旨在获得牦牛FHL2基因序列,阐明该基因序列、蛋白质结构与性质、mRNA的组织表达模式、在雌性生殖器官及颗粒细胞的蛋白表达特性。本研究以5头健康空怀成年母牦牛的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫、输卵管组织及5头妊娠2个月左右母牦牛...旨在获得牦牛FHL2基因序列,阐明该基因序列、蛋白质结构与性质、mRNA的组织表达模式、在雌性生殖器官及颗粒细胞的蛋白表达特性。本研究以5头健康空怀成年母牦牛的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫、输卵管组织及5头妊娠2个月左右母牦牛的子宫、输卵管和卵巢为研究材料,利用逆转录PCR(RT-PCR)技术克隆FHL2基因,并使用在线分子生物学软件分析其生物信息学特性;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析FHL2基因的组织表达特性;应用免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF)技术检测FHL2蛋白在雌性生殖器官的分布和颗粒细胞上的亚细胞定位。结果发现,FHL2基因CDS区全长840 bp (ON456866),编码279个氨基酸,FHL2蛋白属于弱碱性亲水不稳定蛋白,没有跨膜结构。不同物种的FHL2氨基酸序列比对和进化树分析表明,FHL2基因编码区在物种进化中比较保守。RT-qPCR结果显示,FHL2基因在检测的组织都有表达,在心的表达量极显著高于其他检测组织(P<0.01);在肺、卵巢、输卵管和子宫中的表达量极显著高于肝、脾和肾(P<0.01)。FHL2基因在妊娠期子宫中的表达量极显著高于空怀期(P<0.01),在卵巢中妊娠期的表达量极显著低于空怀期(P<0.01)。IHC结果表明,在生殖器官中FHL2蛋白主要在卵泡颗粒细胞、子宫内膜和输卵管黏膜表达;IF定位结果显示,FHL2蛋白主要分布在卵泡颗粒细胞的细胞核中。综上所述,牦牛FHL2基因在动物进化过程中比较保守,在心、肺、卵巢、输卵管和子宫中表达量高,可能在参与牦牛低氧适应性、卵泡发育和妊娠维持等生理功能的调控中发挥重要作用。展开更多
目的研究风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中FHL2蛋白水平的变化,探讨FHL2改变在慢性心房颤动中的作用。方法按性别、年龄、二尖瓣狭窄程度、左房大小及肺动脉压力配对,收集接受瓣膜置换手术的风湿性二尖瓣狭窄患者共28例(窦性组14例...目的研究风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中FHL2蛋白水平的变化,探讨FHL2改变在慢性心房颤动中的作用。方法按性别、年龄、二尖瓣狭窄程度、左房大小及肺动脉压力配对,收集接受瓣膜置换手术的风湿性二尖瓣狭窄患者共28例(窦性组14例,房颤组14例)。在建立体外循环时采取右心耳组织及部分慢性心房颤动患者左心耳组织(7例),用Western blot法检测FHL2蛋白在心房肌中的表达水平。结果在右心耳水平,房颤组FHL2蛋白(0.68±0.28 vs 0.51±0.18,t=2.488,P=0.027)表达水平较窦性组明显上调。房颤组FHL2蛋白的表达量在右心耳与左心耳差异无统计学意义(0.58±0.22 vs 0.50±0.13,t=0.984,P=0.363)。结论 FHL2蛋白在风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中表达上调,其可能参与慢性心房颤动的发生及维持。而FHL2蛋白在慢性心房颤动左、右心房肌的表达无明显差异,表明右心耳标本替代左心耳在本研究中的结果是可信的。展开更多
