其高木质素含量严重制约了其作为能源植物的开发和利用。以柳枝稷茎秆中的mRNA为模板,采用RT-PCR方法克隆得到控制G/S木质素单体相互转化的关键酶基因F5 H家族的2个基因,分别命名为PvF5 H1与PvF5 H2,将这2个基因序列提交到GenBank,登录号分别为JQ430747与JQ430748。DNAMAN序列分析表明,这2个基因的核酸序列相似性为93%,氨基酸序列相似性为90%。利用NCBI在线比对功能对这2个基因的生物学信息进行分析,结果表明:该基因通过生物学方法分析的编码蛋白质与玉米(Zea mays)的同源性最高,系统进化树分析也表明,其与玉米的亲缘关系最近。利用实时荧光定量PCR技术研究这2个基因在机械伤害胁迫下的表达趋势,结果表明:在伤害胁迫下,PvF5 H1与PvF5 H2基因都快速响应,并且在一定时间内,这种响应呈现正相关,其变化趋势一致,但是表达量及其变化相差较大。推测它们在柳枝稷应答伤害胁迫的过程中起重要作用。 展开更多
关键词 f5h基因 柳枝稷 木质素 机械伤害胁迫 表达分析
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柠条锦鸡儿CkF5H基因及启动子的克隆 被引量:2
5
作者 任方媛 李高 +2 位作者 张涛 杨杞 王瑞刚 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期79-86,共8页
为了研究CkF5H基因在柠条锦鸡儿中木质素生物合成途径方面中的生物学功能,以我国西北干旱荒漠地区重要的豆科饲用灌木柠条锦鸡儿为材料,克隆了1个木质素合成相关的CkF5H基因,该基因c DNA全长1 679 bp,g DNA全长3 495 bp,具有2个外显子,... 为了研究CkF5H基因在柠条锦鸡儿中木质素生物合成途径方面中的生物学功能,以我国西北干旱荒漠地区重要的豆科饲用灌木柠条锦鸡儿为材料,克隆了1个木质素合成相关的CkF5H基因,该基因c DNA全长1 679 bp,g DNA全长3 495 bp,具有2个外显子,1个内含子,编码520个氨基酸,Gen Bank登录号HQ829862。通过染色体步移的技术克隆了1 550 bp的启动子序列,对启动子序列上的响应元件进行了分析。结果显示,具有昼夜节律响应元件、防御与胁迫响应元件、赤霉素顺式作用元件和热响应元件等。CkF5H富含二级结构,其中α螺旋占39.81%,β折叠占15.96%,不规则卷曲占44.23%,并预测其三维结构。对CkF5H基因推导的氨基酸序列预测分析得出,CkF5H蛋白等电点为6.45,分子量为58.09 ku,不稳定系数45.72,是不稳定蛋白,总平均亲水性-0.143,属亲水性蛋白。因此,克隆柠条锦鸡儿的CkF5H基因并详细分析,可为进一步研究该基因提供理论依据。 展开更多
关键词 柠条锦鸡儿 f5h 基因克隆 木质素 RACE
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柳枝稷木质素基因F5H的高效编辑 被引量:1
6
作者 邱锐 何峰 +7 位作者 李瑞 王亚梅 邢思年 曹英萍 刘叶飞 周昕越 赵彦 付春祥 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期298-307,共10页
柳枝稷(Panicum virgatum)是重要的C4多年生木质纤维素类生态能饲草。为了快速创制细胞壁转化效率高的能饲草新资源,以异源四倍体柳枝稷品种Alamo为材料,克隆了其木质素合成途径的阿魏酸-5-羟基化酶基因PvF5H,并根据其序列设计编辑靶点... 柳枝稷(Panicum virgatum)是重要的C4多年生木质纤维素类生态能饲草。为了快速创制细胞壁转化效率高的能饲草新资源,以异源四倍体柳枝稷品种Alamo为材料,克隆了其木质素合成途径的阿魏酸-5-羟基化酶基因PvF5H,并根据其序列设计编辑靶点,用于构建CRISPR/Cas9-PvF5H编辑载体,最后通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化方法,获得了59株柳枝稷转基因阳性植株。测序分析表明,PvF5H在94.9%的转基因植株中被编辑,纯合编辑效率为55.4%。该研究建立了高效的柳枝稷基因编辑系统,实现了对细胞壁品质相关靶基因的有效编辑,为今后能饲草新品种的培育奠定了基础。 展开更多
关键词 能饲草 柳枝稷 木质素 f5h 基因编辑
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尾叶桉GLU4无性系F5H基因的克隆表达及序列分析 被引量:1
7
作者 肖玉菲 刘海龙 +2 位作者 刘雄盛 晏巢 陈博雯 《生物技术》 CAS 2018年第3期205-211,共7页
[目的]克隆尾叶桉(Eucalyptus urophylla)GLU4中F5H基因全长,并对其进行序列和表达模式分析。[方法]根据NCBI公布的F5H基因保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4茎部组织为试验材料克隆其g DNA和c DNA片段,利用荧光定量PCR分析其在植株不同组... [目的]克隆尾叶桉(Eucalyptus urophylla)GLU4中F5H基因全长,并对其进行序列和表达模式分析。[方法]根据NCBI公布的F5H基因保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4茎部组织为试验材料克隆其g DNA和c DNA片段,利用荧光定量PCR分析其在植株不同组织中的表达模式。[结果]该基因g DNA长2 358 bp,c DNA长1 610 bp,含有2个外显子、1个内含子。开放阅读框编码529个氨基酸,Eu F5H编码的蛋白为一个带负电荷、存在跨膜结构、定位在内质网起始分泌途径中的蛋白质,二级结构包含典型的的α-螺旋和β-折叠,根据三级结构推测其可能具有羟化酶活性。Eu F5H蛋白与蓝桉亲缘关系较近,Eu F5H在不同组织中表达水平差异显著,其中半木质化茎中表达水平相对最高。[结论]成功获得了尾叶桉GLU4木质素合成酶基因F5H的全长序列。 展开更多
