急性髓系白血病FLT3-TKD、NPM1双基因阳性突变的预后

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者FMS样酪氨酸激酶-3基因第二酪氨酸激酶结构域(FLT3-TKD)、核仁磷酸蛋白基因(NPM1)和FLT3-TKD+/NPM1+双阳性基因突变与预后的关系。方法回顾性分析本院198例AML患者的临床资料,检测其FLT3-TKD和NPM1基因,进行标准方案诱导缓解及缓解后巩固强化化疗。随访1～40个月,观察预后并进行疗效分析及生存分析。结果 (1)疗效分析:与FLT3-TKD-/NPM1-组、FLT3-TKD+/NPM1-组比较,FLT3-TKD+/NPM1+组一个疗程CR率、总CR率明显升高,复发率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与FLT3-TKD-/NPM1+组比较,FLT3-TKD+/NPM1+组一个疗程CR率、总CR率及复发率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)生存分析:四组的总体生存时间和无复发生存时间差异均无统计学意义(均P>0.05);生存曲线提示,与FLT3-TKD+/NPM1-组比较,FLT3-TKD+/NPM1+组总体生存率、80%总体生存率、无复发生存率、80%无复发生存率明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与FLT3-TKD-/NPM1+组和FLT3-TKD-/NPM1-组比较,FLT3-TKD+/NPM1+组总体生存率、80%总体生存率、无复发生存率、80%无复发生存率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 FLT3-TKD+/NPM1-基因的AML患者预后较差,而FLT3-TKD+/NPM1+基因预后良好,具有低复发率,治疗高反应性特点;检测分析AML患者FLT3-TKD及NPM1基因可以指导临床治疗及判断预后。

急性髓系白血病患者FLT3基因第二酪氨酸激酶结构域突变图谱

目的分析急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者Fms样酪氨酸激酶3（Fms-like tyrosine kinase3，FLT3）基因第二酪氨酸激酶结构域（Tyrosine-kinase domain，TKD）突变类型，为基因检测及临床应用奠定基础。方法采用Sanger测序法检测AML患者骨髓细胞FLT3基因第20号外显子碱基序列，统计不同突变类型；收集并比较不同突变类型患者的性别、年龄、WHO分型、白细胞、血红蛋白、血小板、染色体核型等资料。结果在1，063例AML患者中检测到FLT3-TKD突变58例（5．5％），包括点突变52例，缺失突变5例，点突变伴缺失突变1例，其中点突变D835Y突变型比例最高为31例（53．4％）。点突变组与缺失突变组患者在年龄和染色体核型方面差异有统计学意义（P=0．028，P=-0．049），在性别、WHO分型、白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例和髓外浸润方面差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AML患者FLT3-TKD突变以点突变为主，D835Y突变型比例最高；缺失突变组患者较点突变组患者年龄大。

急性髓细胞白血病FLT3基因内部串联重复和点突变及治疗

FLT3受体是Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族中成员。FLT3突变是急性髓细胞白血病（AML）中一种最常见基因改变,1/3的AML患者有该基因突变,最主要的突变包括FLT3近膜区（JM）内部串联重复突变（ITD）和＂活化环＂处点突变（TKD）。这些突变导致FLT3下游信号通路持续活化和变异细胞增殖[1]。

急性髓系白血病FLT3基因ITD、TKD突变的临床特征及预后比较

目的检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变、酪氨酸激酶结构域(TKD)突变,分析并比较不同种类的FLT3突变的临床特征及预后意义。方法采用一代测序法检测2010年7月至2015年10月收治的初诊AML患者骨髓细胞FLT3/ITD和FLT3/TKD的基因突变,收集并比较221例FLT3/ITD、FLT3/TKD突变患者以及ITD/TKD双突变患者的性别、年龄、WHO分型、白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例、生存时间等资料。结果 221例FLT3基因突变AML患者中FLT3/ITD突变172例,FLT3/TKD突变44例,ITD/TKD双突变5例。FLT3/ITD突变、FLT3/TKD突变及ITD/TKD双突变患者的性别、年龄、WHO分型、白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例、髓外浸润及首疗程完全缓解率差异无显著性(P>0.05)。FLT3/ITD突变患者3年RFS及OS累积生存率为21.4%和25.2%,分别较FLT3/TKD突变患者70.5%和72.7%低,差异均有显著性(P<0.001)。结论 AML患者FLT3基因ITD突变较TKD突变比例高,3年RFS及OS累积生存率均较TKD突变低,预后差。