由4个半LIM 结构域组成的FHL家族蛋白(four and a half LIM domains protein)包括FHL1、FHL2、FHL3、FHT4 和ACT.FHL2蛋白参与多种蛋白质的相互作用以及多种转录因子、骨架蛋白、酶等的调控作用.这些作用已经发现在包括心律失常、心...由4个半LIM 结构域组成的FHL家族蛋白(four and a half LIM domains protein)包括FHL1、FHL2、FHL3、FHT4 和ACT.FHL2蛋白参与多种蛋白质的相互作用以及多种转录因子、骨架蛋白、酶等的调控作用.这些作用已经发现在包括心律失常、心肌肥厚、动脉粥样硬化和心血管新生成等方面充当各种重要的角色.而心血管系统是一个精细而复杂的调控系统,心肌拥有复杂、内在的机制来调控相应的心肌重构.很多类型的蛋白,包括结构和信号网络,用于维持机体内稳态以及对环境压力的响应.展开更多
文摘旨在获得牦牛FHL2基因序列,阐明该基因序列、蛋白质结构与性质、mRNA的组织表达模式、在雌性生殖器官及颗粒细胞的蛋白表达特性。本研究以5头健康空怀成年母牦牛的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫、输卵管组织及5头妊娠2个月左右母牦牛的子宫、输卵管和卵巢为研究材料,利用逆转录PCR(RT-PCR)技术克隆FHL2基因,并使用在线分子生物学软件分析其生物信息学特性;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析FHL2基因的组织表达特性;应用免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF)技术检测FHL2蛋白在雌性生殖器官的分布和颗粒细胞上的亚细胞定位。结果发现,FHL2基因CDS区全长840 bp (ON456866),编码279个氨基酸,FHL2蛋白属于弱碱性亲水不稳定蛋白,没有跨膜结构。不同物种的FHL2氨基酸序列比对和进化树分析表明,FHL2基因编码区在物种进化中比较保守。RT-qPCR结果显示,FHL2基因在检测的组织都有表达,在心的表达量极显著高于其他检测组织(P<0.01);在肺、卵巢、输卵管和子宫中的表达量极显著高于肝、脾和肾(P<0.01)。FHL2基因在妊娠期子宫中的表达量极显著高于空怀期(P<0.01),在卵巢中妊娠期的表达量极显著低于空怀期(P<0.01)。IHC结果表明,在生殖器官中FHL2蛋白主要在卵泡颗粒细胞、子宫内膜和输卵管黏膜表达;IF定位结果显示,FHL2蛋白主要分布在卵泡颗粒细胞的细胞核中。综上所述,牦牛FHL2基因在动物进化过程中比较保守,在心、肺、卵巢、输卵管和子宫中表达量高,可能在参与牦牛低氧适应性、卵泡发育和妊娠维持等生理功能的调控中发挥重要作用。
文摘目的研究风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中FHL2蛋白水平的变化,探讨FHL2改变在慢性心房颤动中的作用。方法按性别、年龄、二尖瓣狭窄程度、左房大小及肺动脉压力配对,收集接受瓣膜置换手术的风湿性二尖瓣狭窄患者共28例(窦性组14例,房颤组14例)。在建立体外循环时采取右心耳组织及部分慢性心房颤动患者左心耳组织(7例),用Western blot法检测FHL2蛋白在心房肌中的表达水平。结果在右心耳水平,房颤组FHL2蛋白(0.68±0.28 vs 0.51±0.18,t=2.488,P=0.027)表达水平较窦性组明显上调。房颤组FHL2蛋白的表达量在右心耳与左心耳差异无统计学意义(0.58±0.22 vs 0.50±0.13,t=0.984,P=0.363)。结论 FHL2蛋白在风湿性心脏病合并慢性心房颤动心房肌中表达上调,其可能参与慢性心房颤动的发生及维持。而FHL2蛋白在慢性心房颤动左、右心房肌的表达无明显差异,表明右心耳标本替代左心耳在本研究中的结果是可信的。
文摘由4个半LIM 结构域组成的FHL家族蛋白(four and a half LIM domains protein)包括FHL1、FHL2、FHL3、FHT4 和ACT.FHL2蛋白参与多种蛋白质的相互作用以及多种转录因子、骨架蛋白、酶等的调控作用.这些作用已经发现在包括心律失常、心肌肥厚、动脉粥样硬化和心血管新生成等方面充当各种重要的角色.而心血管系统是一个精细而复杂的调控系统,心肌拥有复杂、内在的机制来调控相应的心肌重构.很多类型的蛋白,包括结构和信号网络,用于维持机体内稳态以及对环境压力的响应.