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秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对白血病细胞K562/ADR多药耐药性的逆转作用
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作者 白宇 冯文雯 孙延庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第2期32-41,共10页
【目的】探讨中药秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对慢性髓系白血病耐药细胞K562/ADR耐药性的逆转作用。【方法】采用CCK-8法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率、周期及细胞内药物蓄积情况,rt-PCR和Western blot法检测耐药及凋亡相关基... 【目的】探讨中药秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对慢性髓系白血病耐药细胞K562/ADR耐药性的逆转作用。【方法】采用CCK-8法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率、周期及细胞内药物蓄积情况,rt-PCR和Western blot法检测耐药及凋亡相关基因/蛋白表达,免疫荧光法观察K562/ADR细胞膜蛋白P-gp表达。【结果】不同浓度的FA-2-b-β对K562/ADR耐药细胞具有增殖抑制作用,其半数抑制浓度为(3.42±0.395)mg/mL,并可将K562细胞周期阻滞在G_(0)/G_(1)期,K562/ADR细胞阻滞于G_(2)/M期,且胞内荧光显示药物蓄积量增多。Western-blot及rt-PCR示FA-2-b-β能够明显下调耐药基因p65、MDR1的表达,上调基因p53、IκB-α、Bax的表达。【结论】秦巴硒菇提取物FA-2-b-β抑制K562/ADR细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过调控NF-κB信号通路实现的。 展开更多
关键词 秦巴硒菇 fa-2-b-β 慢性髓系白血病 多药耐药性
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秦巴硒菇多糖(FA-2-b-β)联合表阿霉素对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移及凋亡的影响
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作者 安红霞 骆文远 +3 位作者 孟敏 刘继新 张伟 孙延庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第6期12-19,30,共9页
【目的】探讨秦巴硒菇多糖(FA-2-b-β)联合盐酸表阿霉素(Epirubicin Hydrochloride,EPI)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移及凋亡的影响。【方法】采用MTT法测定FA-2-b-β、EPI和二者联合用药时对MG63细胞的抑制率,并根据金氏公式判断两药的... 【目的】探讨秦巴硒菇多糖(FA-2-b-β)联合盐酸表阿霉素(Epirubicin Hydrochloride,EPI)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移及凋亡的影响。【方法】采用MTT法测定FA-2-b-β、EPI和二者联合用药时对MG63细胞的抑制率,并根据金氏公式判断两药的协同效应,同时在倒置显微镜下观察细胞形态;划痕实验检测细胞增殖;DAPI染色及流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1染色检测线粒体膜电位的变化;蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)和qPCR检测各组细胞PI3K、AKT、mTOR、Bax、Bcl-2、Capase-3的表达。【结果】FA-2-b-β、EPI及二者联合用药对MG63细胞的增殖均有抑制作用,联合用药组的增殖抑制作用更显著,具有协同效应;倒置显微镜可见联合用药组存活细胞数量减少,体积变大;与单一用药相比,联合用药时诱导MG63细胞凋亡、抑制细胞迁移和降低细胞线粒体膜电位的作用均更显著(P<0.05);FA-2-b-β、EPI和二者联用给药均可上调Bax、Capase-3的表达(P<0.05),下调Bcl-2、PI3K、AKT、mTOR的表达(P<0.05),联合用药组的作用更为显著(P<0.05)。【结论】FA-2-b-β联合EPI可协同抑制骨肉瘤MG63的增殖和迁移,并诱导凋亡,该作用可能与负向调控骨肉瘤MG63细胞中的PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 fa-2-b-β 表阿霉素 凋亡 联合用药 PI3K/AKT/mTOR通路
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秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对人多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 魏玉萍 王雪霁 +10 位作者 宋丽君 马燕萍 包慎 孙延庆 程明霞 李叶琼 张伟 智峰 冶秀鹏 李蓉 陈俊敏 《宁夏医学杂志》 CAS 2020年第3期204-206,共3页
目的探讨秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对人骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡的作用。方法利用MTT比色法检测不同药物浓度(0.6、1.2、1.8、2.4mg/mL)对RPMI8226细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blotting检测BCL-2和BAX蛋白的表达。结果... 目的探讨秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对人骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡的作用。方法利用MTT比色法检测不同药物浓度(0.6、1.2、1.8、2.4mg/mL)对RPMI8226细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blotting检测BCL-2和BAX蛋白的表达。结果 FA-2-b-β对RPMI8226细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测显示,不同浓度FA-2-b-β作用于RPMI8226细胞48 h时,随药物浓度增加凋亡率也增高。Western blotting检测显示,凋亡相关蛋白BAX表达上调,BCL-2表达下调。结论 FA-2-b-β能够抑制多发性骨髓瘤细胞增殖及诱导其凋亡,其机制可能与BCL-2/BAX表达调控有关。 展开更多
关键词 秦巴硒菇 fa-2-b-β 多发性骨髓瘤细胞 凋亡
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FA-2-b-β对慢性髓系白血病原代细胞的增殖抑制作用及其相关机制 被引量:1