关键词 尾叶桉 f5h 木质素合成 基因克隆 序列分析 表达模式
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基于基因过表达及基因沉默解析F5H基因对甘草酸生物合成的调控研究 被引量:4
8
作者 张智新 汪逗逗 +3 位作者 杨林 田少凯 肖瑶 刘颖 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1719-1726,共8页
阿魏酸5-羟化酶(ferulate 5-hydroxylase,F5H)是苯丙烷代谢途径上的关键酶。本课题组前期转录组测序研究显示F5H基因在甘草酸生物合成过程中起负调控作用,因此本文拟克隆该基因,并从基因过表达和沉默两个方面对这一调控作用进行深入研... 阿魏酸5-羟化酶(ferulate 5-hydroxylase,F5H)是苯丙烷代谢途径上的关键酶。本课题组前期转录组测序研究显示F5H基因在甘草酸生物合成过程中起负调控作用,因此本文拟克隆该基因,并从基因过表达和沉默两个方面对这一调控作用进行深入研究。本文克隆得到甘草F5H基因(GenBank注册号:MK882511);以pCAMBIA1305.1为载体骨架,以Spe I和Bgl II为酶切位点,利用基因融合法构建过表达载体pCA-F5H;根据F5H第一外显子设计sgRNA序列,以pHSE401为载体骨架,以BsaⅠ为酶切位点,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体pHSE-F5H;使用电转法将pCA-F5H和pHSE-F5H分别转入发根农杆菌ATCC15834感受态细胞;以甘草胚轴为外植体材料,利用发根农杆菌介导法分别诱导F5H过表达及沉默甘草毛状根系。同时,构建野生型甘草毛状根以及携带空质粒的阴性对照甘草毛状根。利用UPLC法测定各甘草毛状根系中甘草酸的含量,结果显示F5H基因沉默甘草毛状根体系中甘草酸含量显著高于野生型和阴性对照组,而过表达F5H基因甘草毛状根系中甘草酸含量则显著低于野生型和阴性对照组。本文通过逆向遗传学策略,从基因过表达和沉默两个方面证实了F5H基因对甘草酸生物合成的负调控作用,为进一步构建甘草酸次生代谢分子调控网络奠定了基础。 展开更多
关键词 f5h 甘草毛状根 甘草酸 基因过表达 基因沉默 CRISPR/Cas9
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红苞凤梨AbF3′5′H基因上游调控因子筛选
9
作者 林东璞 臧要强 +2 位作者 张霄鹏 周徐子鑫 马均 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期79-89,共11页
颜色是观赏植物最重要的性状之一,也是当前观赏园艺育种的一个重要方向。为研究红苞凤梨红蓝色彩的呈现机制,初步分析金边红苞凤梨(Ananas comosus var.bracteatus)不同组织中花青素种类与含量,用AbF3′5′H基因启动子构建诱饵载体,利... 颜色是观赏植物最重要的性状之一,也是当前观赏园艺育种的一个重要方向。为研究红苞凤梨红蓝色彩的呈现机制,初步分析金边红苞凤梨(Ananas comosus var.bracteatus)不同组织中花青素种类与含量,用AbF3′5′H基因启动子构建诱饵载体,利用酵母单杂交(Y1H)文库筛选其上游调控转录因子;并采用酵母单杂交验证技术,验证筛选出的转录因子与AbF3′5′H启动子的互作关系。结果表明:花青素的种类组成和相对比例决定了组织的颜色性状,AbF3′5′H是花青素合成途径种类分支的关键基因,在花青素种类组成与相对比例调控中具有重要作用;AbBTB/POZ、AbHSP81-1和AbGLOX能够与AbF3′5′H的启动子结合而调控其转录,可能在红苞凤梨花青素合成代谢调控中发挥重要作用。研究结果对于进一步揭示红苞凤梨花青素合成代谢调控机理,研究红苞凤梨呈色机理,培育叶色新品种有着重要的理论和实践意义。 展开更多
关键词 红苞凤梨 F3′5′H基因 花青素 酵母单杂交 调控因子
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亚麻木质素合成途径中关键酶基因片段的克隆与序列分析 被引量:6
10
作者 高原 陈信波 +3 位作者 龙松华 邓欣 邹杰 刘爱玲 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期337-340,共4页
亚麻是一种重要的韧皮纤维作物,木质素对亚麻纤维的性能和品质具有较大影响。以亚麻(Linum usitatis simum L.)茎秆表皮细胞的mRNA为模板,利用木质素合成途径中关键酶基因的同源基因保守序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增,电泳获得13个... 亚麻是一种重要的韧皮纤维作物,木质素对亚麻纤维的性能和品质具有较大影响。以亚麻(Linum usitatis simum L.)茎秆表皮细胞的mRNA为模板,利用木质素合成途径中关键酶基因的同源基因保守序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增,电泳获得13个特异带。分别将这些DNA片段连接到T载体后转化大肠杆菌,从重组质粒转化菌分别挑取5~8个单菌落测定插入片段序列,得到关键酶基因新的片段序列8个。生物信息学分析结果表明,这些新片段分别属于3个基因家族。其中,2个CCoAOMT基因片段(GenBank登录号为EF214740,EF214741),3个4CL基因片段(GenBank登录号为EF214737,EF214738,EF214739),3个F5H基因片段(GenBank登录号为EF214745,EF214746,EF214747),推测亚麻中这几个木质素代谢关键调控酶基因存在多基因家族。新获得的基因片段序列为进一步克隆全序列和了解调控亚麻木质素的生物合成奠定了基础。 展开更多
