绿壳蛋鸡FMO3基因多态性PCR-RFLP检测方法研究

FMO3基因是影响鸡蛋品质的主要基因之一,T329S位点突变是引起该基因功能异常的主要原因。本研究根据GenBank上公布的鱼腥味基因全序列设计引物,采用PCR-RFLP技术对绿壳蛋鸡T329S位点突变体进行检测。结果获得了特异性良好的引物,建立了稳定的反应体系和反应条件,所建方法判型准确、清晰。

饲喂动物油脂对鸭FMO3基因不同基因型表达水平的影响

【目的】为了探究鸭FMO3基因型、动物油脂及其互作对其FMO3基因表达水平的影响.【方法】将79只鸭平均分为2组,用含10%动物油脂和不含动物油脂的2种饲料分别饲养,通过对鸭FMO3基因的第二、六、七外显子的SNPs进行检测,qPCR检测鸭肝、肾中FMO3基因的表达水平,并对FMO3基因SNPs和动物油脂与FMO3基因在肝、肾中的表达进行关联分析.【结果】在鸭FMO3基因SNPs检测中发现cDNA第12bp A/G碱基突变位于FMO3蛋白结构的FAD结合区,与FMO3在肝脏中的表达水平相关,命名为V12I错义突变.GG突变纯合子个体在饲喂添加10%动物油脂时,肝脏中FMO3基因的表达量显著低于饲喂不含动物油脂的处理组(P<0.05),AA、AG2种基因型在是否饲喂含10%的动物油脂2个处理组中肝脏FMO3基因的表达量均没有显著性差异(P>0.05).而是否添加10%的动物油脂、FMO3基因型以及二者的交互作用对肾脏FMO3基因的表达没有显著性影响(P>0.05).【结论】综上表明,饲料中添加10%动物油脂可抑制肝脏FMO3基因的表达,且对GG基因型的影响显著.

NELL1和FMO3基因mRNA在绵羊肝脏与脂肪组织中的表达

旨在探究不同营养水平及不同生长阶段脂尾型绵羊NELL1和FMO3基因mRNA的组织特异性表达模式。选择健康、体质量相近的9月龄滩羊、同羊、哈萨克羊和西藏羊(羯羊)各3只,活体采集尾部脂肪样品。选择健康4月龄滩羊112只随机分为4组,公母各半,每组4个重复,每个重复7只羊。根据体质量增加目标分为3个阶段:22~28kg,28~35kg,35~40kg,每个阶段各组分别饲喂不同营养水平的日粮。每个生长阶段结束时采集肝脏、肾周脂肪、尾脂、皮下脂肪的组织样品,提取样品总RNA,采用实时荧光定量PCR的方法分析NELL1和FMO3 mRNA的表达差异。结果表明,FMO3 mRNA在哈萨克羊尾脂中的表达量最高,在同羊、滩羊、西藏羊尾脂中依次下降,且差异显著;NELL1 mRNA在西藏羊尾脂中的表达量最高,在滩羊、同羊、哈萨克羊中的表达量依次下降;营养水平和月龄对尾脂和肝脏中NELL1和FMO3 mRNA的表达水平有显著影响,而对皮下脂肪和肾周脂肪中NELL1和FMO3 mRNA的表达影响不显著。表明FMO3mRNA的表达水平与脂肪沉积呈正相关,而NELL1 mRNA的表达水平与脂肪沉积呈负相关;NELL1与FMO3对绵羊尾脂和肝脏中的脂肪沉积起调控作用,为进一步揭示脂尾型绵羊体内脂肪沉积的调控机制提供理论基础。

鸭FMO3基因鱼腥味敏感位点的检测

畜禽产品的鱼腥味问题严重影响肉蛋奶产品的风味和人们对畜禽产品的接受能力,FMO3基因的突变会引发鱼腥味综合征。通过DNA池和测序技术检测导致鸡蛋、鹌鹑蛋产生鱼腥味的FMO3基因敏感位点在鸭中是否存在,寻找鸭蛋鱼腥味产生的原因。结果表明,在鸭FMO3基因第7外显子,共检测到6个SNPs,均为同义突变,在FATGY高度保守区未检测到碱基突变,即导致鸡蛋和鹌鹑蛋产生鱼腥味的FMO3基因敏感位点在鸭中并没有检测到。