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作者 程明霞 于尚睿 +6 位作者 汪湛东 白坤恬 王东萍 李娟 刘世栋 孙延庆 董莉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1885-1891,共7页
目的:探讨秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物(FA-2-b-β)抗慢性髓系白血病的效果及机制。方法:应用CCK-8法检测不同浓度FA-2-b-β对初诊慢性髓系白血病患者原代细胞增殖抑制作用;通过尾静脉注射原代白血病细胞建立慢性髓系白血病小鼠模型... 目的:探讨秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物(FA-2-b-β)抗慢性髓系白血病的效果及机制。方法:应用CCK-8法检测不同浓度FA-2-b-β对初诊慢性髓系白血病患者原代细胞增殖抑制作用;通过尾静脉注射原代白血病细胞建立慢性髓系白血病小鼠模型,观察模型小鼠生存期、血细胞数、体重变化;采用免疫荧光、免疫组织化学法、RT-qPCR及Western blot法检测caspase3信号通路相关凋亡基因和蛋白的表达。结果:体外实验显示,各药物浓度组中原代细胞增殖抑制率升高,且呈浓度时间依赖性(r24=0.9082,r48=0.9442,r72=0.9546)。组间比较差异具有统计学意义。体内实验显示,实验组(FA-2-b-β)和阳性对照组(伊马替尼)模型小鼠生存期均延长,并且血细胞数升高及体重恢复至正常,尽管白细胞数仍高;BAX、Caspase-3基因和蛋白表达上调,BCL-2、Cytochrome C、caspase 8、caspase 9、BCL/ABL基因和蛋白表达下降。结论:FA-2-b-β诱导慢性髓系白血病原代细胞凋亡,可延长慢性髓系白血病模型小鼠的生存期,其机制可能与caspase-3信号通路相关凋亡基因和蛋白有关。 展开更多
关键词 秦巴硒菇 fa-2-b-β 伊马替尼 慢性髓系白血病 caspase3信号通路
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秦巴硒菇提取物FA-2-b-β诱导CD34^+CD38^--KG1a白血病干细胞凋亡及其相关机制 被引量:9
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作者 王东萍 石玮 +5 位作者 葛万文 张菊霞 赵莲萍 陈雪 董莉 孙延庆 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1761-1766,共6页
目的:探讨秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对CD34^+CD38^--KG1a白血病干细胞凋亡的诱导及其相关机制。方法:用免疫磁珠分选法从KG1a细胞株中分选出CD34^+CD38^--KG1a干细胞;不同浓度的FA-2-b-β(1.2-2.4mg/ml)体外干预KG1a干细胞24、48 h,应用C... 目的:探讨秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对CD34^+CD38^--KG1a白血病干细胞凋亡的诱导及其相关机制。方法:用免疫磁珠分选法从KG1a细胞株中分选出CD34^+CD38^--KG1a干细胞;不同浓度的FA-2-b-β(1.2-2.4mg/ml)体外干预KG1a干细胞24、48 h,应用CCK-8检测其增殖能力变化;流式细胞术检测FA-2-b-β干预KG1a干细胞后各组细胞凋亡比例;采用Western blot检测BAX、BCL-2、Casepase-3及Cyclin D1蛋白表达。结果:经过免疫磁珠分选后KG1a干细胞比例为(95.35±2.63)%。FA-2-b-β对KG1a干细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性(24 h,r=0.943;48 h,r=0.976)。流式细胞术检测显示,不同浓度FA-2-b-β作用KG1a干细胞24 h时,随药物浓度增加凋亡率也随之增高。Western blot检测显示,凋亡相关蛋白BAX和Casepase-3表达上调,BCL-2和Cyclin D1的表达下调。结论:秦巴硒菇提取物FA-2-b-β能够调控KG1a干细胞的增殖和凋亡,其抗肿瘤效应可能通过调控线粒体介导的凋亡途径实现。 展开更多
关键词 秦巴硒菇 酸性RNA蛋白复合物 白血病干细胞 凋亡 线粒体
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Effects of AZT and RNA-protein complex (FA-2-b-β) extracted from Liang Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells 被引量:11
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作者 Yan-Qing Sun Zi-Ren Wang +3 位作者 Tian-Kang Guo Ya-Ming Xi Che Chen, Jin-Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第31期4185-4191,共7页
To investigate the synergistic effects of 3′-azido-3′- deoxythymidine (AZT) and FA-2-b-β extracted from Ling Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells MKN45 in vitro. METHODS: Ml-I- analysis was made to ... To investigate the synergistic effects of 3′-azido-3′- deoxythymidine (AZT) and FA-2-b-β extracted from Ling Jin mushroom on apoptosis of gastric cancer cells MKN45 in vitro. METHODS: Ml-I- analysis was made to examine the inhibition rate of MKN45 cells treated with AZT (2.5, 5, 10 and 20 mg/L) and FA-2-b-13 (5, 10, 20 and 40 mg/L) singly and combinatively for 24, 48 and 72 h. Apoptotic effects were evaluated by morphological methods, DNA agarose gel electrophoresis and flow cytometry, respectively. Telomerase activity was estimated by TRAP- ELISA. The mRNA expression of caspase-3 and Bcl-2 were detected by RT-PCR. RESULTS: AZT and FA-2-b-13 could significantly inhibit MKN45 cell proliferation and induce its