关键词 亚麻(Linum usitatissimumL.) CCoAOMT基因 4CL基因 f5h基因 序列分析
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抗倒伏甘蓝型油菜(Brassica napus L.)木质素含量及木质素合成关键基因的表达 被引量:18
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作者 李尧臣 戚存扣 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期481-487,共7页
测定了甘蓝型油菜6个抗倒伏材料和5个易倒伏材料薹期和花期植株不同部位的木质素含量,并对木质素合成关键酶基因F5H(阿魏酸-5-羟基化酶)基因、4CL(4-香豆酸辅酶A连接酶)基因、COMT(咖啡酸/5-羟基阿魏酸-O-甲基转移酶)基因进行RT-PCR扩增... 测定了甘蓝型油菜6个抗倒伏材料和5个易倒伏材料薹期和花期植株不同部位的木质素含量,并对木质素合成关键酶基因F5H(阿魏酸-5-羟基化酶)基因、4CL(4-香豆酸辅酶A连接酶)基因、COMT(咖啡酸/5-羟基阿魏酸-O-甲基转移酶)基因进行RT-PCR扩增,以分析抗倒伏和易倒伏材料间木质素含量的差异以及上述3个与木质素合成相关的关键酶基因的表达差异。结果显示:薹期根颈和茎部木质素含量,抗倒伏材料比易倒伏材料分别高0.95个百分点和1.90个百分点;开花期根、根颈和茎部木质素含量,抗倒伏材料比易倒伏材料分别高2.53个百分点、1.97个百分点和1.58个百分点;COMT基因在薹期和开花期的根、根颈和茎部的表达量,抗倒伏与易倒伏材料间没有明显差异;F5H基因在薹期根、茎部和开花期根部的表达量,抗倒伏材料明显高于易倒伏材料;4CL基因在薹期和开花期根、根颈的表达量,抗倒伏材料明显高于易倒伏材料;但在薹期和开花期的茎部,抗倒伏材料与易倒伏材料间4CL基因表达量差异不显著。表明,抗倒伏材料薹期和开花期根、根颈和茎部合成的木质素含量较高,F5H和4CL基因可能是与油菜抗倒伏性状相关的关键基因。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 抗倒伏 木质素 COMT基因 f5h基因 4CL基因 表达差异
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Genome-Wide Analysis of the F3′5′H Gene Family in Blueberry(Vaccinium corymbosum L.)Provides Insights into the Regulation of Anthocyanin Biosynthesis
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作者 Xiaolan Guo Jinbin Hu +2 位作者 Shimei Yang Delu Wang Jianbing Wang 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第9期2683-2697,共15页
The F3′5′H gene family plays an important role in regulating anthocyanin biosynthesis,abiotic stress,and hormone signaling.In this study,14 F3′5′H genes were identified from the blueberry genome.The chromosomal di... The F3′5′H gene family plays an important role in regulating anthocyanin biosynthesis,abiotic stress,and hormone signaling.In this study,14 F3′5′H genes were identified from the blueberry genome.The chromosomal distribution,physicochemical properties,F3′5′H domain,conserved motifs,cis-acting elements,and intron/exon compositions were analyzed.The functional prediction analysis of these VcF3′5′Hs indicated that their biological functions included light response and other secondary metabolites.The results of qRT-PCR showed that VcF3′5′Hs(especially