FLT3基因突变在急性早幼粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的:检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变和酪氨酸激酶结构域(TKD)突变的表达,并探讨临床意义。方法:提取APL患者骨髓单个核细胞DNA,采用聚合酶链反应及测序技术检测FLT3-ITD和FLT3-TKD,分析临床资料及预后。结果:在77例APL患者中,23例(29.9%)检出FLT3-ITD,7例(9.1%)检出FLT3-TKD点突变,具体包括5例D835Y、1例N841I、1例D835Y和D835H复合杂合子。FLT3-ITD与高白细胞计数相关(P=0.033),而FLT3-TKD并无此相关性。与无FLT3基因突变患者相比,尽管FLT3-ITD和TKD突变患者的完全缓解率(CR)、总生存期(OS)、无事件生存期(EFS)均相对更差,除FLT3-TKD与缩短EFS显著相关(P=0.043)外,差异均无统计学意义。值得注意的是,无论是FLT3-ITD(P=0.011)还是FLT3-TKD(P=0.034)均提示高复发风险。多因素分析表明FLT3-ITD(HR=6.381,P=0.037)、FLT3-TKD(HR=5.198,P=0.009)、骨髓早幼粒细胞比例(HR=1.174,P=0.020)、高白细胞计数(WBC>10×10^9/L)(HR=9.067,P=0.011)可作为独立预后因素提示高复发风险。结论:FLT3-ITD和TKD在APL中均有表达,FLT3-ITD患者的白细胞计数高。虽然FLT3基因突变对APL患者的CR率和OS无显著影响,但可作为一个有价值的指标用于评估复发风险。

FLT3基因突变与急性早幼粒细胞白血病髓外复发

目的探讨FLT3基因突变在急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)髓外复发中的意义。方法回顾性检测2例典型APL髓外复发患者骨髓及血液标本可能存在的基因突变,分析FLT3突变与APL髓外复发的相关性。结果 1例APL中枢神经系统复发的患者发生较罕见的FLT3-酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变Asn841Gly(A841G)及一种新的WT1基因突变(c.1209_1210insT/p.K404X);1例APL睾丸复发的患者发生较罕见的FLT3-TKD点突变Asp839Gly(D839G)和一种新的WT1基因突变Arg458Pro(c.1373G>C)。结论本研究病例中发现的罕见FLT3突变与新的WT1基因突变可能与APL髓外复发相关,为后续相关研究提供了基础。临床中需重视APL患者基因突变检测,以便更好分层治疗,改善预后。

急性髓系白血病FMS样酪氨酸激酶3-激酶结构域突变的高灵敏度检测方法的建立及应用

目的 建立一种急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase-3,FLT3)-激酶结构域突变(tyrosine kinase domain,TKD)的高灵敏度检测方法,并将该方法应用于AML微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)的监测。方法 构建FLT3野生型质粒和FLT3-D835Y突变型质粒,按一定比例混合后制备FLT3-D835Y突变率为50%、1%、0.1%和0%的质粒标准品,以其为检测对象,联合限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)识别法和一代测序法建立新的FLT3-TKD检测方法。用建立的方法检测含不同FLT3-D835Y突变率的质粒DNA标准品和血液样本DNA标准品,以验证方法的灵敏度;用建立的方法检测AML患者治疗前后的基因组DNA样本,以监测MRD。结果 构建的FLT3野生型质粒和FLT3-D835Y突变型质粒经测序证明构建正确。在纯化的质粒DNA和收集的血液样本DNA中,建立的方法通过一代测序结合EcoRⅤ/XhoⅠ双酶切和回收突变片段的步骤,将灵敏度提高至0.1%;用该方法在1名AML患者完全缓解期外周血样本中检测到MRD,而直接一代测序法未检测到MRD。结论 本研究开发了一种高灵敏度检测FLT3-TKD突变的方法,该方法对指导AML治疗以及监测其完全缓解期内MRD具有重要临床意义。