apoptosis. MKN45 cells were inhibited in dose- and time- dependent manner. The inhibition effect of AZT combined with FA-2- b-β was obviously better than that used singly (0.469 + 0.022 vs 1.075 4- 0.055, P 〈 0.05, 0.325 4- 0.029 vs 0.469 + 0.022 P 〈 0.01). AZT used singly and combination of FA-2-b-β could decrease the activity of tumor cell telomerase, and AZT has synergistic function with FA- 2-b-β. A certain concentration of AZT could up-regulate the expression of caspase-3 mRNA (r = 0.9969, P 〈 0.01), which was positively related to apoptosis rate, and could down-regulate the expression of Bcl-2 mRNA, which was negatively related to apoptosis rate (r = 0.926, P 〈 0.01). Furthermore, the effect of AZT combined with FA-2-b-13 was significantly higher than that used singly. CONCLUSION: Combination of AZT and FA-2-b-β has an obviously synergetic effect in the gastric cancer cells MKN45, which has provided a new approach to the treatment of gastric cancer clinically. 展开更多
关键词 AZT fa-2-b-β APOPTOSIS Telomerase Bcl-2 Caspase-3 MKN45 cell
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秦巴硒菇提取物FA-2-b-β对伯基特淋巴瘤Raji细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制 被引量:2
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作者 白坤恬 孙延庆 +3 位作者 董莉 程明霞 张启科 党春艳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第10期1134-1138,共5页
目的观察秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物FA-2-b-β对伯基特淋巴瘤细胞株Raji增殖及凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法体外培养Raji细胞,分别加入浓度为0.9、1.5、2.1、2.7 mg/mL的FA-2-b-β,对照组加入等量培养基。培养24、48、7... 目的观察秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物FA-2-b-β对伯基特淋巴瘤细胞株Raji增殖及凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法体外培养Raji细胞,分别加入浓度为0.9、1.5、2.1、2.7 mg/mL的FA-2-b-β,对照组加入等量培养基。培养24、48、72 h后收集各组细胞,采用CCK-8法检测FA-2-b-β对Raji细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞β-catenin、c-myc、cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果FA-2-b-β能抑制Raji细胞增殖,且呈浓度-时间依赖性(P<0.01);给药48 h后,各浓度FA-2-b-β组细胞凋亡率较对照组均显著上升,且呈剂量依赖性(P<0.05);各浓度FA-2-b-β组细胞β-catenin、c-myc、cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平显著低于对照组,且呈剂量依赖性(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著高于对照组,同样呈剂量依赖性(P<0.05),Bax/Bcl-2比值增加。结论FA-2-b-β呈时间-剂量依赖性诱导伯基特淋巴瘤凋亡,可能与Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 秦巴硒菇 fa-2-b-β 伯基特淋巴瘤 细胞增殖 细胞凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
原文传递
秦巴硒菇提取物对NCG小鼠慢性髓系白血病模型体内抗肿瘤的初步研究 被引量:4
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作者 程明霞 祁晶 +6 位作者 赵莲萍 吕黎 陈雪 李高 白坤恬 韩彩娟 孙延庆 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期381-388,共8页
目的:验证秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物FA-2-b-β诱导肿瘤细胞凋亡及免疫调节的作用。方法:采用CCK-8法计算FA-2-b-β对K562细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率。通过尾静脉/皮下注射K562细胞构建慢性髓系白血病模型,观察... 目的:验证秦巴硒菇提取物酸性RNA蛋白复合物FA-2-b-β诱导肿瘤细胞凋亡及免疫调节的作用。方法:采用CCK-8法计算FA-2-b-β对K562细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率。通过尾静脉/皮下注射K562细胞构建慢性髓系白血病模型,观察小鼠成瘤负荷,每天2次观察小鼠一般情况,定期检测小鼠外周血细胞数。RT-q PCR及Western blot检测FA-2-b-β作用于白血病小鼠后相关凋亡基因/蛋白的表达;免疫荧光和免疫组织化学检测CD3、CD4、CD8的表达。结果:FA-2-b-β抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,模型小鼠成瘤率100%,药物治疗21天后,与对照组相比,外周血白细胞数明显升高,血红蛋白降低;免疫荧光及免疫组化结果显示CD3、CD4、CD8阳性,比例失调,治疗后各项指标有所改善。结论:初步验证秦巴硒菇提取物FA-2-b-β具有诱导肿瘤细胞凋亡及免疫调节作用。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 秦巴硒菇 fa-2-b-β 凋亡 免疫调节 小鼠
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