VcF3′5′H4)were highly expressed at the ripening stage.Subcellular localization revealed that VcF3′5′H4 may be located in the endoplasmic reticulum.Co-expression analysis showed that the VcF3′5′H gene family was related to anthocyanin.This research provides an overview of the blueberry F3′5′H family and helps verify the role of these genes in regulating anthocyanin biosynthesis. 展开更多
关键词 BLUEBERRY F3′5′H ANTHOCYANIN gene expression CO-EXPRESSION
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矮牵牛F3′5′H基因的克隆及其在不同着色花药中的表达 被引量:4
13
作者 花庆 王蕾 +2 位作者 韦灵林 刘迎团 徐虹 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期152-158,共7页
通过品种间杂交和后代筛选,从模式植物矮牵牛中筛选出具有蓝花冠蓝花药的稳定株系。为了明确蓝色花药形成的分子机制,对蓝色花色素苷合成途径中的关键酶黄烷酮3′,5′-羟化酶(F3′5′H)进行研究,比较不同花药着色的矮牵牛植株中,F3′5′... 通过品种间杂交和后代筛选,从模式植物矮牵牛中筛选出具有蓝花冠蓝花药的稳定株系。为了明确蓝色花药形成的分子机制,对蓝色花色素苷合成途径中的关键酶黄烷酮3′,5′-羟化酶(F3′5′H)进行研究,比较不同花药着色的矮牵牛植株中,F3′5′H基因组DNA的PCR扩增模式、基因组序列,以及花发育第3阶段的花药组织中基因表达差异。结果表明,蓝色花药植株与对照材料间的F3′5′H基因组DNA扩增模式基本相同,都存在两个基因编码位点Hf1和Hf2。在蓝色花药植株中,Hf1位点扩增出两个片段,一个与已公布的Hf1的序列完全一致,另一个是不能编码完整蛋白的假基因;Hf2基因位点也扩增出两个基因片段,其中有一个片段的5′-末端序列与已公布的Hf2序列有96%同源性,另一个是非特异性扩增产物。此外,Hf1基因可以在花药组织中表达,但仅在蓝色花药中有转录,而Hf2基因在花药组织中没有表达。根据上述结果认为,矮牵牛植株中,编码F3′5′H的Hf1基因与蓝色花药的形成相关,这一结论为进一步揭示矮牵牛蓝色花药形成的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 F3′5′H基因 矮牵牛 蓝色花药 基因组DNA MRNA
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蝴蝶兰F3′5′H基因转化OT杂种百合Robina的研究 被引量:4
14
作者 刘爱玲 刘雅莉 +1 位作者 娄倩 张海芹 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期874-880,共7页
为了定向育种获得蓝色百合,该研究以百合Robina为蓝色基因最佳受体,以其花丝诱导产生的胚性愈伤组织和再生小植株小鳞片作为转化材料,利用农杆菌介导法,将蝴蝶兰F3′5′H基因导入百合Robina中。结果表明:以小鳞片为转化材料,预培养3d,OD... 为了定向育种获得蓝色百合,该研究以百合Robina为蓝色基因最佳受体,以其花丝诱导产生的胚性愈伤组织和再生小植株小鳞片作为转化材料,利用农杆菌介导法,将蝴蝶兰F3′5′H基因导入百合Robina中。结果表明:以小鳞片为转化材料,预培养3d,OD_(600)为0.8,侵染10min,共培养3d,加入100μmol/L AS稳定转化率最高为12.78%;而以胚性愈伤为转化材料,预培养2d,OD_(600)为0.8,侵染10min,共培养3d,加入100μmol/L AS稳定转化率最高为12.22%。2种转化材料的最适潮霉素筛选浓度均为20mg/L。对抗性植株分别进行PCR和反转录PCR检测,获得9个阳性株系,Southern印记分析进一步确定了6株转基因百合中携带蓝色基因F3′5′H,为后续进一步获得蓝色百合奠定了基础。 展开更多
关键词 F3′5′H Robina百合 胚性愈伤组织 小鳞片 遗传转化
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矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建 被引量:4
15
作者 李吉莲 姚宁涛 +1 位作者 祝建波 邓福军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第17期7897-7899,共3页
[目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝... [目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550 bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553 bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98.55%。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与"F3′5′H"构建成能够在植物中进行遗传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。 展开更多
