Synthesis of Boc-Asp(OBzl)-β-Ala-Asp(OBzl)-N(OMe)Me as a Useful Precursor of Aspartyl Peptide Aldehyde Derivatives

Aim To synthesize the tripepide Weinreb amide Boc Asp(OBzl) β Ala Asp(OBzl) N(OMe)Me (7) as a useful precursor of aspartyl peptide aldehyde derivatives; Methods DCC, IBCF method was used for preparation of Weinreb amide; N hydroxysuccinimide activated ester was used in peptide synthesis; and Boc as N protecting group of amino acid. Results Boc Asp(OBzl) N(OMe)Me (3), Boc β Ala Asp(OBzl) N(OMe)Me (5), and Boc Asp(OBzl) β Ala Asp(OBzl) N(OMe)Me (7) were synthesized successfully. Conclusion An useful precursor of tripeptide aspartyl aldehydes was synthesized.

Boc和Fmoc保护氨基酸与M树脂和王氏树脂结合率的比较

M树脂与Boc保护的亮氨酸、甘氨酸或苯丙氨酸的铝盐成酯反应摩尔比1:12,时间31h,其产物用重量法和水杨醛法测得的结合率均值分别为87.3％、89.1％和89.6％。王氏树脂与Fmoc保护的亮氨酸、甘氨酸或苯丙氨酸反应48h,树脂:Fmoc氨基酸:DCC:DMAP摩尔比为1:3:4:1,其产物结合率的均值分别为44.2％、30.4％和56.2%。结果表明,前者产物结合率高于后者。另外,重量法与水杨醛法测得的结合率相差不超过2.7％,但重量法更方便,易行。

经济实用的Boc保护氨基酸键合氯甲基树脂的方法研究

在固相多肽合成中,探索一种经济有效的Boc保护氨基酸键合氯甲基树脂的方法.采用K_2CO_3/KI作为键合试剂,一步合成产物,反应条件为:Boc保护氨基酸2.5倍量,K_2CO_32.5倍量,KI0.01倍量,氯甲基树脂1.0倍量,普通DMF作反应溶剂,70℃空气浴中旋转反应25h.考察了28种不同结构的氨基酸底物在此条件下与氯甲基树脂的键合收率,大多数氨基酸都能得到几乎定量的酯化产率.并选取了不同空间位阻的4种Boc保护氨基酸,比较了KOH,Cs_2CO_3,TEA/KI,DCHA/KI,DIPA/KI,Cs_2CO_3/KI和K_2CO_3/KI等不同键合条件对收率的影响.结果表明,除Boc-Asn-OH外,K_2CO_3/KI条件与Cs_2CO_3/KI的效果大体相同,但K_2CO_3/KI更为经济、可行.

新型脱除Boc试剂——二氯二甲基硅烷

通过考察苯酚浓度对DDSi^(2)脱除Boc的影响,比较与CTMSi脱除Boc的效率差别;DDSi对侧链保护基及对肽—树脂连接结构完整性的影响等实验证明,DDSi可以作为肽合成中脱除Boc的试剂。最后,利用DDSi脱除Na-Boc的方法,成功地制备了四肽Pro—Thr—Phe—Tyr。

Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH的合成工艺研究

N^(α)-芴甲氧羰基-N^(δ)-叔丁氧羰基-L-鸟氨酰甘氨酸(Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH)是宫缩抑制剂阿托西班的短肽片段,通过液相合成法高效合成高纯度的Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH片段可以有效降低阿托西班的合成成本。采用液相合成方法,以N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(HONB)活化N^(α)-芴甲氧羰基-N^(δ)-叔丁氧羰基-L-鸟氨酸(Fmoc-L-Orn(Boc)-OH)的羧基高效合成Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH,并对反应物料配比和反应溶剂体系进行了研究,得到了最优的Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH合成工艺,该工艺操作简单、成本低且产物纯度高,可用于工业化生产。