林甸鸡玫瑰冠、鱼腥味和矮小性状的遗传基础分析

试验研究了影响玫瑰冠性状、鱼腥味性状和矮小性状的MNR2、FMO3和GHR基因突变位点在林甸鸡群中的分布情况。通过PCR对分别影响林甸鸡玫瑰冠性状、鱼腥味性状和矮小性状的MNR2和GHR基因突变位点进行分型,发现林甸鸡群玫瑰冠个体为MNR2-RS型;林甸鸡群中存在鱼腥味易感基因FMO3基因c.984A>T变异位点,25.4%鸡只携带T等位基因,其中TT基因型频率为4.3%,AT基因型频率42.2%;没有检测到影响矮小性状GHR基因第10外显子和3′UTR区1.7 kb缺失(c.1744_3516 del)突变位点。通过追溯试验群体的系谱结构,发现影响林甸鸡玫瑰冠型的MNR2基因、鱼腥味性状的FMO3基因和矮小性状的GHR基因的突变位点在上下代传递过程中与先前报道结果一致。

河北太行鸡不同群体含黄素单氧化酶3基因多态性检测

为了研究含黄素单氧化酶3(FMO3)基因T329S突变位点在河北太行鸡不同群体中的等位基因及基因型频率分布情况,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法(PCRRFLP)和DNA测序技术分别对赞皇、平山、唐县地区3个河北太行鸡群体FMO3基因及基因型频率进行检测。结果显示,平山地区太行鸡群体中未检测到SS型个体,而平山、唐县地区太行鸡群体中均有FMO3基因SS型个体;赞皇、平山、唐县3个太行鸡群体中T等位基因的频率分别为0.129 8、0.075 0、0.084 2,其频率均远低于等位基因A的频率。独立性卡方检验结果显示,不同群体间基因型频率分布差异不显著;经适合性卡方检验,赞皇、平山、唐县3个太行鸡群体卡方值分别为1.173 0(P>0.05)、0.035 1(P>0.05)、0.188 5(P>0.05),说明该基因位点A→T碱基突变在3个群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态;通过分析3个不同群体遗传变异参数发现,3个太行鸡群体在该基因位点上均处于低度多态(PIC<0.25)。以上结果表明,河北太行鸡群体中FMO3基因型频率较低,可以通过PCR-RFLP的方法予以剔除。

北京油鸡种鸡鱼腥味基因不利位点的剔除

研究对北京油鸡4个品系种鸡集中开展了鱼腥味基因FMO3突变位点分子标记辅助选择,结合严格的登记和选留制度,剔除了北京油鸡4个品系鱼腥味基因的不利位点。使用TaqMan探针和KASP两种检测方法对后代种鸡和配套杂交生产的商品鸡进行检测验证,未发现含T位点的个体。结果充分表明北京油鸡种群完成了鱼腥味不利基因位点的剔除工作。该研究可为中国其他地方鸡种鱼腥味基因的剔除提供借鉴。

河北太行鸡鱼腥味敏感基因多态性检测方法及群体分布研究

本试验旨在研究鱼腥味敏感基因(FMO3)T329S突变位点在河北太行鸡群体中的等位基因及基因型频率分布情况。根据Gen Bank中公布的鸡FMO3基因序列设计引物,采用PCR-RFLP方法对河北太行鸡T329S位点进行检测。结果显示:河北太行鸡群体中,AA(野生型)、AT(杂合型)和TT(突变型)基因型频率分别为0.8194、0.1672和0.0134。该多态位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。结果表明:河北太行鸡群体中存在TT基因型鱼腥味综合征易感个体,其基因型频率不高,可以通过PCR-RFLP的方法予以剔除。

不同肉鸡品种黄素单氧化酶3基因频率分布研究

研究旨在检测不同肉鸡群体中鱼腥味基因FMO3关键位点c.984 A>T基因型分布情况,为后续开展鱼腥味基因与鸡肉品质研究提供参考。试验群体包括8个地方品种、2个引进品种和2个专门化品系,采用PCR-RFLP和测序方法进行检测。结果表明:麻黄鸡、惠阳胡须鸡和各专门化品系均无TT基因型个体,且惠阳胡须鸡个体全部为AA基因型(非鱼腥味易感基因型);TT基因型个体在不同地方品种的频率由高到低依次为丝羽乌骨鸡(39.66%)、文昌鸡(18.95%)、清远麻鸡(11.11%)、霞烟鸡(10.84%)、广西三黄鸡(7.04%)和杏花鸡(4.55%);TT型个体在引进品种隐性白为5.26%、Ross308为1.67%。由此可见,除丝羽乌骨鸡和文昌鸡外,其他品种中鱼腥味综合征易感个体(TT基因型)频率均不高。

FMO3基因突变频率在4个傣族群体中的分布

采用PCR-RFLP方法对云南同一个少数民族4个不同地区的傣族群体进行FMO3基因突变频率分析,发现FMO3基因突变频率在这4个群体间有差异.