关键词 矮牵牛 PchsA启动子 克隆 蓝色基因F3′5′H 表达载体
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木质素相关合成酶在甘蓝型黄、黑籽油菜中的表达差异 被引量:1
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作者 冉秀芝 雷波 +3 位作者 梁颖 李加纳 李波 柴友荣 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 2012年第6期29-35,共7页
以1对甘蓝型黄籽(L2)、黑籽(L1)油菜的近等基因系为材料,研究了木质素生物合成的部分关键酶4CL、F5H和CAD在黄、黑籽油菜的不同组织中的表达差异。结果表明:4CL、F5H和CAD在甘蓝型黄、黑籽油菜不同器官和组织中的表达存在差异,特别是在... 以1对甘蓝型黄籽(L2)、黑籽(L1)油菜的近等基因系为材料,研究了木质素生物合成的部分关键酶4CL、F5H和CAD在黄、黑籽油菜的不同组织中的表达差异。结果表明:4CL、F5H和CAD在甘蓝型黄、黑籽油菜不同器官和组织中的表达存在差异,特别是在种子中。其中,在同一组织器官中,4CL的不同种皮颜色之间的甘蓝型油菜中的表达差异明显;F5H在甘蓝型黄、黑籽油菜中的花与在30 d种子中的表达差异明显;CAD在种子的不同发育期中的表达差异明显。因此,这几种酶在甘蓝型黄、黑籽油菜种子中的表达差异,特别是在甘蓝型黄籽油菜的30 d种子中的表达都明显低于相应的黑籽油菜,说明这些酶的转录水平是导致木质素在甘蓝型黄、黑籽油菜之间存在表达差异的主要原因之一,也可能是形成甘蓝型黄、黑籽油菜皮壳差异的重要原因之一。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 对-香豆酸连接酶 5-羟基阿魏酸羟化酶 松柏醇脱氢酶 转录水平
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矮牵牛F3’5’H基因在花瓣呈色中的作用解析 被引量:1
17
作者 符真珠 王锐 +8 位作者 张泰然 王慧娟 高杰 李艳敏 蒋卉 王利民 袁欣 李彦邦 张和臣 《河南农业科学》 北大核心 2021年第12期121-127,共7页
为了揭示F3’5’H基因对矮牵牛花瓣的呈色作用,对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明,矮牵牛基因组中共有HF1和HF2两个位点编码F3’5’H基因。不同类型的矮牵牛具有不同的F3’5’H基因型。F3’5’H1^(R27)在第3个内含子上有1个dT... 为了揭示F3’5’H基因对矮牵牛花瓣的呈色作用,对其进行生物信息学分析和功能验证。结果表明,矮牵牛基因组中共有HF1和HF2两个位点编码F3’5’H基因。不同类型的矮牵牛具有不同的F3’5’H基因型。F3’5’H1^(R27)在第3个内含子上有1个dTPH9转座子的插入,使其产生2个类型的转录本,其中1个转录本的非正常编码是矮牵牛花瓣呈现粉色的主要原因。在矮牵牛M1×R27中超表达不同类型的F3’5’H基因,除F3’5’H1^(R27)外,其他基因型都能正常行使分子功能,促使转基因后代的矮牵牛花瓣呈现紫色。 展开更多
关键词 矮牵牛 F3’5’H 花色 分子机制
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Analysis of the Lignin Contents and Related Enzymes Activities in Seed Coat Between Black-Seeded and Yellow-Seeded Rapes (Brassica napus L.) 被引量:3
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作者 RAN Xiu-zhi LIANG Ying LI Jia-na 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2005年第12期890-897,共8页
One pair of near isonegic yellow/black seeded rape (Brassica napus L) were used as experimental materials to study the changes of lignin contents and enzymes activities of 4-coumarate: CoA ligase (4CL), Cinnamyl ... One pair of near isonegic yellow/black seeded rape (Brassica napus L) were used as experimental materials to study the changes of lignin contents and enzymes activities of 4-coumarate: CoA ligase (4CL), Cinnamyl alcohol dehydrogenase (CAD) and ferulate 5-hydroxylase (F5H) in seedcoats during the stage of seed development. The variation analysis showed that