甲酰基肽受体1对BV-2细胞迁移的影响及机制的体外研究

目的探讨甲酰基肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)对BV-2细胞迁移的影响及潜在机制。方法免疫荧光染色检测BV-2细胞FPR1的表达,Transwell小室实验分别检测浓度为1、10、50、100、500 nmol/L的FPR1特异性激动剂(formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,f MLP)对细胞迁移的影响,划痕实验及Transwell小室实验验证f MLP促进细胞迁移的作用可以被FPR1特异性阻断剂BocMLF所抑制。Western blot检测激动剂组、阻断剂组和阻断剂+激动剂组BV-2细胞经干预后其FPR1蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regulate kinase,p-ERK)蛋白表达量的变化。结果经免疫荧光染色结果显示,BV-2细胞表达FPR1,主要位于细胞膜表面。随着f MLP浓度的升高,Transwell迁移实验结果显示BV-2细胞的迁移能力明显增加(P<0.05),呈现出明显的剂量依赖性。100 nmol/L及500 nmol/L激动剂组效果最明显,f MLP促进BV-2细胞迁移的最适浓度为100 nmol/L。划痕及Transwell小室实验结果显示5μmol/L的Boc-MLF可显著阻断上述现象(P<0.05)。f MLP可以上调BV-2细胞中FPR1的表达(P<0.05),并且显著活化胞内ERK信号通路,上调p-ERK蛋白的表达水平(P<0.05),Boc-MLF又可显著抑制上述改变(P<0.05)。结论 BV-2细胞表达FPR1,且FPR1在促进BV-2细胞迁移中具有重要作用。

Merrifield树脂和王氏树脂与N端保护苯丙氨酸成酯反应的比较

目的:比较Merrifield树脂和王氏树脂与N端保护苯丙氨酸成酯反应的结合率。方法:Merrifield树脂与Boc苯丙氨酸铯盐成酯反应克分子比为1∶1.2,反应31h。王氏树脂与Fmoc苯丙氨酸酯化反应48h,克分子比为1∶3。结果:Merrifield树脂与Boc苯丙氨酸铯盐成酯反应产物,用质量法和水杨醛法测得其产物结合率分别为90.0%和89.2%;王氏树脂与Fmoc苯丙氨酸酯化产物,用质量法和水杨醛法测得其产物的结合率分别为56.1%和56.3%。结论:Merrifield树脂的成酯产物结合率至少高于王氏树脂产物的32%。另外,质量法与水杨醛法测得的结合率相差不超过1%,但质量法更方便。

聚乙二醇-聚苯乙烯接枝共聚物的合成及其接肽反应性能

本文应用环氧乙烷在羟乙基树脂上的开环聚合方法,合成了凝胶和大孔型聚乙二醇-聚苯乙烯接枝共聚物(简称PEG树脂)。对不同类型载体的接肽反应动力学性能研究表明,在PEG树脂载体上的反应速度是在氯甲基化树脂上的三倍,与在溶液中进行的接肽反应速率相当。此外,还对载体性能与树脂交联度、骨架结构之间的关系进行了初步探索。

阿尔茨海默β-淀粉样肽核心片段衍生物的合成

由苯丙氨酸(F)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)和赖氨酸(K)组成的KLVFF五肽序列是阿尔茨海默β-淀粉样肽自聚集形成纳米纤维化结构的核心片段,合成该肽段及对其分子侧链和主链结构进行修饰对研究阿尔茨海默病发病机制具有重要意义。以Fmoc-保护基缬氨酸(Fmoc V-OH)和Fmoc-保护基苯丙氨酸(Fmoc F-OH)为原料,N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)和二环己基碳二亚胺(DCC)为缩合剂,采用液相合成法合成了Fmoc基保护的二肽、三肽模块Fmoc FF-OH和Fmoc VLK(Boc)-OH,模块在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中与哌啶反应脱保护基后得到二肽、三肽NH2-FF-OH和NH2-VLK(Boc)-OH。Fmoc基保护的模块再与二肽、三肽组合、缩合及脱保护反应后,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化得到骨架中赖氨酸(K)的侧基由Boc保护的阿尔茨海默β-淀粉样肽核心片段肽H2N-VLK(Boc)FF-OH及H2N-FFVLK(Boc)-OH,并对目标五肽进行了核磁和质谱表征。