the changes of lignin contents and enzyme activities of 4CL, CAD and F5H in seed coat had significant differences between black- and yellow-seeded rapes, and also between different development stages. The correlation analysis demonstrated that the lignin contents were positively correlative to the activities of all three enzymes investigated in the study, and the interactions between them in the seed coat of the two lines. For yellow-seeded rape, the correlation coefficient (0.7262018) of lignin content and the interaction between 4CL and F5H was significant, the lignin contents were highly positively correlative to the activities of CAD and F5H, the interaction between 4CL and CAD, and the interaction between CAD and F5H. For the black-seeded rape, only the lignin content was highly positively correlative to the activity of F5H (the correlation coefficient was 0.772949), the other correlation coefficients, i. e. lignin contents to 4CL, CAD activities, the interactions between the three enzymes were not significant although all the correlation coefficients were above 0.5000. The results suggested that 4CL, CAD and F5H regulated the biosynthesis of lignin in seedcoat of rapes, leading to the lignin contents in the seedcoats of the yellow-seeded rape much lower than that of the black-seeded line, and affecting the thickness of the developing seedcoats in rapes. Therefore, it was likely to change the seedcoat ratio by overexpressing or suppressing the activities of one of the enzymes, both of them or all of them. 展开更多
关键词 Brassica napus L.0 Lignin contents0 4CL CAD f5h
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马铃薯‘转心乌’F3'5'H的cDNA克隆、原核表达和生物信息学分析 被引量:1
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作者 杨晓娜 赵昶灵 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第22期165-169,共5页
花色苷合成途径中,类黄酮-3'5'-羟基化酶是合成-3'5'-羟基花色素苷的关键酶。从‘转心乌’块茎嫩芽提取总RNA,通过RT-PCR克隆到F3'5'H的cDNA序列(GenBank登录号为HQ860267),SDS-PAGE获得表达蛋白的分子量约为55... 花色苷合成途径中,类黄酮-3'5'-羟基化酶是合成-3'5'-羟基花色素苷的关键酶。从‘转心乌’块茎嫩芽提取总RNA,通过RT-PCR克隆到F3'5'H的cDNA序列(GenBank登录号为HQ860267),SDS-PAGE获得表达蛋白的分子量约为55 k Da。该基因全长1 518 bp,编码区长1 485 bp,共编码494个氨基酸。 展开更多
关键词 马铃薯'转心乌’ 花色苷 F3′5′H 克隆 原核表达
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氟乙烷(C_2H_5F,EtF)制备研究进展 被引量:2
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作者 柳彩波 白占旗 《浙江化工》 CAS 2004年第6期16-18,共3页
本文着重介绍了氟乙烷的各种制备方法,对各种工艺进行了比较,以期从中选出适合于工业生产的工艺方法;文中也对氟乙烷的各种性质和用途进行了简单的介绍。
关键词 氟乙烷 C2H5F 制备 乙烯 加成 性质
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